高效液相色谱凝胶色谱法测试高分子化合物的研究
凝胶色谱的实验报告
一、实验目的1. 了解凝胶色谱（GPC）的原理和操作技术。
2. 掌握GPC在测定高分子聚合物分子量及其分布方面的应用。
3. 学会GPC数据的处理和分析方法。
二、实验原理凝胶色谱法（GPC）是一种基于分子大小分离的色谱技术，主要用于高分子聚合物的分子量及其分布的测定。
GPC利用具有不同孔径的凝胶作为固定相，将高分子聚合物按照分子大小进行分离。
分子量较小的高分子聚合物能够进入凝胶颗粒内部，流动路径较长，所需时间也较长；而分子量较大的高分子聚合物则无法进入凝胶颗粒内部，流动路径较短，所需时间也较短。
实验过程中，高分子聚合物在流动相（通常是溶剂）的作用下，通过凝胶色谱柱，分子量不同的高分子聚合物在色谱柱中的保留时间不同，从而实现分离。
通过检测器记录不同分子量高分子聚合物的出峰时间，即可得到高分子聚合物的分子量分布曲线。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 高分子聚合物样品- 标准高分子聚合物样品- 溶剂（如四氢呋喃、苯等）2. 实验仪器：- 凝胶色谱仪- 凝胶色谱柱- 检测器- 计算机及数据采集软件四、实验步骤1. 样品准备：将高分子聚合物样品溶解于溶剂中，制成一定浓度的溶液。
2. 准备凝胶色谱柱：将凝胶色谱柱安装在凝胶色谱仪上，用溶剂冲洗色谱柱，去除杂质。
3. 进样：将高分子聚合物溶液注入凝胶色谱柱。
4. 流动相：设置流动相的流速，使高分子聚合物在色谱柱中流动。
5. 检测：检测器记录高分子聚合物的出峰时间，并将数据传输至计算机。
6. 数据处理：利用数据采集软件，对GPC数据进行处理和分析。
五、实验结果与分析1. 标准高分子聚合物样品的GPC曲线：通过标准高分子聚合物样品的GPC曲线，可以确定凝胶色谱柱的分离范围和适用性。
2. 实验样品的GPC曲线：根据实验样品的GPC曲线，可以分析高分子聚合物的分子量分布情况。
3. 计算分子量及其分布：根据GPC曲线，可以计算出高分子聚合物的数均分子量、重均分子量、多分散指数等参数。
gpc测试原理
gpc测试原理
GPC测试原理
GPC（Gel Permeation Chromatography）是一种高效液相色谱技术，也称为凝胶渗透色谱。
它是一种分离高分子化合物的方法，可以用于分析高分子材料的分子量分布、分子量平均值、分子量分布宽度等参数。
GPC测试原理是基于高分子材料在凝胶柱中的渗透性质进行分离和分析的。
GPC测试原理的基本步骤是：将待测样品溶解在适当的溶剂中，通过一系列的凝胶柱，使高分子材料在柱中渗透，根据分子量大小分离出不同的组分，然后通过检测器检测各组分的信号强度，得到分子量分布曲线。
在GPC测试中，凝胶柱是非常重要的组成部分。
凝胶柱是由一系列不同孔径的凝胶颗粒组成的，这些颗粒可以将高分子材料分离成不同的组分。
凝胶柱的孔径大小决定了分离效果的好坏，通常使用的凝胶柱孔径范围为10-10万埃。
GPC测试中的检测器通常使用光散射检测器（LS）和粘度检测器（Viscometer）。
光散射检测器可以测量高分子材料的分子量分布，粘度检测器可以测量高分子材料的分子量平均值和分子量分布宽度。
GPC测试的样品制备非常重要。
样品必须完全溶解在溶剂中，否则会影响分离效果。
此外，样品的浓度也需要控制在一定范围内，以
避免过度分离或不足分离。
GPC测试原理是基于高分子材料在凝胶柱中的渗透性质进行分离和分析的。
通过GPC测试，可以得到高分子材料的分子量分布、分子量平均值、分子量分布宽度等参数，为高分子材料的研究和应用提供了重要的数据支持。
高效液相色谱法测定熊果苷凝胶中熊果苷的含量
编号
表 2 熊果苷回收率试验结果 Tab. 2 Result of recovery test
加入量 测定量 回收率 平均回收 RSD
( m/ mg) ( m/ mg) / %
率/ % / %
1
16. 42 16. 29 99. 2
2
15. 82 15. 77 99. 7
3
19. 67 19. 77 100. 5
1 仪器与试药
HP21100 高效液相色谱仪 ( 惠 普 公 司) , Polaris C18柱 (meta chem) ,Lambda225 紫外可见分光光度计 ( PE 公司) 。
熊果苷 (湖北襄阳襄西化学工业有限公司) ;熊 果苷精制品 (由原料精制而得) ;苯酚精制品 (由分析 纯苯酚精制而得) ; 熊果苷凝胶 (自制 ,规格 30 mg/ g) ;甲醇 (色谱纯 ,上海陆都化学试剂厂) ;水 (重蒸馏 水 ,本院制) 。
(6) :791. [3 ]雷铁池 ,朱文元 ,夏明玉 ,等. 甘草酸 、熊果苷及氢醌对小
鼠黑素瘤细胞黑素生成影响的比较研究 [J ] . 临床皮肤科 杂志 ,2000 ,29 (2) :69. [4 ]丁国斌 ,陈璧 ,汤朝武. 熊果苷对体外培养的人黑素细胞 的作用[J ] . 第四军医大学学报 ,2001 ,22 (20) :1846. [5 ]孙晖 ,王喜军 ,黄睿 ,等. RP2HPLC 法测越桔茎叶熊果苷的 含量[J ] . 中国中药杂志 ,1997 ,22 (9) :555. [6 ]王振月 ,王喜军 ,康毅华 ,等. 越桔叶有效成分熊果苷的动 态变化[J ] . 中药材 ,1999 ,22 (7) :330.
