种子纯度
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
统计:
样品醇溶蛋白提取:取单粒种子,称重,用 样品钳夹碎,放入0.5ml离心管中,然后按 1mg加5μl的比例加入样品提取液,室温浸提 过夜,使用前用10000rpm离心10min。
凝胶配制: 取适量的凝胶溶液,加入适量的10%过硫酸 胺和TEMED,迅速摇匀,灌胶,插好样品梳, 让其在5-10分钟内完全聚合。一般为每1ml 凝胶溶液加入1µl的10%过硫酸胺和TEMED。
变异。
从电泳图 谱上发现不同等位基因间的差异主要表现 在蛋白谱带的数量、相对迁移率等方面。
实验分组:
8人为1组配试剂 每人3个样品
一、试验材料: 绵麦37(省区试对照品种) 二、药品器材 Bio-RAD垂直电泳仪
试剂配制 样品提取Buffer(100ml):(每组20ml) 甲基绿0.05g,2-氯乙醇25ml 10×电极buffer(1L):(每组100ml) 冰醋酸40ml,甘氨酸4g,使用前稀释10倍 凝胶buffer(1L):(每组200ml) 冰醋酸20ml,甘氨酸1g。 凝胶溶液(200ml): Acr=20g,Bis=0.8g,尿素12g,抗坏血酸0.2g, 硫酸亚铁0.008g,溶于凝胶buffer中。
点样、电泳: 小心拔出样品梳,用电极缓冲液冲洗加样孔, 每个样品的上样量10µl。 恒压500V,恒温10-15℃,电泳时间为甲基 绿前沿指示剂迁移至板底所需时间的三倍。
来自百度文库
固定染色:每块胶板吸取1%考马斯亮蓝溶液 5ml再加入10%三氯乙酸200ml,染色过夜。
漂洗:用清水漂洗胶,拍照,或制干胶保存。
种子纯度检验
小麦种子蛋白质电泳法测定小麦种子纯度不受自然 影响 ,测定结果较为准确 对实现种子质量的前控将起到巨大作用 ,可将小麦 假冒伪劣种子消灭在种植之前,以避免更大的经济 损失 小麦种子蛋白质电泳法测定纯度与田间小区种植鉴 定结果一致 ,二者呈显著的正相关关系
小麦醇溶蛋白是种子胚乳中的主要贮藏蛋白质 ,编 码醇溶蛋白基因的 6个位点(G1i-A1,G1i-B1,GliD1,G1i-A2,G1i-B2,Gli-D2)存在大量的等位基因