医院制剂质量标准起草说明模版
15质量标准草案及起草说明
一、规格 0.2g（相当于原总药材 0.2g）质量标准草案复方苦木消炎胶囊Fufang Kumu Xiaoyan Jiaonang【处方】穿心莲 100g 苦木 100g【制法】以上二味，穿心莲加水煎煮二次，每次 2 小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成稠膏；苦木粉碎成粗粉，照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法（中国药典 2000年版一部附录 I O），用乙醇作为溶剂，缓缓渗漉，漉液回收乙醇，浓缩成稠膏。
将上述二种稠膏混匀，干燥，粉碎，过筛，加辅料适量，制成颗粒，装成 1000 粒胶囊，即得。
【性状】本品内容物为褐绿色粉末或颗粒；味苦。
【鉴别】（1）取本品 10 粒，去囊壳，研细，加乙醇 30ml，加热回流 15 分钟，滤过，滤液照下述方法试验：（ 1.1）取上述滤液的一半，蒸干，残渣加 1%盐酸溶液适量使溶解，滤过，取滤液分置二支试管中，一管滴加碘化铋钾试液 1~2 滴，生成橘红色沉淀，另一管滴加碘化汞钾试液 1~2 滴，生成黄白色沉淀。
（1.2）取上述滤液的另一半，加活性炭适量，温热，滤过，滤液供下列试验：①取滤液 2ml，滴加 2%3,5-二硝基苯甲酸的甲醇溶液及 5%氢氧化钾溶液各 2 滴，即显紫红色。
②取滤液 2ml，加固体氢氧化钾 1 小粒，振摇后，溶液显橘红色。
（2）取本品 10 粒，去除囊壳，将内容物研细，混匀，称粉末1g，加甲醇 10ml，冷浸过夜，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇 1ml 使溶解，作为供试品溶液。
另取苦木药材 1g，加甲醇 10ml，冷浸过夜，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇 1ml 使溶解，作为对照药材溶液。
吸取上述两种溶液各10μl，照薄层色谱法（中国药典 2000 年版一部附录 VI B ）试验，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶 G 薄层板上，以氯仿－甲醇（ 17：3）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以改良碘化铋钾试液，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，应显相同颜色的斑点。
××质量标准起草说明
&××质量标准起草说明××制药厂是××生产的厂家之一，其质量标准收载于卫生部药品标准中药成方制剂第十三册中，根据国家食品药品监督管理局国食药监注[2004]35号精神，按照国家药品标准提高行动计划中成药品种增修订项目任务表的具体要求，对××质量标准进行了提高、完善。
在原标准基础上，增加了处方中地黄、桃仁、大黄的显微鉴别方法；增加了大黄、当归及陈皮的薄层鉴别方法；以橙皮苷为对照品，制定了陈皮的含量测定方法。
修订后的质量标准，提高了药品的质量控制。
现将起草工作情况说明如下：1历史沿革处方来源：验方。
本品在1953年以前即为私营企业生产。
1953年纳入天津市卫生局审核的天津市固有成方统一配本。
此后在天津市卫生局核定的1956年中药成方选辑。
1964版年中成药规范，1978版年中成药规范，1990年版天津市药品标准，卫生部药品标准中药成方制剂第十三册中均予收载。
2药材标准2.1地黄：本品为玄参科植物地黄Rehmammia glutinosa Libosch.的新鲜或干燥根块。
《中国药典》2005年版一部收载。
3性状：原标准的颜色描述为棕褐色的大蜜丸，鉴于外观颜色深于丸芯，且随时间推移本品颜色会加深，故在原标准基础上修订为：本品为棕褐色至黑褐色的大蜜丸；气微，味微苦。
4鉴别4.1显微鉴别：地黄、桃仁、陈皮、大黄。
鉴于本品为生粉入药，故参照《中国药典》2005年版一部等有关内容进行了制定，具体内容为：取本品，置显微镜下观察：薄壁组织灰棕色至黑棕色，细胞多皱缩，内含棕色核状物（地黄）。
