细胞膜和细胞器的分离提纯方法(附图)
细胞器分离
(5) 1／15 mol／L磷酸缓冲液 (pH 6.8)： 1／15 mol／L磷酸二氢钾(KH2PO4) 50 mL 1／15 mol／L磷酸氢二钠(Na2HPO4) 50 mL (6) 卡诺(Cornay)固定液： 无水乙醇 6 mL 冰醋酸 1 mL 氯 仿 3 mL (7) 生理盐水
2．器具： 解剖刀，剪刀，漏斗，玻璃匀浆器，尼 龙织物，刻度离心管，显微镜，冷冻高 速离心机。
鼠肝线粒体的分离
【材料 材料】 材料 鼠肝脏或猪肝脏。 【实验用品 实验用品】 实验用品 1．试剂： (1) 0.25 mol／L蔗糖+0.01 mol／L三羟甲基氨基甲烷 (Tris)一盐酸缓冲液(pH 7.4)： 0.1 mol／L三羟甲基氨基甲烷溶液 10 mL 0.1 mol／L盐酸 8.4 mL 加双蒸水到100 mL，再加蔗糖使浓度为0.25 mol／L。 (2) 0.34 mol／L蔗糖+0.01 mol／L Tris一盐酸缓冲液 (pH7.4)，配法同上。
2．差速离心： 将0.34 mol／L蔗糖溶液4.5mL放入离 心管，然后沿管壁小心地加入4.5mL鼠肝 匀浆覆盖于上层。用冷冻控温的高速离 心按下图顺序进行差速离心。
分离细胞核：
鼠肝匀浆700×g离心10 min 沉淀(细胞核及质膜碎片) 上清液(1)
洗涤(0.25 mol／L预冷蔗糖溶液5 mL洗涤2次， 每次1000×g离心15 min。 沉淀(细胞核及质膜碎片) 清(1)合并 上清液(2)→与上
细胞器的分离实验原理及步骤
实验二十二细胞器的分离一．实验目的：以大鼠肝为例，介绍用差速离心法分离细胞器的一般操作程序二．实验原理：（略）三．试剂和器材（一）试剂：１.生理盐水2 . 0.25mol/L 蔗糖-0.01mol/L Tris-盐酸缓冲液（pH7.4）。
配法：0.1mol/L Tris 10ml 0.1mol/L盐酸 8.4ml 加双蒸水到100ml。
再向上述缓冲溶液中加蔗糖，使浓度为0.25mol/L。
蔗糖为密度梯度离心用D（+）蔗糖。
3. 0.34mol/L 蔗糖-0.01mol/L Tris-盐酸缓冲液（pH7.4）。
4. 0.34mol/L 蔗糖-0.5mmol/L Mg（AC）2溶液，用1mol/L NaOH调pH到7.4。
5. 0.88mol/L 蔗糖-0.5mmol/L Mg（AC）2溶液， pH7.4。
6. RSB溶液：0.01mol/L Tris-盐酸缓冲液（pH7.2）,0.01mol/L NaCl，1.5mmol/L MgCl27. 比重d20=1.18的蔗糖溶液（51.5g/L）。
比重d20=1.16的蔗糖溶液（51.0g/L）。
8. 1%詹纳斯绿（Janus green B）染液，用生理盐水配制9. 甲基绿-派洛宁染液。
配法：甲液：2%甲基绿水溶液 14ml 5%派洛宁水溶液 4ml 蒸馏水 16ml 乙液：0.2mol/L 醋酸缓冲液（pH4.8）16ml将甲液和乙液混合均匀，此染液不宜久置。
10. 卡诺固定液无水乙醇 6ml 冰醋酸 1ml 氯仿 3ml11. 丙酮12. 酸性磷酸酶显示用液4℃冷丙酮 2%醋酸水溶液 1%硫化铵水溶液（现用现配）酸性磷酸酶作用液：0.2mol/L醋酸缓冲液 12ml 5%硝酸铅 2ml3.2%β—甘油磷酸钠 4ml 蒸馏水 74ml配制时须缓慢加药，否则将会出现沉淀。
