血细胞直方图1

红细胞直方图
红细胞计数和血细胞比容测定与白细 胞计数相似。
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300
400 (fl)
WBC直方图
血小板直方图
随红细胞在一个系统中进行检测。
%
10
20
30(fl)
直方图在2～28fl（不同仪器不一）。
（二）白细胞系检测原理
1.


电阻抗法
稀释液 电阻抗法 溶血素单个白细胞
标本
按体积大小分类
血细胞分析仪
教学目标
1、掌握血细胞分析仪的库尔特原理
2、掌握白细胞、红细胞、血小板直方图的临
床意义。 3、了解血细胞分析仪的质量控制
教学重点、难点
教学重点：
1、血细胞分析仪电阻抗原理 2、细胞直方图的分析 教学难点： 细胞直方图的分析
授课内容
概述
血细胞分析仪检测原理 血细胞分析仪类型 血细胞分析仪检测项目 血细胞直方图
淋巴细胞 单个核细胞
中性粒细胞
仪器将体积为35～450fL的血细胞， 分为 256 个通道（ channel ）。每个通道： 1.64fl 。根据细胞大小，分别置于不同 的通道中，显示血细胞体积分布直方图 (Histogram)。
白细胞检测原理
根据电阻抗的原理，不同体积白细胞(35-450)fL 产生脉冲大小的明显差异而区分相应的三群细胞：
100
200
300
400 (fl)
电阻抗法检测红细胞要注意白细胞增高干扰： 稀释血液中含有白细胞，正常时，血液红细胞 与白细胞的比例约为500：1～1000：l，因此， 白细胞因素可忽略不计。 当病理情况下，如白血病时，白细胞数明显 增高，同时又伴有贫血时，使所得红细胞参 数可产生明显误差。
2. 血红蛋白测定原理
RF:射频电流
细胞内部结构信息
DC:直流电 细胞大小的信息
（3）激光与细胞化学法 过氧化物酶检测通道 嗜碱性粒细胞/分叶核检测通道。
（ 4 ） 多 角 度 偏 振 光 散 射 （ multi-angle polarized scatter separation of white cell, MAPSS）法 0°：前角光散射（ 1°～ 3°），可粗略 测定细胞大小。 10°：狭角光散射（ 7°～ 11°），可测 定细胞内部结构相对特征。 90°：垂直光散射（ 70°～ 110°），测 定细胞核分叶情况。 90°：消偏振光散射（ 70°～ 110°）， 区分嗜酸性粒细胞与其他细胞。
库尔特先生1913-1998
COULTER ：全自动细胞分析仪
COULTER ：细胞分析仪
第一台细胞计数仪 瓶瓶罐罐+管道+电极+示波器库尔特（美国通电气公司员工）在上海工作时所拍照
血细胞分析发展史
1953年美国Coulter公司研制成功第一台电 阻抗是血细胞分析仪； 2. 六十年代已普遍应用到临床，当时可检测 RBC、Hb、WBC 、 MCV 、 MCH 、 MCHC 等项目； 3．七十年代，增加了PLT； 4．七十年代末至八十年代开发了DC及RDW及 MPV等新项目； 5．九十年代以来，RET、NRBC、淋巴细胞亚 群分析等指标。
（二）光散射法血液分析仪检测原理


光散射法组合应用电学、光学、细胞化学 多项技术检测血液细胞，可得出较准确的 细胞计数和分类计数的结果。 这些测试原理的改进主要体现在对白细胞 分类部分的改进，即电阻抗法的白细胞三分 群发展为多项技术对白细胞五分类。
1、白细胞检测 （ 1 ） 容 量 、 电 导 、 光 散 射 （ volume ， conductivity， scatter, VCS）法