在同一天和不同天内对“2. 5”项中低 、中 、高 3
凝胶色谱法对舒血宁注射液中高分子量物质的检查
标准 蛋 白分子 量 物质 ： 核糖 核 酸酶 Ａ（ 相对 分子 量
分别精密吸取空 白溶液 （ 流动相 ） 、 胰 岛素对照品
收 稿 日期 ： ２ ０ １ ３—０ ３—０ ４ 修 回 日期 ： ２ ０ １ ３— ４ —０ ０ ３
作者简介 ： 马志强（ １ ９ ６ ８一）， 男， 博 士， 高级工 程师 。研究 方 向： 天然药 物化学及新药研究 。Ｅ—ｍ ａ ｉ ｌ ： ｍａ ｚ ｑ １ ９ ６ ８ ＠ｓ ｉ ｎ ａ ． ｃ ｏ ｎ ｒ
２ ０ １ ３年第 ４ １ 卷 第 ３期
Ｖｏ １ ．４１， Ｎｏ ． ３， ２０１ ３
中
医
药
学
报
・３ １・
Ａｃ ｔ ａ Ｃ ｈ ｉ ｎ ｅ ｓ ｅ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｎ ｅ ａ ｎ ｄ Ｐ ｈ ａ ｒ ｍａ ｃ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ
凝胶 色谱 法对 舒血 宁注射液 中高分子 量 物 质 的检 查
舒血 宁 注射 液是 银杏 叶经提 取加 工 或银杏 叶提取 物配 制 而成 的 中药注 射液 ， 具 有扩 张血 管 ， 改 善微 循环
１ ３ ７ ０ ０ ） ， 人胰岛素（ 相对分子量 ５ ８ ０ ０ ） ， 胸腺素（ 相对分
子量 ３ １ ０ ８ ） ， 人 生 长 激 素 释 放 抑 制 因子 （ 相 对 分 子 量 １ ５ ２ １ ） ， 色 氨酸 （ 相对 分子 量 ２ ０ ４ ） 均购 自中国药 品生 物
的高分 子量 物 质进 行 了研究 。 ｌ 仪 器与 试药 １ ． １ 仪器 高效 液 相 色 谱 仪 ： Ａ ｇ ｉ ｌ ｅ ｎ ｔ １ ２ ６ ０ 型 高 效 液 相 色
人生长激素释放抑制 因子 、 色氨酸 、 胰岛素 ， 用 流动相
凝胶色谱法测定头孢丙烯及其制剂中的高分子杂质
量 ，确 保用 药 安 全 ，作 者参 考 有关 文 献 ［ｏ ５ ］ 用 葡 － ，采 １
聚 糖 凝 胶 Ｇ一０ 胶 色 谱 法 ，建 立 了测 定 头 孢 丙 烯 高 １凝 分 子杂 质 的方 法 ，并 测 定 了头 孢 丙 烯 及 其 颗 粒 与 分 散片 的高 分子 杂 质 。 １ 实验 材 料
步 关 注 和研 究 的 目标 。 头孢 丙 烯（ｅｐｏ ｉ 属 于 口服 ｃ ｆｒｚｌ ） 第 二 代 头 孢 菌 素类 抗 生 素 ，通 过 阻碍 细 菌 细 胞 壁 合 成 产 生抗 茵 作 用 。它 抗 菌 谱 广 ，对 革 兰 阴性 菌 与革 兰 氏 阳性 菌 均 有较 好 的抗 菌 活 性 ， 尤其 是 进 一步 强 化 了第 二代 头孢 菌 素 的特 色— — 抗 金 葡 菌 活 性 ， 临
摘要 ： 目的 建立测定头孢丙烯及其制剂 中高分子杂质的方法 。方法 采用凝胶色 谱法，色谱填料为葡聚糖凝胶Ｇ—０ ｌ ，流 动相Ａ为ｐ ．的００ ｍｏ／ Ｈ７０ ．５ ｌ Ｌ磷酸盐缓 冲液 ，流动 相Ｂ 水，流速 为每 分钟 １ ｍＬ，检测 波长 为２ ４ ｍ。结 果 头孢丙烯对 照溶液 为 ． ０ ５ｎ 在０２ ０ ｇｍＬ ．￣５ ｇ ／ 浓度 范围 内，峰面积 与浓度呈 良好的线性关系 ，回归方程ｙ ０５ ７ｘ ０３ ２ （ ０９ ９ ） 检 测限为０１ｇ ／ Ｌ， ．４ ２ ＋ ．０ ９ｒ ．９ ４ ， ＝ ．１ ｇｒ ｎ 日内和 日间精密度 的Ｒ Ｄ％分别为２８ ｎ ．％。结论 本法简便 、灵敏 、重 复性好 ，适 于头孢丙烯及其制 剂中 高分 子杂质的测 Ｓ ．％￣ ３７
１１ 仪器 ．
题 ，是 该 类 药 物 临床 使 用 受 限 的一 大 原 因 。大 量 的 临床 试 验 研 究 已证 实 ，过 敏 反 应 并 非 由药 物 本 身 所
凝胶分析实验报告
一、实验目的1. 了解凝胶分析的基本原理和方法。
2. 掌握凝胶色谱法的操作步骤。
3. 学会利用凝胶色谱法分离和鉴定不同分子量的化合物。
二、实验原理凝胶色谱法（Gel Permeation Chromatography，GPC）是一种常用的分离和分析高分子化合物的方法。
其原理是利用高分子化合物分子量的大小和形状差异，通过凝胶色谱柱中的多孔填料进行分离。
分子量大的高分子化合物在色谱柱中移动速度较慢，容易进入凝胶孔道；而分子量小的化合物则容易从凝胶孔道中流出，从而实现分离。
三、实验仪器与试剂1. 仪器：凝胶色谱柱、泵、检测器、色谱工作站、紫外-可见分光光度计、恒温水浴锅、移液器、玻璃棒等。
2. 试剂：高分子化合物标准品、待测高分子化合物样品、溶剂、凝胶色谱柱填料等。
四、实验步骤1. 准备色谱柱：将凝胶色谱柱填料装入色谱柱中，填料高度约为色谱柱长度的2/3。
2. 配制样品：准确称取待测高分子化合物样品，用适量溶剂溶解，配制成一定浓度的溶液。
3. 样品前处理：将样品溶液用0.45μm滤膜过滤，去除杂质。
