药敏试验 PPT
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药敏试验说课教案PPT课件
药敏试验说课教案ppt课件
目录 Contents
• 药敏试验概述 • 药敏试验的步骤 • 药敏试验的临床应用 • 药敏试验的注意事项 • 药敏试验的发展趋势
01
药敏试验概述
药敏试验的定义
药敏试验
是一种检测细菌对抗生素敏感性的试 验，用于指导临床医生选择合适的抗 生素进行治疗。
定义补充
药敏试验通过测量细菌在接触不同浓 度的抗生素时生长情况的变化，来判 断细菌对抗生素的敏感程度，从而帮 助医生选择最有效的抗生素。
接种方法
将制备好的菌液均匀涂布在培养基上， 或使用定量接种环接种。
培养
培养条件
根据不同病原体设定适宜的培养 温度和时间。
培养观察
定期观察培养基上是否有细菌生长， 以及生长情况是否符合预期。
防止污染
确保培养过程的无菌操作，避免杂 菌污染。
结果解读
结果判定
根据培养结果，判断细菌是否对 某种药物敏感或耐药。
耐药性的监测
总结词
药敏试验有助于监测病原微生物的耐 药性变化，为抗生素的更新换代和临 床用药提供依据。
详细描述
随着病原微生物耐药性的不断增加， 药敏试验能够监测耐药性的发展趋势， 及时发现新的耐药菌株，为临床用药 提供更新换代的选择。
治疗效果的评估
总结词
通过药敏试验可以评估治疗效果，及时调整治疗方案，提高治愈率。
THANKS
结果记录
及时、准确地记录实验结果， 为后续数据处理和分析提供依
据。
实验后的数据处理与分析
数据处理
对实验数据进行整理、分类和 统计，确保数据准确无误。
结果分析
根据实验目的和要求，对实验 结果进行分析，得出结论。
结果报告
目录 Contents
• 药敏试验概述 • 药敏试验的步骤 • 药敏试验的临床应用 • 药敏试验的注意事项 • 药敏试验的发展趋势
01
药敏试验概述
药敏试验的定义
药敏试验
是一种检测细菌对抗生素敏感性的试 验，用于指导临床医生选择合适的抗 生素进行治疗。
定义补充
药敏试验通过测量细菌在接触不同浓 度的抗生素时生长情况的变化，来判 断细菌对抗生素的敏感程度，从而帮 助医生选择最有效的抗生素。
接种方法
将制备好的菌液均匀涂布在培养基上， 或使用定量接种环接种。
培养
培养条件
根据不同病原体设定适宜的培养 温度和时间。
培养观察
定期观察培养基上是否有细菌生长， 以及生长情况是否符合预期。
防止污染
确保培养过程的无菌操作，避免杂 菌污染。
结果解读
结果判定
根据培养结果，判断细菌是否对 某种药物敏感或耐药。
耐药性的监测
总结词
药敏试验有助于监测病原微生物的耐 药性变化，为抗生素的更新换代和临 床用药提供依据。
详细描述
随着病原微生物耐药性的不断增加， 药敏试验能够监测耐药性的发展趋势， 及时发现新的耐药菌株，为临床用药 提供更新换代的选择。
治疗效果的评估
总结词
通过药敏试验可以评估治疗效果，及时调整治疗方案，提高治愈率。
THANKS
结果记录
及时、准确地记录实验结果， 为后续数据处理和分析提供依
据。
实验后的数据处理与分析
数据处理
对实验数据进行整理、分类和 统计，确保数据准确无误。
结果分析
根据实验目的和要求，对实验 结果进行分析，得出结论。
结果报告
《解读药敏报告》课件
药敏报告的重要性
指导临床用药
药敏报告为临床医生提供了致病微生物对各种抗菌药物的敏感性和耐药性信息，有助于医生选择 合适的药物。
提高治疗效果
通过药敏报告，医生可以选择对致病微生物敏感的抗菌药物，提高治疗效果，缩短病程。
控制耐药性的产生
药敏报告有助于医生及时发现和防止耐药性的产生，保护抗菌药物的有效性。
患者情况
一位65岁男性，因尿路感染住院 治疗。
病原体
耐万古霉素肠球菌。
药敏报告
显示该菌对多种抗生素耐药。
治疗过程
采用替加环素治疗，同时根据药 敏报告调整剂量和疗程。
THANKS
告并合理选用敏感药物。
加强与实验室的沟通合作
03
临床医生和实验室之间应加强沟通合作，及时反馈和解决药敏
试验中出现的问题。
05
实际案例分享
案例一：耐药菌感染治疗失败
01
患者情况
一位70岁女性，因
肺部感染住院治疗
02
。
耐药菌株
肺炎克雷伯菌，对 多种抗生素耐药。
04
结果
患者死亡，诊断为
03
多重耐药菌株感染
02
药敏报告解读步骤
确定病菌种类
01
确定病菌种类是解读药敏报告的第一步，因为 不同病菌对药物的敏感性不同。
02
通过查看报告中的细菌名称或编号，可以确定 感染的病菌类型。
03
了解病菌种类有助于医生选择合适的药物进行 治疗。
判断是否耐药
耐药性是指病菌对某些药物产 生抵抗力，导致药物无法有效 杀死或抑制病菌的生长。
04
药敏报告的局限性及未来展 望
药敏报告的局限性
01
培养基的局限性
药敏试验_PPT幻灯片
因此，在使用抗菌药物的过程中，必须加强细菌对 抗菌药物敏感性的实验室监测，为临床上合理使用 抗菌药物提供试验依据。而细菌对抗菌药物的敏感 试验，就是对抗菌药物进行实验室监测的主要手段 之一。
二、 几个概念
1.敏感（sensitive，S）:某菌株能被某抗菌药物常用剂 量或途径可达到的治疗浓度杀死或抑制称为敏感。 （敏感度的分级：三个程度，敏感、中敏、耐药）
