中药制剂检测技术 第四章 中药制剂的杂质检查技术剖析

学成分发生氧化、水解、分解等变化而产生。
三、杂质的分类
一般杂质：自然界中分布广泛，普遍存在于药材中，在大 多数中药制剂的生产和贮存过程中均易引入的杂 质。如酸、碱、泥砂、氯化物、硫酸盐、铁盐、 重金属砷盐等。 特殊杂质：药物在生产和贮存过程中，由于药物本身的性 质、生产方法和工艺的不同可能引入或产 生的 杂质是某种（类）特定药物中特有的杂质。如大 黄流浸膏中的土大黄苷、阿胶中的挥发性碱性物 质等。
重金属：在规定实验条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠试液作用而显色
的金属杂质。如银、铅、汞、铜、镉等。中药制剂生产过程中接触铅的机会
较多，且铅在人体内易蓄积中毒，故重金属检查一般以铅为代表。
《中国药典》2010年版有三种重金属检查法：
一、硫代乙酰胺法 检查原理：硫代乙酰胺在酸性（pH3.5的醋酸盐缓冲液）条件下水解产
三、硫化钠法
适用于能溶于碱而不溶于稀酸（或在稀酸中即生成沉淀）的 药物的重金属限量检查。 检查原理：在碱性条件下，药物中的重金属离子，与硫化钠试液作用，生成
有色的金属硫化物混悬液，与一定量标准铅溶液经同法处所呈现 的颜色进行比较，判断供试品中重金属是否超过规定限量。
Pb2+ + Na2S
NaOH PbS↓ + 2Na+
地奥心血康中重金属检查
地奥心血康为薯蓣科植物黄山药和穿山龙薯蓣的根茎提取物。 《中国药典》2010年版采用第二法检查其重金属，并规定含重金属不得过 百万分之二十。

《中国药典》收载有两种砷盐检查法：古蔡氏法和二乙基二硫代氨基甲酸 银法 （Ag-DDC法）
一、古蔡氏法
检查原理
砷盐与锌和盐酸作用产生砷化氢气体 ；
与适量的水使溶解成30ml，分取溶液10ml，加盐酸4ml与水14ml，依法
检查砷盐。已知标准砷溶液（每1ml相当于1μg的As）取用量为2ml，计 算砷盐限量。
6 CV 1 10 2.0 ×106 = 3（即百万分之三） 6 解：L = ×10 = 10 W 2.0
30
答：阿胶中砷盐的限量为百万分之三。
操作方法：除另有规定外，取供试品适量，加氢氧化钠试液5ml与水20ml溶解
后，置纳氏比色管中，加硫化钠试液5滴，摇匀，与一定量的标准 铅溶液同样查
《中国药典》2010年版收载的冰片为人工合成品，又称合成龙脑。 《中国药典》2010年版采用第一法对冰片进行重金属检查，并规定冰片含 重金属不得过百万分之五。
全，然后按第一法进行检查。
操作：取供试品一定量，缓缓炽灼至完全炭化，放冷，加硫酸0.5～1.0ml
使恰湿润，用低温加热至硫酸除尽后，加硝酸0.5ml，蒸干，至氧 化氮蒸气除尽后，放冷，在500～600℃炽灼使完全灰化，放冷，加 盐酸2ml，置水浴上蒸干后，加水15ml，滴加氨试液至对酚酞指示 液显中性（微粉红色），再加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml，微热溶 解后移置纳氏比色管中，加水稀释成25ml，按照第一法检查。
CV L（%）= W ×100%
杂质最大允许量 杂质限量（ppm）= ×106 样品量
L（ppm）=
C：杂质标准溶液的浓度
V： 杂质标准溶液的体积 W：样品量
CV ×106 W
七、实例解析
阿胶砷盐限量的计算
取本品2.0g，加氢氧化钙1g，混合，加少量水，搅匀，干燥后先用 小火烧灼使炭化，再在500～600℃炽灼使完全灰化，放凉，加盐酸3ml
m1：为炽灼后残渣的重量（g）；
m2：为炽灼前供试品的重量（g）。
二、酸不溶性灰分测定法
供试品粉碎过二号筛 残渣加稀盐酸
取3～5g称重
无灰滤纸过滤
500～600℃炽灼至恒重 计算酸不溶性灰 分含量
滤渣干燥称重
m1 酸不溶性灰分含量% = ×100% m2
m1：为酸不溶性残渣的重量（g）；
m2：为炽灼前供试品的重量（g）。
四、杂质检查的意义
中药制剂质量的优劣主要从两方面来评价： ①药物本身的疗效及其毒副作用。
②药物所含杂质的多少。
