水果采后病害生防菌的分离筛选及使用途径的研究进展
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从食品工业中经常使用的酵母菌种中也可筛选 出有效的生防菌。Ｆｉｌｏｎｏｗ 等 从 已 存 在 的 菌 种 中 分 离 筛选到了能有效防治贮藏期间苹果灰霉病的酵母菌 Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｈｕｍｉｃｏｌａ ＮＲＲＬ Ｙ１２６６， Ｆｉｌｏｂａｓｉｄｉｕｍ
２４８ Ｎｏ． ８． ２００８
ｆｌｏｒｉｆｏｒｍｅ ＮＲＲＬ Ｙ７４５４， Ｒｈｏｄｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ ｔｏｒｕｌｏｉｄｅｓ ＮＲＲＬ Ｙ１０９１ 和 Ｓｐｏｒｏｂｏｌｏｍｙｃｅｓ ｒｏｓｅｕｓ ＦＳ－ ４３－ ２３８［１０］。 范青等从保存的菌种中分离出洋葱伯克霍尔德氏菌 （ Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ ｃｅｐａｃｉａ ） 、 季 也 蒙 假 丝 酵 母 （ Ｃａｎｄｉｄａ ｇｕｉｌｉｅｒｍｏｎｄｉｉ ） 、 柠 檬 形 克 勒 克 酵 母 （ Ｋｌｏｅｃｋｅｒａ ａｐｉ － ｃｕｌａｔａ）、 汉 逊 德 巴 利 酵 母 （Ｄｅｂａｒｙｏｍｙｃｅｓ ｈａｎｓｅｎｉｉ） 和 枯 草 芽 孢 杆 菌 （Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）Ｂ－ ９１２ 等 ５ 种 拮 抗 菌 对 甜 樱 桃 褐 腐 病 都 表 现 出显著的抑制效果， 其中枯草芽孢杆菌、季也蒙假 丝酵母可完全抑制病害的发生； 季也蒙假丝酵母 和柠檬形克勒克酵母能有效地防治核果类果实采 摘 后 软 腐 病 ［１１］。 １．４ 从土壤中分离
社，２００３：６９９－ ７００
Ｎｏ． ８． ２００８ ２４７
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健康， 化学药剂对人体的毒害已越来越受到社会的 关注， 迫使人们去寻求更安全有效的采后防病新技 术 ［１］。 利 用 微 生 物 生 防 菌 进 行 采 后 病 害 的 生 物 防 治 是 国内外近年来发展起来的一个新的研究领域。本文 介绍水果采后病害生物防治生防菌的分离筛选和使 用途径的研究进展， 为进一步促进生防菌的分离筛 选和使用途径提供新的思路。
关键词： 水果采后病害； 生防菌； 分离； 筛选； 使用途径
中图分类号： ＴＳ ２５５．３
文献标志码： Ｂ
文章编号： １００５－ ９９８９（２００８）０８－ ０２４７－ ０４
Ｒｅ ｖｉｅ ｗ ａ ｄｖａ ｎｃｅ ｓ ｏｎ ｉｓ ｏｌａ ｔｉｏｎ， ｓ ｃｒｅ ｅ ｎ ａ ｎｄ ｕｔｉｌｉｚａ ｔｉｏｎ ｏｆ ｂｉｏ－ ａ ｎｔａ ｇｏｎｉｓ ｔ ｔｏ ｐｏｓ ｔｈａ ｒｖｅ ｓ ｔ ｄｉｓ ｅ ａ ｓ ｅ ｓ ｏｆ ｆｒｕｉｔｓ
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３ 生防菌的利用途径
利用生防菌防治采后病害， 有两条基本途径： （１）利用自然附生于果蔬表面的生防菌； （２）人为引入生 防菌。 ３．１ 自然发生于水果表面的生防菌
