常用标本的采集原则与方法

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痰培养标本
采集与运送
病原体种类繁多而复杂 使下呼吸道感染病原诊断成为难题
细菌（包括放线菌与奴卡菌，厌氧菌与分枝杆 菌） 真菌（包括肺孢子菌） 病毒
支原体、衣原体与立克次体
原虫 寄生虫
咳痰途经口咽部
不可避免地受到污染
唾液中口咽部定植菌的浓度可达108109/ml。 研究显示，国内常规痰标本中约半数存在 唾液严重污染现象。
各种标本的采集
一、痰标本的采集 二、咽拭子标本的采集 三、尿标本的采集 四、粪便标本的采集 五、血液标本的采集
各种标本的采集
一、痰液标本的采集 ★痰常规标本 ★痰培养标本 ★24小时痰标本
三种痰标本的区别
分类 目的
痰常规标本 痰培养标本 24小时痰标本
痰液一般形状，涂片查细 胞、细菌、虫卵等 痰中的致病菌 24小时痰液的量和性状
几种下呼吸道直接采集的标本
经气管穿刺吸引（transtracheal aspiration,TTA） 经胸壁针刺吸引（transthoracic needle aspiration, TNA） 经支气管镜采样
支气管肺泡灌洗（bronchoalveolar lavage, BAL） 经支气管镜直接吸引 防污染样本毛刷（protective specimen brush, PSB）
操作步骤及要点
操作前准备
核对
将棉签插入 试管中送检
点燃酒精灯，指导患者张口发“啊”音， 用长棉签蘸 以敏捷、轻柔的动作擦拭 两侧腭弓、咽扁桃体上的分泌物，取毕， 将试管口及棉塞在酒精灯火焰上消毒后 插入棉签，塞紧。
咽拭子标本采集注意事项
作真菌培养时，须在口腔溃疡面采集分泌物 避免交叉感染 注意棉签不要触及其它部位，防止污染标本，影 响其他结果 避免在进食2小时内采集标本，以防呕吐
甲苯： —保持尿液的化学成分不变，常用作尿蛋白、尿糖 的定量测定。 —用法：每100ml尿液中加入0.5%~1%甲苯 2ml，使之形成一薄膜，覆盖于尿液的表面，防 止细菌感染。如果测定尿中的钠、钾、氯、肌 酐 、肌酸等需加10ml。
尿标本采集注意事项
—女患者月经期不宜留取尿标本 —会阴部分泌物过多时，应先清洁再冲洗，再收集。 —做早孕检查试验应留晨尿 —留取尿培养标本时，无菌操作 —留取12h或24h尿标本，集尿瓶应放在阴凉处， 根据检验要求加防腐剂。
能自理的患者：
—晨起后用清水漱口 —以清晨第一口痰为宜 —深吸气后用力咳出气管深处的痰液 —不可混入漱口液、唾液、鼻涕等
无法咳痰或不合作者：
—用吸痰法收集（集痰器）
痰标本采集注意事项
1、如查癌细胞，应立即送检或用95%乙醇或用 10%甲醛固定后送检
2、不可将唾液、漱口水、鼻涕等混入痰液中
3、收集痰液宜在清晨，因此时痰量较多，痰内细 菌也较多，提高阳性率。
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标本采集方法
标本的定义：是指采取患者少许的血液、排泄物 （粪、尿）、分泌物（痰、鼻分泌物）、呕吐物、 体液（胸腔积液、腹腔积液）和脱落细胞（食道、 阴道）等样品， 经过物理、化学和生物学的实验室技术和方 法对其进行检验，作为判断患者有无异常存在的 依据。
本章重点： 掌握标本采集的原则 掌握痰标本、血标本、尿标本、 粪标本的采集方法
清洁中段尿液
尽量取早晨第一次尿液 弃去开始流出的尿液，以冲刷尿道口的细菌，取能代 表膀胱部位病原菌的中段尿 详细告知病人以下操作步骤 女性病人
收集标本前用清洗液冲洗干净，从前向后仔 细擦洗尿道区域 分开阴唇，开始排尿 排出几毫升后，不停止尿流，采集中段尿 回缩包皮并清洗龟头 排出几毫升后，不停止尿流，采集中段尿
中段尿留取法： 1、导尿术 2、按导尿术清洁外阴、尿道口→嘱患者排去前段 尿→用试管留取5-10ml中段尿液
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尿培养标本
采集与运送