种皮外表皮石细胞淡黄色或淡棕色，呈贝壳形，径向110～198μm，壁一面层纹细密（桃仁）。
草酸钙方晶成片存在于薄壁细胞中（陈皮）。
草酸钙簇晶大，直径60～140μm（大黄）。
4.2薄层鉴别：大黄参照《中国药典》2005年版一部有关内容进行了制订。
心无忧胶囊药品标准草案及起草说明
中药注册分类8药学研究资料申报资料15药品标准草案及起草说明，并提供药品标准物质的有关资料(心无忧胶囊)课题名称心无忧胶囊研究单位 xxxx制药有限公司试验负责人 xxxx试验参加人 xxxx xxxx xxxx xxxx试验时间 20xx.1.24至20xx.2.4原始资料保有地 xxxx制药有限公司申报单位 xxxx制药有限公司联系人 xxxx联系方式 Tel:Fax:国家食品药品监督管理局标准心无忧胶囊Xinwuyou Jiaonang【处方】黄杨木50g 射干25g 细辛25g川芎37.5g 土木香37.5g 丹参125g瓜蒌皮12.5g 茵陈37.5g【制法】以上八味，黄杨木粉碎成粗粉，丹参切片，混合加热回流提取二次，第一次用10倍量乙醇加热回流2小时，第二次用8倍量50%乙醇加热回流1小时，合并两次回流提取液，滤过，滤液回收乙醇，药渣加10倍量水煎煮2小时，滤过，滤液与上述药液合并，浓缩成稠膏；土木香、细辛提取挥发油，药渣与其余射干等四味加10倍量水煎煮二次，第一次2小时，第二次1.5小时，滤过，合并滤液，浓缩成稠膏；将上述两种稠膏混匀，加入适量辅料，混匀，干燥，粉碎，喷入土木香和细辛的挥发油，混匀，装入胶囊，制成1000粒，即得。
【性状】本品为胶囊剂，内容物为淡棕黄色粉末；味微苦、辛。
【鉴别】（1）取本品内容物2g，研细，加乙醇20ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。
另取丹参酮ⅡA对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
照薄层色谱法(中国药典20xx年版一部附录ⅥB)试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(30～60℃)-氯仿-醋酸乙酯(35∶5∶1)为展开剂，展开，取出，晾干。
供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
（2）取本品内容物5g，研细，加甲醇-甲酸(95：5)30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。
质量标准起草说明的技术要求
质量标准起草说明的技术要求-------------------------------------------------------------------------------- （一）品种制修订的历史沿革1 、写明品种最初来源、各级标准收载情况及修订情况。
2 、若为不同品种合并统一的应注明两标准主要区别和合并理由（如同方异名等）。
（二）名称1 、有无变更的历史情况。
2 、未后缀剂型名的，应增加剂型名。
3 、不符合命名原则，除含有“灵”、“精”等外，含有“降糖”、“降脂”、“降酶”、“减肥”、“健美”等暗示疗效和有误导作用及不实之词的均应更名。
4 、须进行更名的应按命名原则推荐至少 2 个以上并经过查询没有与已批准标准中的名称重名的名称供审核用。
企业确有理由不宜更名的，可随起草标准草案一并上报审核。
（三）处方1 、变更的历史情况及原因（濒危、毒性、正名、分列等）2 、与药典炮制方法不同的炮制品要注明。
3 、药典多品种来源的如仅用其中 1 个或几个来源的应明确，并在标准正文页尾加注（如芥子用白芥子）。
所用药材品种，应该引起起草单位的重视。
如贯众：药典收载品种为绵马贯众，主要作用是驱虫，故用于治疗感冒的贯黄感冒颗粒中的贯众应明确基源，若涉及基源变更的，需提供历史延用证明性文件或资料。
4 、下列品种应特别注意核查和明确方中用药：五味子、南五味子；粉萆薢、绵萆薢；寒水石、北寒水石；大青叶、蓼大青叶；黄柏、关黄柏；金银花、山银花；葛根、粉葛；土木香、藏木香；山楂、南山楂；败酱草、北败酱草；刘寄奴、北刘寄奴；板蓝根、南板蓝根；牛膝、怀牛膝；金钱草、广金钱草；山豆根、北豆根；橘红、化橘红；苦地丁、紫花地丁、甜地丁；紫草、硬紫草；前胡、紫花前胡等。