人们发现， 植物的叶围和根围自然存在大量的 生防菌， 这些生防菌对抑制病害的发生发展具有不 可忽视的作用。Ｃｈａｌｕｔｚ 和 Ｗｉｌｓｏｎ 发现， 清 洗 后 贮 藏 的柑橘果实比未清洗的果实容易腐烂； 将浓的柑橘 洗果液进行接种培养， 培养基中仅出现酵母菌和细 菌； 而将洗果液稀释后培养， 则出现了病原性霉菌。 这说明柑橘果实上的酵母菌和细菌自发地抑制了病 原菌的生长， 洗果过程中清洗了附生生防菌而使果 实 易 于 染 病 腐 烂［１６］。 迄 今 已 从 苹 果 、 柑 橘 等 果 实 表 面 分离出附生生防菌， 如从苹果的果实及叶上分离的 枝顶孢菌， 能完全抑制引起灰霉病的灰葡萄孢。若调 节采前采后附生生防菌的环境达到最适生长条件， 就会刺激它们增殖， 增强其对病原菌的竞争抑制作 用， 如收获前对芒果树喷施富含营养物的液剂， 能显 著控制芒果炭疽病。但如何以有利有效的方式操纵 附生混合微生物区系中的生防菌种类， 人们尚知之 甚少。 ３．２ 人为引入生防菌
ＭＡ Ｌｏｎｇ－ ｃｈｕａｎ， ＺＨＡＮＧ Ｈｏｎｇ－ ｙｉｎ＊， Ｊ ＩＡＮＧ Ｓｏｎｇ
（Ｃｏｌｌｅ ｇｅ ｏｆ Ｆｏｏｄ ａ ｎｄ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａ ｌ Ｅｎｇｉｎｅ ｅ ｒｉｎｇ， Ｊ ｉａ ｎｇｓ ｕ Ｕｎｉｖｅ ｒｓ ｉｔｙ， Ｚｈｅ ｎｊｉａ ｎｇ ２１２０１３）
Ａｂｓｔｒ ａｃｔ： Ｔｈｅ ｐａｐｅｒ ｐｒｅｓ ｅｎｔｓ ｔｈｅ ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ ｏｆ ｉｓ ｏｌａｔｉｏｎ， ｓ ｃｒｅｅｎ ａｎｄ ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｗａｙ ｏｆ ｂｉｏ － ａｎｔａｇｏｎｉｓ ｔ ｔｏ
作者简介： 马龙传（１９８３—）， 男， 山东金乡人， 硕士研究生， 研究方向为水果采后病害的生物防治。
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２５（６）：５１－ ５２ ［２］ 李络，彭璎，张素苹，等．植酸－ 食用油脂抗氧化剂的应用研
致病作用， 目前控制采后病害的主要方法是使用化 学杀菌剂。然而， 长期的使用化学药剂导致病菌产生 的抗药性降低了化学药剂的防病效果， 同时化学药 剂造成农药在水果上的残毒量的增加威胁着人类的
收稿日期： ２００７－ １２－ ２８
＊ 通讯作者
基金项目： “８６３”计划项目（０６１６０８０７）； 江苏省高校自然科学基金项目（０６ＫＪＢ２１００１３）。
Ｋｅｙ ｗｏｒ ｄｓ： ｐｏｓ ｔｈａｒｖｅｓ ｔ ｄｉｓ ｅａｓ ｅｓ ｏｆ ｆｒｕｉｔ； ａｎｔａｇｏｎｉｓ ｔ； ｉｓ ｏｌａｔｉｏｎ； ｓ ｃｒｅｅｎ； ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ
果蔬采后病害造成的损失是巨大的。据报道， 发达国家有 １０％￣３０％的新鲜果蔬损失于采后的腐烂， 而在发展中国家， 由于缺乏储运冷藏设备， 果蔬腐 烂损失率更高。水果腐烂主要归因于病原微生物的
品科学，２００４，２５（８）：１７７－ １８１ ［８］ Ｃｌａｒｉｓｓａ Ｍ Ｇｕｅｄｅｓ， Ａｌｉｃｅ Ｂ Ｐｉｎｔｏ， Ｒｉｃａｒｄｏ Ｆ Ａ Ｍｏｒｅｉｒａ， ｅｔ
ａｌ． Ｅｕｒ Ｆｏｏｄ Ｒｅｓ Ｔｅｃｈｎｏｌ，２００４，２１９：４６０－ ４６４ ［９］ ＭＹ Ｌｉ， ＧＨ Ｚｈｏｕ， ＸＬ Ｘｕ， ｅｔ ａｌ． Ｃｈａｎｇｅｓ ｏｆ ｂａｃｔｅｒｉａｌ