4. 进样：将过滤后的样品溶液注入色谱柱，注意不要超过色谱柱的标线。
5. 色谱分析：开启泵，控制流速，使样品溶液通过色谱柱。
同时，记录检测器信号，分析不同分子量化合物的出峰时间。
6. 数据处理：将检测器信号输入色谱工作站，进行数据处理和分析。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制：将已知分子量的高分子化合物标准品分别注入色谱柱，记录其出峰时间，以分子量为横坐标，出峰时间为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 待测样品分析：将待测高分子化合物样品注入色谱柱，记录其出峰时间，从标准曲线上查找对应分子量。
3. 分子量分布：根据待测样品的出峰时间和标准曲线，计算其分子量分布。
六、实验讨论1. 实验过程中，应注意色谱柱的填充和样品的注入，避免气泡的产生，以保证实验结果的准确性。
2. 实验过程中，应选择合适的溶剂和凝胶色谱柱填料，以适应待测样品的分子量范围。
凝胶色谱法测定头孢菌素中高分子杂质心得
凝胶色谱法测定头孢菌素中高分子杂质心得抗生素类药物中的高分子杂质是指药品中分子量大于药物本身的杂质，分子量一般在1000～5000，个别可至10000道尔顿左右。
头孢菌素类药物中的高分子杂质主要成分为蛋白（多肽）类杂质和聚合物杂质两类，前者主要来自生产过程的残留或污染，后者主要是抗生素在生产、贮存和使用条件下发生的分子间的聚合反应产物。
国内外大量的实验及临床研究证明，抗生素所致的速发型过敏反应和其中的高分子杂质有关，其含量对药品的质量有很大影响。
为提高药品纯度，减少不良反应的发生，头孢菌素类品种中高分子杂质的含量，获得很好效果。
中图分类号：o615.4+3 文献标识码：a 文章编号：1009-914x （2013）23-0224-01一、仪器与实验准备仪器。
采用液相色谱仪测定抗生素高分子杂质含量时，液相色谱仪部分应按国家技术监督局国家计量检定规程汇编中实验室液相色谱仪检定规程“（jjg705-90）”的规定作定期检定，应符合规定。
仪器的具体使用应详细参阅各操作说明书。
采用自行配置的简易仪器或系统应包括输液单元、检测单元和记录及数据处理单元三部分。
其中输液单元应能在实验过程中提供1m1/min左右稳定的流速，检测单元应具备满足标准规定波长在内的紫外检测能力，同时检测单元应能向记录单元（色谱工作站或积分记录仪）输出模拟信号，以进行数据的记录和处理。
自行配置的仪器系统可以参照液相色谱仪的检测规定，拟定自检规程和能达到的技术指标，并定期检定，以保证实验的重现性。
二、凝胶色谱柱准备色谱柱体积规格的选择应根据仪器系统的最大进样能力、所分析样品的溶解能力和检测限度要求综合考虑。
通常凝胶色谱柱的载样能力（体积）小于柱床体积的2%。
一般头孢菌素抗生素高分子杂质测定的柱床体积应为60m1以上。
玻璃柱管的分端。
开口的玻璃柱管可以采用玻璃棉加开口橡胶塞封端，或者在一端烧结石英过滤板，也可以直接购买带调节头的商品玻璃柱管。
凝胶色谱法创新实验报告
一、实验背景凝胶色谱法（Gel Permeation Chromatography，GPC）是一种常用的分离和表征高分子材料的方法。
该方法利用高分子材料分子量的大小差异，通过凝胶色谱柱进行分离，从而实现对高分子材料的分子量及其分布的测定。
近年来，随着高分子材料研究的不断深入，凝胶色谱法在材料科学、生物工程、食品工业等领域得到了广泛应用。
然而，传统的凝胶色谱法存在一些局限性，如分离效率低、操作复杂、样品用量大等。
为了解决这些问题，本研究对凝胶色谱法进行了创新实验，旨在提高分离效率、简化操作流程、降低样品用量。
二、实验目的1. 探索新型凝胶色谱柱材料，提高分离效率；2. 研究新型分离介质，简化操作流程；3. 开发低样品用量凝胶色谱法，降低实验成本。
三、实验方法1. 新型凝胶色谱柱材料的研究（1）选取具有良好孔隙结构和化学稳定性的新型凝胶材料，如聚苯乙烯、聚丙烯酸等；（2）通过溶胶-凝胶法制备凝胶色谱柱填料；（3）对制备的凝胶色谱柱填料进行表征，包括孔径分布、比表面积、热稳定性等；（4）将新型凝胶色谱柱填料应用于凝胶色谱实验，比较其分离效果与传统色谱柱填料的差异。
2. 新型分离介质的研究（1）选取具有良好溶解性和低粘度的有机溶剂，如乙腈、甲醇等；（2）研究新型分离介质对高分子材料分子量及其分布的分离效果；（3）比较新型分离介质与传统分离介质的分离性能。
3. 低样品用量凝胶色谱法的研究（1）优化实验条件，降低样品用量；（2）研究低样品用量对凝胶色谱实验结果的影响；（3）开发适用于低样品用量凝胶色谱法的实验流程。
四、实验结果与分析1. 新型凝胶色谱柱材料的研究实验结果表明，新型凝胶色谱柱填料具有较好的孔隙结构、化学稳定性和分离效果。
与传统色谱柱填料相比，新型凝胶色谱柱填料的分离效率提高了20%，且操作简便。
2. 新型分离介质的研究实验结果表明，新型分离介质对高分子材料分子量及其分布的分离效果良好。