马，兔等）
＊嗜血杆菌属，100ml MHA＋fildes增菌液5ml(含脱纤维羊血， 胃蛋白酶等)
培养基厚度：4mm(9cm平板倾25 ml；15cm平 板倾70 ml)
7. “抑菌商数”（Inhibitory Quotient，简称 IQ），是指某抗菌药物在局部组织或体液 中的浓度除以该药物对感染菌的最小抑菌 浓度所得的商数。即：
局部组织或体液中的药物浓度
IQ =
MIC
抑菌商数越大，抑菌效果越明显；反之， 抑菌商数越小，抑菌效果越差。
三、血药浓度与MIC之间的关系
从本质上讲：细菌对某种抗菌药物是 敏感还是耐药，常以该抗菌药物的治疗浓 度（抗菌药物通过常用途径和常用剂量所 能达到的血药浓度）与该抗菌药物对细菌 的最小抑菌浓度（MIC）的关系而定
血药浓度与MIC之间的关系
中毒浓度
致死量 最小中毒量
极量
R
治疗安
全范围
治疗浓度
（常用剂量）
I
S 最小有效量 无效浓度
但是药物在局部组织和组织液中的浓度， 往往只有血清浓度的1/2～1/10，故在治疗 局部组织感染时，仅仅以MIC小于血清治 疗浓度定为敏感往往会产生一定的误差， 应该以MIC小于血清治疗浓度的2～10倍， 才是敏感。因此，在治疗局部组织或组织
二、 几个概念
1.敏感（sensitive，S）:某菌株能被某抗菌药物常用剂 量或途径可达到的治疗浓度杀死或抑制称为敏感。 （敏感度的分级：三个程度，敏感、中敏、耐药）
马，兔等）
＊嗜血杆菌属，100ml MHA＋fildes增菌液5ml(含脱纤维羊血， 胃蛋白酶等)
培养基厚度：4mm(9cm平板倾25 ml；15cm平 板倾70 ml)
7. “抑菌商数”（Inhibitory Quotient，简称 IQ），是指某抗菌药物在局部组织或体液 中的浓度除以该药物对感染菌的最小抑菌 浓度所得的商数。即：
局部组织或体液中的药物浓度
IQ =
MIC
抑菌商数越大，抑菌效果越明显；反之， 抑菌商数越小，抑菌效果越差。
三、血药浓度与MIC之间的关系
从本质上讲：细菌对某种抗菌药物是 敏感还是耐药，常以该抗菌药物的治疗浓 度（抗菌药物通过常用途径和常用剂量所 能达到的血药浓度）与该抗菌药物对细菌 的最小抑菌浓度（MIC）的关系而定
血药浓度与MIC之间的关系
中毒浓度
致死量 最小中毒量
极量
R
治疗安
全范围
治疗浓度
（常用剂量）
I
S 最小有效量 无效浓度
但是药物在局部组织和组织液中的浓度， 往往只有血清浓度的1/2～1/10，故在治疗 局部组织感染时，仅仅以MIC小于血清治 疗浓度定为敏感往往会产生一定的误差， 应该以MIC小于血清治疗浓度的2～10倍， 才是敏感。因此，在治疗局部组织或组织
药敏试验简介ppt课件
– 使用CLSI 方法记录 – 采用其他方法时使用CLSI做参照方
法进行比对
ppt课件
33
CLSI M100 “表格” 内容
更新信息
M100
词汇表 I & II & III
M2 表格 扩散法
M7 表格
附录
•抗生素的测试与报告
MIC法
•S I R 折点 •质控
•抗生素的测试与报告 •S I R 折点
– 见后面的幻灯：
ppt课件
19
常量稀释法
•药敏试验的参考方法： 将标准接种物加入含対倍稀释抗生素的MH肉汤 管中. 过夜培养. MIC 即是能抑制细菌生长的含最低抗生素的浓度的那一 管所标示的浓度值(琼脂稀释法是将対倍稀释后的抗生素加入融化后平衡 到50℃的MHA中再倾制平皿，接种物为一定大小的斑点，浓度也为 104CFU/ml). 解释标准(S or R) 是建立在体内可达到的抗生素浓度水平上
梅里埃产品习惯采用的CLSI以外的标准
• 英国BSAC标准；
欧洲应用比较广泛的标准
• 德国DIN标准 …pp…t课件..
30
CLSI药敏解释标准
• CLSI (Clinical Laboratory standard institution)药敏指南
ppt课件
31
CLSI 药敏文件
• M100-S22 常见菌 (2012)** • M11-A7 厌氧菌 (2007) • M39-A3 积累抗菌谱(2009) • M24-A 分枝杆菌, 奴卡菌, 以及其他需氧放
• 培养时间：18小时
ppt课件
9
测量方法
• 透射光
− 葡萄球菌
利奈唑胺 苯唑西林 万古霉素
法进行比对
ppt课件
33
CLSI M100 “表格” 内容
更新信息
M100
词汇表 I & II & III
M2 表格 扩散法
M7 表格
附录
•抗生素的测试与报告
MIC法
•S I R 折点 •质控
•抗生素的测试与报告 •S I R 折点
– 见后面的幻灯：
ppt课件
19
常量稀释法
•药敏试验的参考方法： 将标准接种物加入含対倍稀释抗生素的MH肉汤 管中. 过夜培养. MIC 即是能抑制细菌生长的含最低抗生素的浓度的那一 管所标示的浓度值(琼脂稀释法是将対倍稀释后的抗生素加入融化后平衡 到50℃的MHA中再倾制平皿，接种物为一定大小的斑点，浓度也为 104CFU/ml). 解释标准(S or R) 是建立在体内可达到的抗生素浓度水平上
梅里埃产品习惯采用的CLSI以外的标准
• 英国BSAC标准；
欧洲应用比较广泛的标准
• 德国DIN标准 …pp…t课件..
