生物化学期中复习
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生物化学期中考试复习提纲
第二章:氨基酸
1. 氨基酸的区别在于侧链r 基的不同。二十种常见氨基酸分类:
○
1按照r 基的化学结构,20种氨基酸可分为脂肪族,芳香族和杂环族3类。脂肪族氨基酸含5种中性氨基酸(甘氨酸,丙氨酸,缬氨酸,亮氨酸,异亮氨酸);含羟基或硫元素的氨基酸4种(丝氨酸,苏氨酸,半胱氨酸,甲硫氨酸);酸性氨基酸及其酰胺4种(天冬氨酸,天冬酰胺,谷氨酸,谷氨酰胺);碱性氨基酸2种(赖氨酸,精氨酸)杂环氨基酸2种(组氨酸,脯氨酸);芳香族氨基酸3种(苯丙氨酸,酪氨酸,色氨酸)
组氨酸也是一种碱性氨基酸
○2按r 基的极性大小(指在细胞ph 即ph=7左右的解离状态下):
非极性氨基酸: Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Trp, Met
R 基具极性不带电荷的氨基酸: Gly, Ser, Thr, Cys, Tyr, Asn, Gln
R 基带正电荷的氨基酸: Lys, Arg, His
R 基带负电荷的氨基酸: Asp, Glu 2.氨基酸的等电点(概念及计算式,性质)
概念:当溶液浓度为某一pH 值时,氨基酸分子中所含的正负电荷正好相等,净电荷为0。这一pH 值即为氨基酸的等电点,简称pI 。在等电点时,氨基酸既不向正极也不向负极移动,即氨基酸处于两性离子状态
计算式:侧链不含离解基团的中性氨基酸,其等电点是它的p K ’1和p K ’2的算
术平均值:
pI = (p K 1 + p K ’2 )/2
侧链含有可解离基团的氨基酸,其pI 值也决定于等电兼性离子两边的p K
值的算术平均值。
酸性氨基酸: pI = (p K ’1 + p K ’R-COO - )/2
硷性氨基酸: pI = (p K ’2 + p K ’R-NH2 )/2
无论氨基酸侧链是否解离,其pI 值均决定于净电荷为零的等电兼性离子两边的p K ’值算术平均值
性质:当低于等电点的任一ph 时,氨基酸带有净正电荷,向负极移动;当高于等电点的任一ph 时,氨基酸带有净负电荷,向正极移动。在一定的ph 范围内氨基酸溶液的ph 离等电点越远,氨基酸所带净电荷越多。
3..氨基酸的光谱性质(后面的蛋白质同样具有)
芳香族氨基酸(酪氨酸,色氨酸,苯丙氨酸)在280nm 波长附近有最大的紫外吸收峰,由于大多数蛋白质含有这些氨基酸残基,氨基酸残基数与蛋白质含量成正比,故通过对波长的紫外吸光度的测量可对蛋白质溶液进行定量分析(核酸在260nm 处有最大的吸收峰)
第三章:蛋白质的通性,纯化和表征
1.蛋白质的性质:○1胶体性质(具有丁达尔效应);○2沉淀(特殊的:盐析)
2 2.蛋白质的等电点同氨基酸,与它所含的酸性氨基酸和碱性氨基酸的数目比例
有关。处于等电点处时,蛋白质的溶解度最小。
3.蛋白质的等离子点:当没有溶液中的离子干扰时,蛋白质分子本身的质子供
体集团解离出来的质子数与它的质子受体基因结合的
质子数相等时溶液ph.
