电泳技术的临床应用-完整版
电泳技术的临床应用-完整版
电泳技术的临床应用-完整版电泳技术的临床应用简介电泳技术是一种用电场对带电粒子进行排序的技术，包括凝胶电泳、毛细管电泳等多种方法。
这些技术在临床应用中具有重要意义，可以用于基因检测、蛋白质分析、药物筛选等领域。
章节一、凝胶电泳在临床基因检测中的应用1.1 基本原理凝胶电泳是将DNA分子或RNA分子按照大小和电荷在聚丙烯酰胺或琼脂糖凝胶中进行排序的方法。
利用电荷作用力和凝胶孔径可以实现DNA分子的分离和检测。
1.2 检测方法通过对DNA分子进行各种特定的处理，如限制性内切酶切割、PCR扩增等，然后进行凝胶电泳，可以检测基因变异、突变等。
1.3 实际应用凝胶电泳在临床基因检测中应用广泛，可以用于遗传病的诊断、个体基因分型等。
章节二、毛细管电泳在临床蛋白质分析中的应用2.1 基本原理毛细管电泳是利用毛细管的小孔径和电场作用力对蛋白质进行分离和分析的方法。
根据蛋白质的电荷和大小的不同，可以实现蛋白质的分离。
2.2 分析方法通过对蛋白质进行化学修饰和标记，然后进行毛细管电泳分析，可以获得蛋白质的分子量、等电点等信息。
2.3 实际应用毛细管电泳在临床蛋白质分析中被广泛运用，可以用于疾病标志物的检测、药物代谢产物的分析等。
章节三、电泳技术在药物筛选中的应用3.1 基本原理电泳技术在药物筛选中的应用主要是通过分析化合物的电荷、极性等性质，来确定药物的分子特征。
3.2 筛选方法通过对化合物进行毛细管电泳分析，可以确定其在电场下的迁移率，从而进一步进行相关的筛选实验。
3.3 实际应用电泳技术在药物筛选中具有广泛的应用前景，可以用于药物新品种的开发和质量控制。
附件：本文档涉及附件见附件部分。
法律名词及注释：1、限制性内切酶：指一类能够识别DNA的特定序列并在该序列的特定位点上切割DNA分子的酶。
2、PCR扩增：聚合酶链式反应，是一种体外生物分子复制技术，通过循环反应过程，可以扩增出特定的DNA片断。
3、药物代谢产物：指药物在人体内发生代谢反应后形成的新的化学物质。
电泳技术在医学中的应用
电泳技术在医学中的应用电泳技术在医学中的应用电泳技术在医学中的应用自从1946年瑞典物理化学家Tiselius教授研制的第一台商品化移界电泳系统问世以来,在近半个多世纪的时间里,电泳技术发展极其迅速。
基于电泳原理的各种仪器设备不断问世,特别是20世纪80年代后, 许多自动化电泳仪器相继为临床实验室所采用,电泳技术已成为基础医学和临床医学研究的重要工具之一。
目前,该技术已广泛用于蛋白质、多肽、氨基酸、核苷酸、有机物、无机离子等的分离和鉴定,甚至病毒与细胞的研究。
特别是电泳所用支持介质由流动相改为固相支持物后,各种各样的电泳分析装置不断推出以适应不同教学、临床和科研工作的需要。
当今,电泳技术与质谱技术联用在后基因组学研究中,正发挥者着巨大的作用,为临床检验的发展带来新的生机与活力。
一、电泳分析仪电泳分析仪可分为两大类:临床实验室常规类,如全自动荧光/可见光双系统电泳仪、全自动醋纤膜电泳仪、全自动琼脂糖电泳仪和全自动琼脂糖电泳仪;科研为主兼做临床样本类,如双向电泳及双向电泳2液相色谱2质谱联用、高效毛细管电泳及高效毛细管电泳2质谱联用、高效毛细管芯片电泳、DNA测序系统。
1. 全自动荧光/可见光双系统电泳仪:具有荧光/可见光双系统,在使用荧光试剂项目如肌酸激酶(CK) 、乳酸脱氢酶(LD)同工酶时为全自动。
只需将样品、试剂、琼脂糖凝胶电泳胶片放好后,操作人员可离机完成试验并得到结果,此为全自动电泳仪。
但是使用可见光项目如蛋白电泳,中途人员需返回,将电泳胶片由电泳槽放入染色系统中才可完成试验。
而最大优点是荧光系统全自动且灵敏度高,准确度高并且采用高压、低温系统,只需要20 min即可完成电泳分析,速度非常快。
2. 全自动醋纤膜电泳仪:为可见光单系统,使用醋纤膜电泳片。
自动化程度高,只需将样品、试剂、电泳片放好,人员可离机完成试验得到结果。
但是因为使用醋纤膜致使灵敏度低,无法分析尿蛋白/脑脊液蛋白,对同工酶分析效果也不理想,多半实验室只用于血清蛋白电泳分析。
电泳技术的临床应用完整版
A1AT 等电聚焦电泳
急性炎症电泳图谱
Alpha 2 globulins(α2球蛋白区带)
下列情况中出现下降:
- 肝功能不全 - 血管内溶血
出现两个条带:
- 溶血标本 (结合珠蛋白-血红蛋白复合体) - 结合珠蛋白不同基因型 - 出现单克隆免疫球蛋白(带有大量负电荷)
*Alpha 2条带在电泳图谱中,是一个很特殊的条带. 因为这一条带 中含有五种蛋白: HDL, Haptoglobin, Alpha 2 Macroglobulin, Ceruloplasmin and Gc globulin. 由于结合珠蛋白有不同的基 因表现型, 增加了这一条带的复杂程度. 结合珠蛋白非常靠近 Alpha 1条带; 出现溶血时结合珠蛋白的迁移率会发生改变. 同时, 由于HDL的含量或者是存放过久的标本, HDL的迁移速度可能会 更快.
临床意义
将电泳作为常规检测之一, 基于蛋白含量的 变化, 有助于我们对以下疾病的筛查 :
炎症 营养不良 肺气肿
临床意义
对异常条带的筛查,有助于我们检测下列疾病: 骨髓瘤 巨球蛋白血症(Waldenstrom) 细菌和病毒感染
在这些情况下, 必须要做其他辅助测试, 比如 说免疫固定, 使用不同类型的抗血清对异常蛋 白进行检测. (对于后期治疗有很重要的指导意义)
电泳技术的医学应用
蛋白质电泳分析是实验室必备的检测手 段, 可全面精确, 描绘出患者蛋白质的 全貌. 对疾病的早期诊断, 疗效观察及 预后判断具有非常重要的临床价值.