其中0.2mol/L醋酸缓冲液配法（pH5.0）：0.2mol/L NaAC 7ml 0.2mol/L HAC 3ml13. 葡萄糖-6-磷酸酶显示剂①作用液：0.125%葡萄糖-6-磷酸钾盐水溶液 4ml 2%硝酸铅 0.6ml0.2mol/L Tris-马来酸（pH6.6） 4ml 蒸馏水 1.4ml其中0.2mol/L Tris-马来酸的配法：甲液：Tris 2.42g 顺丁烯二酸 2.32g 加蒸馏水到100ml乙液：0.8%NaOH水溶液按下列比例混合：甲液 25ml 乙液 21.2ml 蒸馏水 53.8ml②1%硫化铵水溶液③10%中性甲醛固定液：市售30%甲醛，投入足量碳酸镁振荡，放置24小时，以中和其中的甲酸，然后加水稀释10倍。
细胞器的分离、纯化实验ppt课件
实验方法
玉米黄化幼苗线粒体的分别〔整个过程坚持在0-4℃ 〕
1.将玉米黄化幼苗剪下，称重每小组约5g，在冰箱中 放置1小时
2.将幼苗剪碎直接倒入研钵中以1:3(分量体积比g:ml) 比例参与离心匀浆介质，快速研磨，留意先参与少 许介质液，研碎后将余液参与
3.用双层尼龙网过滤，除去残渣。 4.取滤液在低温高速离心机伤2300rpm离心10min弃
该法的优点是：①分别效果好，可一次获得较纯颗 粒；②顺应范围广，既能分别具有沉淀系数差的颗 粒，又能分别有一定浮力密度的颗粒；③颗粒不会 积压变形，能坚持颗粒活性，并防止已构成的区带 由于对流而引起混合。
缺陷：① 离心时间较长；②需求制备梯度；③操 作严厉，不宜掌握。
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半径
方法： 两点一 线法
4. 试剂：
5.
① 线粒体离心匀浆介质。
6.
② 1%詹纳斯绿B的0.25M蔗糖溶液。
7.
③ 0.05M Tris-HCl液体 Ph=8.0
8.
④ 0.35mol/L NaCl
匀浆介质，普通为一定浓度的蔗糖溶液参与其它
9离. 子成分，可以维持亚细胞组分的浸透压。
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概述
离心机
！
制备性
分析性
普通离心机
细胞器的分别、纯化 — 细胞分级分别法
—秦川
实验目的
实验原理
实验用品
实验方法
运用范围： 1.病毒及亚细胞 组份分别 2.蛋白梯度分别 3.脂蛋白分别 4.RNA梯度沉淀 5.质粒DNA提纯
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实验目的
• 认识离心机及学习离心机的运用方法 • 学习细胞器的分别及纯化的普通原理和
方法
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分离细胞内不同细胞器的主要技术
分离细胞内不同细胞器的主要技术
1. 离心分离法：离心分离法是一种常用的分离细胞器的方法。
通过将细胞悬浮液离心，可以将不同的细胞器分离出来，离心的时间和速度可以调节，以分离出不同大小或密度分布的细胞器。
2. 超声波破碎法：超声波破碎法是利用超声波的高强度振动作用于细胞组织或器官的方法，可以使细胞破裂、组织或器官分解，从而分离出不同的细胞器。
3. 差速离心法：差速离心法是一种分离不同细胞器的高级离心分离方法，通过调整不同离心管的离心速度和时间，可以分离出大小、密度不同的细胞器。
4. 渗透压梯度离心法：渗透压梯度离心法是利用不同浓度的蔗糖等渗透剂制备一系列不同浓度的梯度，将准备好的样品均匀地载于梯度上，利用离心的作用可以使细胞器在梯度中定位，从而分离出不同的细胞器。