第四章:蛋白质的共价结构(一级结构)(一起说明蛋白质的
高级结构)
1.蛋白质的一级结构:即蛋白质分子中氨基酸的排列顺序。主要化学键:肽
键,有些蛋白质还包含二硫键。
2、蛋白质的高级结构:包括二级、三级、四级结构
3.蛋白质的二级结构:指蛋白质分子中某一段肽链的局部空间结构,也就是该
段肽链骨架原子的相对空间位置,并不涉及氨基酸残基侧链的构象。二级结构
以一级结构为基础,多为短距离效应。可分为
○1α螺旋:多肽链主链围绕中心轴呈有规律地螺旋式上升,顺时钟走向,即
右手螺旋,
每隔3.6个氨基酸残基上升一圈,螺距为0.540nm。α螺旋的每个肽键的NH和
第四个肽键的羧基氧形成氢键,氢键的方向与螺旋长轴基本平形
○2.β-折叠:多肽链充分伸展,各肽键平面折叠成锯齿状结构,侧链R基团
交错位于锯齿状结构上下方;它们之间靠链间肽键羧基上的氧和亚氨基上的氢形
成氢键维系构象稳定
○3. β-转角:常发生于肽链进行180度回折时的转角上,常有4个氨基酸残
基组成,第二个残基常为脯氨酸。
注:无规卷曲:无确定规律性的那段肽链。主要化学键:氢键
4.蛋白质的三级结构:蛋白质的三级结构:指整条肽链中全部氨基酸残基的相
对空间位置,显示为长距离效应。
主要化学键:疏水键(最主要)、盐键、二硫键、氢键、范德华力。
5.蛋白质的四级结构:对蛋白质分子的二、三级结构而言,只涉及一条多肽链
卷曲而成的蛋白质。在体内有许多蛋白质分子含有二条或多条肽链,每一条多
肽链都有其完整的三级结构,称为蛋白质的亚基,亚基与亚基之间呈特定的三
维空间排布,并以非共价键相连接。这种蛋白质分子中各个亚基的空间排布及
亚基接触部位的布局和相互作用,为四级结构。由一条肽链形成的蛋白质没有
四级结构。
主要化学键:疏水键、氢键、离子键
重要:多肽链的部分裂解(p49)
蛋白酶是一类肽链内切酶称为内肽酶。在蛋白质测序中常用到的有:
3
1. 胰蛋白酶:最常用到的,专一性强,只断裂碱性氨基酸(赖氨酸残基
或者是精氨酸残基的羧基参与形成的肽键,多得到以arg (精氨酸),lys (赖氨酸)为c-末端残基的肽段。
2. 胰凝乳蛋白酶(糜蛋白酶):专一性不如胰蛋白酶,断裂含苯环的氨
基酸(苯丙氨酸,色氨酸,酪氨酸等疏水氨基酸的羧基端肽键)。若
断裂点附近的基团是碱性的,裂解能力增强,反之,减弱。
3. 胃蛋白酶:其专一性与胰凝乳蛋白酶相似,但它断裂的是苯丙氨酸,
色氨酸,酪氨酸或缬氨酸等疏水性氨基酸的氨基端肽键。(与胰凝乳
蛋白酶不同点在于酶作用的最适ph 不同,胃蛋白是ph=2,而胰凝乳蛋
白酶的是ph=8~9.
4.
葡萄球菌蛋白酶:作用于酸性氨基酸,专一断裂谷氨酸残基或者是天
冬氨酸残基的羧基端肽键。 第五章:第七节:球状蛋白质与三维特点(p66)
球状蛋白质与三维结构的特征:
1. 球状蛋白质同时含有几种类型二级结构元件(α螺旋,β转角,
β折叠)
2. 具有明显的折叠层次(包括二级结构,超二级结构,结构域,三级
结构,四级结构)
3. 球状蛋白质是致密的球状或椭球状实体.
4. 球状蛋白质分子疏水残基埋藏在分子内部,亲水残基埋在分子表
面
5. 球状蛋白质分子的表面有一个空穴或者一个裂沟.
. 第八节,亚基缔合与四级结构(p67)
1 )四级结构:很多蛋白质以三级结构的球状蛋白通过非共价键彼此缔
合在一起形成聚集体,这就是蛋白质的四级结构。亚基又称单体,四
级结构的蛋白质中每个球状蛋白质称为亚基或亚单位,亚基一般是一
条多肽链,但有的亚基由二条或多条肽链通过二硫键连接而成,本身
具有完整的三级结构,.单体蛋白质:指无四级结构的蛋白质,如肌红
蛋白、溶菌酶等,寡聚蛋白质(多亚基蛋白质或多聚蛋白质):指由两
条或更多条多肽链(亚基)组成的蛋白质.只由一种亚基组成的寡聚
蛋白质称为同多聚蛋白质.由几种不同的亚基组成多聚蛋白质称为杂
多聚蛋白质.
多聚蛋白质分子的一般特点:亚基数目一般为偶数(尤以2和4为多),
极少数的为奇数;亚基的数目一般的是一种或两种,少数的多于两种.
稳定四级结构的力与稳定三级结构的力相同。
一级 结构指蛋白质分子中多肽链的氨 基酸残基排列顺序,一级结构是
由基因上遗传 密码的排列顺序决定的。稳定结构主要是共价键,还有 二
硫键。
二级 结构指多肽链中主链原子在各局 部空间的排列分布状况,而 不涉
及各R 侧链的空间排布。主要形式包括α-螺旋结 构、β-折叠和β-转
角等。 基本单位是肽键平面或称 酰胺平面 稳定二级结构的主要因素
是氢键。另外还有肽键。