蛋白的电泳检测
根据使用的染料或者是底物的不同，我 们可以检测到不同类型的蛋白:
血清蛋白 脂蛋白(运送脂类) 各种酶类 血红蛋白
电泳检测
电泳技术的原理及应用总结报告
电泳技术的原理及应用总结报告一、电泳技术的原理电泳是一种利用电场作用力将带电粒子分离的技术。
其基本原理是通过施加电场，使带电粒子在电场中运动，根据粒子的电荷量和电荷性质的不同，使粒子在电场中以不同的速度迁移，从而实现分离。
电泳技术的原理主要包括以下几个方面：1.高分子链带电：电泳分离的主要对象是带电的高分子。
在电场作用下，带电高分子链受到电场力的作用，发生迁移运动。
2.裂解动力：带电高分子链在空间中受电场力的作用下，随着电场力的增大，高分子链发生裂解，形成不同长度的分子片段。
3.正向、反向电泳：根据高分子链的目标分离要素的电荷性质，可以选择正向电泳还是反向电泳。
正向电泳指的是目标分离要素的迁移方向与电场方向一致，利于正带电粒子分离；反向电泳指的是目标分离要素的迁移方向与电场方向相反，利于负带电粒子分离。
4.分离效应：基于带电高分子链裂解的速度和不同长度带电链片段的移动速度差异，实现粒子的分离。
二、电泳技术的应用电泳技术是生物化学、医学、环境科学等领域中广泛应用的分析和分离方法。
以下是电泳技术的一些常见应用：1.DNA分析：电泳技术可以用于DNA序列分析、DNA片段长度测定、DNA芯片检测等。
通过电泳，能够分离检测到的DNA片段，并得到其长度和浓度信息。
2.蛋白质分离：电泳技术常用于蛋白质的分离和定量。
通过电泳，可以将不同大小、不同电荷的蛋白质分离开来，获取蛋白质的特征信息。
3.药物分析：电泳技术在药物分析中有着广泛的应用，可以用于药物成分的指纹图谱分析、药物的纯度检测等。
电泳可以快速、准确地分离和检测药物的组分。
4.环境监测：电泳技术可以用于分析环境样品中的各种离子和有机物质。
通过电泳，可以快速检测水质、大气污染物、土壤污染物等。
5.口腔医学：电泳技术在口腔医学中的应用主要是分离和分析不同牙体质地、牙釉质及牙本质的特征和成分。
总之，电泳技术的原理是通过施加电场，利用电荷性质和粒子大小的差异，实现带电粒子的分离。
Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用ppt课件
多发性骨髓瘤的临床特征： 骨质疏松和溶骨现象 贫血，粒细胞、血小板减少 肾淀粉样变性损害 免疫功能低下，易感增加
36
多发性骨髓瘤的免疫学特征:
血中出现M蛋白,正常Ig水平明显减低 尿中出现M蛋白和轻链蛋白(BJP) 骨髓中浆细胞明显增加 无免疫活性Ig导致免疫功能低下
37
多发性性骨髓瘤诊断标准
1.骨髓中浆细胞>15％，并有异常浆细胞
（骨髓瘤细胞）或骨髓活检为浆细胞瘤。
为主要的诊断依据。 2.血清中出现大
量单克隆免疫球蛋白（M蛋白），
IgG>35g/L；IgA>20g/L；IgD>2.0g/L；
IgE>2.0g/L；IgM>15g/L或尿中出现单
2
发展历程
1809年俄国科学家列 伊斯首先发现电泳现 象
1937年瑞典科学家 Tiselius建立了界面电 泳技术, 并首次证明了 血清是由白蛋白及α, β, γ球蛋白组成的因此获 得1948年诺贝尔化学 奖.
1950年后, 区带电泳
从发展到成熟. 1980
年以来, 毛细管电泳逐
渐受到重视
3
常用的电泳技术
滤纸电泳 醋酸纤维素薄膜电泳 凝胶电泳
琼脂糖凝胶电泳 : 琼脂糖凝胶适用于蛋白质和核酸 的电泳支持介质, 成本低, 结果易保存.
聚丙烯酰胺凝胶电泳 : 最常用的定性分析蛋白质的 电泳方法, 特别是用于蛋白质纯度检测和测定蛋白 质分子量, 一般用于科研.