杂质的存在严重影响中药制剂的有效性、安全性和稳定性 为确保中药制剂安全有效、稳定可控，必须对所含杂质进 行严格检查。
五、杂质检查的方法
对照法（限量检查法）：供试液与待检杂质对照液在相同
条件下处理，比较反应结果，判断供试品中所含杂 质是否
灰分
总灰分（生理灰分）：纯净的样品高温灼烧后遗留的灰分称总 灰分（药材本身所含的各种盐类）。每一种中药材或制剂 剂，在无外来掺杂物时，一般都有一定的总灰分含量范围， 此范围内的总灰分不属于杂质。如果总灰分超过含量限度范 围，则说明有泥砂（主要为硅酸盐）等外来杂质掺入 。
酸不溶性灰分：总灰分加盐酸处理，得到的不溶于盐酸的
注意事项
（1）标准砷溶液的制备：用三氧化二砷配制贮备液，临用前稀释而成。 （2）标准砷溶液的用量：以2ml为宜。 （3）碘化钾和氯化亚锡的作用：主要是使五价砷还原为三价砷 。 （4）醋酸铅棉花：用于吸收硫化氢气体 。应松紧适宜、保持干燥 。
（5）锌粒：无砷锌粒。锌粒大小以能过一号筛（粒径2mm左右）为宜。
重金属检查注意事项
标准铅溶液（每1ml相当于10μg 的Pb）应临用前配制，用量为2ml。配制与贮 存标准铅溶液用的玻璃容器，均不得含有铅。 显色条件：最佳酸度为pH=3.5。最佳显色时间为2分钟。 若供试品溶液有颜色，可在对照液管中加稀焦糖液或其他无干扰的有色溶液， 使之与供试液颜色一致 。 供试品中如含高铁盐，影响检查，可在供试液管和对照液管中分别加入维生素 C 0.5～1.0g，将高铁离子还原成为亚铁离子消除干扰。 炽灼温度必须控制在500～600℃，温度过低灰化不完全，重金属不能全部游离 ，温度在700℃以上，多数重金属盐都有不同程度的挥发损失 。 为了消除盐酸或其他试剂可能夹杂重金属的影响，在配制供试品溶液时，如使 用的盐酸超过1.0ml（或与盐酸1.0ml相当的稀盐酸），氨试液超过2ml，或加 入其他试剂进行处理者，除另有规定外，对照液中应取同样同量的试剂置瓷 皿中蒸干，加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml与水15ml，微热溶解后，移置纳氏 比色管中，加标准铅溶液一定量，再用水稀释成25ml。
第一节 灰分检查法 第二节 重金属检查法 第三节 砷盐检查法 第四节 注射剂有关物质检查法
第五节 农药残留量检查法
第六节 甲醇量检查法 第七节 可见异物检查法 第八节 特殊杂质检查法
李萍、崔海燕老师编写
一、杂质定义
中药制剂的杂质：系指中药制剂中存在的无治疗作用 或影响中药制剂的疗效和稳定性，甚至对人体健康有害的物 质。 包括： 毒性物质，如重金属、砷盐、黄曲霉毒素等。
检砷装置
溴化汞试纸
与AsH3生成砷斑
醋酸铅棉花 标准砷溶液（或供试液）
吸收H2S气体
酸性氯化亚锡、盐酸、 碘化钾、锌粒、水
使五价砷还原为三价砷
A．磨口锥形瓶 B．磨口塞（中有一孔） C．导气管（装醋酸铅棉花60mg） D．有机玻璃旋塞 E．有机玻璃旋塞盖
操作
（1）导气管的准备： 在导气管C中装入醋酸铅棉花60mg（高度为60～ 80mm），再于旋塞D的顶端平面上放一片溴化汞试纸（试纸大小以能覆 盖孔径而不露出平面外为宜），盖上旋塞盖E并旋紧，即得。 （2）标准砷斑的制备：精密量取标准砷溶液2ml，置A瓶中，加盐酸5ml 与水21ml，再加碘化钾试液5ml与酸性氯化亚锡试液5滴，在室温放置10分 钟后，加锌粒2g，立即将照上法装妥的导气管C密塞于A瓶上，并将A瓶置 25～40℃水浴中，反应45分钟，取出溴化汞试纸，即得。 （3）供试品砷盐检查：取按各品种项下规定方法制成的供试品溶液，置 A瓶中，加盐酸5ml与水适量使成28ml，照标准砷斑的制备，自“再加碘 化钾试液5ml”起，依法操作。将生成的砷斑与标准砷斑比较，不得更深。
生硫化氢，与重金属作用生成黄色到棕黑色的金属硫化物混悬液，与一定量的 标准铅溶液同法处理后所呈颜色比较，判断供试品中重金属是否超过限量。
pH=3.5 CH3CSNH2 + H2O CH3CONH2 + H2S pH=3.5 Pb2+ + H2S PbS↓ + 2H+
操作
25ml
灰分称酸不溶性灰分（泥砂等外来掺杂物）。
灰分检查
总灰分检查
酸不溶性灰分检查
