球菌及检验

第一节 葡萄球菌属
(Staphylococcus)
一、生 物 学 特 性
（一）形态与染色
G+， 球形，无鞭毛、无芽孢，呈葡萄串状排列。
（二）培养特性
营养：要求不高，耐盐。 液体：均匀浑浊生长 普通琼脂平板： 血液琼脂平板： 高盐甘露醇平板：金黄色葡萄球菌为淡橙黄色菌落；
其他葡萄球菌为白色菌落。
（三）生化反应 活泼 分解多种糖类、蛋白质、氨基酸。
(如：葡萄糖，麦芽糖，蔗糖，甘露醇） 触酶（＋）（区别于链球菌属）
（四）抗原构造 １、蛋白抗原（ＳＰＡ） ２、多糖抗原
金黄色葡萄球菌：核糖醇磷壁酸 （检测磷壁酸Ａｂ有助于金葡菌感染诊断）
凝固酶（－）：甘油磷壁酸
（五）分类:
３２个种及亚种
１、按色素分类：金、白、柠
（四）结果评价和报告
1、金黄色葡萄球菌：无论任何标本中分离到 均 应鉴定并报告临床。
2、表皮葡萄球菌及腐生葡萄球菌：从输液导 管、人工植入组织中分离到，应视为致病菌。
3、尿培养计数：>103-104为阳性菌尿标准。 4、其他凝固酶阴性葡萄球菌：引起感染流行
或治疗失败时，应鉴定到种。 5、金黄色葡萄球菌（MRSA)：头孢菌素类
取可疑菌落
鉴定试验
药敏试验
报告
（三）检验方法
1、直接涂片
适用于：正常情况下无菌的标本（如脑脊液） 伴有炎症细胞的其他体液标本、脓液等
初步报告： “查见革兰阳性葡萄状排列球菌，疑
为葡萄球菌” 或：“查见类似葡萄球菌的革兰阳性球
菌”
2、分离培养
血液标本5ml
脑脊液、脓液、
穿刺液、咽拭、
50ml葡萄糖肉汤（增菌）
液体：沉淀生长（絮状或颗粒状）。 普通琼脂平板：不生长。 血液琼脂平板：
（三）生化反应
活泼 分解多种糖类、蛋白质、氨基酸。 菊糖（-） 胆汁溶菌试验（-） （区别甲链与肺链） optochin敏感试验（-） 触酶（-）（区别于葡萄球菌属）
（四）抗原构造
１、多糖抗原（C抗原）： 群特异性。
抗生素体外药敏试验为敏感时，不应报告， 因体内试验已证实MRSA对该类抗生素耐药。
第二节 链球菌属
(Streptococcus)
一、 链 球 菌
一、生 物 学 特 性
（一）形态与染色 G+，球形或椭
圆形，呈链状排列， 无鞭毛、无芽胞， 有荚膜。
一、生 物 学 特 性
（二）培养特性
条件：营养要求较高，多数为兼性厌氧菌，少 数专性厌氧。
２、按凝固酶分类：
凝固酶阴性、凝固酶阳性葡萄球菌
３、按噬菌体分类：金葡菌分为5群26型
4. 据色素、生化反应分：
金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌
三种葡萄球菌的主要性状
性状
金黄色 葡萄球菌
色素
金黄色
血浆凝固酶
+
α溶血素
+
耐热核酸酶
+
甘露醇
+
SPA
+
致病性
强
表皮 葡萄球菌
白色 － － －
－
－ 弱
腐生 葡萄球菌 白色或柠檬色
－ － －
－
－ 无
（六）抵抗力 无芽胞菌中最强，耐干燥，对石炭酸、
升汞、龙胆紫敏感。 易产生耐药性变异，如：耐甲氧西林金
黄色葡萄球菌（MRSA）。MRSA常呈多 重耐药，对青霉素、氧氟沙星及红霉素的 敏感率分别为1.3%、3%及14%。
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）
长期住院、反复使用各种广谱抗菌药物、烧伤或 有伤口的病人及与MRSA定植或感染的病人接触都 是造成院内MRSA流行的危险因素。MRSA定植或 感染的人员及院内环境污染是引起院内流行的主要 来源。
MRSA定植或感染的人员及院内环境污染是引 起院内流行的主要来源。
二、致病性和免疫性
(一)致病物质
金黄色葡萄球菌产生多种侵袭性酶与外毒素。 1．血浆凝固酶（coagulase)：
对人有致病性的球菌主要引起化脓性 炎症,又称化脓性球菌。
G+C：葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌
G-C：脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、卡他 布兰汉菌
ห้องสมุดไป่ตู้
学习目的与要求
1. 了解病原性球菌的概念及种类。 2. 熟悉常见病原性球菌的主要生物学特 性、致病性和免疫性。 3. 掌握葡萄球菌、链球菌、脑膜炎奈瑟 菌和淋病奈瑟菌的检验程序和检验方法。
（一）标本采集 根据病情采集标本 种类：脓液、伤口分泌物、穿刺液、
血液、尿液、痰液、脑脊液、粪便等。 注意：无菌操作，避免污染。
（二）葡萄球菌检验程序
脓液、咽拭子、穿刺液 尿液、痰液
脑脊液
血液
粪便、呕吐 物
直接涂片染色
初报
分离培养 （血平板）
分离培养
增菌培养 （高盐甘露醇 平板）
涂片染色 血浆凝固酶 耐热核酸酶 其他鉴定试验
分：结合型凝固酶、游离型凝固酶。 鉴别金黄色葡萄球菌的重要指标。 2．葡萄球菌溶血素（staphylolysin）
3．杀白细胞素（leukocidin） 4．肠毒素（enterotoxin）：
（A、B、C1、C2、C3、D、E、G、H 9个 血清型） 5．表皮剥脱毒素（exfoliative toxin） 6. 毒性休克综合征毒素1（toxic shock syndrome toxin 1, TSST1）
CNS主要引起以下几种感染：泌尿系感染， 细菌性心内膜炎，败血症等，其中大多为医 院内感染。此外，心脏起搏器安装、置换人 工心脏瓣膜、长期腹膜透析、静脉滴注等亦 可造成凝固酶阴性葡萄球菌的感染。
三、微 生 物 学 检 验
（一）标本采集 （二）检验程序 （三）检验方法
三、微 生 物 学 检 验
（二）所致疾病
1．侵袭性疾病： （1）皮肤软组织感染 特点：病灶局限且脓汁粘稠
（2）内脏器官感染 （3）全身感染 （4）尿路感染
2．毒素性疾病
（1）食物中毒 （2）烫伤样皮肤综合征 由表皮剥脱毒素引起。 （3）毒性休克综合征 由TSST1引起 （4）假膜性肠炎
3、凝固酶阴性葡萄球菌的致病性
人类凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）感染中 以表皮葡萄球菌的感染最为常见。
尿液
粪便、 呕吐物
无菌（7天）
浑浊
报告： 无菌生长
血平板
高盐甘露 醇平板
（三）检验方法
3、鉴定试验
（1）血浆凝固酶试验：金黄色葡萄球菌（+） （2）甘露醇发酵试验：金黄色葡萄球菌（+） （3）耐热核酸酶试验：金黄色葡萄球菌（+） （４）肠毒素测定： 金黄色葡萄球菌产生 （5）SPA检测： 金黄色葡萄球菌 （6）凝固酶阳性和凝固酶阴性的葡萄球菌鉴定 （7）API葡萄球菌鉴定试剂盒