毛细管电泳 :经典电泳技术和现代微柱分离 相结合的产物
M蛋白在α2～γ区形成浓密区带 用光度计可扫出基底较窄，高而尖锐的蛋白峰 其标准为：
在γ区，蛋白峰的高和宽之比应＞2：1；在 β区和 α2区应＞ 1：1
电泳的应用
电泳的应用电泳是一种常用的生物分离技术，广泛应用于生物医学、生物工程、食品安全等领域。
它通过利用分子在电场中的迁移速度差异，实现对混合溶液中生物大分子的分离和纯化。
本文将介绍电泳的应用及其在不同领域的重要性。
电泳在基因测序中起到了至关重要的作用。
基因测序是研究基因序列的重要手段，而电泳则是测序仪器中不可或缺的核心技术。
通过电泳技术，可以将DNA分子按照大小进行分离，从而得到DNA序列信息。
这项技术的突破使得人们能够更好地理解基因组的结构与功能，对疾病的发生机理有了更深入的认识。
电泳在蛋白质分析中也发挥着重要作用。
蛋白质是生物体中最基本的功能性分子，其结构和功能的研究对于理解生命活动具有重要意义。
电泳技术可以将蛋白质按照电荷、分子量进行分离，从而实现对蛋白质的纯化和鉴定。
通过电泳技术，科学家们可以研究蛋白质的结构、功能和相互作用，为药物研发和疾病治疗提供重要依据。
除了基因测序和蛋白质分析，电泳在医学诊断领域也有重要应用。
例如，在遗传病的筛查中，电泳技术可以对DNA样本进行分析，找出携带有致病基因的个体。
此外，电泳还可以用于病毒和细菌的检测，通过检测其DNA或RNA的特征带电荷，实现对病原体的快速鉴定和定量。
电泳的应用不仅限于生物医学领域，它在食品安全领域也发挥着重要作用。
食品中的添加剂和污染物对人体健康构成潜在威胁，因此对食品中的成分进行准确分析和检测至关重要。
电泳技术可以快速、准确地分析食品中的蛋白质、核酸和多种有机物，从而帮助监管部门确保食品质量和安全。
电泳还在农业科学、环境科学等领域发挥着重要作用。
在农业科学中，电泳可以用于检测作物的基因型、筛选优良品种；在环境科学中，电泳可以用于检测水体和土壤中的污染物，为环境保护和治理提供科学依据。
电泳作为一种重要的生物分离技术，在基因测序、蛋白质分析、医学诊断、食品安全等领域都有广泛应用。
它不仅提高了科学研究的效率和准确性，也为人类健康和生活的改善做出了重要贡献。
Sebia全自动凝胶电泳仪的临床应用
Sebia全自动凝胶电泳仪的临床应用随着生物技术的不断发展，分子生物学在临床诊断和治疗中的应用越来越广泛。
其中，全自动凝胶电泳仪作为一项重要的技术，为临床应用提供了强有力的支持。
本文将重点介绍Sebia全自动凝胶电泳仪及其在临床应用中的优势。
Sebia全自动凝胶电泳仪是一种高效、自动化的分子生物学分析仪器，主要应用于DNA、RNA和蛋白质的分析。
该仪器具有高分辨率、高灵敏度和高重复性的特点，能够提供准确、可靠的检测结果。
疾病诊断：全自动凝胶电泳仪能够通过对特定基因的表达水平进行分析，帮助医生对疾病进行早期诊断和预后判断。
例如，通过对肺癌、乳腺癌等肿瘤相关基因的表达水平进行检测，有助于医生对患者的病情进行准确诊断。
药物筛选：全自动凝胶电泳仪可以用于药物筛选过程中，通过对药物作用靶点的检测和分析，筛选出具有潜在疗效的药物。
这有助于缩短药物研发周期，提高药物研发效率。
遗传病诊断：全自动凝胶电泳仪能够对基因突变进行检测，帮助医生对遗传病进行诊断。
例如，通过对地中海贫血基因的检测，有助于医生对地中海贫血进行诊断。
微生物鉴定：全自动凝胶电泳仪可以用于鉴定细菌、病毒和其他微生物。
通过对微生物的基因组进行分析，有助于医生确定感染源，为感染性疾病的诊断和治疗提供依据。
血液分析：全自动凝胶电泳仪可以用于血液分析，帮助医生对血液疾病进行诊断。
例如，通过对血红蛋白、白细胞和血小板等血液成分的分析，有助于医生对贫血、白血病和血小板减少等疾病进行诊断。
优势：全自动凝胶电泳仪具有自动化、高分辨率和高灵敏度等优势，能够提供准确、可靠的检测结果。
该仪器操作简便，能够大大缩短检测时间，提高检测效率。
局限性：全自动凝胶电泳仪的价格较高，限制了其在临床的广泛应用。
该技术的灵敏度和特异性受限于检测样本的质量和数量，需要严格控制样本采集和处理的各个环节。
Sebia全自动凝胶电泳仪作为一种高效的分子生物学分析仪器，在临床应用中具有广泛的前景。
电泳技术在蛋白质分离中的应用
电泳技术在蛋白质分离中的应用电泳技术是一种常见的生物化学实验方法，用于分离蛋白质和核酸等生物大分子。
它基于分子在电场中的迁移速率不同，利用电场作用下的电荷差异，使得不同蛋白质分子按照其电荷和尺寸大小迁移速率的差异进行分离。
电泳技术在蛋白质分离中被广泛应用，为生物科学研究和医学诊断提供了强大的工具。
一、蛋白质电泳的基本原理蛋白质电泳是利用蛋白质分子在电场中的电荷差异进行分离的方法。
蛋白质在电场中迁移的速度与其电荷性质以及分子大小有关。
在电泳过程中，将样品加载到聚丙烯酰胺凝胶或者聚丙烯酰胺凝胶电泳板上，然后通电，通过电场作用，使得带有电荷的蛋白质分子向电极迁移。
由于不同蛋白质分子的电荷量和大小不同，所以迁移速率也会有所不同，从而实现了蛋白质的分离。
二、电泳技术的种类1. 等电点电泳(IPG)等电点电泳是一种以蛋白质的等电点为基准来进行分离的技术。
等电点是指蛋白质在水溶液中带有等量正、负电荷时的pH值。
在等电点电泳中，将样品加载到等电点聚丙烯酰胺凝胶上，通电后，蛋白质分子在电场作用下向正电极或负电极迁移，直至达到其等电点处才停止迁移。
这种电泳方式可以根据蛋白质等电点值的差异实现对蛋白质的高分辨率分离。
2. 非变性凝胶电泳(SDS-PAGE)非变性凝胶电泳是一种常见的蛋白质电泳技术，常用于分析样品中的蛋白质组成。
在SDS-PAGE中，样品中的蛋白质会与SDS（十二烷基硫酸钠）一起电泳迁移，SDS会使得蛋白质分子的电荷变得均匀，并且根据蛋白质的分子量大小将其分离开来。
在SDS-PAGE中，将样品加载到聚丙烯酰胺凝胶上，通电后，蛋白质分子向正电极迁移，根据其分子量的不同，蛋白质分子会在电泳过程中停留在不同位置，实现了蛋白质的分离。
三、电泳技术在蛋白质研究中的应用1. 蛋白质纯化与分析电泳技术可以用来纯化和分析复杂混合物中的蛋白质。
通过电泳分离，能够在不同位置上分离出目标蛋白质，然后将其整理收集。
这种方法常用于从细胞提取物或血清中纯化蛋白质。