30
CLSI药敏解释标准
• CLSI (Clinical Laboratory standard institution)药敏指南
ppt课件
31
CLSI 药敏文件
• M100-S22 常见菌 (2012)** • M11-A7 厌氧菌 (2007) • M39-A3 积累抗菌谱(2009) • M24-A 分枝杆菌, 奴卡菌, 以及其他需氧放
• 培养时间：18小时
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测量方法
• 透射光
− 葡萄球菌
利奈唑胺 苯唑西林 万古霉素
药敏试验(扩散法)操作方法PPT课件
（2）为方便临床给药，根据MIC提供一个定性的结果是 必要的。临床医师根据敏感、中介、耐药的提示结合 MIC可以方便地制定用药方案。
敏感（S）：表示该药物对细菌的MIC值低于常规剂量下的抗菌 药物血液浓 度或组织浓度4-8倍，可以用常规剂量治愈。
中介（I）：表示该药物对细菌的MIC值接近于常规剂量给药后的血药浓度 或组织药物浓度，细菌对该药的敏感性降低，但仍可用于生理性浓集部位的 感染或使用高剂量药物进行治疗（注：必须考虑高剂量的安全性）。
二、常用的药敏测定方法
1、扩散法：纸片法、牛津杯法、打孔法等。
纸片法 手工测试的方法，通过测试药物纸片在固体培养基 上的抑菌圈的大小，判断细菌对该种药物是否敏感。目前临床上 广泛使用此法。定性
2、稀释法：琼脂稀释法、液体稀释法（试管、微量）
通过测试细菌在含不同浓度药物培养基内的生长情况，判断 其最低抑菌浓度（MIC）。自动化仪器均采用液体稀释法为药敏 试验的方法。 定量
2、药片吸水量的测定 在上述药片用微量移液器进行滴 加蒸馏水，最可使药片完全浸透又不滴水为宜，最终计 算出每片药片的吸水量。一般常用直经6mm的定性滤纸 药片吸水量为0.01ml。
药液的制备（用于商品药的试验）：
按兽药说明书(或标签)上标明的治疗量的10-20倍比例配制药液。 如某药品：100g兑水100kg，表明该药治疗量为1ห้องสมุดไป่ตู้兑水1L，配制 药液时就是1g加50-100ml水或1L水加10-20g药品，即为配制药敏 片所用的药液浓度。
2、成药（复方成分） 多种联合 的抗菌药物制剂应以其成分中某种 含量最高的抗菌药物为标准稀释成 有效浓度。但多数厂家由于产品配 方机密，多按产品用量进行配制。 药敏片可由厂家提供，也可自制。
敏感（S）：表示该药物对细菌的MIC值低于常规剂量下的抗菌 药物血液浓 度或组织浓度4-8倍，可以用常规剂量治愈。
中介（I）：表示该药物对细菌的MIC值接近于常规剂量给药后的血药浓度 或组织药物浓度，细菌对该药的敏感性降低，但仍可用于生理性浓集部位的 感染或使用高剂量药物进行治疗（注：必须考虑高剂量的安全性）。
二、常用的药敏测定方法
1、扩散法：纸片法、牛津杯法、打孔法等。
纸片法 手工测试的方法，通过测试药物纸片在固体培养基 上的抑菌圈的大小，判断细菌对该种药物是否敏感。目前临床上 广泛使用此法。定性
2、稀释法：琼脂稀释法、液体稀释法（试管、微量）
通过测试细菌在含不同浓度药物培养基内的生长情况，判断 其最低抑菌浓度（MIC）。自动化仪器均采用液体稀释法为药敏 试验的方法。 定量
2、药片吸水量的测定 在上述药片用微量移液器进行滴 加蒸馏水，最可使药片完全浸透又不滴水为宜，最终计 算出每片药片的吸水量。一般常用直经6mm的定性滤纸 药片吸水量为0.01ml。
药液的制备（用于商品药的试验）：
按兽药说明书(或标签)上标明的治疗量的10-20倍比例配制药液。 如某药品：100g兑水100kg，表明该药治疗量为1ห้องสมุดไป่ตู้兑水1L，配制 药液时就是1g加50-100ml水或1L水加10-20g药品，即为配制药敏 片所用的药液浓度。
2、成药（复方成分） 多种联合 的抗菌药物制剂应以其成分中某种 含量最高的抗菌药物为标准稀释成 有效浓度。但多数厂家由于产品配 方机密，多按产品用量进行配制。 药敏片可由厂家提供，也可自制。
细菌药敏试验及其耐药表型检测课件
药敏试验的分类
纸片扩散法
将抗菌药物纸片贴在接种了待测 菌的琼脂平板上，通过测量抑菌 圈大小来确定细菌对药物的敏感
程度。
稀释法
通过不同浓度的抗菌药物与细菌在 琼脂平板上接触，观察细菌生长情 况，以判断药物的抑菌浓度。
E-test法
将抗菌药物浓度梯度试纸贴在接种 了待测菌的琼脂平板上，根据抑菌 圈边缘与试纸条的交汇点读出最低 抑菌浓度值。
点，是临床常用的药敏试验方法之一。
04
药敏试验的结果解读
结果判读标准
敏感（Susceptible）
01
表示细菌对药物敏感，通常为≤2μg/ml或≤10μg/ml，具体标
准根据药物种类和实验方法而异。
中介（Intermediate）
02
表示细菌对药物中度敏感，通常为2μg/ml＜MIC＜10μg/ml或
