食品中亚硝酸盐含量测定试剂盒说明书
实验十 食品中亚硝酸盐含量的检测
实验十 食品中亚硝酸盐含量的检测1.实验目的掌握盐酸萘乙二胺法检测肉制品中食品添加剂——亚硝酸盐的基本操作技术。
2.实验原理在弱酸性条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，再与盐酸奈乙二胺偶合生成紫红色化合物，颜色的深浅与亚硝酸盐含量成正比，其最大吸收波长为538nm ，可测定吸光度并与标准比较定量。
2HCl+NaNO 2+H 2N3H重氮化H 3SO-Cl----+NaCl 2H +2O2HCl .H 2NH 2CH 2+--N-Cl N3H偶合CHN 2CH 2NH 2H .2HCl N -H 3SON +HCl盐酸萘乙二胺紫红色3.仪器、试剂及材料3.1仪器50mL 小烧杯，752型分光光度计，250mL 容量瓶，1mL 移液管，25mL 具塞试管，洗耳球 3.2试剂（1）饱和硼砂溶液：溶解5g 硼酸钠于100mL 热水中，冷却后备用。
（2）硫酸锌溶液：溶解30g 硫酸锌于100mL 水中。
（3）对氨基苯磺酸溶液（0.4%）：溶解0.4g 对氨基苯磺酸于100mL20%盐酸中，避光保存。
（4）盐酸奈乙二胺溶液（0.2%）：溶解0.2g 盐酸奈乙二胺于100mL 水中，避光保存。
（5）亚硝酸钠标准溶液：精确称取0.1000g 亚硝酸钠（硅胶干燥中干燥24小时），加水溶解，移入500mL 容量瓶，并稀释至刻度，混匀，临用前吸取5.00mL 容量瓶中，加水至刻度，混匀，此溶液每毫升相当5μg 亚硝酸钠。
（6）亚铁氰化钾溶液：称取10.6g 亚铁氰化钾于100mL 容量瓶中定容。
3.3材料火腿肠4.实验步骤4.1亚硝酸钠的提取4.2 测定试剂按照表1进行添加表1 各试剂添加顺序滤液20 0.4%对氨基苯磺酸1 1 1 1 1 1 混匀3~5min 0.2%盐酸奈乙二胺0.50.50.5 0.5 0.50.5补水至25mL数据处理公式与方法：1000250201000A X ⨯⨯⨯=mX ——样品中的亚硝酸盐的含量，mg/kg ；A ——测定用滤液中亚硝酸钠的含量，μg ； m ——样品的质量，g ；20/250——测定用样液体积mL/试样处理液总体积mL 。
亚硝酸盐快速检测作业指导书[1]
![亚硝酸盐快速检测作业指导书[1]](https://img.taocdn.com/s3/m/1a841f6da98271fe910ef991.png)
食品中亚硝酸盐快速检测盒使用作业指导书检测原理：食品中的亚硝酸盐与试剂反应生成紫红色的特殊物质，通过与管理样品颜色深浅对比可判定样品中亚硝酸盐是否超标。
适用范围：适用于肉类、肉类罐头、熏肉和香肠类等食品中的亚硝酸盐的现场快速检测。
材料：亚硝酸盐快速检测管亚硝酸盐管理样品粉碎机微型超声波仪微型离心机5毫升移液器检测下限：0.025毫克每千克操作：1、管理样品：取管理样品胶囊打开，放入样品杯中，用移液器加入10毫升蒸馏水，溶解摇匀。
取上述溶液1毫升于另一个空样品杯中，再加9毫升水，摇匀待测。
2、样品前处理：取适量用粉碎机粉碎的样品（具体样品称取质量请参照贵州省工商行政管理局红盾网中亚硝酸盐检测中食品样品的称样量表）于60毫升萃取瓶或样品杯中，加入10毫升蒸馏水或纯净水，用超声波仪超声5分钟以上后静置，若样品处理液浑浊用离心机离心，取上述溶液1毫升于另一个空样品杯中，再加9毫升水，摇匀，溶液待测。
3、样品测定：分别取1毫升上述管理样品和待测样品加入至不同的检测管中，盖上盖，将试剂摇溶，10分钟后样品与管理样品颜色对比。
4、样品结果判定：若样品颜色深于管理样品颜色判定该样品亚硝酸盐指标不合格，若样品颜色浅于管理样品颜色判定该样品亚硝酸盐指标合格，若样品颜色和管理样品颜色相同或相近为疑似不合格样品。