有的药典新分列品种如金银花，原生产工艺是金银花和山银花按一定比例合并投料的，则应在处方中分列，并明确各自的处方量；如果仅用一种，应以原研单位意见为主；又如海带和昆布，现合并为昆布，可在处方中直接做相应修订并说明即可。
质量标准及起草说明
汉桃叶的质量标准及起草说明姓名：汪岩学号：S2010210 专业：中药学汉桃叶质量标准【中文名】汉桃叶【汉语拼音】Hantaoye【拉丁名】Scheffera arboricola Hayata【来源】汉桃叶为五加科植物白花鹅掌柴(Scheffiera kwang siensis Merr.ex Li)的根或茎、叶，又名广西鹅掌柴，气微，味微苦涩，全年可采，切段晒干或烘干。
【产地】广西【性状】植株性状：常绿矮小灌木，略带蔓性。
全株无毛。
茎圆柱形，幼枝绿色至绿褐色，有细纵纹及明显环状叶痕。
老茎灰棕色，栓皮灰白色或呈脱落状。
1掌状复叶，小叶5～9片，叶柄长6～12cm，基部扩大抱茎；叶片纸质或咯革质，长圆形至披针形，长5~12cm，宽1.5～5 cm，最宽处在叶基上部1／3处；先端渐尖或少数或尾状渐尖，基部楔形，全缘，边缘向下表面略卷。
叶片上面深绿色，有光泽，下面略淡；网状叶脉向上，下表面稍凸出，侧脉叶柄长5～7对。
伞形花序顶生，圆锥状排列。
苞片卵形，长叶柄长8~l0mm。
花序具花叶柄长5~8朵，总花梗长叶柄长4～l0mm，小花梗长2～5mm。
花萼光滑或具稀疏毛，全缘。
花瓣5，白色或紫色，长1～2mm；雄蕊5，花丝长2～2.5 cm；子房下位，5室，花盘略凸起，柱头5，直立。
核果圆形至卵圆形，长约5mm，宽4～5mm，外具棱线。
花期2～3月，果期3～5月。
生于山坡、灌木丛。
药材性状：茎枝圆柱形，常斜切成厚片或段，长1～3cm，直径0.4～3cm。
外表灰白色至淡黄棕色，具纵皱纹及点状皮孔，有的可见半环状叶痕，栓皮常片状脱落。
质坚实而稍轻。
断面黄白色，皮部薄，木部宽广，致密坚实，放射状纹理明显，髓部质松，或成空洞。
叶多切碎，完整者为掌状复叶。
小叶柄长为掌状复叶，小叶披针形，革质。
先端渐尖，有光泽；，羽状网脉于两面明显凸出；小叶柄长1～3cm。
小叶片革质，完整者长圆形至披针形，长5～12cm，宽1.5～5 cm；先端渐尖，基部楔形，全缘并稍向下反卷。
三黄片质量标准起草说明
三黄片质量标准起草说明组别：组员：【名称】三黄片三黄片质量标准起草说明【处方】大黄 300g 盐酸小檗碱 5g 黄芩浸膏 21g 【制法】见正文，按制成1000粒。
【性状】本品为糖包衣或薄膜包衣，除去包衣后显棕色；味微苦、涩【鉴别】（1）盐酸小檗碱的TLC鉴别盐酸小檗碱为该药的主要成分，参照2021版《中国药典》黄柏的TLC鉴别方法，以盐酸小檗碱为对照品（购自中国药品生物制品检定所），用薄层微量进样器分别吸取盐酸小檗碱标准品配制成的对照品溶液和供试品溶液各2ul, 用薄层电动点样器分别点同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上, 以乙酸乙酯-丁酮- 甲酸- 水( 10：7：1 ：1) 为展开剂, 展开, 取出, 晾干, 置紫外光灯( 365 nm)下检视。
此外，令使用苯- 醋酸乙酯- 甲醇- 异丙醇- 浓氨试液(12 ∶6 ∶3 ∶3 ∶1)为展开剂进行验证，置用氨气预饱和15min 的展开缸内。
展开，取出，晾干，紫外光灯(365nm) 下检视，供试品色谱在与对照品色谱相应的位置上,显相同的一个黄色荧光斑点。
阴性对照色谱在与对照品色谱相应的位置上无斑点。
（2）大黄的TLC鉴别：大黄为本方的君药，所含的大黄酸、大黄素、大黄酚是主要有效成分，参照2021版《中国药典》大黄的TLC鉴别方法，以大黄素对照品、大黄酸对照品、大黄酚对照品及大黄对照药材（购自中国药品生物制品检定所）吸取上述供试品溶液、阴性对照溶液及对照药材溶液各10μL ,对照品溶液5μL ,分别点于同一硅胶G薄层板上,以石油醚(30～60 ℃) - 甲酸乙酯- 甲酸(15∶5∶1) 的上层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365nm) 下检视。