某些细菌可以产生酶类，将药物分解 或灭活，从而降低或消除药物的抗菌 作用。
抗菌药物作用靶点的修饰
细菌通过增加或改变靶点蛋白的数量 或修饰状态，降低药物与靶点的结合 能力。
03
药敏试验的方法
纸片扩散法
总结词
一种常用的药敏试验方法
详细描述
纸片扩散法是一种简便、快捷的药敏试验方法，通过将含有一定浓度的抗菌药 物的纸片贴在接种了待测菌的琼脂平板上，观察细菌周围的抑菌圈大小，判断 细菌对药物的敏感程度。
细菌药敏试验及其耐药表型检测课 件
目录
• 细菌药敏试验概述 • 细菌耐药性及耐药表型 • 药敏试验的方法 • 药敏试验的结果解读 • 耐药表型检测的应用 • 展望与未来发展方向
01
细菌药敏试验概述
药敏试验的定义
• 药敏试验：指通过实验室方法检测细菌对抗生素等抗菌药物的敏感程度，为临床医生提供抗菌药物选择依据的过程。
药敏试验报告的解读PPT课件
48
（二）微生物检验标本采集和处理
1、血液及骨髓标本
最常用的方法为血液增菌培养法。成人每瓶需8-10ML,儿 童每瓶需1-3ML。另外，脑脊液和胸腹水也可用儿童血液 培养瓶增菌，采集量同血液。 （1）为了提高阳性率，应在抗生素治疗前，病人寒战或高 热时严格无菌静脉采血后注入血培养瓶。 （2）于已用抗生素不能停用时，可于48小时内分别于下次 用抗生素之前，采取3份血液标本(要求双管双侧）立即送 检，如不能立即送检，应放置室温保存，但不能超过8-9 小时。 （3）必要时可取骨髓1-2ML，无菌注入血培养瓶中送检。 注意：应严格无菌操作避免污染。一般病人在发病初期1-2 天或发热高峰时采集血液保本。
– 细菌对A组抗生素耐药 – 病人对A组抗生素过敏 – 严重感染或多部位、多种细菌混合感染 – 控制传染病流行
--C组：备选抗生素，在下列情况下使用
– 对一个或多个首选药耐药的地区流行株感染 – 对不常见菌感染的治疗 – 控制传染病的流行
--U组：包含某些仅用于或首选治疗泌尿道感染的抗 菌药物
26
与临床沟通中常见问题
）、美罗培南天然耐药。
28
细菌的天然耐药
• ⑶肺炎链球菌：对氨基糖苷类抗生素天然耐药 • ⑷产气肠杆菌和阴沟肠杆菌：对头孢西丁天然
耐药。
• ⑸克柔念珠菌：对氟康唑天然耐药。 • ⑹肺炎克雷伯菌：对氨苄西林天然耐药。 • ⑺铜绿假单胞菌：对氨苄西林、阿莫西林、阿
莫西林棒酸、复方新诺明、头孢1代、头孢2代 天然耐药。
下面就以上几种情况分别解读
9
10
11
12
铜绿假单胞菌
13
产ESBL大 肠埃希菌
14
15
16
17
18
（二）微生物检验标本采集和处理
1、血液及骨髓标本
最常用的方法为血液增菌培养法。成人每瓶需8-10ML,儿 童每瓶需1-3ML。另外，脑脊液和胸腹水也可用儿童血液 培养瓶增菌，采集量同血液。 （1）为了提高阳性率，应在抗生素治疗前，病人寒战或高 热时严格无菌静脉采血后注入血培养瓶。 （2）于已用抗生素不能停用时，可于48小时内分别于下次 用抗生素之前，采取3份血液标本(要求双管双侧）立即送 检，如不能立即送检，应放置室温保存，但不能超过8-9 小时。 （3）必要时可取骨髓1-2ML，无菌注入血培养瓶中送检。 注意：应严格无菌操作避免污染。一般病人在发病初期1-2 天或发热高峰时采集血液保本。
– 细菌对A组抗生素耐药 – 病人对A组抗生素过敏 – 严重感染或多部位、多种细菌混合感染 – 控制传染病流行
--C组：备选抗生素，在下列情况下使用
– 对一个或多个首选药耐药的地区流行株感染 – 对不常见菌感染的治疗 – 控制传染病的流行
--U组：包含某些仅用于或首选治疗泌尿道感染的抗 菌药物
26
与临床沟通中常见问题
）、美罗培南天然耐药。
28
细菌的天然耐药
• ⑶肺炎链球菌：对氨基糖苷类抗生素天然耐药 • ⑷产气肠杆菌和阴沟肠杆菌：对头孢西丁天然
耐药。
• ⑸克柔念珠菌：对氟康唑天然耐药。 • ⑹肺炎克雷伯菌：对氨苄西林天然耐药。 • ⑺铜绿假单胞菌：对氨苄西林、阿莫西林、阿
莫西林棒酸、复方新诺明、头孢1代、头孢2代 天然耐药。
下面就以上几种情况分别解读
9
10
11
12
铜绿假单胞菌
13
产ESBL大 肠埃希菌
14
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17
18
抗菌药物敏感性试验(药敏试验)PPT课件
治疗对基本药物过敏的患者
治疗少见菌的感染
流行病学调查为目的向感染控制部门报告
试验方法—纸片扩散法
改良Kirby-Bauer法(K-B法)
试验材料
培养基 非苛氧菌用Mueller- Hinton（M-H）琼脂 药物纸片 直径6mm纸片，每片吸水量约20μl 菌液比浊管 0.5号麦氏（McFarland）标准比浊管，
抗菌药物敏感性试验(药敏 试验)
目的
指导临床医生针对各类临床感染患者选择 最佳抗菌药物