5. 密度梯度离心法：密度梯度离心法是利用细胞器或分子间密度的不同，用离心作用力使其沉降在梯度中进行分离，可以在不破坏细胞结构的情况下，直接分离细胞器。
6. 免疫学分离法：免疫学分离法是利用免疫学原理，通过特异性抗体与其抗原结合，实现对细胞器的高效分离。
该方法具有选择性强、精度高等优点，适用于分离不同表面表达特异性抗原的细胞器。
分离各种细胞器的方法是
分离各种细胞器的方法是
有多种方法可以分离和纯化细胞器，其中一些常用的方法包括：
1. 差速离心法：通过不同细胞器的离心沉淀速度差异，将细胞破碎后的组织液经过一系列离心步骤，最终达到分离不同细胞器的目的。
2. 密度梯度离心法：将细胞破碎后的组织液通过离心在稀溶液和浓溶液的梯度之间分层，不同密度的细胞器会沉降到不同的位置，从而实现分离。
3. 断续梯度离心法：通过逐渐增加或减少离心机转速来做到细胞器的分离。
在不同速度下，不同细胞器会在不同离心机转速时分离出来。
4. 亲和层析法：利用特定化合物与细胞器的结构或功能特异性结合，通过将混合细胞器溶液通入预先固定某种化合物的树脂，然后洗脱其他细胞器，最终纯化目标细胞器。
5. 膜分离法：利用不同细胞器的膜特性，通过破碎和离心等步骤将膜分离出来，并进行纯化。
6. 免疫沉淀法：利用特异性抗体与特定抗原结合，使用磁珠或纳米粒子等辅助载体将目标细胞器选择性地沉淀下来。
7. 光学分选法：利用显微镜观察细胞器的形态和荧光标记，通过脉冲激光和光散射等方法，将不同细胞器分离出来。
这些方法可以根据需要的分离纯化细胞器的目的和细胞类型进行选择和结合使用。
细胞器分离和细胞脱核技术
细胞器分离和细胞脱核技术一、破碎细胞的方法1.杆状玻璃匀浆器法•该匀浆器由一根端部表面磨砂的玻璃杆和一个内壁磨砂的玻璃套管组成。
使用时，先用锋利的刀片把组织块切碎，然后把碎块加入套管中，用力使玻杆移动使组织细胞破碎。
2.高速组织捣碎机法•使用时将4℃预冷的组织碎块或细胞悬液加入捣碎机的梅花玻璃杯中，至杯体积的1/3即可盖好玻璃杯盖，固定好带杆叶片刀，缓慢调整旋转速度，一般开机数十秒后，组织细胞即可被高速旋转的叶片刀破碎。
但不宜时间过长，以防高速旋转产生热而导致分离物中的活性物降解，用冷却水降温更好。
3.超声波处理法•超声波发生器能产生高强度的超声信号，经换能器传送至与之接触的溶液中，由声波形成冲击和振动而产生剪力，致使细胞破碎，动物组织肝、肾、胸腺、淋巴结、腹水细胞、红细胞、体外培养的细胞均可在短时间内破碎，因超声时可产热，应注意冰浴冷却，生物大分子如核酸和酶对超声敏感，一般不宜采用4.化学裂介法•在细胞悬液中加入Triton-100、NP-40、SDS，去氧胆酸钠均可使细胞裂解，往往仍需机械去辅助，方可在短时间内使细胞完全裂解，裂解后应清除化学裂解剂，以防止干扰分析。
5.反复冻融法•组织细胞浓液在-70℃或液氢中冷冻后，于37℃融化，经3～4次冻融周期，可使细胞破碎。
二、部分细胞器的分离方法一般采用差速离心或密度梯度离心的方法得到分离细胞器。
1.细胞膜的分离•细胞膜又称质膜，分离细胞膜有助于研究生物膜的结构与功能。
一般说，红细胞膜与线粒体膜的制备用差速离心法即可，其他细胞膜的分离可根据膜组分的密度大小不同，采用梯度离心后，分布于指定区域，可分离得到纯制品2.线粒体的分离•线粒体普遍存在于真核细胞中，它是细胞呼吸的主要场所，细胞活动所需能量主要依靠在线粒体内进行氧化所产生的能，线粒体的分离主要靠差速分离。