电泳技术及临床应用
**市中心医院检验科生化室
操作步骤-点样
**市中心医院检验科生化室
操作步骤-选择电泳类型
**市中心医院检验科生化室
操作步骤-烘干染色
**市中心医院检验科生化室
操作步骤-扫描
**市中心医院检验科生化室
电泳结果
**市中心医院检验科生化室
2.血清蛋白电泳看的是什么？
含量的变化 : 条带中蛋白含量增或减
血清蛋白成分简介— β1区
转铁蛋白（TRF）是血浆中主要的含铁蛋白质，分子量7.7万，等电 点5.7，半寿期7天，点泳位于β 1区带。血浆中TRF水平可用于贫血 的诊断和对治疗的监测。TRF在急性时相反应中往往降低。因此在炎 症恶性病变时常随着白蛋白和前白蛋白同时下降，在慢性肝病及营 养不良时亦下降，可作为营养状态的一项指标。妊娠及口服避孕药 或雌激素注射可使血浆TRF升高。 血红素结合蛋白（Hpx）分子量为5.7万。和游离血红素有特异结合 能力，可配合结合珠蛋白对血红蛋白进行处理。当广泛溶血时，血 浆结合珠蛋白耗竭，循环中游离的血红可降解为珠蛋白和血红素两 部分，Hp可与血红素可逆结合，而在血循环中反复利用，这是机体 有效地保存铁的又一种方式。 β -脂蛋白：分子量300万。主要功能脂类的运输。肾病患者或某些 肠道疾病患者，常见导致血浆蛋白丢失，由于肝细胞补偿性的合成 增加，β -脂蛋白可有增加。 C4：补体成分，分子量20.6，属急性时相反应蛋白之一，在炎症、 创伤、心肌梗死、感染、肿瘤等情况下可见升高。
**市中心医院检验科生化室
血清蛋白电泳图谱
白蛋白 α1球蛋白区 α2球蛋白区 Β球蛋白区 Γ球蛋白区
**市中心医院检验科生化室
血清蛋白电泳图谱—正常sebia质控
电泳技术的原理及其应用
电泳技术的原理及其应用1. 引言电泳技术是一种广泛应用于生物学、医学、药物研发和分析化学领域的分离和分析方法。
它基于物质在电场中的迁移速度差异，通过电化学原理将被分析物质分离出来。
本文将介绍电泳技术的原理以及一些常见的应用领域。
2. 电泳技术的原理电泳技术主要基于物质在电场中的迁移速度差异而实现分离。
通过施加电场，带电粒子或溶液中的分子会在电场中运动，而运动速度与其电荷、大小和形状有关。
电泳技术的原理可以归纳为以下几个方面：•电场作用：施加电场可以使带电粒子受到电荷作用力，从而在溶液中迁移。
•电泳介质：电泳介质通常是凝胶，如聚丙烯酰胺凝胶或琼脂糖凝胶。
它们通过限制溶液中溶质的扩散，使分子在凝胶中的运动主要受到电场力的影响。
•迁移速度差异：不同的分子在电场中的迁移速度差异主要由它们的电荷、大小和形状决定。
带有相同电荷的粒子，较大的粒子迁移速度较慢，较小的粒子迁移速度较快。
•检测方法：电泳技术常用的检测方法包括紫外光检测、荧光检测和放射性检测等。
这些方法可以用来检测分离出来的分子，并对其进行分析。
3. 电泳技术的应用电泳技术在生物学、医学、药物研发和分析化学等领域都有广泛的应用。
下面将介绍几个常见的应用领域：3.1 DNA测序DNA测序是电泳技术的一个重要应用领域。
通过电泳技术可以将DNA分子分离出来，根据DNA片段在电泳过程中的迁移速度差异，可以确定DNA序列。
这对于基因组研究、遗传变异分析和疾病诊断等都具有重要意义。
3.2 蛋白质分离与分析电泳技术也常用于蛋白质的分离和分析。
通过电泳技术可以将蛋白质分离出来，并根据其迁移速度差异进行分析。
这在生物学研究和药物研发中都非常常见。
3.3 药物研发电泳技术在药物研发中有着重要的应用。
通过电泳技术可以对药物进行分离和定量分析，从而评估药物的纯度、稳定性和活性等。
这对于药物研发过程中的质量控制非常关键。
3.4 环境分析电泳技术也被广泛应用于环境分析领域。
通过电泳技术可以对环境样品中的污染物进行分离和分析，对于环境监测和污染物治理具有重要意义。
电泳分离技术在生物研究中的应用
电泳分离技术在生物研究中的应用电泳分离技术是一种广泛应用于分子生物学研究中的技术，它能够对不同大小、电荷和形状的分子进行分离和定量分析。
这种技术除了分离DNA、RNA、蛋白质等生物分子外，还可以用于研究分子间的相互作用、分子运动机理、分子表达差异及其与遗传疾病的关联等方面。
本文将详细讨论电泳分离技术在生物研究中的应用及其优势。
1. DNADNA电泳分离技术是进行DNA序列测定、PCR产物检测、基因分型、基因组快速分析等重要技术手段之一。
它利用DNA的电荷和大小差异来将其分离出来。
DNA电泳技术广泛应用于基因克隆、基因诊断、遗传标记筛选等方面。
DNA电泳分离技术很大程度上促进了基因组学、基因技术和生物医学等领域的发展。
DNA电泳分离技术主要有两种：琼脂糖电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳。
琼脂糖电泳适用于较小的DNA片段（1~20 kb），而聚丙烯酰胺凝胶电泳则适用于大分子（超过10kb）DNA。
随着技术的不断发展，DNA电泳分离技术已经成为生物医学和基因组学等领域中必不可少的分析手段。
2. 蛋白质蛋白质电泳分离技术主要用于研究蛋白质结构、表达水平、亚型分离、分子量、等电点等方面的信息。
同样地，蛋白质电泳分离技术也有两种：SDS-PAGE和二维凝胶电泳。
SDS-PAGE可以将复合物中的蛋白质分离出来，以便进一步研究其分子量和构成。
SDS-PAGE被广泛应用于结构生物学、代谢学、蛋白质分析及蛋白质纯化等方面。
二维凝胶电泳（2-DE）可用于实现蛋白质分离作为一种商业技术。
它具有高分离性、高灵敏度、高分辨率和快速分析的特点。
3. 电泳分离技术在生物研究中的优势电泳分离技术在生物研究中的优势是其具有灵敏度、准确度、速度、自动化和适用于多样性样本的特点。
相较于传统的质谱技术，电泳分离技术具有价格较低、预处理较小以及对样品种类适应性强等优点。
同时，电泳分离技术可以经过一番旋转加工便可扩展到蛋白质质量、糖蛋白、DNA捕获等多样性检测领域中。
电泳技术在临床检验中的应用
激导致的 - 急性胰腺炎导致的双白蛋白血症 : 大量的
胰酶的出现可以导致白蛋白降解
双白蛋白血症
g
b a2 a1 Alb
在下列情况下白蛋白会出现下降 :