你知道吗？
尿液通常是无菌的或一过性有少量微生物，但是尿道内或尿道周围皮 肤的菌群会污染尿液标本，从而可能导致错误的培养结果。 诊断症状明显的病人（如尿急、尿频、尿痛），一份标本就已足够， 治疗48-72小时后再采集第二份标本。对于症状不明显的病人，需采 集2-3份标本。怀疑肾结核时，应连续3天采集晨尿。 多次收集或24小时尿不能用作培养。
怀疑军团菌或深部真菌感染，痰标本理想的送检 次数尚无定论。
痰培养的运送和保存
尽快（<2h）送至实验室。
如不能及时送达，应将标本暂存于4℃，但放置时
间不可超过24h。
厌氧培养标本的最佳运送时间取决于标本量。
被口咽部菌群污染的标本如咳痰等不可用于厌氧
菌培养。
二、咽拭子标本采集
目标：从咽部和扁桃体取分泌物作细菌培 养或病毒分离，协助诊断。
尿液；注入无菌杯或试管中
耻骨上穿刺吸取尿液
常用于患儿、泌尿道厌氧菌感染或脊柱损伤病人等。 可避免尿道或会阴细菌的污染，但对膀胱内少量尿液 的小儿难以实施。 方法：消毒自脐以下至尿道之间区域的皮肤，局麻穿 刺点部位；在耻骨联合与脐连线上，高于耻骨联合2cm 处进针刺入膀胱；取20ml尿液；置于无菌容器中并送 往实验室。 可用于厌氧菌检测
申请单上必须注明病人症状是否明显，这对于定量培养分析非常重要， 尤其只有少量尿液标本。
室温都有利于病原菌和污染菌会生长繁殖，因此若30min内不能及时 培养尿液则必须冷藏，但也不能超过24小时。
尿培养标本
清洁中段尿
导尿导管尿
经耻骨上皮肤穿刺采集膀胱内尿液 送检标本以晨起第一次尿液为佳 不能立即送检者，可暂存4℃冰箱，但保存不 超过8h
四、粪便标本采集
意义、目的： 1、了解消化道炎症、梗阻、出血、寄生虫感染等 2、了解消化道状况，粗略判断胰腺的外分泌功能 3、粪便隐血可作为消化道恶性肿瘤的诊断筛查试验 4、检查粪便中有无细菌感染，防止肠道感染
种类 常规标本
目的 查一般形状
容器 便盒
细菌培养标本
隐血标本 寄生虫或虫卵标本
来自百度文库
查致病菌
开胸肺活检（open-lung biopsy，OLB） 经人工气道吸引分泌物（endotracheal aspirates，ETA）
痰培养的送检次数
对于普通细菌性肺炎，痰标本送检每天1次，连续 2～3天。不建议24h内多次采集，除非痰液外观性 状出现改变；
怀疑分枝杆菌感染者，应连续收集3天清晨痰液送 检；
采集粪便标本的注意事项：
1、采集培养标本时，如患者无便意，用长无菌棉 签蘸生理盐水，由肛门插入6-7cm，顺一个方 向轻轻旋转后取出，将棉签插入培养试管内，盖 紧送检。 2、病人服用驱虫药或做血吸虫孵化实验，应留取 全部粪便送检。 3、患者如有腹泻，水样便应盛于便盆内送检
五、血液标本的采集
血标本的分类和目的
培养瓶
查肉眼不能察见的 便盒 微量血液 查寄生虫 便盒
便盒
大便培养
种类
操作要点
常规标本
排空膀胱。异常粪便挑取有脓血、粘液 的部分；外观无异常的粪便应从中央取 材，2-5g大小 用无菌棉签取中央部分或脓血、粘液部 分2-5g致培养瓶内，塞紧瓶盖。
细菌培养标本
隐血标本（OB） 检查前3天禁食肉类、肝、血、含大量 绿叶素的食物或含铁剂药物，三天后留 取标本送检。 寄生虫或虫卵标 虫卵：不同部位的异常粪便5-10g 本 蟯虫：用透明胶带粘肛门周围 阿米巴：便器加热致人体体温
我国痰细菌培养现状
标本送检率低
苛养菌检出率极低
结果重复性差
报告速度慢 感染菌与污染菌不易区分 药敏结果与治疗反应存在差距
咳痰标本的采集
标本采集方法
医师或护士直视下采集标本 病人先漱口，去除表面的菌群 教育病人深咳，收集从下呼吸道咳出的 痰液 临床上约半数咳痰标本不合格！
标本采集的意义 明确诊断 观察病情 指导制定治疗措施
标本采集的原则
遵照医嘱 充分准备： 1）患者准备 2）用物准备 3）护士自身准备 严格查对：检查项目、患者姓名、床号、 住院号 正确采集：方法、时间、量、容器 及时送检