3.线粒体膜分离•线粒体膜分离方法主要是密度梯度离心4.聚核糖体的分离•核糖体是由核糖酸和蛋白质组成的核糖核酸蛋白颗粒，附着在粗面内质网的称固着核糖体，分散在细胞内的称游离核糖体，数个或数十个核蛋白体聚在一起称为聚核糖体，一般用差速离心法可分离出聚核糖体。
高中生物《细胞的功能和结构》练习题(附答案解析)
高中生物《细胞的功能和结构》练习题(附答案解析)学校:___________姓名：___________班级：___________一、单选题1．细胞溶胶是细胞与外界环境、细胞质与细胞核及细胞器之间物质运输、能量交换和信息传递的重要介质，其主要成分是（）A．水B．无机盐C．葡萄糖D．蛋白质2．下列关于原核细胞的叙述，正确的是（）A．有膜包被的细胞器B．有膜包被的细胞核C．有染色体D．拟核区有DNA分子3．下列事实或者证据中不支持细胞是生命活动的基本单位的是（）A．病毒无细胞结构，但必须依靠细胞才能完成生命活动B．光照条件下离体的叶绿体在一定的水溶液环境中能放出氧气C．缩手反射的过程需要神经细胞和肌肉细胞协调配合D．草履虫无组织、器官、系统层次，但能进行细胞分裂和运动4．生物体（除病毒以外）结构和功能的基本单位是A．蛋白质和核酸B．生物大分子物质C．新陈代谢D．细胞5．遗传信息就像细胞生命活动的蓝图，有关叙述错误的是（）A．同一生物体内所有体细胞的蓝图都一样B．脱氧核苷酸的排列顺序储存着生物的遗传信息C．正是由于这张蓝图，细胞核才具有控制细胞代谢的功能D．病毒的遗传信息储存在DNA中6．T2噬菌体是一种由蛋白质外壳包裹的DNA病毒。
下列有关叙述正确的是（）A．T2噬菌体的核酸中含尿嘧啶B．T2噬菌体的核酸彻底水解产物有6种C．T2噬菌体没有细胞核但有核糖体D．可用营养齐全的培养基培养T2噬菌体7．酵母菌是单细胞真菌也是一种应用于生物学各领域的重要微生物。
下列说法错误的是（）A．实验“探究酵母菌细胞呼吸的方式”运用了相互对照，无需空白对照B．探究酵母菌种群数量的动态变化时采用抽样检测法对酵母菌计数并建立数学模型C．家庭制作果酒时添加适量白糖可提升果酒的酒精度和甜度D．可以将酵母菌放在清水中让其细胞膜涨破，再用差速离心法获取各种细胞器8．下列教材中实验及对应方法错误的是（）A．分离细胞器—差速离心法B．研究细胞膜的流动性—同位素标记法C．制作真核细胞的三维结构模型—建构模型法D．利用伞藻研究细胞核功能—嫁接和核移植法9．下列关于真核细胞结构和功能的叙述，正确的是（）A．叶绿体的类囊体薄膜上有催化ATP合成的酶B．溶酶体只能对侵入人体细胞的病毒或病菌起作用C．核糖体上合成的蛋白质不能在细胞核中发挥作用D．细胞间进行信息交流都需要细胞膜上的受体蛋白参与10．关于细胞质基质的叙述错误的是（）A．细胞质基质是细胞质的一部分B．细胞质基质能够为生命活动提供所需要的物质和能量C．细胞中蛋白质可在细胞质基质中合成D．细胞质基质中有多种酶，也是多种化学反应的场所二、综合题11．在一定时间内使某种细胞吸收放射性同位素标记的氨基酸，经检查发现放射性同位素依次先后出现在图中①②③④⑤⑥⑦部位。
高中生物--细胞器习题(带答案)
判断正误并找到课本原文1．细胞质基质呈溶胶状，是代谢的主要场所。
( )2．分离细胞器的方法——差速离心法。
( )3．线粒体是细胞进行有氧呼吸的主要场所，是细胞的“动力车间”。
( )4．叶绿体是绿色植物所有细胞含有的细胞器。
( )5．液泡可以调节植物细胞内的环境、充盈的液泡还可以使植物细胞保持坚挺。
( ) 6．内质网是蛋白质等大分子物质的合成、加工场所和运输通道。
( )7．溶酶体是细胞的“消化车间”，内部含有多种水解酶，能分解衰老、损伤的细胞器，吞噬并杀死侵入细胞的病毒或细菌。