注意事项：1、具体样品称取质量请参考贵州省工商行政管理局红盾网中亚硝酸盐检测中食品样品的称样量表；2、生活自来水不能作为测定用的稀释液，可用纯净水，如市售纯净水；3、若显色后颜色很深且有沉淀产生或很快褪去变成浅黄色，说明样品中的亚硝酸盐含量很高，需加大稀释倍数重新检测，否则结果不准确，若稀释10倍或更高倍数有颜色，则样品严重超标；4、对于阳性怀疑样品可重复操作来加以确定；5、试剂具有一定的腐蚀性，小心操作，勿沾染皮肤，如误入眼中，请立即用清水冲洗；6、试剂应远离儿童触摸到的地方常温保存；7、在认定样品亚硝酸盐超标前，请用国家标准检验方法复检。
湖南水土中亚硝酸盐含量测检测试剂盒说明书
湖南水土中亚硝酸盐含量测检测试剂盒说明书一、检测原理：亚硝酸盐能使人体血红蛋白氧化而失去运输氧的能力，造成慢性、急性中毒，还能与食品中、人体内的仲胶类化合物反应生成具有强致癌性的亚确胺类化合物，亚猜胺除致癌外，还可经胎盘对胎儿产生致略和毒性作用。
因此，严格控制食品中的亚硝酸盐含量，是治理餐桌污染，保障消费者的健康权益的重要工作。
本速测金根据国家标准GB/T5009.33-1996《食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定方法》研制而成，食品中的亚硝酸盐可迅速与本试剂反应生成索红色产物，颜色越深，表示样品中亚硝酸盐的含量越高，与标准品比较，可以得出样品中亚硝酸盐是否超标的半定量结果。
由于亚硝酸盐对肉制品具有发色和防腐保解作用，高浓度的亚硝酸盐不仅可改善肉制品的感观色泽，还可大大缩短肉制品的如工时间，因此在肉制品加工中经常被大量使用，同时，蔬菜和肉类中富含的硝酸盐在掩制、加工或储存不当的情况下，也会在还原酶的作用下转变成有毒的亚硝酸盐。
我国对食品中的亚硝酸盐允许的残留量有严格的限量标准，但目前食品中亚硝酸盐超标的现象仍较普遍。
二、适用样品范围；广泛用于检测肉制品和腌制菜类及各类食品中亚硝酸盐的含量三、试剂金组成：1.亚硝酸盐检测液A:l瓶：2.亚硝酸盐检测液B；l瓶；3.标准工作液：1瓶；（根据要求提供）4.多孔比色管：2个：5.样品杯：20只：6.小吸管：100支：7.使用说明书：1份；8.色卡：1片：四、储存：4℃避光密封冷政可保存6个月：于25C阴凉干燥处避光密闭贮藏可保存3个月。
五、检测步骤：用天平称取l克样品并尽可能剪成小碎片，放入样品杯中：用塑料刻度吸管或刻度杯加入5ml蒸锦水或纯净水，放置10分钟以上，其间可用吸管搅拌或振摇以加速提取，其上清液即为样品液；?在多孔比色管的一个孔中滴加1滴检测液A.1滴检测液B，混匀：稍停几秒后，用吸管吸取2滴样品液到该孔中，摇动混匀（建议搜拌混匀）；用吸管吸取1管蒸馏水或纯净水到该孔中，2分钟后观察颜色变化并与色卡对照：六、结果判断：1、样品中亚硝酸盐含量越高，比色孔中反应物颜色越深，对照色卡上的标示数值可知样品中亚硝酸盐的含量；2、比较样品与标准工作液显色的结果（标准工作液所显颜色相当于亚确酸盐含量为30毫克/公斤的样品处理后颜色），若滴加样品液的孔中的颜色比滴加标准工作液的孔中颜色深，呈明显的紫红色，表示该样品中亚确酸盐含量超过30毫克/公斤。
SGS 食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定
1.Scope范围This test method is applicable to determination of the nitrite and nitrate content in foods by IC equipment. The method detection limit is 0.40mg/ kg (NO2-) and 0.8mg/kg (NO3-).该方法采用离子色谱检测食品中亚硝酸盐与硝酸盐含量,检出限为：亚硝酸盐（以NO2-计）0.4mg/ kg，硝酸盐（以NO3-计）0.8mg/kg。