- 肾病综合症, 蛋白流失, 胃肠病: 检查尿蛋白 - 淋巴细胞增生综合征 - 营养不良 - 肝脏功能不全 - 慢性炎症 - 严重烧伤 - 血液稀释
正确解释电泳结果 有助于临床疾病判断的参考
血清蛋白电泳
电泳条带的鉴定
白蛋白
Alpha-1 Alpha-2 Beta-1 Beta-2 Gamma
白蛋白 Alpha-1 酸性糖蛋白
Alpha-1抗胰蛋白酶 结合珠蛋白
Alpha-2 巨球蛋白
免疫球蛋白 C3补体
转铁蛋白 血液结合素
正常血清标本
含有单克隆免疫球蛋白的血清标本
Heterozygous phenotype of A1AT
Alpha 2 globulins
下列情况中出现下降:
- 肝功能不全 - 血管内溶血
出现两个条带: - 溶血的标本 (haptoglobin-hemoglobin complex) - 出现特殊表型的结合珠蛋白 - 出现迁移率靠近正极端的单克隆免疫球蛋白
电泳技术在临床检验 中的应用
背景简介
电泳：在直流电场中，带电粒子向带符号相反 的电极移动的现象（electrophoresis）
电泳技术就是利用在电场 的作用下，由于待分离样 品中各种分子带电性质以 及分子本身大小、形状等 性质的差异，使带电分子 产生不同的迁移速度，从 而对样品进行分离、鉴定 或提纯的技术
醋酸纤维素薄膜电泳 凝胶电泳 琼脂糖凝胶电泳 : 琼脂糖凝胶适用于蛋白质
电泳技术的临床应用-完整版
电泳技术的临床应用-完整版
电泳技术的临床应用-完整版
一、引言
电泳技术是一种常用的生物分析方法，其在临床应用中发挥着重要的作用。
本文将详细介绍电泳技术在临床应用中的各个方面，包括基本原理、常用技术类型、临床检测方法以及应用案例等。
二、基本原理
电泳技术是利用电场作用下分离物质的一种方法。
其原理基于分子在电场中的迁移速率与其电荷量、形状和大小有关。
主要原理包括凝胶电泳和毛细管电泳两种类型，分别适用于分离大分子和小分子。
本章将详细阐述这两种类型的原理和适用范围。
三、常用技术类型
电泳技术有多种类型，常用的包括聚丙烯酰胺凝胶电泳、蛋白质凝胶电泳、DNA凝胶电泳等。
本章将分别介绍这些常用的技术类型，包括原理、操作步骤和实验条件等。
四、临床检测方法
电泳技术在临床应用中可用于多种检测方法，包括基因突变检测、蛋白质定量和分析、DNA指纹技术等。
本章将详细介绍这些临床检测方法的原理、步骤和应用案例。
五、应用案例
电泳技术在临床应用中有许多成功的案例，本章将选取几个典型的应用案例进行详细介绍，包括基因突变检测在遗传病诊断中的应用、蛋白质电泳在肿瘤标记物检测中的应用等。
六、附录
本文档涉及的附件包括电泳实验数据表格、实验操作图解等。
具体内容请参见附件部分。
七、法律名词及注释
本文所涉及的法律名词及注释包括但不限于：国家药品监督管理局、医疗器械管理法、医疗器械注册证等。
具体的法律名词及注释请见法律名词及注释部分。
电泳技术及临床应用
操作步骤-挂缓冲条和电泳胶片
操作步骤-点样
操作步骤-选择电泳类型
操作步骤-烘干染色
操作步骤-扫描
电泳结果
2.血清蛋白电泳看的是什么？
含量的变化 : 条带中蛋白含量增或减
基于蛋白含量的变化, 有助于我们对以下疾病的筛 查 :炎症 、营养不良、肺气肿等
性质的变化 :异常条带的出现
对异常条带的筛查,有助于我们检测下列疾病:骨髓 瘤、巨球蛋白血症、细菌和病毒感染等
铜蓝蛋白（CER）是一种含铜的α2糖蛋白，分子量12～16万，等电 点4.4，半寿期4.5天，CER也属于一种急性时相反应蛋白。在感染、 创伤和肿瘤时血浆CER增加，在营养不良、严重肝病及肾病综合症时 CER往往下降。妊娠期、口服避孕药时其含量有明显增加。该蛋白最 特殊作用在于协助Wilson病的诊断，既患者血浆CER含量明显下降， 而拌有血浆可透析的铜含量增加。
小儿类脂样肾病时，γ-球蛋白可降低，有时可降低至零； 成人肾病综合症时，γ-球蛋白通常增加，特别是狼疮性肾病。
异常血清蛋白电泳-弥漫性肝损伤型
主要特征： Alb明显降低, α1-球蛋白在轻度时可略增加，但肝细胞破 坏严重时，则α1、α2和β球蛋白通常均降低，在胆汁郁积性肝炎时， α2和β球蛋白可增高，γ-球蛋白轻度或中度增高。
异常血清蛋白电泳-肝硬化型
主要特征： Alb均有不同程度的降低，α1、α2和β球蛋白正 常或降低，γ-G明显增高且宽度增加，可见β-γ桥。
异常血清蛋白电泳-原发性肝癌
主要特征： 在Alb与α1球蛋白之间 出现一小的 区带，称为 甲胎蛋白带。
本项目试验 精确地的限 制这个AFP 区带很难分 清，需要用 高分辨染色
1969 年 Alper 和 Johnson 相继报道了 IFE 在铜蓝蛋 白、 IgG 基因的多态性检 测和 C3 激活后分子转变 中的应用，随后他们又发 表了 IFE 在补体组份基因 多态性和抗胰蛋白酶表现 型鉴别中的研究。
电泳技术在临床上的应用
Oligoclonal pattern(寡克隆免疫球蛋白)
• 血清蛋白电泳是 • M蛋白 (Monoclonal Protein) • 多克隆 (polyclonal Protein) • 寡克隆 (Oligoclonal Protein) • 的首选检测项目
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
多发性骨髓瘤 multiple myeloma
IgE-κ、 IgE-λ
Ig异常合成
• 所谓“异常”一是指合成障碍，二是合成 增殖，γ区带主要成分是Ig，有多株浆细 胞所产生可表现为多克隆、单克隆和寡克 隆。 多克隆性增多，见于反复或慢性感染、自 身免疫性疾病、肝细胞疾病或寄生虫感染， 早期恶性肿瘤有多克隆增殖现象尤其淋巴 瘤，γ区带呈弥散性升高。
电泳结果的临床应用及常见电泳结果分析
• 什么情况下必须进行电泳检测? 血液沉降速度发生异常变化
出现恶性疾病征兆
在免疫球蛋白定量检测中发现 某一种免疫 球蛋白出现大量异常增加
电泳区带分析
白蛋白区带 双白蛋白,或者一条宽峰,或者在白蛋白 条带出现附属条带可能是由以下原因造成 : - 遗传性双白蛋 - 暂时性的双白蛋白血症可能是由于药物刺 激导致的 - 急性胰腺炎导致的双白蛋白血症 : 大量 的胰酶的出现可以导致白蛋白降解
• M蛋白疾病：M蛋白在电泳上表现为高而狭窄的尖峰.
