拟南芥基因组DNA的提取

拟南芥基因组DNA的提取

以生长良好的野生型拟南芥幼叶为材料，采用CTAB法提取基因组总DNA。操作步骤：

（1）将CTAB提取液先在65℃水浴锅中预热；

（2）在液氮中研磨拟南芥幼嫩叶，在离心管中加入800μL粉末，然后加入800μL CTAB提取液，65℃保温30min以上；

（3）加入酚：氯仿：异戊醇=400:384:16，混匀，室温静置1分钟；

（4）4℃，12000rpm离心机中离心2min，取上清，加入氯仿：异戊醇=768:32，混匀，室温静置1min；

（5）4℃，12000rpm离心机中离心2min，取上清，加入氯仿800μL异丙醇，混匀，室温静置10min；

（6）4℃，12000rpm离心机中离心15min，取上清；

（7）在上清液中加入800μL的70%乙醇洗涤沉淀，12000rpm离心机中离心2min，弃上清；

（8）加入30μLddH2O，放入-20℃的冰箱中备用。