明确检验项目、检验目的及注意事项 标本的容器贴好标签，附上验单：患者的姓名、 科室、床号、住院号、送检目的、送检日期和时 间等 每次采集血标本时应做到“三个一”：一患者、 一化验单、一容器 一般培养标本的采集应在使用抗生素之前 culture
关于咳痰标本
在抗生素应用前采集痰标本;
标本采集后1～2h内必须立即进行实验室处理
咳痰标本应用最早且广泛，但也是最受争议的标本 取标本前应摘去牙托，清洁口腔如刷牙和漱口 深咳，采集标本过程中要有专业的医务人员指导 无痰可用3％～5％NaCl 5ml雾吸约5min导痰
也可用物理疗法、体位引流、鼻导管抽吸等法取痰
三、尿标本的采集
尿标本的分类
尿常规标本 尿培养标本 12h或24h尿标本
1、尿常规标本
查尿液的性状，有无管型和细胞，并作尿蛋白和 尿糖的定性检测 用物准备：一次性尿杯
自理的病人：清晨首次尿，1/3到1/2杯 留置导尿：集尿袋中放出尿液
2、尿培养标本
用于细菌培养和细菌敏感试验
用物：
ACD (液体)
促凝剂： 矾土水泥，以铝矾土和石灰石为原料，经锻炼制成 纤维蛋白原
3、12h或24h尿标本
尿生化或尿浓缩查结核杆菌
7pm(am)排空膀胱→翌日7am 请病人先把尿液排到便盆或便壶内，再置于 3000-5000ml带盖的清洁容器内。
用物：容器（3000~5000ml） 防腐剂
常用防腐剂：
甲醛： —防腐和固定，用于作尿爱迪计数（12小时尿细 胞计数）等 —每30ml尿液加 40%甲醛液1滴 浓盐酸： —作用：保持尿液在酸性环境中，防止尿中激素被 氧化。常用于内分泌系统的检验，如17-酮类固 醇、17-羟类固醇 —24小时尿中加5-10ml
分 类
用物
痰常规标本
痰培养标本
普通容器，痰盒
无菌集痰器，漱口液
24小时痰标本
500ml的广口玻璃瓶， 内盛少量清水
共同点：验单
分
类
采集方法
痰常规标本幻 灯片 10
痰培养标本
能自理的患者； 无法咳痰或不合作者
步骤基本同上。不同的是先 用漱口液漱口，再用清水漱 口；无菌容器，无菌操作。 24小时痰标本 从晨7时~次晨7时第一口痰 结束。全部痰液留在容器中 送检。
常用抗凝剂
EDTA (乙二胺四乙酸)
常用类型:

通过与血中钙离子形成螯合物,从而阻止血液凝固

塑料试管以喷雾状态抗凝. ICSH推荐. 需充分混匀 K3EDTA: EDTA三钾(玻璃试管以液体状态抗凝) 可能因‘采血量不足’液体抗凝剂对标本有稀释作用,从而导致错误的实验结果
K2EDTA: EDTA二钾
男性病人
导尿管尿液
集尿袋内的尿液不能用作培养； 导尿管末端的尿液也不能用于培养，因为很难避免没
有尿道菌群污染。
留置导管尿液标本常通过专门的采样端口采集，不能 把导尿管与尿袋拔开后收集尿液。 采样端口用酒精消毒；必要时，可先夹住导尿管但不 能超过30分钟；将注射器针头插入采样端口，抽吸出
全血：用作血沉、血常规和测定血液中某些物质的 含量，如肌酐、尿素氮、尿酸、血糖等 血清：全血自然凝固后析出的液体,用于生物化学、 免疫学检测等，如血清酶、脂类、电解质、肝功 能
血培养标本：查找血液中的致病菌
采集法
1、静脉采血法 ★全血 ★血清 ★血培养 2、动脉血标本采集法 3、毛细血管采集法
常用于血气分析 常用于血常规检查
上呼吸道标本
上呼吸道感染：
绝大部分呼吸道感染局限于口咽、鼻咽和鼻腔部 位； 导致 咽痛、鼻涕、常常会发热。感染喉部、中耳、 鼻窦炎、结膜炎或角膜炎。 可能与严重疾病百日咳、流行性感冒、麻疹和传
染性单核细胞增多症并存。
不同的采样拭子 对标本的检测结果有影响吗?
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棉+木棍
抑菌区域的产生 由于棉中所含的 脂肪酸以及从木 棒中渗出的树脂 和甲醛。


Na2EDTA: EDTA二钠
应用: 常规液学实验, 输血前试验, 糖化血红蛋白 (HbA1C),血红蛋白电泳现象分析.
枸橼酸钠: 如血凝（1：9）、血沉（1：4） 肝素：如血黏液
氟化钠 (固体)
草酸钾类似EDTA都是通过去除 血液中的钙而达到抗凝作用.氟化钠帮助保存分析前的血糖. ---血 糖保存剂