大量单克隆免疫球蛋白
双克隆免疫球蛋白
与下列各类疾病相关的寡克隆免疫球蛋白(多 个条带) :
- 自身免疫病
- 先天性免疫缺陷症
- 病毒感染
(C Hepatitis, HIV disease, CMV(巨细胞病毒), EBV,…)
- 免疫抑制治疗
➢聚丙烯酰胺凝胶电泳 : 最常用的定性 分析蛋白质的电泳方法, 特别是用于蛋 白质纯度检测和测定蛋白质分子量, 一 般用于科研.
Sebia全自动凝胶电泳仪的临床应用
全面评估、辅助诊断、指导治疗
详细描述
Sebia全自动凝胶电泳仪在免疫系统疾病诊断中发挥了重要作用，通过对免疫球蛋白、补体等指标的 检测，全面评估患者的免疫状态。该仪器有助于辅助医生对免疫系统疾病的诊断，并为治疗方案的选 择提供依据。
05
结论
应用效果总结
01
02
03
准确度高
Sebia全自动凝胶电泳仪 在临床应用中表现出高准 确度，能够为临床医生提 供可靠的诊断依据。
科研支持
Sebia全自动凝胶电泳仪在科研领域也具有重要价值，为疾病机制 研究、新药研发等提供技术支持。
对未来发展的展望
技术升级
随着技术的不断发展，Sebia全自动 凝胶电泳仪有望在未来实现更高的检 测灵敏度、分辨率和自动化程度。
应用拓展
个性化医疗
结合基因组学、蛋白质组学等其他技 术，Sebia全自动凝胶电泳仪有望在 个性化医疗领域发挥重要作用，为患 者提供更加精准的治疗方案。
案例二：肿瘤个体化治疗监测
总结词
灵敏度高、实时监测、指导治疗
详细描述
在肿瘤个体化治疗监测中，Sebia全自动凝胶电泳仪能够灵敏地检测肿瘤标志物，如CEA、AFP、CA19-9等，对 肿瘤的复发和转移进行实时监测。通过动态观察肿瘤标志物的变化，可以为医生提供治疗方案的调整依据，实现 个体化治疗。
案例三：免疫系统疾病诊断
儿科
用于新生儿筛查，早期发现和诊断遗传性疾 病。
内科
用于肝病、肾病等全身性病变引起的蛋白异 常的检测。
急诊科
用于快速诊断和分型，为患者提供及时的治 疗。
应用优势
自动化程度高
减少人工操作，降低误差，提高检测的准确性和 可靠性。
电泳技术及应用详解
电泳技术及其应用一：电泳（Electrophoresis）：带电粒子在直流电场中向着所带电性相反的电极移动的现象。
电泳分析技术：利用电泳现象进行物质分离的技术。
二：影响电泳的因素：1．带电粒子的带电状态（电量和电性）。
2．带电粒子的分子量大小和分子形状。
3．电场强度。
4．缓冲液的PH值，组成成分及离子强度。
5．支持介质的吸附和电渗作用。
三：蛋白质电泳的机理1．蛋白质是两性电解质：当 PH=PI时，所带净电荷为零；当 PH>PI时，所带净电荷为负；当 PH<PI时，所带净电荷为正；当 PH距离PI越远时，所带电量越多。
2．不同蛋白质等电点不同，在同一缓冲液中所带电性及电量不同，电泳时迁移的方向和速率不同。
3．不同蛋白质分子量大小和分子形状不同，故迁移率不同。
四：实验：血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳（一）原理：1．人血清蛋白质的分类，等电点，分子量及迁移率：血清蛋白质等电点（PI）分子量（MW）迁移率μ（cm2/s.v）白蛋白（A） 4.8 68500 5.9×10-5α1球蛋白（α1-G） 5.06 >10万 5.1×10-5α2球蛋白（α2-G） 5.06 >10万 4.1×10-5β球蛋白（β-G） 5.12 >10万 2.8×10-5γ球蛋白（γ-G） 6.85-7.3 >10万 1.0×10-5 2．在PH8.6的缓冲液中均带负电，泳向正极。
3．染色漂洗后，可见5条带（定性）。
4．洗脱比色后可定量（今天不做）。
（二）器材和试剂：1．电泳仪 2. 电泳槽 3. 载波片，点样器，镊子4.染缸5. 醋纤膜6. 巴比妥缓冲液7. 氨基黑染液8. 漂洗液（三）操作：1．准备：1）将缓冲液倒于电泳槽中（每池约500ml）。
2）将醋纤膜浸泡在缓冲液中20min。
3）每人取一张醋纤膜（用镊子夹取），用滤纸吸干水分，找到粗糙面，在距一端2cm处划点样线，用铅笔或圆珠笔写上学号。
血清蛋白电泳的临床应用
33
免疫球蛋白电泳结果
浆细胞恶性增殖
多克隆免疫球蛋白 单克隆免疫球蛋白
骨髓瘤
异常电泳结果
M蛋白
34
200 nm
IgG LambdaIgG KΒιβλιοθήκη ppaIgA Lambda
IgA Kappa
IgM Lambda
IgM Kappa
35
正常
多克隆 Igs 异常
单克隆Ig---“M”蛋白
什么是M蛋白
• 单克隆浆细胞恶性增殖产生的均一蛋白 • “M”
- 红细胞
- 粒细胞
- 巨核细胞
3• B淋巴细胞 转化为浆细胞
4• 浆细胞 合成抗体,即免疫球蛋白.
