粮油储藏学实验指导书

实验一 粮食呼吸强度的测定

（一）实验目的

呼吸作用是粮食在储藏期间的重要生理作用，处于不同生理状态的粮食，其呼吸强度与性质有很大的差异。剧烈的呼吸作用不仅消耗储粮中的营养物质，而且是导致粮堆发热的一个重要因素，因此研究粮食的呼吸作用，对于安全储粮，保持储粮品质稳定有着重要的意义。 在研究呼吸作用时常用的生理指标是“呼吸强度”，它表示粮食在储藏期间呼吸作用的强弱，通常以每100g 干物质在24h 内放出二氧化碳毫克数或吸收氧的毫克数来表示。

测定呼吸强度的方法很多，但常用的是以二氧化碳的释放量为基准，可分为两大类，测定气体体积变化的检压法和测定二氧化碳释放量的滴定法、比色法等。简易法属于测定二氧化碳释放量的滴定法。本实验要求学会用简易法测定粮食的呼吸强度，为判断储粮稳定性提供依据。

（二）实验原理

用纱布将一定量的待测样品包好，并且悬挂在带有金属钩的橡皮塞下面，把橡皮塞盖在盛有定量氢氧化钡溶液的广口瓶上，并且要塞紧。橡皮塞上装有干燥管，干燥管内装有色钠石灰，其作用是吸附空气中的二氧化碳，使空气中的氧源源不断地进入广口瓶，以利于广口瓶内样品的呼吸作用正常进行。实验装置如图所示。

1—装有色钠石灰的干燥管 2—橡皮塞 3—小钩

4—盛有样品的纱布袋 5—广口瓶 6—0.05N 氢氧化钡溶液

经24h 后，瓶内待测样品呼吸放出的二氧化碳气体完全被氢氧化钡溶液吸收，生成碳酸钡和水，反应式如下：

O H BaCO CO OH Ba 2322)(+→+

拔去橡皮塞，滴入1～2滴酚酞指示剂，用标准草酸溶液滴定瓶中剩余的氢氧化钡，反应式

如下：

O H O BaC O C H OH Ba 2424222)(+→+

此外，再做一个空白实验为对照，其内只加定量的氢氧化钡，不放样品，经24h 后用同样的方法滴定。空白滴定与样品滴定所用草酸量之差，即代表样品放出的二氧化碳量（毫克）。

（三）实验仪器与试剂

1. 500mL 广口瓶4个，用橡皮塞塞紧，塞下悬挂金属勾；

2．干燥管4支；

3. 5OmL 酸式滴定管1支；

4. 25mL 大肚吸量管1支，5mL 移液管1支；

5. 洗耳球一个；

6. 小漏斗一个；

7. 0.05mol/L 氢氧化钡溶液；

8. 标准草酸溶液（2.8636克/升）；

9. 有色钠石灰；

10. 酚酞指示剂。

（四）实验步骤

1．称取试样2份，每份30g ，放于纱布内。

2．向广口瓶中用吸量管准确加入25mL 的氢氧化钡溶液，并将纱布包悬挂于橡皮塞下的小钩上，立即塞上塞子，封严开始计时。

3．另作一个空白实验，其内只加定量的Ba(OH)2溶液。为求实验结果准确，应如上再作一次重复。

4．实验进行的时间依材料不同而不同，在实验时间内常移动瓶子，防止形成BaCO 3薄膜而妨碍CO 2吸收，注意在移动时勿使碱液碰到纱布包内的样品上。

5．实验结束时打开塞子，取出纱布包，加1～2滴酚酞指示剂，用标准草酸溶液滴定至终点。

（五）实验结果

若实验样品瓶中用去草酸为A 毫升，空白实验瓶中用去草酸B 毫升，则实验条件下产生的二氧化碳气为（B －A ）毫克，实验样品的呼吸强度为：

实验时间（小时）试样重（干基，克）呼吸强度⨯⨯⨯=

24100A)-(B

呼吸强度的单位为：CO 2毫克/100克干物重/24小时。

（六）注意事项

1．本实验教学时数为4学时。

2. 样品要用105℃衡质法测水分，换算成干重。

3. 标准草酸溶液的制备：为了缩短计算时间，可以制备这样浓度的草酸溶液，即1毫升草酸溶液，相当于1毫克的二氧化碳。用分析天平称取草酸2.8636g ，置于1000mL 容量瓶内，先用少量蒸馏水溶解，再加蒸馏水将溶液稀释到刻度，密闭，摇匀。