( )8．细胞骨架是由蛋白质纤维组成的网架结构，与细胞运动、分裂、分化及物质运输、能量转化、信息传递等生命活动密切相关。
( )9．观察叶绿体时可选取菠菜叶稍带些叶肉的上表皮细胞。
( )10．研究分泌蛋白合成和运输的方法是同位素标记法。
( )11．在分泌蛋白的合成、加工、运输的过程中，需要消耗的能量全部来自线粒体。
( ) 12．在分泌蛋白合成、加工、运输过程中，高尔基体起着重要的交通枢纽作用。
( ) 13．生物膜的组成成分和结构相似，在结构和功能上紧密联系。
( )14．生物膜把各种细胞器分隔开，使细胞内能同时进行多种化学反应，而不会互相干扰。
( )细胞可以清除功能异常的线粒体，线粒体也可以不断地分裂和融合，以维持细胞内线粒体的稳态。
下列有关线粒体的叙述，错误的是()A．线粒体具有双层膜结构，内、外膜上所含酶种类相同B．线粒体是真核细胞的“动力车间”，为细胞生命活动提供能量C．细胞可通过溶酶体清除功能异常的线粒体D．细胞内的线粒体数量处于动态变化中易错判断1．哺乳动物红细胞、蛔虫、原核生物因为没有线粒体，所以不能进行有氧呼吸。
() 2．蓝细菌、光合细菌无叶绿体也能进行光合作用。
()3．植物细胞不一定都有叶绿体，如根尖细胞。
()4．脂质(如性激素)的合成场所：内质网。
()5．液泡是最大的细胞器，且液泡里的色素种类与叶绿体一致。
()6．线粒体、叶绿体、溶酶体内存在核糖体。
细胞器的分工
到与本身密度相等介质处，并停留在那里到达平衡，从而将不 一样密度成份分离。
细胞器的分工
第11页
速度沉降Velocity (A) and 匀速沉降Equilibrium (B) sedimentation
细胞器的分工
第47页
有一定自主性
• 含有少许DNA、RNA和 核糖体
• 完成相对独立代谢活 • 经过双层膜结构与细胞
动
质其它成份分隔开
叶
细胞器的分工 小空间内高效完成代谢活动
•
基粒类囊体增大了内膜
面积
第16页
细胞器的分工
3.内质网(单层膜)
•膜连接成网状结构 •蛋白质合成和加工 •脂质合成 •酶附着场所
第17页
4.核糖体（非膜）
稳定蔗 糖介质
细胞器的分工
浓度改 变蔗糖 介质
第12页
二.细胞器之间分工
1.线粒体(双层膜) 细胞有氧呼吸主要场所. 提供能量
细胞器的分工
第13页
讨论：
⑴为何翱翔鸟类胸肌细胞中线粒 体数量比不翱翔鸟类多？
⑵为何运动员肌细胞线粒体数量 比缺乏锻练人多？
⑶为何在体外培养细胞时，新生 细胞比衰老或病变细胞线粒体多？
“生产蛋白质机器” 核糖体 脂类合成“车间” 内质网
蛋白质进行加工“车间”及“发送站”
“消化车间” 溶酶体
高尔基体
细胞器的分工
第25页
回顾小结: 1、真核细胞中具膜结构细胞器有哪些？
2.动植物细胞含有细胞器异同？
细胞器的分工
第26页
•真核生物细胞器膜结构:
高考生物一轮复习第5讲 细胞器与生物膜系统课件
叶绿体 椭球形、球形
成分
内膜:与有氧呼吸有关的酶 类囊体薄膜:①与光反应有关
基质:①与有氧呼吸有关的 的酶;②叶绿素和类胡萝卜素
酶;
基质:①与暗反应有关的酶;
②少量DNA和RNA
②少量DNA和RNA
增大膜面积方式 内膜向内凹陷形成嵴 囊状结构堆叠形成基粒
功能
有氧呼吸的主要场所 光合作用的场所
共同点
合作用进行的酶
正常生理状态下,溶酶体不会分解细胞自身结构
④
:将多肽再加工为成熟的蛋白质,并以囊泡的方式运输到细胞
膜。
具有该标志的蛋白质能被高尔基体膜上的M6
P受体识别,经高尔基体膜包裹形成囊泡,在囊泡逐渐转化为溶酶体的过程中,