5• 免疫球蛋白 在免疫系统中被用来识别和消 灭如细菌或病毒等外源物
正常浆细胞
免疫球蛋白电泳结果
P1 P2 P3 P4 P5
多克隆免疫球蛋白
正常电泳结果
正常
所有浆淋巴细胞同步合成免疫球蛋白= 多克隆免疫球蛋白
10 种免疫球蛋白
IgA Kappa
IgD Kappa
IgG Kappa
IgM Kappa
IgA Lambda
IgG Lambda
IgM Lambda
IgE Kappa IgD Lambda
IgE Lambda
免疫球蛋白的合成过程
1 骨髓 (颅骨,盆骨, 肋骨, 胸骨)
浆细胞 免疫球蛋白
2
• 造血干细胞分化为3类细胞:
α-1抗胰蛋白（A1AT）缺乏症
Alb a1 a2 b1 b2 g
α-1抗胰蛋白（A1AT）杂合子表型
Alb
a1 a2 b1 b2
g
α 2区：触珠蛋白的不同表型
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何鹏 – 中国区临床应用部总监
使用范围和检测原理
电泳技术就是利用在电场 的作用下, 由于待分离样品 中各种分子带电性质以及 分子本身大小, 形状等性质 的差异, 使带电分子产生不 同的迁移速度, 从而对样品 进行分离, 鉴定或提纯的技 术. 在生化检测中, 主要用于分 离各类蛋白分子.
在5 % 正常群体中 (MGUS)
在多发性硬化患者中: (CSF 90%)
检测结果阐述
电泳的结果是以%的形式给出的, 但是对 于临床诊断, 结果必须要以浓度的形式给 出g/L 蛋白浓度出现异常时,必须要进行其它的 补充检测
患者的随访
首次被发现的患者:
如果检测到的异常M蛋白峰值不多, 同时其他免 疫球蛋白的含量未发生变化,也没有临床症状, 怀疑可能是 MGUS, 第一年每4 至 6个月对患者经性随访,从第二年 起, 每年进行一次随访.
出现在 b 区域的单克隆免疫球蛋白
游离轻链病
Gamma globulins (免疫球蛋白区带)
在下列情况中会出现下降现象:
- 部分的或全部的免疫缺陷 - 免疫抑制治疗 - 游离轻链病或非分泌型骨髓瘤
低免疫球蛋白血症
多克隆免疫球蛋白的增加:
- 炎症 - 肝硬化 - 亚急性和慢性感染
影响电泳分离效果的因素
分离效果影响因素: 介质的选择(例如:琼脂糖浓度)
缓冲液成分 电泳温度 电流和电压 加样方式
电泳技术的医学应用
蛋白质电泳分析是实验室必备的检测手 段, 可全面精确, 描绘出患者蛋白质的 全貌. 对疾病的早期诊断, 疗效观察及 预后判断具有非常重要的临床价值.
蛋白的电泳检测
发展历程
1809年俄国科学家列伊 斯首先发现电泳现象 1937年瑞典科学家 Tiselius建立了界面电泳 技术, 并首次证明了血清 是由白蛋白及球 蛋白组成的因此获得 1948年诺贝尔化学奖. 1950年后, 区带电泳从 发展到成熟. 1980年以 来, 毛细管电泳逐渐受到 重视
正常的电泳图谱
出现单克隆免疫球蛋白的电泳图谱
血清蛋白电泳的目的是什么?
检测异常 :
含量的变化 : 条带中蛋白含量的增加或 减少
性质的变化 : 异常条带的出现
临床意义
将电泳作为常规检测之一, 基于蛋白含量的 变化, 有助于我们对以下疾病的筛查 :
炎症 营养不良 肺气肿
临床意义
对异常条带的筛查,有助于我们检测下列疾病: 骨髓瘤 巨球蛋白血症(Waldenstrom) 细菌和病毒感染 在这些情况下, 必须要做其他辅助测试, 比如 说免疫固定, 使用不同类型的抗血清对异常蛋 白进行检测. (对于后期治疗有很重要的指导意义)
在下列情况中白蛋白会出现增加:
- 脱水症状
- 血液浓缩 - 白蛋白注射
Alpha 1 globulins(α1球蛋白区带)
将会在下列情况下出现下降:
- 蛋白流失 - 肝功能不全 - 先天性抗胰蛋白酶缺乏症 - 抗胰蛋白酶的不同基因型 - 炎症症状
出现两个条带: 出现增加:
A1AT不同的基因型
临床实例
MGUS
意义未明的单克隆免疫球蛋白疾病: Benign MC
在法国,在对献血者进行检测时,会检测到 0,15% 比例的单克隆免疫球蛋白携带者. 在老龄人群中检测到的携带者比例更高 (80岁以上人群). 在对60到99岁人群的检测显示, 出现Ig的比例 从2,6%上升至19,2%. (平均值= 5%)
- 免疫抑制治疗
Oligoclonal pattern(寡克隆免疫球蛋白)
血清蛋白电泳是 M蛋白 (Monoclonal Protein) 多克隆 (polyclonal Protein) 寡克隆 (Oligoclonal Protein) 的首选检测项目
什么是M蛋白
M蛋白疾病(Monoclonal gammapathies, MG) 是由于单一克隆浆细胞无限增殖产生的均一 单克隆蛋白(Monoclonal-proteins)所导致的 一组疾病 M蛋白疾病的“M”含义是Myeloma, Macroglobulinemia, Malignant lymphoma和 Monoclonal Gammapathies均以“M”开头. M蛋白在电泳上表现为高而狭窄的尖峰.
已确诊的患者:
如果电泳结果和先前检测相同, 利用异常峰值进行量 化以便于检测异常M蛋白的浓度是否发生变化.