叶面同样是生防菌的一个好的来源， 因为它 上面有可能分布部分水果微生物区系， 包括含有 具 有 拮 抗 真 菌 作 用 的 微 生 物 。 Ｋｏｒｓｔｅｎ 等 从 酪 梨 水 果 表 面 和 叶 片 上 分 离 出 来 的 Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ 能 有 效 防 治 酪 梨 水 果 采 后 由 Ｐｓｅｕｄｏｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ ｐｕｒｐｕｒｅａ 引 起 的 黑 星 病 ［８］。Ｚｈｏｕ 等 从 叶 片 上 成 功 地 分 离 出 能 有 效 防 治 梨 果 实 采 后 病 害 的 假 单 胞 菌 （Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｙｒｉｎｇｅ）［９］。 １．３ 从已存在菌种中选择
土壤也是一个丰富的生防菌来源。枯草芽孢杆 菌 Ｂ３ 就 是 一 种 从 桃 树 根 部 的 微 生 物 中 分 离 的 生 防 菌， 它是第一株大规模研究的用于采后病害的生物 防治的菌株， 并在桃子褐腐病的生物防治上取得了 成功， 激发了人们对水果采后病害生物防治研究的 兴 趣 ［１２］。 宋 聪 等 从 水 果 、 叶 片 表 面 及 果 园 土 壤 中 分 离 筛选到 １ 株细菌 ２ 株酵母菌， 对梨黑斑病菌 （Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ ｋｉｋｕｃｈｉａｎａ）、柑 橘 青 霉 病 菌 （Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｉｔａｌｉｃｕｍ）都表现出显著的拮抗效果［１３］。 １．５ 其他
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水果采后病害生防菌的分离 筛选及使用途径的研究进展
马龙传， 张红印 ＊， 姜 松 （江苏大学食品与生物工程学院， 镇江 ２１２０１３）
摘要： 论述近年来国内外水果采后病害生物防治生防菌的分离、筛选的方法和使用生防菌防治水果
采后病害的途径的研究进展， 为进一步筛选有效的水果采后病害生防菌提供新思路。
肉的研究［Ｊ］．农业工程学报，２００５，２１（２）：１５７－ １６０ ［６］ 郭 月 红，李 洪 军，廖 洪 波，等．肉 类 食 品 防 腐 保 鲜 技 术 的 研
究进展［Ｊ］．肉类工业，２００５，１１（３）：２３－ ２５ ［７］ 潘 思 轶，王 可 兴，杨 东 旭．魔 芋 涂 膜 保 鲜 冷 却 肉 研 究［Ｊ］．食
ｐｏｓ ｔｈａｒｖｅｓ ｔ ｄｉｓ ｅａｓ ｅｓ ｏｆ ｆｒｕｉｔ ａｎｄ ｓ ｕｇｇｅｓ ｔｓ ｎｅｗ ｌｉｎｅｓ ｏｆ ｒｅｓ ｅａｒｃｈ ｔｈａｔ ｃｏｕｌｄ ｐａｖｅ ｔｈｅ ｗａｙ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｓ ｃｒｅｅｎｉｎｇ ｏｆ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙ ｂｉｏ－ ａｎｔａｇｏｎｉｓ ｔ ｆｏｒ ｐｏｓ ｔｈａｒｖｅｓ ｔ ｄｉｓ ｅａｓ ｅ ｃｏｎｔｒｏｌ．