一、总灰分测定法
供试品粉碎过二号筛 残渣称重
取2～3 g称重
计算总灰分含量
500～600℃炽灼至恒重 结果判断 将计算结果与 该品种项下的 规定值进行比 较，判断供试 品中酸不溶性 灰分是否超过 规定限量。
m1 总灰分含量% = ×100% m2
超出限量。不需测定杂质的准确含量。 准确测量法（含量测定法）：可测定杂质的准确含量 。 灵敏度法：是以检测条件下反应的灵敏度来控制杂质限量 的方法 。
六、杂质限量及计算
杂质限量：药物中所含杂质的最大允许量称为杂质限量。通常
用百 分之几（%）或百万分之几（ppm）表示。
杂质限量（%）=
杂质最大允许量 ×100% 样品量
酸不溶性灰分测定：将“总灰分测定”中所得的灰分，在坩埚中小心加 入稀盐酸约10ml，用表面皿覆盖坩埚，置水浴上加热10分钟，表面皿用热 水5ml冲洗，洗液并入坩埚中，用无灰滤纸滤过，坩埚内的残渣用水洗于 滤纸上，并洗涤至洗液不显氯化物反应为止。滤渣连同滤纸移至同一坩埚 中，干燥，炽灼至恒重。根据残渣重量，计算供试品中酸不溶性灰分的含 量（%）。
无毒副作用，但影响药物的稳定性和疗效的物质，如水、铁
盐等。 无毒副作用，也不影响药物的稳定性和疗效，但能反映药物 的生产工艺和贮存状况是否正常的物质，如氯化物、硫酸盐 等。
二、杂质的来源
中药制剂中的杂质主要来源于三个方面：
由中药材原料中带入； 在生产制备过程中引入：使用试剂、溶剂及与生产设 备接触等； 贮存过程中引入：外界条件的影响使中药制剂中的化
结果判断
三、应用实例
九味羌活丸总灰分和酸不溶性灰分测定
《中国药典》2010年版规定，九味羌活丸应进行“总灰分”和“酸不溶性 灰分”检查。要求总灰分不得过7.0%，酸不溶性灰分不得过2.0%。
总灰分测定：取九味羌活丸5袋，粉碎，过二号筛，混合均匀后，取3～ 5g，置炽灼至恒重的坩埚中，称定重量（准确至0.01g），缓缓炽热，注 意避免燃烧，至完全炭化时，逐渐升高温度至500～600℃，使完全灰化并 至恒重，称定残渣重量，计算供试品中总灰分的含量（%）。
2HBr + AsH（HgBr）2（黄色） AsH3 + 2HgBr2
AsH3 + 3HgBr2
3HBr
+ AsH（HgBr）3（棕色）
比较供试品砷斑与标准砷斑颜色的深浅，判定供试品中砷盐是否
超过限量。
供试品砷斑颜色比标准砷斑颜色浅，则供试品含砷盐符合规定； 供试品砷斑颜色比标准砷斑颜色深，则供试品含砷盐不符合规定。
（6）反应时间：45分钟。 （7）反应温度：控制在25～40℃之间。
课堂活动
导气管中的醋酸铅棉花为什么要松紧适宜，保持干燥？
二、二乙基二硫代氨基甲酸银法
本法简称Ag-DDC法，既可检查药品中砷盐限量，又可准确测定砷盐含量。
As3 +
3Zn + 3H+
AsH ↑ + 3Zn
3
2+
（反应快）
+ AsO3 3+ 3Zn + 9H
AsH ↑ + 3Zn
3
2+
+ 3H2O （反应快） + 4H2O （反应慢）
+ + 4Zn + 11H AsO34
AsH ↑ + 4Zn
3
2+
砷化氢与溴化汞试纸作用，生成黄色至棕色的砷斑；
后，同置白纸上，自上向下观察，当丙管中显出的颜色不浅于甲管时，乙管中 显示的颜色与甲管比较，不得更深。如丙管中显出的颜色浅于甲管，应取样按 第二法重新检查。
二、 炽灼法
适用于需先灼烧破坏，使与有机分子结合的重金属游离出来，再取炽灼残 渣进行检查的供试品。中药及其制剂的重金属检查多采用此法。
检查原理：将供试品炽灼破坏后，加硝酸处理，使有机物分解、破坏完
甲管
纳 氏 比 色 管
3支
标准铅溶液 2ml 醋 酸盐缓冲液（pH3.5）2ml溶 剂适量 （共25ml） 醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml 供试液适量 （共25ml） 标准铅溶液 2ml
乙管
丙管
醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml
与乙管同量的供试品及溶剂适量（共25ml）
显色与判断：再于甲、乙、丙三管中分别加硫代乙酰胺试液2ml，2分钟