这种情况下的随访检测,一定要选择相同的技术方法.
如果随访结果显示出现异常区带, 一定要进行免疫 固定电泳确认这些异常蛋白的成分.
多发性骨髓瘤(Multiple Myeloma,MM)
MM是造血系统的恶性肿瘤,占整个恶性肿瘤的1%
常见于中、老年人(50-70岁居多,40岁以下少 见).以往对此病认识不足，漏诊、误诊可达到 70%以上.随着寿命的延长对此病认识的提高病 例数显著增加.
MM临床表现特点
骨痛,骨骼肿块与病理性骨折,骨质疏松和溶骨现象 贫血 免疫功能低下,反复感染 肾脏损害 高钙,高粘(血浆相对黏度6以上)高尿酸血症表现
根据使用的染料或者是底物的不同，我 们可以检测到不同类型的蛋白:
血清蛋白 脂蛋白(运送脂类) 各种酶类 血红蛋白
电泳技术在临检中的应用
急,慢性炎症 造血系统疾病: 多发 性骨髓瘤, 巨免疫球 蛋白血症 肾脏疾病 肝脏疾病 中枢神经系统疾病: 多发性硬化症 遗传性疾病: 地中海 贫血 代谢性疾病: 糖尿病 心血管疾病: 心梗,动 脉粥样硬化 恶性肿瘤
大量报告显示,在下列情况中,发展成为恶性淋巴细胞 增生疾病的可能性很小 : - 单克隆免疫球蛋白:
IgG < 15 g/L IgA < 10 g/L IgM < 5 g/L - 尿蛋白中未出现本周氏蛋白 - 其他类型的免疫球蛋白未出现下降
寡克隆免疫球蛋白
由于药物原因导致的免疫缺陷: - 在器官或者骨移植之后
MM的临床表现多样化,常常因此就诊于 骨科、肾脏内科等,延误诊治
多发性骨髓瘤的免疫学特征
血中出现M蛋白,正常Ig水平明显减低 尿中出现M蛋白和轻链蛋白(BJP) 骨髓中浆细胞明显增加 无免疫活性Ig导致免疫功能低下
多发性骨髓瘤病人溶骨报告(骨盆)
多发性骨髓瘤病人溶骨报告
多发性骨髓瘤病人溶骨报告(颅骨)
在下列情况下会出现两个条带:
- 长期存放的标本或者是高胆固醇的标本, LDL 有不同的迁移率; 从而导致LDL电泳是偏移 Beta位置
Beta球蛋白在下列情况下会出现增加现象:
胆管阻塞 肾病综合征 肝硬化 缺铁性贫血 血球蛋白异常 高脂蛋白血症 大量溶血
β 脂蛋白
酒精性肝硬化中的β-γ 桥
电泳检测ห้องสมุดไป่ตู้
电泳结果的临床应用及常见电泳结果分析
什么情况下必须进行电泳检测?
A/G比例变化 血液沉降速度发生异常变化 出现恶性疾病征兆
在免疫球蛋白定量检测中发现 某一种免疫球蛋白出 现大量异常增加
电泳区带分析
白蛋白区带
双白蛋白,或者一条宽峰,或者在白蛋白条带出现 附属条带可能是由以下原因造成 :
正确解释电泳结果 为临床对疾病的判断提供可靠参考
血清蛋白电泳
白蛋白
a1: a1酸性糖蛋白, a1抗胰蛋白酶 a2: 结合珠蛋白, a2 巨球蛋白, a脂蛋白, 铜蓝蛋白 b : 转铁蛋白, 血液结合素, C3补体, b脂蛋白 g : 免疫球蛋白
蛋白染色
血清蛋白电泳后会呈现出5 或者 6 条带. 染色后,每个条带呈现出的不同程度的染色对应 着各自的蛋白浓度. 如何检测染色程度: 需要使用光密度仪.
MGUS携带者特征:
-未出现临床和影像学特征 -未出现不良反应, 未检测到血钙升高,也未出现肾功 能衰竭 -未见骨髓瘤的临床特征 -单克隆免疫球蛋白 < 20g/l -其他免疫球蛋白都是正常的,同时在患者尿液中未检 测到本周氏蛋白 -单克隆免疫球蛋白的浓度随着时间的推移未发生增 加现象 -其他的免疫球蛋白的浓度也未随时间推移而出现下降
常用的电泳技术
滤纸电泳 醋酸纤维素薄膜电泳 凝胶电泳
琼脂糖凝胶电泳 : 琼脂糖凝胶适用于蛋白质和核酸 的电泳支持介质, 成本低, 结果易保存. 聚丙烯酰胺凝胶电泳 : 最常用的定性分析蛋白质的 电泳方法, 特别是用于蛋白质纯度检测和测定蛋白 质分子量, 一般用于科研.
毛细管电泳 :经典电泳技术和现代微柱分离 相结合的产物
表1
646例M蛋白类型分类
例数 205 93 56 12 5 214 1 2 49 8 % 31.73 14.40 8.67 1.86 0.77 33.13 0.15 0.31 7.59 1.24
型别 IgG型骨髓瘤 IgA型骨髓瘤 IgM型骨髓瘤 IgD型骨髓瘤 重链病 轻链病 半分子病 7S IgM BMG 双M蛋白病
- 遗传性双白蛋 - 暂时性的双白蛋白血症可能是由于药物刺激导 致的 - 急性胰腺炎导致的双白蛋白血症 : 大量的胰酶 的出现可以导致白蛋白降解
双白蛋白血症
双白蛋白血症
在下列情况下白蛋白会出现下降 :
- 肾病综合症, 蛋白流失, 胃肠病: 检查尿蛋白
-
淋巴细胞增生综合征 营养不良 肝脏功能不全 慢性炎症 严重烧伤 血液稀释
检测到其他条带
- 单克隆免疫球蛋白 - 寡克隆免疫球蛋白
高免疫球蛋白血症
血清蛋白021216－狼疮病
血清蛋白030127－酒精肝B-r桥
与下列各类疾病相关的寡克隆免疫球蛋白(多个条 带) :
- 自身免疫病 - 先天性免疫缺陷症 - 病毒感染
(C Hepatitis, HIV disease, CMV(巨细胞病毒), EBV,…)