为了成功地进行生物防治， 选择有潜力的生防 菌的生长条件必须与相关病原菌的生长条件相同或 是相似。不同条件下测定菌株在水果表面伤口上的 定殖能力、对水果上营养物质的利用率、低温和常温 下的生长率， 是检测一种微生物是否可作为果蔬采 后生防菌的重要指标。其他的标准还包括生物防治 剂对果树生存环境的抗性、生防菌对水果的致病性 等， 因为一些有生防潜力的生防菌株会造成一些水 果细微的腐烂和褐变。为了确保人类安全， 当生防菌 作为商品上市时， 必须经过严格的检测， 以保证对人 体 绝 对 安 全 ［１５］。
究［Ｊ］．食品科学，１９９８，（８）：５－ ３７ ［３］ 阎 高 峰，wk.baidu.com 丽 珍．肉 类 食 品 的 保 鲜 技 术［Ｊ］．山 西 食 品 工 业，
２００２，（３）：１２－ １５ ［４］ 王 树 林．鲜 肉 保 鲜 技 术 的 应 用 及 研 究 现 状［Ｊ］．肉 类 工 业，
２００２，１２（２）：１５－ １８ ［５］ 汪 学 荣，阚 建 全，彭 顺 清，等．用 玉 米 醇 溶 蛋 白 涂 膜 保 鲜 牛
除此以外， 从弱毒系中及昆虫生物防治菌中， 也是生防菌的筛选的主要方法。
２ 生防菌的筛选
生防菌筛选方法有离体筛选和活体筛选两种方 法。一般是先将在离体情况下能产生较大抑菌圈的 潜在生防菌筛选出来， 进一步转移到果蔬表面进行 活体拮抗试验， 这样筛选到的生防菌主要是些产生 抗生素的细菌， 但往往遗失了较普遍存在的靠营养竞 争 发 挥 作 用 的 拮 抗 酵 母 类 。Ｗｉｌｓｏｎ 等 认 为 直 接 的 活 体筛选更可取， 这不仅可以避免遗失非抗生机制的 生防菌， 而且也可避免人们产生对含抗菌素物品的 恐 惧 心 理 ［１４］。
１ 生防菌的分离
生物防治工作的基础， 首先是分离、筛选到有 良好拮抗效果的生防菌。一般认为， 从自然的病害系 统中最易发现有效生防菌。 １．１ 从水果表面分离
水果采后病害生防菌的筛选大多是从水果表面 分离得到。水果表面是抵制采后水果腐烂的生防菌 的良好生长源。在病害有可能发生但是还没有发生 的水果部位， 已分离出了许多具有拮抗作用的细菌 和 酵 母 菌［２－ ３］。 因 此 ， 在 果 园 或 贮 藏 的 无 腐 烂 的 水 果 表面寻找生防菌， 成为水果采后生物防治生防菌的 筛 选 首 选 方 法 。 选 用 没 有 管 理 的 果 园 里 （没 施 用 化 肥 农药）的水果可以提高生防菌分离效 果 ， 因 为 在 这 些 水果上自然的微生物群落没有被化学物质破坏， 所 以它潜在的生防菌群落比施用化肥农药的水果上的 多［４－５］。澳大利亚的 Ｈｕａｎｇ 和 Ｗｉｌｄ 等 从柑桔果实表面 分 离 获 得 的 Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｕｍｉｌｕｓ 用 于 防 治 伏 令 夏 橙 的 绿 霉病， 表现出和杀菌剂抑霉哇一样的防效。用于华脐 和里斯本柠檬的绿霉病防效也较好。生防菌也可以 从水果表面的伤口、自然裂缝、含有水果洗液的琼脂 平板以及用水果洗液处理并培养了若干天的水果伤 口处分离［６］。Ｆａｎ 和 Ｔｉａｎ 从桃果实的伤口处成 功地分 离到了能有效防治核果类果实软腐病的酵母菌 （Ｐｉｃｈｉａ ｍｅｍｂｒａｎｅｆａｃｉｅｎｓ）， 该 生 防 菌 可 以 防 治 桃 果 实 的 软 腐 病［７］。 １．２ 从叶面分离
ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ａｎｄ ｍａｉｎ ｆｌｏｒａ ｉｎ ｃｈｉｌｌｅｄ ｐｏｒｋ ｄｕｒｉｎ ｓｔｏｒａｇｅ ｕｓｉｎｇ ＰＣＲ－ ＤＧＧＥ． Ｆｏｏｄ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２００６，２３：６０７－ ６１１ ［１０］ 薛 慧 文．肉 品 卫 生 监 督 与 检 验 手 册 ［Ｍ］．北 京 ：金 盾 出 版
２４８ Ｎｏ． ８． ２００８
ｆｌｏｒｉｆｏｒｍｅ ＮＲＲＬ Ｙ７４５４， Ｒｈｏｄｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ ｔｏｒｕｌｏｉｄｅｓ ＮＲＲＬ Ｙ１０９１ 和 Ｓｐｏｒｏｂｏｌｏｍｙｃｅｓ ｒｏｓｅｕｓ ＦＳ－ ４３－ ２３８［１０］。 范青等从保存的菌种中分离出洋葱伯克霍尔德氏菌 （ Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ ｃｅｐａｃｉａ ） 、 季 也 蒙 假 丝 酵 母 （ Ｃａｎｄｉｄａ ｇｕｉｌｉｅｒｍｏｎｄｉｉ ） 、 柠 檬 形 克 勒 克 酵 母 （ Ｋｌｏｅｃｋｅｒａ ａｐｉ － ｃｕｌａｔａ）、 汉 逊 德 巴 利 酵 母 （Ｄｅｂａｒｙｏｍｙｃｅｓ ｈａｎｓｅｎｉｉ） 和 枯 草 芽 孢 杆 菌 （Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）Ｂ－ ９１２ 等 ５ 种 拮 抗 菌 对 甜 樱 桃 褐 腐 病 都 表 现 出显著的抑制效果， 其中枯草芽孢杆菌、季也蒙假 丝酵母可完全抑制病害的发生； 季也蒙假丝酵母 和柠檬形克勒克酵母能有效地防治核果类果实采 摘 后 软 腐 病 ［１１］。 １．４ 从土壤中分离
社，２００３：６９９－ ７００
Ｎｏ． ８． ２００８ ２４７
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健康， 化学药剂对人体的毒害已越来越受到社会的 关注， 迫使人们去寻求更安全有效的采后防病新技 术 ［１］。 利 用 微 生 物 生 防 菌 进 行 采 后 病 害 的 生 物 防 治 是 国内外近年来发展起来的一个新的研究领域。本文 介绍水果采后病害生物防治生防菌的分离筛选和使 用途径的研究进展， 为进一步促进生防菌的分离筛 选和使用途径提供新的思路。
关键词： 水果采后病害； 生防菌； 分离； 筛选； 使用途径
中图分类号： ＴＳ ２５５．３
文献标志码： Ｂ
文章编号： １００５－ ９９８９（２００８）０８－ ０２４７－ ０４
Ｒｅ ｖｉｅ ｗ ａ ｄｖａ ｎｃｅ ｓ ｏｎ ｉｓ ｏｌａ ｔｉｏｎ， ｓ ｃｒｅ ｅ ｎ ａ ｎｄ ｕｔｉｌｉｚａ ｔｉｏｎ ｏｆ ｂｉｏ－ ａ ｎｔａ ｇｏｎｉｓ ｔ ｔｏ ｐｏｓ ｔｈａ ｒｖｅ ｓ ｔ ｄｉｓ ｅ ａ ｓ ｅ ｓ ｏｆ ｆｒｕｉｔｓ
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３ 生防菌的利用途径
利用生防菌防治采后病害， 有两条基本途径： （１）利用自然附生于果蔬表面的生防菌； （２）人为引入生 防菌。 ３．１ 自然发生于水果表面的生防菌