此外以石油醚(30～60 ℃) - 甲酸乙酯- 乙酸(15∶4∶1.5) 的上层溶液为展开剂进行验证，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。
供试品色谱中在与对照药材色谱相应的位置上,显相同5 个橙黄色荧光斑点,在与对照品色谱相应的位置上显相同橙黄色斑点,置氨气中熏后,日光下检视,斑点为红色。
药品质量标准的起草说明
六、阐明曾经作过的试验的数据与 结论 不成熟的、 不成熟的、尚待完善的 失败的 暂未收载或不能收载于正 文的 七、起草单位和复核单位意见 八、参考文献
下面哪些指标为药物分析常用的 效能指标 A．准确性 B．回收率 C．精密度 D．检测限 E．选择性
药物分析方法常用的效能指标包 括 准确度 、 精密度 、 专属性 、 检测限 、 定量限 、 范围 、 耐用性 。 线性 、
二、与原标准不同的，对修订部分 与原标准不同的， 的内容加以说明，修订依据、 的内容加以说明，修订依据、修订 前后测定结果比较， 前后测定结果比较，对未修订的内 容说明不修订的理由 三、属于新的检查方法，特别是含 属于新的检查方法， 量测定方法要有专题研究报告
四、原料药的起草说明需增加 1、本品的药理作用和临床用途 2、国内外质量控制的情况 3、与各种生产工艺路线的分析对 比 五、制剂的起草说明需增加 1、与各种处方的分析对比 2、制备工艺路线及分析 3、稳定性考察的材料与结论
第三节 药品质量标准的起草说明 一、按质量标准项目逐条说明 （一）概况 临床用途 产历史 工艺改革和重大科研成果、 工艺改革和重大科研成果、 国外情况（药典、产品质量） 国外情况（药典、产品质量）
（二）生产工艺 若有其他不同工艺路线的应列出 并指明厂家 （三）质量标准制定的意见或理由 按标准内容依次说明 检验结果与数据 （四）与国外药典标准进行对比 对本标准的水平进行评价
质量标准的制定与起草说明
新药质量标准起草说明制订新药质量标准，还应有一份起草说明。
起草说明是对所制订的质量标准进行解释，并有研究数据，例如该新药的研制工艺，讨论哪一些是属于应该控制的质量指标，哪一些可以不控制，检测方法的原理是什么，检测数据及综合比较等、起草说明在新药申报时，可供卫生行政部门审批时参考，在新药批准后，执行质量标准的过程中可以供查阅，解决一些质量问题，同时对今后修改质量标准也具有重要参考价值．起草说明可以从以下11个方面来写：1．背景材料介绍药品的研制过程，简略地说明实验室研究与临床试验的时间、机构及试验结论。
如果国外已有产品，则要介绍最早投放市场的厂家和时间，目前生产的厂家和采用的商品名称，在其他国家注册登记的情况，并要注意专利权。
对于制订或选用的中、外文名称的理由，应加以解释。
2.药品的制造方法简略说明合成路线、工艺、处方、原辅料的来源及质量要求。
化学合成药要着重说明结晶、精制、干燥等工序的细节。
需要技术保密的工艺、特殊的添加剂、辅料等，可以另外列出，只供有关审批部门审阅查考，并给予保密。
3．理化性质检测结果及讨论对于一类药，不管来自化学合成或从天然来源中提取，一般都应有专题报告证明其结构和理化指标，而且要用精制品测定。
对仿制品，则要有材料证明该物质与被仿制品有相同的理化常数，证明两者为同一物质应有图谱。
4. 鉴别应说明选用的鉴别反应的依据，最好能说明鉴别反应的原理。
5．检查杂质检查，应说明一般杂质检查的倩况，对可能存在的特殊杂质的检查结果，必要时要说明检出灵敏度．对确定的限度的理由要加以解释，经检查后对不必列入标准的杂质检查项目宜说明理由，尤其对国外药典列入的检查项目不订入标准中更要说明理由。
制剂的检查项目如固体制剂的崩解时限、溶出度、缓释和控释制剂的释放度考察数据，热原与安全性试验结果，选择剂量的参考资料、无菌试验的测定结果、微生物检查情况等，都应列出。
6．含量测定应说明测定的原理、测定方法的精密度、准确度，影响测定结果的因素。
中药制剂质量标准
在正常室温（15～30℃）范围内. 放冷至室温的放置时间. 供试品水分的高低. 不同厂家、批次的试剂.
含量测定
干扰简单的情况.
容量法、重量法、分光光度法.
干扰复杂时可考虑具在线分离功能、专属性更 强的色谱法.