2.Principle原理Precipitate the protein and wipe off the fat in sample then extract and sublimate by corresponding method, and analyze sample solution by using IC equipment试样经沉淀蛋白质、除去脂肪后，采用相应的方法提取和纯化，用离子色谱检测。
3.References参考GB 5009.33-2010 Determination of nitrite and nitrate in foods食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定–第一法Dionex ICS2000 manual4.Equipment仪器4.1 Millipore water purification system4.2 Balance (0.0001g accuracy) 天平（精确到0.0001g）4.3 Food disintegrator 食品粉碎机4.4 Ultrasonic cleaning system 超声波清洗器4.5 Purification column: C18 column, Ag column and Na columnActivation is essential before the column being used. Rinse the C18 column by using 10ml methanol and 15 ml ultra pure water one by one，and keep the flow rate is 4mL/min. Rinse the Ag column and the Na column by using 10ml ultra pure water keeping the flow rate is2mL/min. Then wait for 30 min.净化柱：包括C18柱、Ag柱和Na柱固相萃取柱使用前需进行活化，如使用C18柱、Ag柱（1.0mL）和Na柱（1.0mL），其活化过程为：C18柱(1.0mL)使用前依次用10mL甲醇、15mL水通过(流速为4mL/min)，静置活化30min。
实验十二食品中亚硝酸盐的测定
实验十二、食品中亚硝酸盐的测定（盐酸萘乙二胺分光光度法）一、实验目的1.明确亚硝酸盐在食品中的作用以及限量标准。
2.掌握盐酸萘乙二胺法测定食品中亚硝酸盐的原理、操作步骤、注意事项二、实验原理样品经沉淀蛋白质，除去脂肪后，在弱酸条件下硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色的染料，与标准系列比较定量。
三、仪器1. 722分光光度计，提前20min打开预热2. 组织绞碎机，菜刀，砧板 1-2套3. 50mL烧杯 500mL烧杯 3L大烧杯4. 电炉 2个5. 托盘天平6. 200mL容量瓶 500mL容量瓶7. 恒温水浴锅8. 25mL具塞比色管9. 滴管，漏斗，滤纸，吸小球10. 玻璃棒，温度计，标记笔，标签纸四、试剂（所用试剂，除另有规定外，均为分析纯试剂。
）1、亚铁氰化钾溶液：称取106.0g亚铁氰化钾[K4Fe6(CN)·3H2O]，用水溶解后，稀释至1000mL。
2、乙酸锌溶液：称取22.0g乙酸锌[Zn(CH3C00)2·2H20]，加3 mL冰乙酸溶于水，并稀释至100mL。
3、饱和硼砂溶液：称取5.0g硼酸钠(Na2B07·10H20)，溶于100 mL热水中，冷却后备用。
4、对氨基苯磺酸溶液(4g/L)：称取0.4 g对氨基苯磺酸，溶于100 mL 20％的盐酸中，置棕色瓶中混匀，避光保分装。