人们发现， 植物的叶围和根围自然存在大量的 生防菌， 这些生防菌对抑制病害的发生发展具有不 可忽视的作用。Ｃｈａｌｕｔｚ 和 Ｗｉｌｓｏｎ 发现， 清 洗 后 贮 藏 的柑橘果实比未清洗的果实容易腐烂； 将浓的柑橘 洗果液进行接种培养， 培养基中仅出现酵母菌和细 菌； 而将洗果液稀释后培养， 则出现了病原性霉菌。 这说明柑橘果实上的酵母菌和细菌自发地抑制了病 原菌的生长， 洗果过程中清洗了附生生防菌而使果 实 易 于 染 病 腐 烂［１６］。 迄 今 已 从 苹 果 、 柑 橘 等 果 实 表 面 分离出附生生防菌， 如从苹果的果实及叶上分离的 枝顶孢菌， 能完全抑制引起灰霉病的灰葡萄孢。若调 节采前采后附生生防菌的环境达到最适生长条件， 就会刺激它们增殖， 增强其对病原菌的竞争抑制作 用， 如收获前对芒果树喷施富含营养物的液剂， 能显 著控制芒果炭疽病。但如何以有利有效的方式操纵 附生混合微生物区系中的生防菌种类， 人们尚知之 甚少。 ３．２ 人为引入生防菌
ＭＡ Ｌｏｎｇ－ ｃｈｕａｎ， ＺＨＡＮＧ Ｈｏｎｇ－ ｙｉｎ＊， Ｊ ＩＡＮＧ Ｓｏｎｇ
（Ｃｏｌｌｅ ｇｅ ｏｆ Ｆｏｏｄ ａ ｎｄ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａ ｌ Ｅｎｇｉｎｅ ｅ ｒｉｎｇ， Ｊ ｉａ ｎｇｓ ｕ Ｕｎｉｖｅ ｒｓ ｉｔｙ， Ｚｈｅ ｎｊｉａ ｎｇ ２１２０１３）
Ａｂｓｔｒ ａｃｔ： Ｔｈｅ ｐａｐｅｒ ｐｒｅｓ ｅｎｔｓ ｔｈｅ ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ ｏｆ ｉｓ ｏｌａｔｉｏｎ， ｓ ｃｒｅｅｎ ａｎｄ ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｗａｙ ｏｆ ｂｉｏ － ａｎｔａｇｏｎｉｓ ｔ ｔｏ
作者简介： 马龙传（１９８３—）， 男， 山东金乡人， 硕士研究生， 研究方向为水果采后病害的生物防治。
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
２５（６）：５１－ ５２ ［２］ 李络，彭璎，张素苹，等．植酸－ 食用油脂抗氧化剂的应用研
致病作用， 目前控制采后病害的主要方法是使用化 学杀菌剂。然而， 长期的使用化学药剂导致病菌产生 的抗药性降低了化学药剂的防病效果， 同时化学药 剂造成农药在水果上的残毒量的增加威胁着人类的
收稿日期： ２００７－ １２－ ２８
＊ 通讯作者
基金项目： “８６３”计划项目（０６１６０８０７）； 江苏省高校自然科学基金项目（０６ＫＪＢ２１００１３）。
Ｋｅｙ ｗｏｒ ｄｓ： ｐｏｓ ｔｈａｒｖｅｓ ｔ ｄｉｓ ｅａｓ ｅｓ ｏｆ ｆｒｕｉｔ； ａｎｔａｇｏｎｉｓ ｔ； ｉｓ ｏｌａｔｉｏｎ； ｓ ｃｒｅｅｎ； ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ
果蔬采后病害造成的损失是巨大的。据报道， 发达国家有 １０％￣３０％的新鲜果蔬损失于采后的腐烂， 而在发展中国家， 由于缺乏储运冷藏设备， 果蔬腐 烂损失率更高。水果腐烂主要归因于病原微生物的
品科学，２００４，２５（８）：１７７－ １８１ ［８］ Ｃｌａｒｉｓｓａ Ｍ Ｇｕｅｄｅｓ， Ａｌｉｃｅ Ｂ Ｐｉｎｔｏ， Ｒｉｃａｒｄｏ Ｆ Ａ Ｍｏｒｅｉｒａ， ｅｔ
ａｌ． Ｅｕｒ Ｆｏｏｄ Ｒｅｓ Ｔｅｃｈｎｏｌ，２００４，２１９：４６０－ ４６４ ［９］ ＭＹ Ｌｉ， ＧＨ Ｚｈｏｕ， ＸＬ Ｘｕ， ｅｔ ａｌ． Ｃｈａｎｇｅｓ ｏｆ ｂａｃｔｅｒｉａｌ