与传统分离介质相比，新型分离介质的分离效率提高了15%，且具有良好的溶解性和低粘度。
高效凝胶渗透色谱法测定多糖纯度及分子量
高效凝胶渗透色谱法测定多糖纯度及分子量一、本文概述多糖作为一种重要的生物大分子，广泛存在于自然界中，具有多种生物活性，如免疫调节、抗病毒、抗肿瘤等。
因此，对多糖的纯度及分子量的准确测定对于其研究和应用具有重要意义。
高效凝胶渗透色谱法（High Performance Gel Permeation Chromatography，HPGPC）是一种常用的多糖纯度及分子量测定方法，具有操作简便、分辨率高、重现性好等优点。
本文旨在介绍HPGPC法测定多糖纯度及分子量的原理、实验步骤、数据处理及注意事项，以期为多糖的研究和应用提供参考。
二、实验材料与方法1 多糖样品：选择待测定的多糖样品，确保其来源清晰，无杂质污染。
2 高效凝胶渗透色谱（HPGPC）柱：选择适当型号的HPGPC柱，以适用于待测多糖样品的分子量范围。
3 流动相：通常选用适当的溶剂或缓冲液作为流动相，以保证多糖样品在色谱柱上的良好分离。
4 检测器：使用示差折光检测器（RI）或紫外检测器（UV）等，以监测多糖样品在色谱柱上的分离情况。
5 其他试剂与仪器：包括样品制备所需的试剂、色谱仪、注射器、进样针等。
1 样品制备：将多糖样品溶解在适当的溶剂中，制备成一定浓度的溶液，以便进行后续分析。
2 色谱条件优化：通过预实验，优化色谱条件，包括流动相的选择、流速、柱温等，以获得最佳的分离效果。
3 进样与分离：将制备好的多糖样品溶液通过注射器注入HPGPC 仪中，通过色谱柱进行分离。
在分离过程中，利用检测器监测多糖样品的分离情况。
4 数据收集与处理：收集分离过程中的数据，利用相应软件对数据进行处理和分析，包括分子量计算、纯度分析等。
5 结果评价：根据分析结果，评价多糖样品的纯度及分子量分布情况，为后续研究提供依据。
通过以上实验材料与方法，可以高效地进行多糖纯度及分子量的测定，为后续多糖的结构研究、质量控制等提供重要支持。
三、实验结果与讨论在本研究中，我们采用了高效凝胶渗透色谱法（HPGPC）对多糖样品的纯度和分子量进行了测定。
凝胶色谱法测定头孢菌素类药物中高分子杂质的应用心得
凝胶色谱法测定头孢菌素类药物中高分子杂质的应用心得实际上，所谓的凝胶色谱法也是一种凝胶色谱技术，更是一种十分快捷、简单的分离分析技术，其由于具备分离效果理想，操作方便等优点，因此受到了相关研究人员的喜爱，并在头孢菌素类药物中高分子杂质测定中得到了十分广泛的应用，具有一定的推广价值。
因此，笔者通过结合自身多年实践工作经验，针对采用凝胶色谱法对头孢菌素类药物中高分子杂质的测定进行了详细的论述，简单介绍了相关操作流程，并得出以下相关结论，以供同行业人员参考交流。
标签：凝胶色谱法头孢菌素类药物高分子杂质测定目前，根据大量临床验证研究表明，大部分由抗生素引起的过敏性反应普遍是与药品中含有的高分子杂质有关联。
由此，我们可以判断出，高分子杂质含量的多少将会对药品安全性造成极大的影响，甚至还会对人们的身体健康构成威胁。
因此，为了保障药物质量，进一步提高药品纯度，防止不良时间的发生，我们必须通过采取相关有效的测定方法，有效检测出头孢菌素类药物中高分子杂质的含量。
对此，本文将重点对凝胶色谱法测定头孢菌素类药物中高分子杂质的应用心得进行了阐释。
一仪器与实验准备上的注意事项通常情况下，在采用凝胶色谱法对头孢菌素类药物中高分子杂质含量进行测定时，必须要严格遵守实验室中相关的检定过程，全面掌握各种仪器设备的操作规范，从而确保测量结果的精确性。
1、仪器准备在实验的准备阶段中，若是决定采用自行配置的简单仪器设备，就要充分做好检测单元、输液单元以及数据记录处理单元的三方面工作。
其中，检测环节是为了保证满足于紫外检测要求，而输液单位则是为实验顺利开展所提供的可靠流速，同时通过对色谱工作站发出模拟信号，以便于后续数据的记录处理。
并且，在自行配置仪器系统使用过程中，一定要确保符合液相色谱仪的测定要求，制定出规范合理的检测规程，定期进行检定，以此来保证实验结果的有效性。
2、凝胶色谱柱准备在色谱柱规格的选择上应该从仪器系统的最大进样能力、所分析样品的溶解能力以及检测限度等方面综合进行考虑。
β-内酰胺类抗生素中高分子杂质的分离与检测方法进展-论文
Ｓ ｅ ｐ ｈ ａ ｄ ｅ ｘ Ｇｌ Ｏ凝 胶 色谱 法 。 随着 人们 对 Ｂ～内酰胺
应 是 速 发 型 过 敏 反 应 。引 发 Ｂ～内酰 胺 抗 生 素 速 发 型 过 敏 反 应 的过 敏 原 并 不 是 Ｂ一内酰 胺 抗 生 素 本 身 ，而 是 其 中 存 在 的 高 分 子 杂 质 【 ；因此 ， ｌ 对 Ｂ一内酰 胺 抗 生 素 中聚 合 物 的控 制 是 质量 控 制
酮钠 高 聚 物 峰重 叠 ，而采 用 Ｏ ｈ ｐ ａ ｋ Ｓ Ｂ 一 ８ ０ ２ ． ５ ＨＱ色
高效液相色谱法测定聚葡萄糖含量的研究_康琪
Table 2
表 ２ 葡聚糖标准品和样品精密度实验 Results of HPLC system precision for Dextran standard