鉴别缺铁性贫血和β-珠蛋白生成障碍性贫血 1）共同点：小细胞性贫 血，峰左移。 2）鉴别点： a．RDW增高，峰底宽 a N b．RDW正常，峰底窄
b
100
200
fl
根据MCV、RDW进行贫血形态学分类
MCV 增高 RDW 正常 增高 正常 正常 增高 降低 正常 增高 贫血类型 大细胞均一性贫血 大细胞不均一性贫血 正细胞均一性贫血 正细胞不均一性贫血 小细胞均一性贫血 小细胞不均一性贫血 常见疾病举例 部分再生障碍性贫血 巨幼细胞性贫血 急性失血性贫血 再生障碍性贫血、G-6-PD 缺乏症 轻型β -地中海贫血 缺铁性贫血
MPV的变化：鉴别血小板减少
①PLT↓而MPV↑：Plt破坏增多（如DIC、 ITP等） ②PLT↓而MPV↓：M增生不良、AIDS、 M纤维化、再障、M瘤、白血病化疗、败血症 等
先进技术预览
把20μl 血液样 品在机外稀释，混匀后放 在样品架上，按下计数键 它就可以对15种血液指标 和3个细胞直方图进行一 次分析。测定完成后结果 会立即在LCD上显示并 将结果打印出来。
（三）全自动多功能血细胞分析仪
检测速度为每小时110－150份标本 工作模式：CBC CBC+DIFF CBC+NRBC
CBC+DIFF+NRBC
CBC+RET CBC+DIFF+RET CBC+DIFF+NRBC+RET
三 检测参数
血液分析仪一般能检测20余项参数，功能 较全的仪器最多的能检测40余项参数。常见血 液分析检测报告的术语及英文缩写词。见下表：
2．RBC体积直方图 要注意观察图形峰的位置、峰底的宽度、峰顶的 形状及有无双峰现象。 1）缺铁性贫血 2）轻型β－Hb合成障碍 3）铁粒幼细胞性贫血 4）叶酸缺乏的巨幼细胞性贫血 5）其他
100
200
fl
红细胞直方图
（1）正常红细胞分布：50～200fl （2）异常红细胞直方图
血小板直方图
电阻抗法在2-30fl范围内分析PLT，但大多 数在2-15fl范围，正常血小板直方图，呈现左 偏态分布。
当血小板计数和血小板体积直方图呈现异常现象时，均 应检查血液是否有血小板凝聚和微小血块，必要时作血涂片 检查，观察是否有小红细胞、红细胞碎片或大血小板增多现 象。
10
20
30
fl
3、血小板直方图
正常血小板直方图呈左偏态分布：2～30fl 分布，主要在2～15fl。
异常血小板直方图
（三） 血小板参数的临床意义
35—90f1
160fl以上
90～160f1
经溶血素处理脱水后，血细胞体积大小发生 了变化！！！以细胞的有形成分作为细胞的 大小 第一群（35～90fl）小细胞区：淋巴细胞 （体积最小）。 第二群（90～160fl）单个核细胞区，（中 间细胞）：单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱 性粒细胞、原始、幼稚细胞、异常细胞等。 第三群（160fl以上）大细胞区：嗜中性粒细 胞（体积最大）。
图4．HS血液常规检查流水线
HST-330 SE-9000/R-3000/SP-100 从血球计数、白血球分类到网织红细胞测定以及标本 的推片、染色，全面实现了自动化。 实现了高效率的检测。
根据电阻抗法，血小板随红细胞在一 个系统中进行检测，在红细胞／血小板计 数池中计数2fl～30fl的颗粒。
血小板检测原理
血小板计数（platelet, PLT）： 随红细胞在一个系统中进行检测。
%
呈偏态，峰顶5~10fl
10
20
30(fl)
直方图在2～30fl（不同仪器不一）。
血细胞分析仪工作流程
1.
现代分析仪进展
1．自动化程度越来越高；
2．提供参数越来越多； 3．精密度越来越高； 4．速度越来越快； 5．越来越注重环保； 6．质控功能得到加强； 7．智能化程度越来越高。
一
血液分析仪检测原理
血液分析仪检测原理大致分为两类： ①电阻抗法（库尔特原理） ②光散射法 （其中电阻抗法是血液分析仪的设计基础）
血液分析仪主要能完成两大功能： ①细胞计数功能 ②细胞分类功能
（一） 电阻抗法原理（库尔特原理）
1 库尔特原理 库尔特原理是利用电阻抗法测量 细胞的数量和体积。其内容为：血细 胞是电的不良导体，当一个细胞通过 计数小孔时，会导致小孔两端电阻的 变化，将其转化成脉冲，感应器通过 检测脉冲的数量及大小，从而计算出 通过小孔的细胞数量及体积。
（三）红细胞测试原理
1．红细胞计数（RBC）和红细胞比积（Hct） 1）RBC原理（脉冲数的多少） 2）Hct/PCV原理（脉冲的高度与叠加） 3）白细胞数的干扰 RBC 4）红细胞体积分布直方图
100
200
fl
红细胞检测原理
红细胞计数和血细胞比容测定与白细 胞计数相似。
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正态分布,峰顶在82~96fl
图1．半自动分析仪
这是一台用于临 床实验室体外诊断的 全自动血液分析仪， 能每小时分析80份样品， 打印出18份参数和3种细 胞分布曲线图。操作简 便， 快速。
图2．全自动分析仪
图3．CD-3500 血球计数分析仪
．30个参数，10项白细胞分类，7个分布图，7个散射表示图 ．可以做网织红细胞分析，以及动物血液测试高达60个品种 ．采用最先进的激光技术和电阻法技术 ．20个质控程序，120个带25个参数的质控样品的SD.CV均值
原理 细胞体积技术（测量 细胞大小） 电导性技术（测量细 胞内部结构） 光散射技术（测量细 胞形态、细胞核和细胞 颗粒）。
体积
电导
光散射
VCS可显示3种细胞散点图 DF1（体积值和散射光值） DF2（体积值和电导值） DF3（体积值和电导值）
（2）电阻抗与射频法（能透入细胞内，测 量核的大小及颗粒的多少）。
2 库尔特原理图
细胞计数池中，小孔内外 两个电极和稀释液构成一 个电流回路，在负压作用 下，细胞通过小孔，电极 能感应到一个瞬间的电阻 变化，并将其转换成脉冲， 脉冲的数量代表细胞数量， 脉冲大小反映细胞体积大 小。