一定区域内积累对公共卫生有关的重要耐 药的微生物流行病学资料
根据细菌对药物敏感谱进行菌种鉴定
药敏试验原理
纸片扩散法
把含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测 试细菌的琼脂平板上
纸片中药物吸收琼脂水分溶解后通过弥散 作用形成递减的浓度梯度
纸片周围一定距离范围内试验菌生长受抑 制，从而形成无菌生长的透明圈即抑菌环。
抑菌环大小反映测试菌对测定药物的敏感 程度
抑菌环大小除与细菌的敏感性有关外还与 其它诸因素相关。
稀释法
定量测定抗菌药物活性 抗菌药物与肉汤或琼脂培养基混合稀释后
种入试验细菌，孵育过夜。 以能抑制细菌生长的最低浓度为最低抑菌
变形杆菌属的菌株可扩散到某些抗菌药物 的抑菌环内，故在明显抑菌环内有薄膜状 爬行生长可以忽略。
加贴纸片
将接种好的平板敞开盖子倒置在室温下干 燥3-5min 使平板上的水分被琼脂完全吸 收。
用镊子取纸片一张贴在琼脂平板表面，轻 压使其与琼脂完全接触。纸片中心间距 ≥24mm,纸片中心距平皿边缘≥15mm。 直径90mm的平板最好贴6张。
15min内将平板倒置放温箱孵育。
注意
纸片一旦贴下就不可再挪动位置，因纸 片中的药物已扩散到琼脂中。 需要时应在适当的地方贴新纸片
治疗少见菌的感染
流行病学调查为目的向感染控制部门报告
试验方法—纸片扩散法
改良Kirby-Bauer法(K-B法)
试验材料
培养基 非苛氧菌用Mueller- Hinton（M-H）琼脂 药物纸片 直径6mm纸片，每片吸水量约20μl 菌液比浊管 0.5号麦氏（McFarland）标准比浊管，
抗菌药物敏感性试验(药敏 试验)
目的
指导临床医生针对各类临床感染患者选择 最佳抗菌药物
一定区域内积累对公共卫生有关的重要耐 药的微生物流行病学资料
根据细菌对药物敏感谱进行菌种鉴定
药敏试验原理
纸片扩散法
把含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测 试细菌的琼脂平板上
纸片中药物吸收琼脂水分溶解后通过弥散 作用形成递减的浓度梯度
纸片周围一定距离范围内试验菌生长受抑 制，从而形成无菌生长的透明圈即抑菌环。
抑菌环大小反映测试菌对测定药物的敏感 程度
抑菌环大小除与细菌的敏感性有关外还与 其它诸因素相关。
稀释法
定量测定抗菌药物活性 抗菌药物与肉汤或琼脂培养基混合稀释后
种入试验细菌，孵育过夜。 以能抑制细菌生长的最低浓度为最低抑菌
变形杆菌属的菌株可扩散到某些抗菌药物 的抑菌环内，故在明显抑菌环内有薄膜状 爬行生长可以忽略。
加贴纸片
将接种好的平板敞开盖子倒置在室温下干 燥3-5min 使平板上的水分被琼脂完全吸 收。
用镊子取纸片一张贴在琼脂平板表面，轻 压使其与琼脂完全接触。纸片中心间距 ≥24mm,纸片中心距平皿边缘≥15mm。 直径90mm的平板最好贴6张。
15min内将平板倒置放温箱孵育。
注意
纸片一旦贴下就不可再挪动位置，因纸 片中的药物已扩散到琼脂中。 需要时应在适当的地方贴新纸片
药敏试验方法简介ppt
2
3
包括试剂、器材的准备，样品的收集、处理等。
确保试验前准备工作充分
试验过程中应严格按照规定的方法和步骤进行，避免误差和偏差。
严格遵守操作规程
试验中的细节问题不容忽视，如试剂的保存和配制、样品的处理等。
注重细节
03
数据处理问题
数据处理需谨慎，避免误差和异常数据的干扰，同时要注意数据的可重复性和可再现性。
目的
定义与目的
1906年，美国医学家首次提出药敏试验方法，以解决抗菌药物治疗中的问题。
1940年代，药敏试验逐渐普及并成为抗菌药物治疗中的重要辅助手段。
1950年代，美国FDA开始对药敏试验标准进行规范和推广。
1980年代，自动化药敏试验设备开始广泛应用于临床。
目前，药敏试验已经成为临床抗菌药物治疗中不可或缺的环节。
归档要求
药敏试验结果报告应当及时归档保存，以便后续分析和应用。
结果报告与归档
通过对药敏试验结果的分析，可以了解细菌对不同药物的敏感性，为临床治疗提供参考。
分析目的
药敏试验结果可以应用于临床治疗、流行病学调查、药物疗效评估等多个领域。
应用范围
结果分析与应用
05
药敏试验注意事项及改进建议
1
注意事项
新药研发
综合治疗策略的研究是另一研究热点，通过研究不同药物之间的协同作用，可以制定更加科学合理的治疗方案。
综合治疗策略研究
03
加强基础研究
加强基础研究，深入研究药敏试验方法的原理和机制，推动药敏试验方法的创新和进步。
对未来研究的建议
01
加强国际合作
加强国际间的合作与交流，共同应对耐药性的挑战。
02
03
稀释注意事项：选择合适溶剂、准确计算浓度、保证无菌操作等。
药敏试验PPT资料PPT课件
在感染初期或症状明显时 采集样本，以提高检出率。
采集部位
选择病原体含量较高的部 位进行采集，如痰液宜选 自肺部。
样本处理
样本保存
样本量