薄层扫描法、高效液相色谱法、气相色谱法等
制剂应使用的化学原料药必须已有国家药用标准， 并必须使用通用名。如：“扑尔敏” . 中药材或中药材提取物、辅料应有国家标准或省级 质量标准. 中药材应注意与最新版药典相一致.
五味子（五味子、南五味子），葛根(野葛、粉葛) 黄柏(川黄柏、关黄柏)，金银花(忍冬、山银花)， 前胡(白花前胡、紫花前胡) 等.
其它大类成分的呈色反应、沉淀反应、荧光反 应、泡沫试验等专属性较差 .
鉴别－－紫外吸收光谱
利用供试品较为稳定的紫外吸收峰：
如药典：八角茴香、川乌、牡丹皮、阿魏、附子、
岩白菜素、草乌、香加皮、莪术、银柴胡、罂粟壳 木香槟榔丸、复方丹参滴丸等.
注意：综合的多组分吸收叠加，大复方制剂中 可能较难重现，对于药材工艺稳定、精制程度 较高的制剂可以考虑，如复方丹参滴丸.
中药制剂质量标准的撰写 与起草/修订说明的撰写
中药制剂质量标准内容：
中文名称（必要时用括号加注副名），汉语拼 音名. 处方、制法. 性状、鉴别、检查、浸出物、含量测定. 功能与主治、用法与用量、注意、规格、贮藏.
名称
格式为：中文名称（必要时用括号加注副名）， 汉语拼音名. 中药制剂质量标准的名称应使用规范的名称， 含中文名、汉语拼音名，其命名应参照《中国 药品通用名称命名原则》、《中药命名原则》， 不得与已有国家标准的药品名称相同，剂型的 表述参照最新版《中国药典》.
医院制剂质量标准起草说明模版
3.6.4 微生物限度3.6.4.1 方法验证材料与依据3.6.4.1 1 供试品：参榆灌肠液规格：XXX生产企业：江苏省XXX医院批号:111212 111214 1112153.6.4.1.2 培养基：1．营养琼脂培养基批号：110512 厂家：XXX2．玫瑰红钠琼脂培养基批号：1105172 厂家：XXX3．营养肉汤培养基批号：110126 厂家：XXX4．胆盐乳糖培养基批号：110408 厂家：XXX5．MUG培养基批号：110203 厂家：XXX3.6.4.1.3稀释剂: pH7.0无菌氯化钠蛋白胨缓冲液500ml/瓶,批号：2011032801(如缓冲液为市场购买，需写明生产企业)3.6.4.1.4 菌种：3.6.4.1.5 验证依据：《中国药典》2010年版二部附录XI J微生物限度检查法方法验证。
3.6.4.2 验证实验操作根据《中国药典》2010年版二部附录微生物限度检查法方法，采用常规法（如常规法回收率未达70%，需采用培养基稀释法重新进行验证；如培养基稀释法回收率仍未达70%，可采用薄膜过滤法再次进行验证）对细菌、霉菌及酵母菌计数方法的验证。
控制菌检查方法采用常规法（若阳性未生长采用培养基稀释法或薄膜过滤法），从而建立该样品的微生物限度检查方法。
3.6.4.2.1菌液制备方法：1.接种大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中,置350C培养24小时，分别取上述培养物1ml加9ml 0.9％的无菌氯化钠溶液，10倍递增稀释制成每1ml含菌数为50～100cfu的菌悬液。
2.接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁培养基中，置250C培养48小时，取上述培养物1ml加9ml 0.9％的无菌氯化钠溶液，10倍递增稀释制成每1ml含菌数为50～100cfu的菌悬液。
3.接种黑曲霉的新鲜培养物至改良马丁琼脂斜面培养基中,置250C培养7天，加入5ml含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9％的无菌氯化钠溶液,将孢子洗脱，并吸出孢子悬液至无菌试管内，用含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9％的无菌氯化钠制成每1ml含孢子数为50～100cfu的孢子悬液。
医疗机构制剂(中药民族药)质量标准起草说明编写细则
医疗机构制剂（中药、民族药）质量标准起草说明编写细则医疗机构制剂（中药、民族药）质量标准起草说明是说明标准起草过程中，制订各个项目的理由及规定各项指标和检测方法的依据；也是对该制剂从处方、制法，以及它们的理化鉴别，质量控制，临床应用，贮藏等方面资料的汇总。