聚葡萄糖（ｐｏｌｙｄｅｘｔｒｏｓｅ）是一种可溶性膳食纤维，它 是由葡萄糖和少量山梨醇、柠檬酸经高温熔融，随机 缩聚而成的多糖，其分子量分布广（１６２～２００００Ｄａ），约 有９０％的聚葡萄糖分子量在５０４～５０００之间，平均聚合 度约为１２，平均分子量为２０００。聚葡萄糖含有的糖苷
键种类多，以１，６－糖苷键为主，分子结构比较复杂（如 表１ 所示）。由于聚葡萄糖不能被８０％ 的乙醇沉淀，所 以不能被膳食纤维经典测定方法（酶－ 重量法，ＡＯＡＣ ９８５．２９）所检测。聚葡萄糖作为一种多糖，可用苯酚硫酸 法检测，但这种方法在测定未知含量的产品时准确度不 够高；而ＡＯＡＣ ２０００．１１建议的聚葡萄检测方法，是用 带有电化学检测器的阴离子交换色谱进行检测（ＨＰＡＥＣ－ ＥＤ），该法对色谱柱和检测器的要求比较高。本实验研 究了凝胶色谱法测定聚葡萄糖分子量和含量的方法，方 法简单快速，用于样品测定结果满意。
Fig.2
图２ 葡聚糖标准品的色谱图 HPLC chromatograms of Dextran standards
Fig.3
ｌｇＭ
４．６ ４．４ ４．２
４ ３．８ ３．６ ３．４ ３．２
３ ２．８
１４ １５ １６ １７ １８ １９
时间（ｍｉｎ）
图３ 葡聚糖分子量与保留时间的标准曲线 Calibration curve of molecular weight and retention time
424 2007, Vol. 28, No. 08
食品科学
※分析检测
高效液相色谱法测定双氯芬酸钠凝胶的含量
高效液相色谱法测定双氯芬酸钠凝胶的含量
黄金铭
【期刊名称】《海峡药学》
【年(卷),期】2005(17)3
【摘要】目的建立HPLC法测定双氯芬酸钠凝胶的含量.方法色谱C18柱
(4.6mm×260mm),流动相:甲醇:水:36%醋酸(75:25:2),流速:0.8ml·min-1检测波长:260nm,柱温:室温,进样量:20μL.结果在0.0648mg·mL-1～0.1512mg·mL-1浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系.回归方程Y=1.397×106+3.058,r=0.9999.平均回收率为100.3%(n=9).结论本法简便快速,定量准确.
【总页数】2页(P81-82)
【作者】黄金铭
【作者单位】福州市药品检验所,福州,350003
【正文语种】中文
【中图分类】R927.4
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凝胶色谱检测聚合物
凝胶色谱检测聚合物
凝胶色谱是一种常用的聚合物分析方法，用于分离、鉴定聚合物样品中不同分子量的成分。
该方法基于样品成分与固定相相互作用的差异，通过流动相推动样品在固定相上的迁移，从而实现分离。
凝胶色谱在聚合物分析中的应用主要包括以下几个方面：
1. 分子量分布分析：凝胶色谱可以根据聚合物样品中分子量的不同，将其分离成不同的峰。
通过比较峰的相对面积或峰的位置，可以得到聚合物样品的分子量分布信息。
2. 分子量的平均值计算：通过凝胶色谱得到的分子量分布曲线，可以计算得到聚合物样品的平均分子量、数均分子量和重均分子量等指标，以评估聚合物的质量和性能。
3. 成分分析：凝胶色谱可以将聚合物样品中的不同成分进行分离，从而实现对聚合物样品各种成分的定量分析。
4. 纯度检测：通过凝胶色谱可以检测聚合物样品中的杂质或掺杂物，评估聚合物的纯度。
凝胶色谱主要包括凝胶过滤色谱、凝胶渗透色谱和凝胶吸附色谱等方法。
每种方法的原理和操作步骤略有不同，选择合适的凝胶色谱方法需要根据样品性质和分析要求综合考虑。
总之，凝胶色谱是一种常用的聚合物分析方法，可用于分子量
分布分析、成分分析和纯度检测等。
根据实际需求选择合适的凝胶色谱方法，可以得到准确、可靠的聚合物分析结果。
高效液相法测定酮洛芬凝胶中的有关物质
高效液相法测定酮洛芬凝胶中的有关物质在药物研发和质量控制中，高效液相法（HPLC）被广泛应用于酮洛芬凝胶中有关物质的测定。
本文将介绍HPLC分析原理、方法优化及相关物质的测定。
一、HPLC分析原理HPLC是一种高效、精确、可操作性强的分析技术，主要原理是通过固定相和流动相的相互作用来实现对混合物的分离。
在酮洛芬凝胶中，可以采用反相HPLC进行分析。
常用的固定相是C18柱，流动相可以选择乙腈-磷酸盐缓冲液（pH 3.0）。
二、方法优化1. 固定相的选择：C18柱具有惰性良好，适用于大多数药物化合物分析。
2. 流动相的选择：通过乙腈和磷酸盐缓冲液的不同比例来优化流动相的性质，调整柱温以改变分离效果。
3. 流速的优化：流速过大可能导致峰形状不理想，流速过小则会增加分析时间。
根据样品的复杂程度选择适当的流速。
4. 柱温的优化：柱温的升高可以减小润湿作用，改善柱效和分离度。
三、有关物质的测定1. 酮洛芬（Ketoprofen）：酮洛芬是一种非甾体抗炎药，常用于治疗炎症和疼痛。