带有M6P标志的蛋白质转化为溶酶体酶;不能发生此识别过程的蛋白质经囊
泡运往细胞膜。
2.归类比较各种细胞器
[提醒] (1)真核细胞中的核糖体有两类:附着核糖体主要合成分泌蛋白(如抗 体等);游离核糖体主要合成细胞自身所需要的蛋白质。 (2)内质网有两类:粗面内质网与分泌蛋白的合成、加工、运输有关;滑面内 质网与脂质(如某些激素)的合成有关。 (3)动物细胞内的高尔基体与分泌物的形成有关,是各种膜成分相互转化中的 “枢纽”。植物细胞内的高尔基体与细胞壁的形成有关。 (4)液泡中的色素是花青素,与花和果实的颜色有关;叶绿体中的色素是叶绿 素等,与光合作用有关。
解析 有氧呼吸的第二阶段在线粒体基质中进行,可产生[H],但不会发 生[H]的还原反应,[H]的还原反应发生在有氧呼吸的第三阶段,在线粒体内膜 上进行,A错误;在低等植物细胞的有丝分裂过程中,中心体在前期参与纺锤体 的形成,核糖体在间期参与蛋白质合成,B正确;溶酶体内含有多种水解酶,能 分解衰老、损伤的细胞器,吞噬并杀死侵入细胞的病毒或病菌,被溶酶体分解 后的产物如氨基酸、核苷酸等对细胞有用的物质,细胞可以再利用,C正确;液 泡主要存在于植物细胞中且细胞液具有一定的浓度,D正确。
细胞和细胞器及间质的分离
第三章细胞和细胞器及间质的分离细胞内各种结构的比重、大小不同，在同一离心场内的沉降速度也不相同，所以常用不同介质、不同转速、不同时间，通过分级离心，将细胞内各种结构组分（细胞核、核仁、线立体、高尔基复合体、溶酶体、染色体等）分离出来。
主要方法是：组织匀浆的制备、离心分级分离各组分、分析鉴定三个步骤。
一、细胞的分离根据细胞的大小、密度常可分离不同具有不同生物学特征的各种细胞亚群。
其原理是处于悬液中的细胞沉降率与细胞的直径成比例，也与细胞密度和分离介质密度之间差异成比例，假设细胞为球形，则其在溶液中在引力场内的沉降速度以下列公式表示V= 2g(ρc–ρs)r²9η遵循Stokes定律，其中：ρc和ρs分别是细胞和溶液的密度，η为溶液粘度，r为细胞半径，g为重力加速度。
根据细胞直径（大小）的分离方法：主要是速度下降。
细胞在单位引力下，通过低密度介质，或在低离心力作用下，通过密度梯度沉降。
由于细胞大小不同，沉降速度不同，细胞越大沉降越快。
根据细胞密度分离是等密度分离，就是细胞在连续密度梯度分离介质中，在强离心作用下，细胞最后到达与其自身密度相同的分离介质层面，并能保持平衡，在非连续密度梯度中，分离的细胞主要集中于介乎其自身密度两种密度介质的交界面上，从而达到分离。
操作方法：（一）单位重力沉降法：分离介质主要是牛血清白蛋白，其分离的细胞活性高、费用也昂贵。
现已用蔗糖替代，仍能取得较好的分离效果。
1．在固定沉降池上方加入30ml PBS/BSA，含有细胞1×108于池底。
2．从池周边加入50ml PBS覆盖于样品上，不要使整个界面破坏。
3．下口接1％蔗糖梯度液，稍松下口，缓慢放入50ml 1%蔗糖梯度液，约10ml/min。
4．接通梯度混合仪，从下口加入1200ml 1~2%蔗糖梯度液，速度为50ml/min。
5．最后加入500ml 2.5%蔗糖梯度液。
6．整个沉降系统，于4℃，静置4h，这时细胞按大小先后沉降，未成熟的红细胞在先，成熟的网织红细胞在最后。
细胞器的分离纯化细胞分级分离法讲解ppt课件
考 评 项 目 赋 标准分 ，对照 考评内 容和考 评办法 对考评 项目进 行考评 ，评出 各考评 项目的 考评实 际得分 ，考评 类目下 各考评 项目考 评实际 得分之 和为该 考评类 目的考 评实际 得分