5、盐酸萘乙二胺溶液（2g/L）：称取0.2克盐酸萘乙二胺，溶于100毫升水中，避光保存。
有致癌作用6、亚硝酸钠标准溶液（0.2g/L）：精密称取0.1000g于硅胶干燥器中干燥24h的亚硝酸钠，加水溶解移入500ml容量瓶中，并稀释至刻度。
此溶液每ml相当于200µg亚硝酸钠。
7、亚硝酸钠标准使用液（0.2µg/mL）：临用前，吸取亚硝酸钠标准溶液5.00毫升，置于200毫升容量瓶中，加水稀释至刻度，此溶液每毫升相当于5微克亚硝酸钠。
食品亚硝酸盐快速检测盒说明书
食品亚硝酸盐快速检测盒说明书【产品名称】产品名称：食品亚硝酸盐快速检测盒英文名称：Nitrite Rapid Test Kits【产品简介】亚硝酸盐作为肉制品发色剂和防腐剂被允许限量使用，蔬菜在腌渍过程中也会产生亚硝酸盐。
但亚硝酸盐是一种毒性很强的物质，能使人体血红蛋白氧化而失去运输氧的能力，造成慢性、急性中毒，还能与食品中、人体内的仲胺类化合物反应生成具有强致癌性的亚硝胺类化合物。
食品中亚硝酸盐添加或残留过量会对人体有害。
本产品适用于家庭、集体食堂、餐饮企业的各类鲜肉、肉制品、酱腌菜、水果蔬菜、婴幼配方食品等食品中亚硝酸盐快速检测。
【产品规格】20次/盒。
【产品组成】亚硝酸盐试剂瓶（2g，1瓶）；试剂勺（小，1个）；取样勺（大，1个）；量瓶（1支）；比色管（1支）；1mL刻度吸管（20支）；标准色卡（1张）。
【检测原理】本产品根据国家标准《食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定方法GB/T 5009.33-2010》研制而成，食品中的亚硝酸盐可迅速与亚硝酸盐试剂反应生成紫红色产物，与标准色卡比色定量。
【检测限量】本产品检测方法对食品中亚硝酸盐的检出限为1mg/kg。
国家《食品添加剂使用卫生标准GB 2760-2011》和《食品中污染物限量标准GB2762-2012》规定的各类食品亚硝酸盐限量值见下表：样品类别西式火腿类肉罐头类其他肉制品类酱腌泡菜新鲜蔬菜鲜肉蛋鱼婴幼配方食品70 50 30 20 4 3 2亚硝酸盐限量值（≦mg/kg）【使用方法】（1）用取样勺量取1g剪碎的待测样品（液态样品取1勺；肉类和酱腌菜取1勺；婴幼儿配方奶粉或米粉取2勺）。
（2）亚硝酸盐限量低于20 mg/kg的样品检测：用量瓶量取5mL纯净水，将量取的1g样品加入量瓶中，盖紧量瓶盖，摇晃使待测物质充分溶出，静置5-10分钟，取上清液待测；亚硝酸盐限量高于20 mg/kg的样品检测：将量取的1g样品放入碗中，用量瓶量取20mL 纯净水（加水至5 mL刻度线，量取4次），加入到碗中，充分搅拌使待测物质溶出，静置5-10分钟，取上清液待测。
食品中亚硝酸盐的测定
一、实验目的
1.明确亚硝酸盐在食品中的作用以及限量标准。
2.掌握盐酸萘乙二胺法测定食品中亚硝酸盐的原理、操作步骤、注意事项
二、实验原理
样品经沉淀蛋白质，除去脂肪后，在弱酸条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色的染料，最大吸收波长538nm下测吸光度值A,与标准系列比较定量。
三、仪器
1.722分光光度计
若干，提前20min打开预热
2.组织绞碎机，菜刀，砧板
1-2套
3.50mL烧杯
500mL烧杯
3L大烧杯
2个/组
1个/组
2个
4.电炉
2个
5.托盘天平
1个/组
6.200mL容量瓶
500mL容量瓶
1个
1个/组
7.恒温水浴锅
1-2个
8.25mL具塞比色管
11个/组
9.滴管，漏斗，滤纸，吸小球，
品名限量标准mg/kg
食盐（精盐）、牛乳粉≤2
香肠（腊肠）香肚、酱腌菜、广式腊肉≤20
鲜肉类、鲜鱼类、粮食≤3
肉制品、火腿肠、灌肠类≤30
蔬菜≤4
其他肉类罐头、其他腌制罐头≤50
婴儿配方乳粉、鲜蛋类≤5