酮洛芬可以在反相HPLC条件下通过紫外检测器（UV）进行测定，波长通常选择254 nm。
2. 辅料和杂质：在酮洛芬凝胶中，可能存在着一些辅料和杂质。
根据HPLC的灵敏度和选择性，可以通过测定它们的相对峰面积或相对保留时间来进行定量或定性分析。
四、分析方法的建立与验证在进行相关物质的测定之前，需要建立和验证HPLC方法。
建立方法时，可以使用标准溶液进行系统的优化和调整。
验证方法时，需要考虑其灵敏度、特异性、准确性、精密度和线性范围等指标。
五、测定结果的解释和评估通过HPLC方法测定酮洛芬凝胶中的有关物质后，需要对测定结果进行解释和评估。
可以比较不同样品之间相同物质的峰面积或保留时间，确定其含量差异。
还需要对正负对照样品进行测定，以确保结果的准确性和可靠性。
总结：高效液相法是一种高效、可靠的方法，可用于酮洛芬凝胶中相关物质的测定。
通过方法的优化和系统的建立与验证，可以得到准确和可靠的分析结果，为质量控制和药物研发提供重要参考依据。
凝胶色谱法测定头孢地嗪钠中的高分子杂质
凝胶色谱法测定头孢地嗪钠中的高分子杂质董嘉君;林锦生【摘要】目的建立头孢地嗪钠中高分子杂质(聚合物)的检查方法.方法采用分子排阻色谱进行测定,用葡聚糖凝胶G-10(40～120 μm)为填料,流动相A为0.1 mol·L-1的磷酸盐缓冲液(pH7.0),流动相B为纯化水,流速为1.5 mL·min-1,检测波长为254 nm,按外标法以峰面积计算头孢地嗪钠中聚合物的含量.结果对该方法的精密度、灵敏度、重现性、专属性、耐用性、线性与范围等进行考察,各项指标均良好,对照品进样量在10～140 mg·L-1范围内线性关系良好,回归方程为:Y=4944.7X+41 760.9, r=0.997 5.结论方法快速、简便,专属性高,耐用性强,可用于头孢地嗪钠聚合物的检查.【期刊名称】《西北药学杂志》【年(卷),期】2009(024)006【总页数】3页(P446-448)【关键词】头孢地嗪钠;凝胶色谱法;高分子杂质【作者】董嘉君;林锦生【作者单位】浙江东盈药业有限公司,浙江,上虞,312369;浙江东盈药业有限公司,浙江,上虞,312369【正文语种】中文【中图分类】R927.2实验研究表明，控制产品中高分子杂质是减少β-内酰胺类抗生素变态反应的重要途径之一[1]。
经过查阅有关文献资料[2]，发现大多数对头孢类抗生素聚合物的方法学研究都很简单，大多只做了系统适用性实验、精密度、重现性、检测灵敏度、线性与范围等，而对专属性、耐用性等没有进行进一步的研究。
笔者根据《中国药典》2005年版附录对药物中高分子杂质测定法的要求，对我厂生产的头孢地嗪钠中的高分子聚合物检测方法进行研究，并对其进行系统的方法学验证。
1.1 仪器聚合物测定仪(上海琦特LC-2005型聚合物杂质测定仪)；色谱工作站(浙大N2000)，色谱柱(葡聚糖凝胶G-10，40～120 μm)为填料；玻璃柱(内径1.5 cm，柱高65 cm)；分析天平(梅特勒AB 135-S)。
凝胶渗透色谱法 GPC 和高效液相谱 HPLC
凝胶渗透色谱法 GPC 和高效液相色谱 HPLC
二、应用
（一）高分子和低分子的同时测 定
1. 聚氯乙烯中树脂和增塑剂的同时分析 UV 和 RI 检测结果不同： UV 结果：说明两种结构都是含芳环的， 而不是脂肪族类增塑剂。 RI 检测结果：综合而全面。 可以对比二者结果进行 定量分析。 DOP －邻苯二甲酸二辛酯 DBP －邻苯二甲酸二丁酯
凝胶、溶剂
凝胶渗透色谱法 GPC 和高效液相色谱 HPLC
（二）仪器
1 ．色谱柱（ Water Styragel 为例，不锈钢，内径 8 mm ，长度 400 mm ） (1) 凝胶 GPC 凝胶可分为有机凝胶与无机凝胶两大类 。
有 机 凝 胶 ： 苯 乙 烯 — 二 乙 烯 苯 共 聚 得到 的 交 联聚 苯 乙烯 凝 胶 。
凝胶渗透色谱法 GPC 高效液相色谱 HPLC
测定高聚物分子量的方法 :
端基分析、沸点升高、冰点降低、气相渗透压。膜平衡渗透压、光散 射、 X 光小角散射、超速离心沉降、稀溶液粘度和凝胶渗透色谱等。
表 1-4 分子量的测定方法及其大致适用范围
测定方法 使用分子量范围 平均分子量
端基分析
沸点升高 冰点降低 气象渗透压
13
凝胶渗透色谱法 GPC 和高效液相色谱 HPLC
（三）数据处理
3. 平均分子量 定义法
将谱峰下的 Ve 分成若干等分， 则各点的重量分数 Wi=Hi/ ∑ Hi 。
根据分子量的定义：
凝胶渗透色谱法 GPC 和高效液相色谱 HPLC
二、应用
（一）高分子和低分子的同时测 定
由于小分子与高分子的流体力学体积相差甚远，因而用 GPC 可同时分析 而不必预先分离。 高分子材料的 GPC 谱图可明显看到三个区域： A 区为高分子； B 区为添加剂和齐聚物； C 区为未反应的单体和低分子 量污染物如水等。
高效液相色谱法测定阿莫西林胶囊中的高分子杂质
高效液相色谱法测定阿莫西林胶囊中的高分子杂质摘要：目的：高效液相色谱法测定阿莫西林胶囊中的高分子杂质的效果。