1编写原则1.1起草说明不属于药品法规，也不是药典的注释，而是制订各个项目的说明。
内容、文字，特别是名词、术语应力求与药典—致。
计量单位等统一按药典“凡例”中规定要求编写。
1.2起草说明包括理论性解释和实践工作中的经验总结。
尤其是对中药的真伪鉴别及质量控制方面的经验和实验研究，即使不太成熟，但有实用意义的也可编写在内。
1.3每一篇起草说明均应写明作者、审核人的单位、姓名、职称或职务、日期。
2编写格式及要求1.1历史沿革简要说明处方来源，包括验方、古方来源及考证，及历版标准收载、增修订情况。
2.2【名称】应对命名依据作简要说明。
曾用名及修改理由。
3.3【处方】4.3.1对处方药味排列次序进行简要说明。
5.3.2处方中各药味说明其标准收载情况及产地，写法同药典正文来源。
6.3.3处方中如有标准未收载的炮制品，应详细说明炮制方法和质量要求。
2.4【制法】2.4.1列出工艺流程。
包括关键工艺参数和技术指标及确定最终制备工艺及其技术条件的依据。
2.4.2如需粉碎的药材应说明药粉粒度；药材经提取后制成清膏的应说明出膏率（干膏率）并列出相应数据；写明制成品总量。
2.4.3说明主要辅料品种及用量，标准收载情况，药典未收载的辅料应附执行标准。
2.4.4同一品种下收载不同规格应分别说明，如蜜丸，收载水蜜丸、小蜜丸、大蜜丸应分别说明；又如片剂，收载大片与小片、糖衣片、薄膜衣片，应分别说明；如颗粒剂有含糖颗粒、无蔗糖颗粒、含乳糖颗粒等应分别说明。
2.4.5制法过程中的注意事项。
2.5【性状】2.5.1说明正文中性状内容拟定的依据，对性状进行修订的应说明理由。
2.5.2对性状内容需要说明的其他问题。
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3.6.4 微生物限度3.6.4.1 方法验证材料与依据3.6.4.1 1 供试品：参榆灌肠液规格：XXX生产企业：江苏省XXX医院批号:111212 111214 1112153.6.4.1.2 培养基：1．营养琼脂培养基批号：110512 厂家：XXX2．玫瑰红钠琼脂培养基批号：1105172 厂家：XXX3．营养肉汤培养基批号：110126 厂家：XXX4．胆盐乳糖培养基批号：110408 厂家：XXX5．MUG培养基批号：110203 厂家：XXX3.6.4.1.3稀释剂: pH7.0无菌氯化钠蛋白胨缓冲液500ml/瓶,批号：2011032801(如缓冲液为市场购买，需写明生产企业)3.6.4.1.4 菌种：3.6.4.1.5 验证依据：《中国药典》2010年版二部附录XI J微生物限度检查法方法验证。
3.6.4.2 验证实验操作根据《中国药典》2010年版二部附录微生物限度检查法方法，采用常规法（如常规法回收率未达70%，需采用培养基稀释法重新进行验证；如培养基稀释法回收率仍未达70%，可采用薄膜过滤法再次进行验证）对细菌、霉菌及酵母菌计数方法的验证。
控制菌检查方法采用常规法（若阳性未生长采用培养基稀释法或薄膜过滤法），从而建立该样品的微生物限度检查方法。
3.6.4.2.1菌液制备方法：1.接种大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中,置350C培养24小时，分别取上述培养物1ml加9ml 0.9％的无菌氯化钠溶液，10倍递增稀释制成每1ml含菌数为50～100cfu的菌悬液。
2.接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁培养基中，置250C培养48小时，取上述培养物1ml加9ml 0.9％的无菌氯化钠溶液，10倍递增稀释制成每1ml含菌数为50～100cfu的菌悬液。
3.接种黑曲霉的新鲜培养物至改良马丁琼脂斜面培养基中,置250C培养7天，加入5ml含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9％的无菌氯化钠溶液,将孢子洗脱，并吸出孢子悬液至无菌试管内，用含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9％的无菌氯化钠制成每1ml含孢子数为50～100cfu的孢子悬液。