西式蒸煮、烟熏火腿及罐头、西式火腿罐头≤70
八、注意事项
1、盐酸萘乙二胺有致癌作用
2、显色后稳定性与室温有关，一般显色温度为15~30℃时，在20~30min内比色为好。
管号
0
1
2
3
4
56Biblioteka 78样液试剂空白
A538
七、数据处理
按下式计算：
A
X= ———————×1000
实验十二食品中亚硝酸盐含量测定格里斯试剂比色法
实验十二食品中亚硝酸盐含量测定（格里斯试剂比色法）（—）目的熟悉食品中亚硝酸盐的卫生标准，掌握食品中亚硝酸盐含量测定的基本方法。
（二）原理样品经沉淀蛋白质、除去脂肪后，在弱酸性条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，在与N－1－萘基乙二胺偶合形成紫红色染料后，与标准比较定量。
（三）试剂实验用水为蒸馏水，试剂不加说明者，均为分析纯试剂。
1．氯化胺缓冲液lL容量瓶中加入500ml水，准确加人20.0ml盐酸，振荡混匀，准确加入50ml氢氧化铵，用水稀释至刻度。
必要时用稀盐酸和稀氢氧化铵调试至pH9.6～9.7。
2．0.42mol／L硫酸锌溶液称取120g硫酸锌（ZnSO4·7H20），用水溶解并稀释至1000ml。
3. 20g／L氢氧化钠溶液称取20g氢氧化钠用水溶解，稀释至1L。
4. 对氨基苯磺酸溶液称取10g对氨基苯磺酸，溶于700ml水和300ml冰乙酸中，置棕色瓶中混匀，室温保存。
5. 0.1％N－1－萘基乙二胺溶液称取0.lg N－1－荼基乙二胺，加60％乙酸溶解并稀释至100ml，混匀后，置棕色瓶中，在冰箱中保存，一周内稳定。
6. 显色剂临用前将0.1％N－1－萘基乙二胺溶液和对氨基苯磺酸溶液等体积混合。
7. 亚硝酸钠标准溶液准确称取250.0mg于硅胶干燥器中干燥24h的亚硝酸钠，加水溶解移入500ml容量瓶中，加100ml氯化胺缓冲液，加水稀释至刻度，混匀，在4℃避光保存。
此溶液每毫升相当于500ug的亚硝酸钠。
8．亚硝酸钠标准使用液临用前，吸取亚硝酸钠标淮溶液 1.00ml，置于100ml容量瓶中，加水稀释至刻度，此溶液每毫升相当于5.0ug亚硝酸钠。
（四）仪器1．小型粉碎机2．分光光度计（五）操作方法1．样品处理称取约10.00g（粮食取5g）经绞碎混匀样品，置于打碎机中，加70ml水和12m1 2％氢氧化钠溶液，混匀，用2％氢氧化钠溶液调样品至pH8，定量转移至200ml容量瓶中加10ml硫酸锌溶液，混匀，如不产生白色沉淀，再补加2～5m1 氢氧化钠，混匀。
食物中的亚硝酸盐含量测定实验
食物中的亚硝酸盐含量测定实验亚硝酸盐是一种普遍存在于食物中的化学物质，它具有一定的危害性。
过量的亚硝酸盐摄入可引起健康问题，如致癌作用和对血液循环系统的不良影响。
因此，了解食物中的亚硝酸盐含量对我们的健康至关重要。
本文将详细介绍一种简单有效的食物中亚硝酸盐含量测定实验方法。
实验材料：- 油酸银试剂：用浓硝酸和两滴稀硝酸混合制成的10%油酸银溶液。
- 食物样品：如蔬菜、肉类或加工制品等。
- 高纯水：用于制备试剂和稀释样品。
实验步骤：1. 样品制备：将所需食物样品洗净，去皮并切成小块。
取适量的食物样品（约10克）放入容器中备用。
2. 制备油酸银试剂：在实验室条件下，取适量的浓硝酸（约1ml），加入两滴稀硝酸，并充分混合。
得到的溶液即为10%油酸银试剂。
3. 样品处理：将预先准备好的食物样品置于容器中，加入适量的高纯水（约50ml），然后加入足量的油酸银试剂（约2ml）。
4. 摇晃溶液：将容器封闭，并轻轻地摇晃溶液，使油酸银试剂充分与样品接触，反应1分钟。
5. 过滤液处理：使用滤纸或滤膜将溶液过滤，以去除残留的食物固体颗粒。
6. 比色测定：将过滤后的溶液放入比色皿中，然后使用紫外-可见分光光度计测量其吸光度。