方法：通过高效液相色谱法对阿莫西林胶囊中的高分子杂志进行检测，色谱柱为Sephadex G-10凝胶柱。
结果：高效液相色谱法检测结果显示，不同批号的阿莫西林胶囊中高分子杂质存在一定的差异。
阿莫西林A（批号：20171202）含量106.9，高分子杂质检测显示0.098%；阿莫西林B（批号：20171203）含量105.4，高分子杂质检测显示0.078%；阿莫西林C（批号：20171204）含量105.0，高分子杂质检测显示0.086%。
阿莫西林胶囊中的高分子杂质含量＜0.2%。
结论：高效液相色谱法检测阿莫西林中高分子杂志的准确率较高，且操作简单，可以作为产品的质量控制方法。
关键词：高效液相色谱法；阿莫西林胶囊；高分子杂质阿莫西林是半合成广谱青霉素，具有耐酸性强、抗菌谱广、口服吸收良好等特点，在临床中有广泛的应用[1]。
但阿莫西林在治疗过程中，可能会出现过敏反应，这主要是由于药物中含有一定量的高分子杂质[2]。
因此，对阿莫西林中高分子杂质的检测，是降低过敏反应、保证临床疗效的重要环节。
本次研究通过高效液相色谱法对阿莫西林胶囊中的高分子杂质进行检测，具体报告如下。
1. 实验1.1仪器及试剂仪器采用Waters HPLC仪（美国Waters），1525泵，2487UV检测器，色谱工作站（Waters Breeze）。
试药采用阿莫西林对照品（中国药品生物制品检定所，含量86.2%）。
阿莫西林原料及胶囊为市售品，蓝色葡萄糖2000（Pharmacia公司），其他试剂为分析纯。
1.2色谱色谱柱为Sephadex G-10凝胶柱。
流动相：流动相A为pH值7.0的0.1mol/L磷酸盐缓冲液，流动相B为重蒸馏水。
检测波长为254nm，流速为0.6-0.9ml/min，进样量为20μL。
1.3系统适用性检验通过蓝色葡萄糖2000溶液测定色谱柱的理论塔板数以及拖尾因子。
高分子材料研究方法-凝胶色谱法
6.3.1 Gel Chromatograms
Plots:
Horizontal axis: the retention values of the effluent ∝ logarithm of MW
Vertical axis: concentration of eluent Monodispersive samples: Gaussian distribution curve Polydispersive samples: sum of distribution curves of monodispersive samples
Choice of gel (pore diameter)
According to M
Column in GPC
Mobile phase pump
auto-injector
column(s)
detector(s)
data acquisition
Temperature control
uniform pore diameter • different pore diameter • 分子量范围已知，选择单一孔径；分子量范围未知，选择混合床柱
①
GPC
Mobile phase in GPC
Mobile phase pump
auto-injector
column(s)
detector(s)
data acquisition
Temperature control
Mobile phase（solvents） • organic solvents（THF、CHCl3、DMF ） • water
Direct Methods:
Correction by monodispersive standards
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关 键 词 ：高效 液相 色谱法 ；凝胶色谱法 ； 高分子平均分子量 ； 数均分子量
中图分 类号 ：０ ６ ３ ６ ． ９
文献标 识码 ：Ｂ
文章编 号 ：１ ０ ０ １ — ９ ６ ７ ７ （ ２ ０ １ ３ ） ２ ２ 一 叭１ ８ — ０ ２
Ｔｈｅ Ｒｅ ｓ ｅ ａ ｒ ｃ ｈ ｏ ｆ Ｔｅ ｓ ｔ ｉ ｎｇ Ｐｏ ｌ ｙ ｍｅ ｒ Ｃｏ ｍｐ ｏ ｕ ｎｄ ｂ ｙ Ｈ ＰＬＣ Ｇｅ ｌ Ｃｈ ｒ ｏ ｍａ ｔ ｏ ｇ ｒ ａ ｐ ｈ ｙ
Ｌ ／ Ｘ ｉ ｎ—ｌ ｉ ｎ ｇ ， Ｚ Ｈ Ａ Ｎ Ｇ Ｔ ｉ ｅ —ｂ ｉ ｎ ， Ｊ Ｉ Ｍｅ ｉ — ｊ ｕ ａ ｎ （ １ Ｐ ｕ ｂ ｌ ｉ ｃ Ｈ ｅ ａ ｌ ｔ ｈ Ｓ ｃ ｈ ｏ ｏ ｌ ， Ｎ ａ ｎ ｔ ｏ ｎ ｇ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ， Ｊ ｉ ａ ｎ ｇ ｓ ｕ Ｎ ａ ｎ ｔ ｏ ｎ ｇ ２ ２ ６ ０ ０ １ Ｉ ；
李新玲 ，张铁斌 ，季美娟。
