比色法测定奇异果以及柠檬中的维生素C含量

DCPIP滴定法测定奇异果以及柠檬中的维生素C含量

邱建敏

（农业与生物学院，学号：5111509053，组别：B13）

【摘要】建立常见维生素C 含量的DCPIP滴定比较检测方法。以标准抗坏血酸溶液为参照，用2%的草酸溶液溶解水果汁液，采用DCPIP 为指示剂滴定样品与标准溶液，对比即可得水果中维生素的含量。该方法简便、分析速度快、设备简单易操作，能够满足水果中维生素C 的检测要求。

【关键词】维生素C DCPIP滴定比较检测水果

引言

维生素C 又称抗坏血酸，是水溶性维生素，是知名度最高的营养素，不但是美容灵药，更是抗氧化，保护细胞，甚至有效抗癌的维生素，它普遍存在于蔬菜水果中，但容易因外在环境改变而遭到破坏，人体自身无法合成维生素C，必须额外从食物中获取。水果中以猕猴桃含量最多，在柠檬、桔子和橙子中含量也非常丰富；蔬菜以辣椒中的含量最丰富，在番茄、甘蓝、萝卜、青菜中含量也十分丰富，野生植物以刺梨中的含量最丰富，每100克中含2800毫克，有“维生素C王”之称。维生素C为无色晶体，味酸，溶于水及乙醇，不耐热，在碱性溶液中极不稳定，日光照射后易被氧化破坏，有微量铜、铁等重金属离子存在时更易氧化分解，干燥条件下较为稳定。故维生素C制剂应放在干燥、低温和避光处保存；在烹调蔬菜时，不宜烧煮过度并应避免接触碱和铜器。本次检测挑选期中最具代表性的柠檬、奇异果为研究对象，检测期中所含维生素的含量。

目前常规的维生素 C 含量测定方法有紫外分光光度法［1］、碘量法［2］、比色法［3］、荧光法［4］等，近年来发展用高效液相色谱法测定维生素C［5-7］，但这些方法操作步骤复杂或者设备昂贵不适合推广，具有试剂和试样溶液不稳定、灵敏度低、费时等缺点。本文采用DCPIP滴定比较检测方法，该方法对水果中维生素C 含量能够快速、较准确的分析检测。

维生素C具有很强的还原性。它可分为还原性和脱氢型。还原型抗坏血酸能还原染料2,6-二氯酚靛酚（DCPIP），本身则氧化为脱氢型。在酸性溶液中，2,6-二氯酚靛酚呈红色，还原后变为无色。因此，当用此染料滴定含有维生素C的酸性溶液时，维生素C尚未全部被氧化前，则滴下的染料立即被还原成无色。一旦溶液中的维生素C已全部被氧化时，则滴下的染料立即使溶液变成粉红色。所以，当溶液从无色变成微红色时即表示溶液中的维生素C刚刚全部被氧化，此时即为滴定终点。如无其它杂质干扰，样品提取液所还原的标准染料量与样品中所含还原型抗坏血酸量成正比。

实验部分

1.1仪器与试剂

一、试剂

2%草酸溶液: 草酸2g溶于100mL蒸馏水中。

1%草酸溶液: 草酸1g溶于100mL蒸馏水中。

标准抗坏血酸溶液（1mg/mL）: 准确称取100mg纯抗坏血酸（应为洁白色，如变为黄色则不能用）溶于1%草酸溶液中，并稀释至100mL，贮于棕色瓶中，冷藏。最好临用前配制。

0.1% 2,6-二氯酚靛酚溶液: 250mg 2,6-二氯酚靛酚溶于150mL含有52mg NaHCO3的热水中，冷却后加水稀释至250mL，贮于棕色瓶中冷藏（4℃）约可保存一周。每次临用时，以标准抗坏血酸溶液标定。

二、材料

奇异果，柠檬。

三、器材

锥形瓶100mL(2)；移液管10mL(2)；容量瓶100mL(1)；250mL(1)；50mL(5)；微量滴定管5mL(1)；研钵；漏斗；纱布。

1.2提取

水洗干净整株新鲜蔬菜或整个新鲜水果，用纱布或吸水纸吸干表面水分。然后称取奇异果为20.069g、柠檬为19.976g，分别加入20mL 2%草酸，根据实验设计需要处理样品，然后用研钵研磨，四层纱布过滤，滤液备用。纱布可用少量2%草酸洗几次，合并各自滤液，滤液总体积定容至50mL。

1.3标准液滴定

准确吸取标准抗坏血酸溶液1mL置100mL锥形瓶中，加9mL 1%草酸，用微量滴定管以0.1% 2,6-二氯酚靛酚溶液滴定至淡红色，并保持15s不褪色，即达终点。由所用染料的体积计算出1mL染料相当于多少毫克抗坏血酸（取10mL 1%草酸作空白对照，按以上方法滴定）。

1.4样品滴定

准确吸取滤液两份，每份10mL, 分别放入2个锥形瓶内，滴定方法同前。另取10mL 1%草酸作空白对照滴定。

结果与讨论

1）标准液的滴定

2）样品滴定

A．空白对照

3）样品1：奇异果

奇异果质量W1=20.069g

维生素C含量（mg/100g样品）=（V

A ——V

B

）*C*T*100/(D*W)

=（9.57-0.04）*50*0.321*100/（10*20.069） =76.22（mg/100g奇异果）

4）样品2：柠檬

柠檬质量：W2=19.976g

维生素C含量（mg/100g样品）=（V

A ——V

B

）*C*T*100/(D*W)

=（7.28-0.04）*50*0.321*100/（10*19.976） =58.17（mg/100g柠檬）

试验结果可得出，在一定的温度下，对于实验所研究的部位，奇异果的维生素C含量为76.22mg/100g, 柠檬的维生素C含量为58.17mg/100g，奇异果中维生素C含量比柠檬中要更多。对于柠檬的维生素标准含量没有明确的数据，但其比奇异果含量普遍低很多，这与我们实验获得结果是相同的。奇异果鲜果因果形、皮色、肉色不同维生素C 的含量也有区别，普遍含量均在150mg/ 100g 左右[8]，而我们所得的奇异果维生素含量明显要小于此值，根据分析，我们所购买的奇异果并不新鲜很可能是引起其含量减少。

另外，不同的方法所测出的维生素C的含量也会有所差异，例如对于尿液中维生素C 含量的测定，2,6-二氯酚靛酚法测定结果明显高于2,4-二硝基苯肼法，且两者有明显的关系，其回归方程为Y= -14.57+0.529X[9]。

同时，维生素C 含量还随温度的不同而改变。加热会使Vc的有氧氧化，一般在60℃以下时，随着温度的升高，Vc的氧化速度加快，超过60℃氧化速度不随温度升高而增加，达90℃时氧化速度反而下降。表明氧化酶的活性温度区段性，同时溶解氧的浓度随温度而变化[10]。另外，对于同种蔬菜或者水果，由于研究部位不同，维生素C含量也会有所不同[11]。