数据处理与结果分析：根据所得的吸光度值，可以通过制定标准曲线来计算食物样品中的亚硝酸盐含量。
标准曲线通常由不同浓度的亚硝酸钠溶液制成。
通过比较食物样品的吸光度值与标准曲线上的相应吸光度值，可以确定食物中的亚硝酸盐含量。
实验注意事项：1. 实验操作时请佩戴适当的实验室防护设备，如手套和护目镜。
2. 使用实验室用具时要注意安全，如锥形瓶和滤纸。
3. 进行比色测定时，确保比色皿干净，并且避免空气中的尘埃进入溶液。
结论：通过本实验，我们可以有效地测定食物中的亚硝酸盐含量。
这有助于我们评估食物的安全性，并采取相应的措施来减少亚硝酸盐的摄入。
同时，本实验方法简单易行，可以在实验室或家庭环境中进行，为亚硝酸盐的监测提供了一种可行的方法。
食品中亚硝酸盐含量检测试剂盒说明书__ 微量法UPLC-MS-4622
食品中亚硝酸盐含量检测试剂盒说明书货号：UPLC-MS-4622规格：100T/96S微量法产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液一液体50mL×1瓶常温保存提取液二液体50mL×1瓶常温保存提取液三液体50mL×1瓶常温保存提取液四粉剂×1瓶常温保存试剂一液体10mL×1瓶4℃保存试剂二液体10mL×1瓶4℃保存标准品液体500μL×1支4℃保存溶液的配制：1、标准品：1μmol/mL亚硝酸钠标准溶液。
将标准品用蒸馏水稀释成0.04µmol/mL备用。
产品说明：在食品中，亚硝酸盐可与肉品中的肌红素结合而更安定，在食品加工业中作为保色剂，以维持肉制品的良好外观，并防止肉毒梭状芽孢杆菌的产生，提高食用肉制品的安全，但是人体长期摄入亚硝酸盐过量的食品，可诱发消化系统癌变。
在酸性条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸反应生成重氮化合物，再与N-1-萘基乙二胺形成紫红色偶氮化合物，在540nm处有特征吸收峰。
技术指标：最低检出限：0.0011164μmol/mL线性范围：0.00125-0.2μmol/mL注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：天平、研钵/匀浆器、水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、蒸馏水。
操作步驟：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）称取样本约0.5g，破碎，加入0.5mL提取液一，沸水浴15min，冷却至室温，加入0.5mL提取液二，震荡摇匀，加0.5mL提取液三，用镊子加少量提取液四（约1mg），静置30min，10000rpm/min离心15min，取上清液待测。
二、测定步骤：1.可见分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至540nm，蒸馏水调零。
食品中亚硝酸盐含量的测定(精)
四、实验步骤
1.样品处理 称取经绞碎并混合均匀的样品20克于100ml烧杯中， 加硼砂饱和溶液40ml，搅拌均匀后，以70℃以上的热 水100～150ml将样品全部洗入250ml容量瓶中，放入沸 水浴中加热15分钟，取出冷却后，边转动容量瓶边加 入亚铁氰化钾溶液20ml，摇匀后，再加入醋酸锌溶液 20ml，以沉淀蛋白质。然后，加水至刻度，混匀，放 置半小时后，弃去上层脂肪，清液用滤纸或脱脂棉过 滤，弃去初滤液5～10ml，滤液备用。