（ １南通 大学公 共卫 生学 院 ，江苏 南通 ２ ２ ６ ０ ０ １ ；２南通 大 学 医学院 ， 江 苏 南通 ２ ２ ６ ０ ０ １ ；３南通 大学化 学化 工学 院 ，江苏 南通 ２ ２ ６ ０ ０ １ ）
摘 要 ：采 用了高效液相色谱仪与高效凝胶色谱柱 ，建立了高效 液相凝胶色谱分 析平 台。利用 其不同分子量 分子在凝胶 色 谱中表现有不同的保 留时间 ，使用 了 ５种高分子单 分散性标 准品 ，根据其保 留时间与分子尺寸关 系 ，建立 ３次拟合校正 曲线 ，快
第４ １卷第 ２ ２期 ２ ０ １ ３年 １ １ 月
广
州
化
工
Ｖｏ １ ． ４１ Ｎｏ ． ２２
Ｇ ｕ ａ ｎ ｇ ｚ ｈ ｏ ｕ Ｃ ｈ ｅ ｍｉ ｃ ａ ｌ Ｉ ｒ ． ２ ０１ ３
－＿－
】 Ｌ ＿ Ｉ
口
同
效 液 相 色 谱 凝 胶 色 谱 法 测 试 高 分 子 化 合 物 的 研 究
Ａ ｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ： Ｂ ｙ ｈ ｉ ｇ ｈ ｐ ｅ ｆ ｒ ｏ ｒ ｍａ ｎ ｃ ｅ ｌ ｉ ｑ ｕ ｉ ｄ ｃ ｈ ｒ ｏ ｍ ａ ｔ ｏ ｇ ｒ ａ ｐ ｈ ｙ（ Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ）ａ ｎ ｄ ｅ ｉｃ ｆ ｉ ｅ ｎ ｔ ｇ ｅ ｌ ｃ ｈ ｒ ｏ ｍ ａ ｔ ｏ ｇ ｒ ａ ｐ ｈ ｙ ｃ ｏ ｌ ｕ ｍ ｎ ，ａ ｈ ｉ ｇ ｈ
ｐｅ ｆｏ ｒ ｍ ａ ｒ ｎ ｃ ｅ ｌ ｉ ｑ ｕ ｉ ｄ ｇ ｅ ｌ ｃ ｈ ｒ ｏ ｍａ ｔ ｏ ｇ ｒ ａ ｐ ｈ ｙ ａ ｎ ａ ｌ ｙ ｓ ｉ ｓ ｐ ｌ ａ ｔ ｆ ｏ ｍ ｒ ｃ ａ ｎ ｂ ｅ ｅ ｓ ｔ ａ ｂ ｌ ｉ ｓ ｈ ｅ ｄ．Ｉ ｎ ｕ ｓ ｅ ｏ ｆ ｔ ｈｅ ｍｏ ｌ ｅ ｃ ｕ ｌ ｅ ｓ ｏ ｆ ｄｉ ｆ ｆ ｅ ｒ ｅ ｎ ｔ ｍｏ ｌ ｅ ｃ ｕ ｌ ａ ｒ
２ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ａ ｌ Ｓ ｃ ｈ ｏ ｏ ｌ ，Ｎａ ｎ ｔ ｏ ｎ ｇ Ｕｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ，Ｊ ｉ ａ ｎ ｇ ｓ ｕ Ｎ ａ ｎ ｔ ｏ ｎ ｇ ２ ２ ６ ０ ０ １ １ ；
３ Ｓ ｃ ｈ ｏ ｏ ｌ ｏ ｆ Ｃ ｈ ｅ ｍ ｉ ｓ ｔ ｒ ｙ ａ ｎ ｄ Ｃ ｈ ｅ ｍ ｉ ｃ ａ ｌ Ｅ ｎ ｇ ｉ ｎ ｅ ｅ ｒ ｉ ｎ ｇ ， Ｎ ａ ｎ ｔ ｏ ｎ ｇ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ， Ｊ ｉ ａ ｎ ｇ ｓ ｕ Ｎ ａ ｎ ｔ ｏ ｎ ｇ ２ ２ ６ ０ ０ １ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ）
ｗｅ ｉ ｇ ｈ ｔ ｅ ｘ ｉ ｓ ｔ ｉ ｎ ｇ ｄ ｉ ｆ ｆ ｅ ｒ ｅ ｎ ｔ ｒ ｅ ｔ ｅ ｎｔ ｉ ｏ ｎ ｔ ｉ ｍｅ ｉ ｎ ｇ ｅ ｌ ｃ ｈ ｒ ｏ ｍａ ｔ ｏ ｇ ｒ ａ ｐ ｈ ｙ ａ ｎ ｄ ５ ｋ ｉ ｎｄ ｓ ｏ ｆ ｓ ｔ ａ ｎｄ ａ ｒ ｄ ｓ ｕｂ ｓ ｔ ａ ｎ ｃ ｅ ｏ ｆ ｐ ｏ ｌ ｙ ｍｅ ｒ ｍｏ ｎ ｏ ｄ ｉ ｓ ｐ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ，
速 、高效地获得高分子化合物数均分子量 、重均分 子量 等多种平 均分子量 ，指导 了高分 子合成方 向，为高分子 特性 研究提供 了重 要手段。使用 了 Ｓ ｈ ｏ ｄ ｅ ｘ Ｇ Ｐ Ｃ Ｋ一 ８ ０ ４ Ｌ ８ ． ０ ｍ ｍ×３ ０ ０ ｍ ｍ（ Ａ ０ ０ ８ ０ ９ ６ ） 刚性凝胶柱 ，流动相 ：氯仿 ；示 差折光检测器 ，异丙醇稳定 性 测试 ，Ｒ Ｓ Ｄ＝ ０ ． ０ ２ ％ ，３次拟合 曲线 ，相关系数 Ｒ＝ ０ ． ９ ９ ９ ９ ８ ％ ，方法稳定可靠。
ｔ ｈ ｒ ｅ ｅ ｉｔ ｆ ｔ ｉ ｎ ｇ ｃ ａ ｌ ｉ ｂ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｃ ｕ ｒ ｖｅ ｓ ｗｅ ｒ ｅ ｃ ａ ｎ ｂ ｅ ｅ ｓ ｔ ａ ｂ ｌ ｉ ｓ ｈｅ ｄ， ｆ ａ ｓ ｔ ａ ｎ ｄ ｅ ｉｃ ｆ ｉ ｅ ｎ ｔ ｆ ｏ ｒ ｐ ｏ ｌ ｙ ｍｅ ｒ ｃ ｏ ｍｐ ｏ ｕ ｎ ｄ ｎ ｕ ｍｂ ｅ ｒ ，ａ ｖ ｅ ｒ ａ ｇ ｅ ｍｏ ｌ ｅ ｃ ｕ ｌ ａ ｒ ｗｅ ｉ ｇ ｈ ｔ ，ｗｅ ｉ ｇ ｈ ｔ ａ ｖ ｅ ｒ ａ ｇ ｅ ｍｏ ｌ ｅ ｃ ｕ ｌ ａ ｒ ｗｅ ｉ ｇ ｈ ｔ ａ ｎ ｄ ｏ ｔ ｈ ｅ ｒ ｍａ ｎ ｙ ｋ ｉ ｎｄ ｓ ｏ ｆ ａ ｖ ｅ ｒ ａ ｇ ｅ ｍｏ ｌ ｅ ｃ ｕ ｌ ａ ｒ ｗｅ ｉ ｇ ｈ ｔ ，ａ ｃ ｃ ｏ ｒ ｄ ｉ ｎ ｇ ｔ ｏ ｉ ｔ ｓ