采集后的样本应尽快送至实验室进行 检测，如不能及时送检，应妥善保存。
保证足够的样本量，以满足后续实验 需求。
样本处理方法
对采集的样本进行适当的处理，如离 心、过滤等，以去除杂质和无关细胞。
结果判断
根据病原体的生长情况，判断其对不同药物的敏 感程度。
报告发布
将实验结果及时报告给临床医生，为治疗提供参 考依据。
04
药敏试验的应用
抗生素选择
抗生素选择
药敏试验能够确定病原体对各种 抗生素的敏感程度，帮助医生选 择最有效的抗生素进行治疗，提 高治愈率并减少耐药性的产生。
耐药性检测
通过药敏试验可以检测病原体对 抗生素的耐药性，了解耐药机制 和传播情况，为制定防控策略提 供科学依据。
在琼脂平板上接种细菌，然后滴 加抗生素溶液，观察抑菌圈的大 小，判断细菌对药物的敏感性。
稀释法
将不同浓度的抗生素与细菌混合培 养，观察细菌的生长情况，确定药 物的最小抑菌浓度（MIC）。
纸片扩散法
将含有一定量抗生素的纸片贴在琼 脂平板上，观察纸片周围抑菌圈的 大小，判断细菌对药物的敏感性。
02
药敏试验的种类
详细描述
E试验法是一种新型的药敏试验方法，通过在药敏试纸上施加连续变化的压力，使药物浓度与细菌生 长曲线呈线性关系，从而快速准确地判断细菌对药物的敏感程度。该方法操作简便，结果准确可靠。
03
药敏试验的步骤
样本采集
采集方法
根据感染部位和病原体类 型，选择合适的采集方法， 如咽拭子、痰液、尿液等。
采集部位
选择病原体含量较高的部 位进行采集，如痰液宜选 自肺部。
样本处理
样本保存
样本量
采集后的样本应尽快送至实验室进行 检测，如不能及时送检，应妥善保存。
保证足够的样本量，以满足后续实验 需求。
样本处理方法
对采集的样本进行适当的处理，如离 心、过滤等，以去除杂质和无关细胞。
结果判断
根据病原体的生长情况，判断其对不同药物的敏 感程度。
报告发布
将实验结果及时报告给临床医生，为治疗提供参 考依据。
04
药敏试验的应用
抗生素选择
抗生素选择
药敏试验能够确定病原体对各种 抗生素的敏感程度，帮助医生选 择最有效的抗生素进行治疗，提 高治愈率并减少耐药性的产生。
耐药性检测
通过药敏试验可以检测病原体对 抗生素的耐药性，了解耐药机制 和传播情况，为制定防控策略提 供科学依据。
在琼脂平板上接种细菌，然后滴 加抗生素溶液，观察抑菌圈的大 小，判断细菌对药物的敏感性。
稀释法
将不同浓度的抗生素与细菌混合培 养，观察细菌的生长情况，确定药 物的最小抑菌浓度（MIC）。
纸片扩散法
将含有一定量抗生素的纸片贴在琼 脂平板上，观察纸片周围抑菌圈的 大小，判断细菌对药物的敏感性。
02
药敏试验的种类
详细描述
E试验法是一种新型的药敏试验方法，通过在药敏试纸上施加连续变化的压力，使药物浓度与细菌生 长曲线呈线性关系，从而快速准确地判断细菌对药物的敏感程度。该方法操作简便，结果准确可靠。
03
药敏试验的步骤
样本采集
采集方法
根据感染部位和病原体类 型，选择合适的采集方法， 如咽拭子、痰液、尿液等。
细菌药敏试验正式版ppt
生理部位具有(jùyǒu)临床效力（如尿液 我们目前采用的是CLSI折点。
3：药敏试验的结果(jiē guǒ)解释标准（即折点）：可分为 临床和实验室标准化委员会（CLSI）折点与食品与药品管理局（FDA）折点，
中的喹诺酮类和β-内酰胺类）。另外中 我们目前采用的是CLSI折点。
耐药（Resistance）：指受试菌株不能被常规剂 量抗菌药物达到的剂量所抑制。 一、药敏试验(shìyàn)概念
• 中介 (Intermediate)：指抗菌药物MIC接 近血液 和 组织中通常可达到的浓
度，疗效低于敏感药。还表 示在药物 指导临床医生选择使用抗生素，避免用药不当，延误治疗，并诱导产生耐药菌株。
3：药敏试验的结果(jiē guǒ)解释标准（即折点）：可分为 临床和实验室标准化委员会（CLSI）折点与食品与药品管理局（FDA）折点，
第七页，共15页。
3.进行细菌耐药性调查和抗菌药物疗效 (liáoxiào)时需要进行药敏试验。 4.当引起感染的致病菌的种属特征提示其对某种 抗菌药物高度敏感而从来未见有耐药情况报告 时，通常不需要进行药敏试验。如β溶血菌对万 古霉素。
第八页，共15页。
5.自标本中分离出多种细菌，不能确定为致病菌的多种细菌， 分离菌可能是来自环境或人体正常菌群污染时，通常 (tōngcháng)不必进行药敏试验。 6.分离自正常寄生部位的条件致病菌和非致病菌，不能说明 其与污染关系，不需要进行药敏试验。
第十一页，共15页。
试验(shìyàn)结果的评价与报告
由于细菌耐药机制的不同及试验中影响因素 (yīn sù)的干扰，药敏试验的表型可能出现错 误或矛盾，应加以注意！
注意(zhù yì)
第十二页，共15页。