叶面同样是生防菌的一个好的来源， 因为它 上面有可能分布部分水果微生物区系， 包括含有 具 有 拮 抗 真 菌 作 用 的 微 生 物 。 Ｋｏｒｓｔｅｎ 等 从 酪 梨 水 果 表 面 和 叶 片 上 分 离 出 来 的 Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ 能 有 效 防 治 酪 梨 水 果 采 后 由 Ｐｓｅｕｄｏｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ ｐｕｒｐｕｒｅａ 引 起 的 黑 星 病 ［８］。Ｚｈｏｕ 等 从 叶 片 上 成 功 地 分 离 出 能 有 效 防 治 梨 果 实 采 后 病 害 的 假 单 胞 菌 （Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｙｒｉｎｇｅ）［９］。 １．３ 从已存在菌种中选择
土壤也是一个丰富的生防菌来源。枯草芽孢杆 菌 Ｂ３ 就 是 一 种 从 桃 树 根 部 的 微 生 物 中 分 离 的 生 防 菌， 它是第一株大规模研究的用于采后病害的生物 防治的菌株， 并在桃子褐腐病的生物防治上取得了 成功， 激发了人们对水果采后病害生物防治研究的 兴 趣 ［１２］。 宋 聪 等 从 水 果 、 叶 片 表 面 及 果 园 土 壤 中 分 离 筛选到 １ 株细菌 ２ 株酵母菌， 对梨黑斑病菌 （Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ ｋｉｋｕｃｈｉａｎａ）、柑 橘 青 霉 病 菌 （Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｉｔａｌｉｃｕｍ）都表现出显著的拮抗效果［１３］。 １．５ 其他
贮运保鲜
水果采后病害生防菌的分离 筛选及使用途径的研究进展
马龙传， 张红印 ＊， 姜 松 （江苏大学食品与生物工程学院， 镇江 ２１２０１３）
摘要： 论述近年来国内外水果采后病害生物防治生防菌的分离、筛选的方法和使用生防菌防治水果
采后病害的途径的研究进展， 为进一步筛选有效的水果采后病害生防菌提供新思路。
肉的研究［Ｊ］．农业工程学报，２００５，２１（２）：１５７－ １６０ ［６］ 郭 月 红，李 洪 军，廖 洪 波，等．肉 类 食 品 防 腐 保 鲜 技 术 的 研
究进展［Ｊ］．肉类工业，２００５，１１（３）：２３－ ２５ ［７］ 潘 思 轶，王 可 兴，杨 东 旭．魔 芋 涂 膜 保 鲜 冷 却 肉 研 究［Ｊ］．食
ｐｏｓ ｔｈａｒｖｅｓ ｔ ｄｉｓ ｅａｓ ｅｓ ｏｆ ｆｒｕｉｔ ａｎｄ ｓ ｕｇｇｅｓ ｔｓ ｎｅｗ ｌｉｎｅｓ ｏｆ ｒｅｓ ｅａｒｃｈ ｔｈａｔ ｃｏｕｌｄ ｐａｖｅ ｔｈｅ ｗａｙ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｓ ｃｒｅｅｎｉｎｇ ｏｆ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙ ｂｉｏ－ ａｎｔａｇｏｎｉｓ ｔ ｆｏｒ ｐｏｓ ｔｈａｒｖｅｓ ｔ ｄｉｓ ｅａｓ ｅ ｃｏｎｔｒｏｌ．
为了成功地进行生物防治， 选择有潜力的生防 菌的生长条件必须与相关病原菌的生长条件相同或 是相似。不同条件下测定菌株在水果表面伤口上的 定殖能力、对水果上营养物质的利用率、低温和常温 下的生长率， 是检测一种微生物是否可作为果蔬采 后生防菌的重要指标。其他的标准还包括生物防治 剂对果树生存环境的抗性、生防菌对水果的致病性 等， 因为一些有生防潜力的生防菌株会造成一些水 果细微的腐烂和褐变。为了确保人类安全， 当生防菌 作为商品上市时， 必须经过严格的检测， 以保证对人 体 绝 对 安 全 ［１５］。