测定呼吸强度时的反应如下：

O H BaCO CO OH Ba 2322)(+→+

O H O BaC O C H OH Ba 2424222)(+→+

从上述反应方程可见，1mol 草酸相当于1mol 的二氧化碳。

通常，草酸晶粒含有2个水分子（H 2C 2O 4）·2H 2O ，因此1mol 质量等于：

M=1×2+12×2+16×4+2（1×2+16）＝126g

1mol 二氧化碳质量等于：M=12+16×2＝44g

如果126mg 草酸相当于44mg 二氧化碳，则：X mg 草酸相当于1mg 二氧化碳

mg 8636.244

126X == 因此，欲使1ml 草酸溶液相当于1mgCO 2，其中应含草酸2.8636mg 。

4．0.05mol/L 氢氧化钡溶液制备：用粗天平称取Ba(OH)2约8g ，置于玻璃容器内，倒入刚刚煮沸并冷却到室温的蒸馏水1000mL ，摇晃溶液并静置一昼夜，待沉淀后，用虹吸管将透明液移入另一干净容器，并要防止与大气中的CO 2相作用。Ba(OH)2溶液保存在与空气中的CO 2隔绝的容器内，每次实验之前必须用草酸溶液标定Ba(OH)2的浓度。

（七）分析与讨论

1．分析本实验产生误差的原因。

2．影响粮食呼吸强度的因素有哪些？

实验二 粮油种子生活力的测定

（一）实验目的

种子生活力是指种子发芽的潜在能力或种胚所具有的生命力，通常是指一批种子中具有生

命力（即活的）种子数占种子总数的百分率。处于休眠状态的种子是具有生命的，经过休眠期后，一旦遇到适宜的环境条件就能发芽生长，但在休眠期内的种子发芽率一般偏低，不能以发芽试验的方法来测定种子的发芽率，必须应用测定种子生活力的方法来判断种子发芽的潜在能力，作为评定种子品质的主要依据。种子生活力测定一般有物理机械法、生物化学法、感官鉴定法等三种方法，本实验介绍生物化学方法测定种子生活力。

（二）实验原理

红四唑又称红四氮唑，全称为2，3，5—三苯基四唑化氯，简写TTC，为粉状结晶，呈白色或黄白色，遇到直射光线，被还原成红色，红四唑药品应储存在棕色瓶中放于暗处。红四唑溶于水，其水溶液是无色液体。

粮食种子在呼吸过程中，由于脱氢酶的作用释放出氢原子与红四唑分子发生反应，红四唑试剂接受氢原子后，被还原成三苯基甲呈现红色，故种胚有生活力时被染成红色，而种胚丧失生活力时就不着色，反应式如下：

红四唑（无色）三苯基甲（红色）（三）实验仪器与试剂

1. 染色缸：用称量瓶代替，每人一只；

2. 表面皿：每人一只；

3. 单面刀片：每人一只；

4. 镊子：每人一把；

5. 250mL烧杯：每组一只；

6．恒温箱；

7．滤纸、放大镜、纱布2片；

8．0.2%和1%红四唑溶液、蒸馏水。

1%浓度的红四唑溶液用于不切开胚的种子染色，而0.2%浓度的红四唑溶液可用于已经切开胚的种子染色。将1g红四唑药粉溶解于100mL蒸馏水或自来水中，配制成1%浓度的溶液。将1份1%的溶液与4份水混合即成0.2%浓度的溶液，也可以将1g红四唑药粉溶解于500mL水中。配成后可将溶液的PH值调至6～8之间，如果配制溶液的PH值低于4或更低，这种高酸度的溶