1.由于方法对某些药物还不够精确，或由于没有 (méi yǒu)收集到足够的耐药菌株来制定折点， CLSI药敏指南对这些药物除了“敏感”以外没 有(méi yǒu)标明任何其他分类，如果检测结果 提示“非敏感”，应确证微生物鉴定和药敏试 验结果（证实药敏试验在控）随后送上级实验 室证实其结果。 2.出现不可能的结果：如铜绿假单胞菌对头孢唑 林、氨苄西林敏感；MRSA对青霉素敏感；肠 杆菌科细菌对第一代喹诺酮敏感而对环丙沙星 耐药等，此类结果须找出原因加以纠正。
3：药敏试验的结果(jiē guǒ)解释标准（即折点）：可分为 临床和实验室标准化委员会（CLSI）折点与食品与药品管理局（FDA）折点，
中的喹诺酮类和β-内酰胺类）。另外中 我们目前采用的是CLSI折点。
耐药（Resistance）：指受试菌株不能被常规剂 量抗菌药物达到的剂量所抑制。 一、药敏试验(shìyàn)概念
• 中介 (Intermediate)：指抗菌药物MIC接 近血液 和 组织中通常可达到的浓
度，疗效低于敏感药。还表 示在药物 指导临床医生选择使用抗生素，避免用药不当，延误治疗，并诱导产生耐药菌株。
3：药敏试验的结果(jiē guǒ)解释标准（即折点）：可分为 临床和实验室标准化委员会（CLSI）折点与食品与药品管理局（FDA）折点，
第七页，共15页。
3.进行细菌耐药性调查和抗菌药物疗效 (liáoxiào)时需要进行药敏试验。 4.当引起感染的致病菌的种属特征提示其对某种 抗菌药物高度敏感而从来未见有耐药情况报告 时，通常不需要进行药敏试验。如β溶血菌对万 古霉素。
第八页，共15页。
5.自标本中分离出多种细菌，不能确定为致病菌的多种细菌， 分离菌可能是来自环境或人体正常菌群污染时，通常 (tōngcháng)不必进行药敏试验。 6.分离自正常寄生部位的条件致病菌和非致病菌，不能说明 其与污染关系，不需要进行药敏试验。
第十一页，共15页。
试验(shìyàn)结果的评价与报告
由于细菌耐药机制的不同及试验中影响因素 (yīn sù)的干扰，药敏试验的表型可能出现错 误或矛盾，应加以注意！
注意(zhù yì)
第十二页，共15页。
1.由于方法对某些药物还不够精确，或由于没有 (méi yǒu)收集到足够的耐药菌株来制定折点， CLSI药敏指南对这些药物除了“敏感”以外没 有(méi yǒu)标明任何其他分类，如果检测结果 提示“非敏感”，应确证微生物鉴定和药敏试 验结果（证实药敏试验在控）随后送上级实验 室证实其结果。 2.出现不可能的结果：如铜绿假单胞菌对头孢唑 林、氨苄西林敏感；MRSA对青霉素敏感；肠 杆菌科细菌对第一代喹诺酮敏感而对环丙沙星 耐药等，此类结果须找出原因加以纠正。
《药敏试验结果分析》PPT课件
精品医学
13
• K．奇异变形菌、沙门菌：所有氨基青霉 素 R，所有一代头孢和所有脲基青霉素 R/I，所有头霉素 S，任何三代头孢菌素 R/I或头孢泊肟 R，或氨曲南 R/I，说明耐 药性可能由ESBL引起，使青霉素、青霉 素/酶抑制剂、头孢菌素和单环类抗生素 的抗菌活性下降。结果修正为：所有青 霉素 R，所有头孢菌素（除头霉素外） R，氨曲南 R。
• 对所有受试抗生素均R，不可能的结果
精品医学4罕见的矛 Nhomakorabea的结果A. 如果奈替米星 R/I 而妥布霉素 S （通常 二者同步耐药）
B. 如果丁氨卡那 R/I，而妥布霉素/奈替米 星 S（对丁氨卡那耐药的肠杆菌科细菌 对其它氨基糖苷类抗生素耐药）
C. β-内酰胺类抗生素/酶抑制剂R，而该种 β-内酰胺类抗生素 S，不可能的结果。
精品医学
16
• C. 鲍曼不动杆菌或无硝不动杆菌：所有 氨基青霉素或一代二代头孢或氯霉 S，这 个结果不可靠，这两个菌对以上抗生素 天然耐药。
• D. 洋葱伯克霍尔德菌：氨基糖苷类抗生 素或亚胺培南 S，这个结果不太可能，该 菌对以上抗生素天然耐药。
精品医学
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罕见的结果（值得注意）
• A. 铜绿假单胞菌：如果亚胺培南 R，而头孢他 啶 S，替卡西林 S，说明耐药性最大可能为细 菌细胞壁通透性下降所致，不指示与其它β-内 酰胺类抗生素的交叉耐药。
结果修正为所有青霉素 R，所有二代头 孢 R/I，所有青霉素/酶抑制剂 R/I。
精品医学
11
• H. 普通变形杆菌：所有氨基青霉素 R，任何一 代头孢 R，所有羧基青霉素或脲基青霉素 S， 所有三代头孢菌素 S。说明耐药性由内在的头 孢菌素酶引起，使一代、二代头孢菌素抗菌活 性下降。结果修正为：所有一代头孢 R，所有 二代头孢 R/I。
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❖ 原则：
❖
选择S药物可能有效
❖
选择R药物肯定无效
❖
分析结果，推测同类药物
❖
Hale Waihona Puke 首选A组 次选B/C组1.