2.测定 吸取上述滤液40ml于50ml容量瓶中，同时吸取0.0、 0.1、0.2、0.3、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0ml亚硝酸 钠标准使用液（相当于0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、 8.0、12.0、16.0、20.0ug的亚硝酸钠）分别置于 50ml容量瓶中，各加水至25ml处。在样品管及标准管 中分别加入0.4%对氨基苯磺酸溶液4ml，混匀后静置 3～5分钟，然后又在各管及标准管中分别加入0.2%盐 酸萘乙二胺溶液2ml，加水至刻度，摇匀，静置15分 钟后，用1cm的比色皿，以零管调节零点，于波长 538nm处，测吸光度，绘制标准曲线并查出待测液的 亚硝酸盐含量。
④0.4%对氨基苯磺酸溶液：称取0.4g对氨基苯磺 酸，溶于100 ml 20%的盐酸中，避光保存。
⑤0.2%盐酸萘乙二胺溶液：称取0.2g盐酸萘乙二胺, 溶于100 ml水中，避光保存。
⑥亚硝酸钠标准溶液：精密称取0.1000g于硅胶干 燥器中干燥24小时亚硝酸钠，加水溶解移入500 ml容 量瓶中，并稀释至刻度。此溶液每ml相当于200ug亚 硝酸钠。
食品安全亚硝酸盐与硝酸盐的测定-
四、样品的制备和保存
（一）样品的制备 （二）样品的保存
（一）样品的制备
已粉碎的样品（盐菜末等），应使用圆锥四分法（堆成圆锥体— —压成扁平圆形——划两条交叉直线分成四等份——取对角部分 ）进行缩分。
未粉碎的样品（腌咸菜、腌萝卜条等），应间隔一定的距离取多 份小块四分法进行缩分。
已切成片或块的禽肉类样品（排骨、鸡爪等），先室温解冻 ，四 分法缩分。
、乙酸锌[Zn(CH3COO)2.2H2O]、硼酸钠
[Na2B4O7.10H2O]、对氨基苯磺酸[C6H7NO3S]、 盐酸萘乙二胺[C12H14N2.2HCL]
氨缓冲溶液：量取 30mL 盐酸，加 100mL 水，混匀后加65mL 氨水，再加 水稀释至 1000mL，混匀。调节 pH 至 9.6～9.7（用PH计）。
若内壁仍不够清洁，可用下述洗液洗涤： （1）重铬酸钾-浓硫酸的混合液（100g/L）。 （2）等量的30g/L的高锰酸钾溶液和1mol/L的氢氧化 钠的混合溶液。
然后用自来水冲洗，直至洗涤液全部冲净，再用纯水 洗三次。
一般洗净后的玻璃量器应自然风干。若急用，建议玻
璃量器烘干温度不得超过150℃ 。
镉柱不用时，必须用水封盖，随时都要 保持水平面在镉层之上，不得使镉层夹 有气泡。
如无上述镉柱玻璃管时，可以 25mL 酸 式滴定管代替。
三、样品接收
收样人应认真检查样品的包装和状态，若发 现异常，应与送样人达成处理决定。
送样量不能少于规定数量，至少不能少于测 试用量的三倍。
样品应编号登记，加施唯一性标识，保证不 同检测状态和传递过程中样品不被混淆。
当贮液漏斗中的样液流完后，再加 5mL 水置换柱内留存的样液。
（1）镉柱还原效率的测定
02实验二食品中亚硝酸盐的测定
实验二食品（腊肠）中亚硝酸盐的测定一、实验原理与目的目的要求：熟悉亚硝酸盐的化学性质和分离方法。
掌握其定性、定量分析方法。
1知识目标：掌握腊肠中亚硝酸盐含量的测定原理及方法。
技能目标：能对腊肠中的亚硝酸盐含量进行测定。
2、（1）亚硝酸盐作用硝酸盐和亚硝酸盐是食品添加剂中的发色剂（也称护色剂），添加后，硝酸盐在亚硝基化菌的作用下还原成亚硝酸盐，并在肌肉中乳酸的作用下生成亚硝酸。
亚硝酸不稳定，极易分解产生亚硝基，生成的亚硝基会很快与肌红蛋白反应生成鲜艳的、亮红色的亚硝基肌红蛋白，亚硝基肌红蛋白遇热后，放出巯基（-SH）,变成了具有鲜红色的亚硝基血色原，从而赋予食品鲜艳的红色。
另外，亚硝酸盐对抑制微生物增殖有一定作用，与食盐并用，可增加对细菌的抑制作用。
亚硝酸盐摄入量过多会对人体产生毒害作用。
过多地摄入亚硝酸盐会引起正常血红蛋白转变为高铁血红蛋白，而失去携氧功能，导致组织缺氧，引起肠原性青紫症。
