茭白总蛋白质双向电泳技术体系的建立

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中图分类号：Ｑ８１文献标志码：Ａ文章编号：ｌ６７３ —１６８９（２０１３）０６ —０５８１ —０５
ＥｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔｏｆＴｗｏ－ＤｉｍｅｎｓｉｏｎａｌＥｌｅｃｔｒ０ｐｈ０ｒｅｓｉｓＣｏｎｄｉｔｉｏｎｓｆｏｒＰｒｏｔｅｏｍｉｃ
ｆｍｌｉａ，ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｐｒｏｔｅｉｎｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｓ，ｌｏａｄｉｎｇａｍｏｕｎｔ，ｐＨｒａｎｇｅｓｏｆＩＰＧｓｔｒｉｐａｎｄｇｅｌｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ，ｅｔｃ．ｏｎ２－ＤＥｍａｐｓｗｅｒｅｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ．ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｍｏｄｉｉｅｆｄｐｈｅｎｏｌｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｐｒｏｔｏｃｏｌｉｓｍｏｒｅｓｕｉｔａｂｌｅｆｏｒｔｏｔａｌｐｒｏｔｅｉｎｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｏｆＺ．１ａｔｉｆｏｌｉａｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈ
量、１２ｄＬ的凝胶浓度、考马斯亮蓝Ｇ一２５０胶体考染法染色，最终可获得蛋白质点较多，背景清
晰，分辨率较高的２一ＤＥ图谱，为进一步开展茭白差异蛋白质组学研究奠定了基础。
关键词：茭白；蛋白质组学；双向电泳
２１００９５；浙江万里学院生物与环境学院，浙汀波３１５１００）
摘要：为建立茭白总蛋白质双向电泳技术体系，研究了ＴＣＡ／丙酮沉淀法和改良酚抽法两种不同
总蛋白质提取方法、蛋白质上样量、ｐＨ值范围及凝胶质量浓度等条件对２一ＤＥ的影响。结果表明，改良酚抽法更适合茭白总蛋白质的提取，采用１７ｅｍ、ｐＨ４７的胶条、１．０ｍｇ的蛋白质上样
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎｏｒｄｅｒｔｏｅｓｔａｂｌｉｓｈｔｈｅｔｗｏ — ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ（２一ＤＥ）ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｏｆＺｉｚａｎｉａ
（１．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＢｉｏｌｏｇｙａｎｄＦｏｏｄ，ＺｈｅｊｉａｎｇＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，Ｎｉｎｇｂｏ３１５１００，Ｃｈｉｎａ；２．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＦｏｏｄＳｃｉｅｎｃｅ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＮａｎｊｉｎｇＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ２１００９５，Ｃｈｉｎａ；３．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＢｉｏｌｏｇｉｃａｌ＆ＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＳｃｉｅｎｃｅ，ＺｈｅｊｉａｎｇＷａｎｌｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎｉｎｇｂｏ３１５１００，Ｃｈｉｎａ）
茭白总蛋白质双向电泳技术体系的建立
罗 Leabharlann Baidu波一，陈伟。，周静峰，宋慧波，郁志芳
（１．浙汀医药高等专科学校生物食品系，浙江宁波３１５１００；２．南京农业大学食品科技学院，江苏南京
ＡｎａｌｙｓｉｓｏｆＺｉｚａｎｉａｌａｔｉｆｏｌｉａ
ＬＵＯＨａｉ — ｂｏ一，ＣＨＥＮＷｅｉ，ＺＨＯＵＪｉｎｇ－ｆｅｎｇ，ＳＯＮＧＨｕｉ — ｂｏ，ＹＵＺｈｉ－ｆａｎｇ＊
ＴＣＡ／ａｃｅｔｏｎｅｐｒｏｔｏｃｏ１．Ａｎｄａｈｉｇｈｑｕａｌｉｔｙ２－ＤＥｍａｐｗｉｔｈｍｏｒｅｐｒｏｔｅｉｎｓｐｏｔｓ，ｃｌｅａｒｂａｃｋｇｒｏｕｎｄａｎｄｈｉｇｈｐｒｏｔｅｉｎｐｏｉｎｔｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｗａｓｏｂｔａｉｎｅｄｕｓｉｎｇｔｈｅｆｏｌｌｏｗｉｎｇｏｐｔｉｍｉｚｅｄｐｒｏｃｅｄｕｒｅ：ｌｏａｄｉｎｇ１．０ａｇｒ