究［Ｊ］．食品科学，１９９８，（８）：５－ ３７ ［３］ 阎 高 峰，wk.baidu.com 丽 珍．肉 类 食 品 的 保 鲜 技 术［Ｊ］．山 西 食 品 工 业，
２００２，（３）：１２－ １５ ［４］ 王 树 林．鲜 肉 保 鲜 技 术 的 应 用 及 研 究 现 状［Ｊ］．肉 类 工 业，
２００２，１２（２）：１５－ １８ ［５］ 汪 学 荣，阚 建 全，彭 顺 清，等．用 玉 米 醇 溶 蛋 白 涂 膜 保 鲜 牛
除此以外， 从弱毒系中及昆虫生物防治菌中， 也是生防菌的筛选的主要方法。
２ 生防菌的筛选
生防菌筛选方法有离体筛选和活体筛选两种方 法。一般是先将在离体情况下能产生较大抑菌圈的 潜在生防菌筛选出来， 进一步转移到果蔬表面进行 活体拮抗试验， 这样筛选到的生防菌主要是些产生 抗生素的细菌， 但往往遗失了较普遍存在的靠营养竞 争 发 挥 作 用 的 拮 抗 酵 母 类 。Ｗｉｌｓｏｎ 等 认 为 直 接 的 活 体筛选更可取， 这不仅可以避免遗失非抗生机制的 生防菌， 而且也可避免人们产生对含抗菌素物品的 恐 惧 心 理 ［１４］。
１ 生防菌的分离
生物防治工作的基础， 首先是分离、筛选到有 良好拮抗效果的生防菌。一般认为， 从自然的病害系 统中最易发现有效生防菌。 １．１ 从水果表面分离
水果采后病害生防菌的筛选大多是从水果表面 分离得到。水果表面是抵制采后水果腐烂的生防菌 的良好生长源。在病害有可能发生但是还没有发生 的水果部位， 已分离出了许多具有拮抗作用的细菌 和 酵 母 菌［２－ ３］。 因 此 ， 在 果 园 或 贮 藏 的 无 腐 烂 的 水 果 表面寻找生防菌， 成为水果采后生物防治生防菌的 筛 选 首 选 方 法 。 选 用 没 有 管 理 的 果 园 里 （没 施 用 化 肥 农药）的水果可以提高生防菌分离效 果 ， 因 为 在 这 些 水果上自然的微生物群落没有被化学物质破坏， 所 以它潜在的生防菌群落比施用化肥农药的水果上的 多［４－５］。澳大利亚的 Ｈｕａｎｇ 和 Ｗｉｌｄ 等 从柑桔果实表面 分 离 获 得 的 Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｕｍｉｌｕｓ 用 于 防 治 伏 令 夏 橙 的 绿 霉病， 表现出和杀菌剂抑霉哇一样的防效。用于华脐 和里斯本柠檬的绿霉病防效也较好。生防菌也可以 从水果表面的伤口、自然裂缝、含有水果洗液的琼脂 平板以及用水果洗液处理并培养了若干天的水果伤 口处分离［６］。Ｆａｎ 和 Ｔｉａｎ 从桃果实的伤口处成 功地分 离到了能有效防治核果类果实软腐病的酵母菌 （Ｐｉｃｈｉａ ｍｅｍｂｒａｎｅｆａｃｉｅｎｓ）， 该 生 防 菌 可 以 防 治 桃 果 实 的 软 腐 病［７］。 １．２ 从叶面分离
ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ａｎｄ ｍａｉｎ ｆｌｏｒａ ｉｎ ｃｈｉｌｌｅｄ ｐｏｒｋ ｄｕｒｉｎ ｓｔｏｒａｇｅ ｕｓｉｎｇ ＰＣＲ－ ＤＧＧＥ． Ｆｏｏｄ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２００６，２３：６０７－ ６１１ ［１０］ 薛 慧 文．肉 品 卫 生 监 督 与 检 验 手 册 ［Ｍ］．北 京 ：金 盾 出 版