3.6.4.2.2 供试液制备：取供试品10ml,加pH7.0无菌氯化钠蛋白胨缓冲液至100ml,混均,作为1：10供试液。
3.6.4.3 菌落计数方法的验证3.6.4.3.1 平皿法：（常规法）①试验组：取1：10供试液1ml，分别加入10个平皿中，再依次加入大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉5种菌的菌悬液1ml(含50～100cfu)，每株菌平行制备2个平皿，立刻倾注营养琼脂培养基和玫瑰红钠琼脂培养基，分别置350C培养48小时和250C培养72小时。
②菌液组：分别取上述稀释的菌液1ml注入平皿内，每个菌平行制备2个平皿，测定所加的试验菌数。
③供试品对照组：取1：10供试液1ml分别注入4个平皿中，立刻注入营养琼脂和玫瑰红钠琼脂培养基，每种培养基制备2个平皿，分别置350C培养48小时和250C培养72小时。
以测定供试品的本底菌数。
上述方法平行实验3次④结果见表1表1.参榆灌肠液细菌.霉菌和酵母菌回收率的测定（平皿法）试验组菌回收率(%)＝％菌液组的平均菌落数100由表1可见参榆灌肠液用平皿菌落计数法，三次平行试验大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌和黑曲霉的菌落回收都达到了70%，说明常规平皿法用于参榆灌肠液计数结果是准确的。
备注：如采用常规平皿法菌落回收率都达到70%，则细菌、霉菌和酵母菌的计数方法验证即可完成，但如常规法一种或几种菌回收率三次均低于70%，需采用培养基稀释法重新进行试验，具体操作如下：若细菌回收率低于70%则细菌数计数采用培养基稀释法，霉菌回收率低于70%则霉菌酵母菌计数采用培养基稀释法，二者均低于70%则同时采用培养基稀释法。
验证资料中需体现常规法及培养基稀释法两种验证方法及结果。
3.6.4.3.2 平皿法：（培养基稀释法）①试验组：取1：10供试液0.2ml及各试验用菌液1ml分别注入平皿中，每种试验菌平行制备10个平皿，立刻倾注营养琼脂培养基和玫瑰红钠琼脂培养基，细菌350C培养48小时，霉菌及酵母菌250C培养72小时。
②菌液组：分别取上述稀释的菌液1ml注入平皿内，每个菌平行制备2个平皿，测定所加的试验菌数。
③供试品对照组：取1：10供试液0.2ml分别注入20个平皿中，立刻倾注营养琼脂和玫瑰红钠琼脂培养基，每种培养基制备10个平皿，分别置350C培养48小时和250C培养72小时。
以测定供试品的本底菌数。
上述方法平行实验3次④结果见表2表2.参榆灌肠液细菌.霉菌和酵母菌回收率的测定（培养基稀释法）试验组菌回收率(%)＝％菌液组的平均菌落数100由表2可见参榆灌肠液用培养基稀释法，三次平行试验大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌和黑曲霉的菌落回收都达到了70%，说明培养基稀释法用于参榆灌肠液计数结果是准确的。
备注：如培养基稀释法回收率仍低于70%，采用薄膜过滤法再次进行试验。
验证资料中需体现常规法、培养基稀释法及薄膜过滤法三种验证方法及结果。
具体操作如下：3.6.4.3.3 薄膜过滤法：供试液制备：取1：10供试液10ml 放入离心管中，将离心管放入离心机，500转/min 离心3分钟，取上清液。
（注：仅细菌计数可用低速离心，霉菌及酵母菌计数不可采用。
）①试验组：取1：10上述供试液1ml 加pH7.0的无菌氯化钠蛋白胨缓冲液100ml 稀释过滤，用400ml （备注：具体用量依样品抑菌作用强弱而定，在试验中需设计不同的冲洗量进行冲洗，根据回收率的情况选择不同的冲洗量）pH7.0的无菌氯化钠蛋白胨缓冲液冲洗滤膜，每次100ml ，在最后一次冲洗液中分别加入试验用菌液1ml ，过滤后无菌方法取出滤膜，菌面朝上贴于营养琼脂或玫瑰红钠琼脂平板上，细菌350C 培养48小时，霉菌及酵母菌250C 培养72小时。
②菌液组：分别取上述稀释的菌液1ml 注入平皿内，每个菌平行制备2个平皿，测定所加的试验菌数。
③供试品对照组：取1：10供试液1ml 采用上述薄膜过滤法冲洗过滤，分别置350C 培养48小时和250C 培养72小时。
以测定供试品的本底菌数。