（2）测定原理亚硝酸盐采用盐酸萘乙二胺法测定，样品经处理、沉淀蛋白质、除去脂肪后，在弱酸条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化以后，再与N-1-萘基乙二胺偶合形成紫红色染料，在538 nm波长处测定吸光度，与标准比较定量。
二、试剂与材料（亚硝酸盐的测定（依据GB/T 5009.33-2010）1、检测原料：红肠、腊肠、榨菜、咸菜2、试剂：除非另有规定，本方法所用试剂均为分析纯。
水为GB/T 6682-2008规定的二级水或去离子水。
①亚铁氰化钾溶液（106 g/L）:称取106.0 g亚铁氰化钾，用水溶解，并稀释至1000 mL。
②乙酸锌溶液（220 g/L ）：称取220.0 g乙酸锌，先加30 mL冰醋酸溶解，用水稀释至1000 mL。
③饱和硼砂溶液（50 g/L ）：称取5.0 g硼酸钠，溶于100 mL热水中，冷却后备用。
④对氨基苯磺酸溶液（4 g/L）：称取0.4 g对氨基苯磺酸，溶于100 mL20%（V/V ）盐酸中，置棕色瓶中混匀，避光保存⑤盐酸萘乙二胺溶液（2 g/L）:称取0.2 g盐酸萘乙二胺，溶于100 mL水中，混匀后，置棕色瓶中，避光保存。
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货号：QS1806 规格：50管/48样食品中亚硝酸盐含量测定试剂盒说明书
分光光度法
注意：正式测定之前选择 2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
在食品中，亚硝酸盐可与肉品中的肌红素结合而更安定，在食品加工业中作为保色剂，以维持肉制品的良好外观，并防止肉毒梭状芽孢杆菌的产生，提高食用肉制品的安全，但是人体长期摄入亚硝酸盐过量的食品，可诱发消化系统癌变。
测定原理：
在酸性条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸反应生成重氮化合物，再与N-1-萘基乙二胺形成紫红色偶氮化合物，在540nm处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器：
天平、研钵或匀浆器、水浴锅、分光光度计、1mL玻璃比色皿、蒸馏水。
试剂组成和配制：
提取液一：液体50 mL×1瓶，室温保存。
提取液二：液体50 mL×1瓶，室温保存。
提取液三：液体50 mL×1瓶，室温保存。
提取液四：粉剂100 mg ×1支，室温保存。
试剂一：液体25mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂二：液体25mL×1瓶，4℃避光保存。
样品处理：
称取样品约0.2g鲜重或0.05g干重，破碎，加入0.5 mL 提取液一，沸水浴15min，冷却至室温，加入0.5 mL提取液二，震荡摇匀，加0.5 mL 提取液三，用镊子加少量粉剂四（约1 mg），静置30min，25℃，8000g离心15 min，取上清液待测。
亚硝酸盐含量计算
标准曲线回归方程为：y=0.234x + 0.0002，R2= 0. 999 x为标准品亚硝酸钠浓度（μg/ml）y为吸光值A。
-（μg/g）=（△A-0.0002）÷0.234×V样÷（V样÷V样总×W）×0.6668
NO
2
=（△A-0.0002）÷0.234×1.5×0.6668÷W
第1页，共2页
=4.27×（△A-0.0002）÷W
V样总：加入提取液体积，1.5 mL； V样：反应中样品体积，0.35mL；W：样品质量，g。
注意事项：
1.试剂盒2-8℃保存。
2.试剂对人体有一定的危害，请穿实验服，戴手套操作。
3.若检测出得OD值在标准曲线范围外，请将样品进行适当的浓缩或稀释（A540 <0.09浓缩，
A
> 1.5 适当稀释）。
540
4.最低检出限为0.5μg/g。
第2页，共2页。