实验方案
观 察 到 的 线 粒 体 预 期 图
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考 评 项 目 赋 标准分 ，对照 考评内 容和考 评办法 对考评 项目进 行考评 ，评出 各考评 项目的 考评实 际得分 ，考评 类目下 各考评 项目考 评实际 得分之 和为该 考评类 目的考 评实际 得分
实验方案
玉米黄化幼苗线粒体的分离(整个过程保持在O-4℃) 1、将玉米黄化幼苗剪下，称重每小组约取5g，在冰箱中放置l小 时。 2、将幼苗剪碎直接倒入研钵中，以l∶3(重量体积比g：m1)比例 加入离心匀浆PBS介质，快速磨碎，注意先加入少许介质液，研 碎后再将余液加入。 3、用双层尼龙网过滤，除去残渣。 4、取滤液在低温高速离心机上2300rpm离心lO分钟，弃沉淀。 5、取上清液在低温高速离心机上9950rpm离心lO分钟，弃上清。 6、所留沉淀用匀浆介质液洗涤，仍以9950rpm离心10分钟．弃上 清。 7、将所得沉淀悬浮于0.5M、PH7.2甘露醇中，置冰箱备用。 8、将制备的线粒体悬液滴于干净的载玻片上，用1％詹纳斯绿B 的0.25M蔗糖液(PH7.4)染色20分钟。 9、加盖玻片(需特别干净)。镜检最好用相差显微镜,凡线粒体均 被詹纳斯绿B染成蓝绿色颗粒，检验制备线粒体的纯度。
0.1N HCl
55ml
蒸馏水 200ml
(4) 0.35mol/l NaCl
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考 评 项 目 赋 标准分 ，对照 考评内 容和考 评办法 对考评 项目进 行考评 ，评出 各考评 项目的 考评实 际得分 ，考评 类目下 各考评 项目考 评实际 得分之 和为该 考评类 目的考 评实际 得分
细胞器——细胞内的分工合作(共38张PPT)
☺一件优质产品，比如一盒优 质酸奶是如何通过各车间和 部门之间的配合生产出来的？
☺细胞内也存在类似的部门 或车间吗？你能举出例子吗？
植物、动物细胞的亚显微结构
第2节 细胞器——系统内的分工合作
探究一：
要研究各种细胞器的组成成分和功 能，需要将这些细胞器分离出来，用什 么方法呢？
一、细胞器的分工
3、分泌蛋白合成和分泌的过程中需要能量吗？ 能量由哪里提供？
4、与蛋白质的合 成有关的细胞器：
核糖体 内质网
高尔基体
线粒体
3、蛋白质的合成过程：
核糖体 内质网 高尔基体
（合成场所：）（初步加工）（进一步加工）
细胞膜
（分泌）
由此可见，细胞内的各种细 胞器在功能上既有分工又相互 联系。
三、细胞的生物膜系统：
的植物细胞中
结 构：无膜结构（由两个垂直排列的中心
粒组成）
功 能： 与动物细胞有丝分裂有关。
液泡
液泡
分 布： 成熟的植物细胞中
形态结构： 单层膜， 内有细胞液（含糖类、色素等）
①调节细胞内环境，维持细胞形态 主要功能： ②与花、果等颜色有关。
溶酶体
比喻：
“消化车间”
形态：单层膜 特点：含有多种水解酶 功能：分解衰老损伤的细胞器，
“装配车间”
1、分泌蛋白在哪里合成？
A 叶绿体和线粒体
B 线粒体
杀死入侵的病毒和病菌。
5、细胞质的结构
外膜、内膜、嵴、基质（含少量DNA和有关酶）
分 布： 附着在内质网上或游离在细胞质 为多种酶提供了附着位点
附着在内质网上或游离在细胞质 基质中
①对来自内质网的蛋白质进行加工、分类和包装
细胞器和细胞结构？ 4、与蛋白质的合成有关的细胞器：