上述方法平行实验3次 ④结果见表3表3.参榆灌肠液细菌.霉菌和酵母菌回收率的测定（薄膜过滤法）试验组菌回收率(%)＝％菌液组的平均菌落数100由表3可见参榆灌肠液用薄膜过滤法，三次平行试验大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌和黑曲霉的菌落回收都达到了70%，说明薄膜过滤法用于参榆灌肠液计数结果是准确的。
3.6.4.4 控制菌（大肠埃希菌）检查方法的验证 3.6.4.4.1 直接接种法（1）试验组： 取1：10的供试液10ml ，接种至100ml 的胆盐乳糖增菌培养基内，加入49cfu 大肠埃希菌,350C 培养24小时，可见培养基混浊，有气体产生。
取上述培养物0.2ml 接种至5mlMUG 培养基的试管内，培养5小时、24小时，在366nm 紫外线下观察，可见荧光反应，滴加靛基质试液，液面呈玫瑰红色. （2）阴性菌对照组：取1：10的供试液10ml ，接种至100ml 的胆盐乳糖增菌培养基内，加入33cfu金黄色葡萄球菌, 350C培养24小时，培养基无混浊与气体产生。
取上述培养液0.2ml接种至5mlMUG培养基的试管内，培养5小时、24小时，在366nm紫外线下观察，无荧光反应，滴加靛基质试液，液面均呈试剂本色。
上述方法试验组检出了大肠埃希菌，阴性菌对照组未检出金黄色葡萄球菌。
说明用100ml胆盐乳糖增菌培养基可以进行参榆灌肠液大肠埃希菌检查。
备注：试验中若100ml阳性对照未生长，则加大胆盐乳糖增菌培养基用量，分别作200ml、300ml，方法同以上方法。
3.6.4.4.2 薄膜过滤法若直接接种法加大培养基用量阳性对照仍无法检出，则采用薄膜过滤法：（1）试验组：取1：10的供试液10ml，用离心机低速离心500r/min离心3分钟，取上清液定容至10ml，加入pH7.0的无菌氯化钠蛋白胨缓冲液稀释至100ml 薄膜过滤，用400ml（备注：具体用量依样品抑菌作用强弱而定，在试验中需设计不同的冲洗量进行冲洗，根据回收率的情况选择不同的冲洗量）pH7.0的无菌氯化钠蛋白胨缓冲液冲洗滤膜，每次100ml，过滤后无菌方法取出滤膜，接种至100ml的胆盐乳糖增菌培养基内，加入49cfu大肠埃希菌,350C 培养24小时，可见培养基混浊，有气体产生。
取上述培养物0.2ml接种至5mlMUG 培养基的试管内，培养5小时、24小时，在366nm紫外线下观察，可见荧光反应，滴加靛基质试液，液面呈玫瑰红色.（2）阴性菌对照组：取1：10的供试液10ml，用离心机低速离心500r/min离心3分钟，取上清液定容至10ml，加入pH7.0的无菌氯化钠蛋白胨缓冲液稀释至100ml薄膜过滤，用400ml（注：具体用量依样品抑菌作用强弱而定）pH7.0的无菌氯化钠蛋白胨缓冲液冲洗滤膜，每次100ml，过滤后无菌方法取出滤膜，接种至100ml的胆盐乳糖增菌培养基内，加入33cfu金黄色葡萄球菌, 350C培养24小时，培养基无混浊与气体产生。
取上述培养液0.2ml接种至5mlMUG培养基的试管内，培养5小时、24小时，在366nm紫外线下观察，无荧光反应，滴加靛基质试液，液面均呈试剂本色。
上述方法试验组检出了大肠埃希菌，阴性菌对照组未检出金黄色葡萄球菌，说明用100ml胆盐乳糖增菌培养基可以进行参榆灌肠液大肠埃希菌检查。
备注：如制剂中含生药，需增加大肠菌群检查验证试验；如制剂中含动物药，需增加沙门菌检查验证方法；如制剂为外用药，需增加金黄色葡萄球菌、铜绿杆菌检查验证方法，每个品种具体要求见《中国药典》2010年版附录。
其他控制菌检查常规法、培养基稀释法、薄膜过滤法方法同上述大肠埃希菌检查方法，需使用相应增菌及分离培养基。
如金黄色葡萄球菌使用营养肉汤增菌，甘露醇氯化钠琼脂分离等。
结论：参榆灌肠液按《中国药典》2010年版二部附录微生物限度检查法方法验证试验：取供试品10g,加pH7.0无菌氯化钠蛋白胨缓冲液至100ml,混匀,作为1：10供试液。
细菌、霉菌及酵母菌数测定：可用常规平皿法（或培养基稀释法、薄膜过滤法）；大肠埃希菌检查可用100ml胆盐乳糖增菌培养基进行增菌培养（或其他量的培养基、薄膜过滤法）,依法检查。
金黄色葡萄球菌采用。
依法检查，铜绿假单胞菌采用。
依法检查。
（备注：上文中黑体斜体部分文字仅为验证过程中指导之用）。