乳腺癌波形蛋白表达的病理学研究

ABSTRACT Objective:To investigate vimentin expression in breast cancer epithelia and its relationship with var ious pathological features of breast cancer. Methods:The immunohistochemistry was used to detect vimentin, proliferating cell nuclear antigen( PCNA) and cytokeratin expression in breast cancer epithelia. The DNA dot blotting hybridization was used to detect the expressing status of c myc oncogene amplification in breast cancer tissues, and the radio labelling dextran coated act ivated charcoal absorption was applied to assay the estrogen receptor ( ER) quant ity. Results: The vi mentin could be expressed in 26 87% breast cancer tissues, and its expression correlated to histologic grade, ER status and PCNA index, etc. The breast cancer in which the vimentin expressed positively was found to be slightly different from the ordinary breast cancer epithelia in morphology, and the cytokeratin staining was also poor. The proto oncogene c myc amplified more frequently. Conclusion:The breast cancer with positive vimentin expression is a kind of breast can cer which is more malignant and probably with poor prognosis.
生长介质调节自主性生长能力较强的乳腺癌。在临
顺序收集解放军第 307 医院和空军总医院病理 科的 67 例原发性乳腺癌标本。取出的新鲜病变组
织, 一份立即放入液氮存放; 另一份放于福尔马林内 固定, 石蜡包埋后保存。 1 2 检测试剂
( 1) Vimentin、细胞角蛋白( cytokeratin) 和增生细 胞核抗原( PCNA) 单抗, 购自 DAKO 公司。
第2期
夏国庆 等. 乳腺癌波形蛋白表达的病理学研究
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向分化的结果; 亦有人认为, 此现象与细胞的粘着力 降低有关。
根据 Domagala 的研究[ 6] , vimentin 表达与乳腺癌 的组织学类别有关。其较多表达于髓样癌和浸润性
导管癌中, 而较少表达于小叶癌中。本研究未见小 叶癌, viment in 在其他各类乳腺癌中的表达亦未见明 显差异。但 vimentin 表达与浸润导管癌的组织学分 级显著相关, 此与逆分化之 说相一致。Viment in 主 要表达于 ER 阴性的乳腺癌, 这与多数文献 的报道 亦相符[ 7, 8] 。有些研究表明[ 9] , vimentin 在细胞中的 表达受 PDGF 和 PHA 的调节, 两者的刺激能显著地 促使纤母细胞和淋巴细胞的 vimentin 表达, 同时细 胞分裂增生, 而糖皮质激素、胰岛素和泌乳素等则不 具此作用。因而, 作者推测, vimentin 表达阳性的乳 癌很可能是一类对内分泌激素依赖性较小而受局部
取新鲜组织或液氮冻存组织, 研碎, 提取 DNA, 点样于硝酸纤维素膜上, 在甲酰胺 体系中预杂交。 随机引物法以 32P dATP 标记 c myc 探针, 42 杂交 16 h。洗膜、曝光、显影、图像分析检测各杂 交点的 积分吸光度。以患者外周血淋巴细胞 DNA 为正常 标准, 以 actin 探针 为内参照二倍 体探针, 计 算癌 基因扩增倍数。
c myc 扩增倍数= Tmyc L / T Lmyc Tmyc、T 分别为肿瘤组织 DNA 与 c myc、 actin 探针杂交的积 分吸光度; Lmyc、L 分别为患 者外周 血淋巴细胞 DNA 与 c myc、 act in 探针杂交的 积分 吸光度。