选择MIC远离S折点的药物
选择哪种药物
ﻍ头孢菌素类、克林霉素和复方磺胺天然耐药 ﻍ氨基糖苷类药物治疗肠球菌感染只能用于联
合治疗 ﻍ喹诺酮类、呋喃妥因只用于尿路感染的治疗 ﻍ肠球菌导致的血液感染应联合治疗
药敏试验测试中抗菌药物选择原则
根据SAST和美国CLSI标准（每年修正） 参照临床分离的病原菌类型 同类同一亚类只选择1-2种抗菌药 选择的药敏药物应有效、不易耐药、经济
是否能将所有的药都做药敏试验?
• 没有必要： 根据抗菌药物的等效原则和细菌 耐药表型可从已知药敏结果推测其他一些抗菌 药物的敏感性。
选择性报告 ❖ C组，补充性抗菌药物，用于对基本药物药物耐药的流行
菌株、对药物过敏的病人、某些不常见的细菌 ❖ U组，仅用于或首选尿道感染的抗菌药物 ❖ O组， 该组药物对细菌有临床适应症，但在美国一般不用
做常规试验和报告的候选。
敏感性分类(CLSI)
❖ 敏感(susceptible，S) ❖ 中介(intermediate，I) ❖ 耐药(resistance，R) ✓ 剂量依赖性敏感(susceptible-dose dependent，
SDD)
敏感性判定的临床意义
❖ 敏感（Susceptible） 用常规用量治疗有效 常规用药时达到的平均血药浓度超过细菌 的MIC 5倍以上。
❖ 耐药（Resistance） 用常规用量治疗不能抑制细菌的生长 MIC高于药物在血、体液中可能达到的浓 度
敏感性判定的临床意义
❖ 中介 (Intermediate)
耐药、临床疗效不佳、确定中介度的敏感性、选择二线药
自动化药敏测定仪法：利用光学测量法测定抗菌药物对细菌的
作用，即透光量与菌液浊度成反比。优点：快速，尤其适用于快速 生长的细菌，药敏试验可在3~5小时内完成
抗生素连续梯度法 (Etest )：适用于营养要求高、生长缓慢或
需特殊培养条件的病原菌
流式细胞仪
MIC接近血、体液中药物的浓度，治疗反应率低于 敏感株 ❖药物生理浓集部位有效 (尿-FQ) ❖加大用药剂量可能有效
缓冲区：防止操作的系统误差造成重大结果的判定 错误
MIC的意义
耐药 中介 敏感
2010年CLSI.
Isolate 1
Isolate 2
耐药折 点
敏感折点
Isolate 3 Isolate 4
常用实验药物及其代表的药物
如何从预测的同类药物中筛选出最佳药品？
Antibiotic concentration (ug/ml)
Correlation of serum pharmacokinetics with MIC (susceptibility) of an organism
8
6
Drug A
4
Drug B
2
B
0
A
Time above MIC
Time
Drug A present at concentration of 2 ug/ml for 50% of dosing interval
Drug B present at concentration of 2 ug/ml for 30% of dosing interval
综合分析
✓ 疾病本身 ✓ 患者个体情况 ✓ 致病菌情况 ✓ 药物的特点
参考结果，但不唯结果
3、 综合分析
药敏试验的目的
❖ 药敏试验：以患者的血液、体液、排泄物或分泌物为标本， 进行细菌分离培养、鉴定及敏感性测定，以达到诊断和治 疗的目的。
❖ 目的： 使用体外试验的方法检测细菌的反应性，为临床 医生针对某一特定的临床感染提供依据——实施个体化治 疗。
药敏试验基本流程
合格性检查
标本采集
细菌培养
• 没有可能：不是所用药物都可以做药敏试验（ 需要药物在体外稳定，需要有操作标准和解释 标准）
大家有疑问的，可以询问和交流
可以互相讨论下，但要小声点
9
常规试验和报告中抗菌药物建议分组
在标准中抗菌药物建议分成A、B、C 、U四组 ❖ A组，所列的抗菌药物为首选常规药敏测试药物 ❖ B组，为临床使用主要抗菌药物,可用于首选试验，但只是
MIC 0mg/l
Same？
在药敏试验报告中MIC越小的抗菌药 物效果越好吗？
感染菌对同一种药物的MIC越小 ，效果越好
不同种抗菌药物之间MIC无可比 性
Same？
通过药敏试验报告如何正确选用抗菌药物？
抗生素的正确选用
1、通过药敏结果 2、根据药物的类型及PK/PD参数选用 3、综合分析
药敏结果分析
鉴定
细菌分离
药敏试验
结果判断
报告
美国CLSI(Clinical and Laboratory Standards Institute，临床实验室 标准化协会 )制定的标准（每年修订）
药敏试验方法
❖ 纸片扩散法 (K-B法)：测定抑菌圈直径，适合于快速生长的致病菌 ❖ MIC法：
稀释法(肉汤、琼脂)：分为试管稀释法和微量稀释法。用于罕见
细菌药敏报告的解读与抗菌药物的合理选择
报告人：周建国 张晓雪
目录
细菌药敏报告
11、、药药1敏、敏试药验敏试的试验目验的的目目的的 22、、药2药、敏敏药试试敏验试的验验方的的法方方法法 33、、敏敏感感度的度介的绍介绍 44.、MICMI的C意的义意义
抗菌药物的合理选择
1、通过药敏结果选用 2、通过药物的PK/PD选用