1 3 4 乳腺癌的组织学分类和分级 分别参考 1968 年和 1981 年 WHO 的国 际分类
表 1 Vimentin 表 达与乳腺浸润性导管癌病理特征之间的关系
项目 组织学分级
+ ER 状态
ER( + ) ER( - ) 腋窝 LN 转移 LN ( + ) LN ( - )
n
viment in( + )
P
25
11
< 0 05
30
6
28
4
< 0 01
27
13
34
11
> 0 05
21
6
表 2 Vimentin 表达与 PCNA 指数和 c myc 基因扩增的关系
( 2) 载有 c myc 基因片段的 pGEM 2 质粒, 由荷 兰实用放射学和免疫学研究所赠送。
( 3) 载有 actin 片段的 pBR322 质粒, 由军事医 学科学院基础医学研究所赠送。
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南京军医学院学报
2000 年 6 月
第 22 卷
1 3 检测方法 1 3 1 Vimentin 检测
和分级标准。 1 3 5 雌激素受体( ER) 值测定
采用葡聚糖包裹活性碳吸附法 ( DCC 法) , 以 10 fmol/ mg 蛋白作为 ER 阳性的标准[ 3] 。 2 结果
在检测的 67 例原发性乳腺癌中, 浸润性导管癌 55 例, 管内癌为主的浸润 性导管癌 6 例, 髓样癌 5 例, 导管内癌 1 例。Vimentin 阳性的乳腺癌共 18 例, 阳性率 26 87% 。其中, 17 例为浸润性导管癌, 1 例 为髓样癌。在浸润性导管癌中, 显微镜下, vimentin 较多表达于那些融合成片的大细胞中和那些增生成 乳头状的细胞团中。粉刺型导管癌的中央坏死区, viment in 亦往 往阳性。在强 阳性的病 例中, vimentin 阳性细胞往往呈片状分布, 其棕色颗粒弥漫分布于 胞浆, 而在弱阳性的病例中, vimentin 阳性细胞只散 在分布, 呈半环状或袖套状集中于核膜和浆膜的一 极。
KEY WORDS breast cancer; vimentin; proto oncogenes
波形蛋白( viment in) 是一类直径 8 nm 左右的中 丝蛋白, 该类蛋白曾长期被人们认为是间质细胞的 特征性成分[ 1] 。但近年来的研究表明, 其在乳腺癌 上皮亦有所表达。Vimentin 表达的乳腺癌有何病理 学特征? 本文对此进行探讨。 1 材料与方法 1 1 标本收集
关键词 乳腺癌; 波形蛋白; 癌基因 中图分类号 R 737 9 R 361+ 2
Pathological research on breast cancer with vimentin expression
Xia Guoqing, Chu Jian, Liu Guancheng ( Department of Pathology, Nanjing Military Medical College, Nanjing 210099) Li Guomin ( Department of Pathology, the 307th Hospital of PLA, Beijing 100850)
摘要 目的: 研究波形蛋白( vimentin) 在 乳腺癌上皮中的表达 及其与 乳腺癌 病理特 征的关系 。方法: 用免疫 组 化检 测 vimentin、增生细胞核抗原( PCNA) 、细胞角蛋白( cytokeratin) 等在乳腺癌上 皮中的表 达, 用 DNA 斑点杂交检 测 c myc 癌基因在乳腺癌组织中的表达, 用葡 聚糖包 裹活性 碳吸附 法检测乳 腺癌 组织 的雌激 素受 体( ER ) 值。结果: Vimentin 可在 26 87% 的乳腺 癌组织中表达, 其表达与乳腺癌的 组织学分 级、ER 阴 阳性和 PCNA 指 数等一 系列特 征 有关。Vimentin 表达阳性的乳腺癌, 其 细胞形态与一般的乳腺癌上皮有所不同, 细胞角 蛋白阳性 程度减弱, c myc 癌 基因较多发生扩增。结论: Vimentin 表 达阳性的乳腺癌是一类恶性度较高、预后可能不良的 乳腺癌。
n
vimentin( + ) 18 vimentin( - ) 49
PCNA 指数 xs
34 03 7 86 24 27 9 98
P 1 c myc 扩增 P2
8
< 0 01
< 0 05
5
3 讨论 Vimentin 是细胞中丝蛋白的一种。它参与细胞
骨架的构成, 与细胞的膜系统广泛连接。有研究表 明[ 4] , 可溶性 vimentin 多肽还具有与细 胞的核酸和 组蛋白结合的能力, 具有调控 细胞生长、分裂的作 用。人们认为, 它可能参与了肿瘤发生、发展的某个 过程。
第 22 卷 第 2 期
南京军 医学院 学报
2000 年 6 月
Vol. 22, No. 2
J Nanjing Mil Med Coll
June 2000