红细胞检验基本方法2(2014)

红细胞检验的基本方法2

孔虹

kongh@

第三节巨幼红细胞贫血实验室检查(megaloblastic amemia，MgA)

叶酸和/或维生素B

12缺乏或某些影响核

苷酸代谢的药物，导致细胞核脱氧核糖核酸（DNA）合成障碍，核发育障碍所致的贫血。也称脱氧核苷酸合成障碍性贫血。

特点

–呈大细胞性贫血

–骨髓幼红细胞巨幼变

–累及粒系和巨核系

红细胞核苷酸代谢

•叶酸和维生素B

12

在DNA合成中的作用•叶酸的代谢

•维生素B

12的代谢

•叶酸主要由食物供给

•叶酸结合蛋白（FBP）：对叶酸的吸收、转运、贮存有意义•体内叶酸贮存量：５-20mg,每天需要量200μg

•叶酸及其代谢产物主要由肾排

泄

叶酸缺乏

•摄入不足营养不良（绿叶蔬菜缺乏或过分烹煮），酗酒，婴儿未加辅食

•需要量增加妊娠及哺乳，婴幼儿生长及青少年发育期，甲亢，溶血性疾病，恶性肿瘤，脱落性皮肤病（皮肤癌、银屑病）

•吸收利用障碍空肠手术，慢性肠炎，热带口炎性腹泻，麦胶肠病及乳糜泻，药物干扰（叶酸拮抗剂、抗惊厥药物、抗疟药、抗结核药），先天性酶缺陷（缺乏5，10-甲酰基四氢叶酸还原酶等）

•丢失过多血液透析

维生素B

12

的代谢

•来源：维生素B

12来源于食物

•体内维生素B

12贮存量：４-５mg,每天需要

量２-5μg

•吸收与转运：维生素B

12-内因子复合体促进

维生素B

12的吸收

•影响其吸收因素：胃酸、胃蛋白酶减少，内因子缺乏，胰蛋白酶缺乏

•参与体内多种生化反应：DNA合成，腺苷钴胺参与甲基丙二酰辅酶Ａ转变为琥珀酰辅酶Ａ的反应．

•排泄途径：经尿液、粪便排出

维生素B12缺乏

•摄入不足营养不良（素食者、肉类食品缺乏）•吸收利用障碍

–胃酸缺乏（萎缩性胃炎和胃切除后）

–内因子缺乏（全胃切除、存在内因子抗体的恶性贫

血、胃粘膜损伤和萎缩）

–慢性胰腺疾病

–寄生虫竞争（如绦虫病）

–小肠细菌过度生长

–回肠疾患（炎症、手术切除、肿瘤、结核、热带口

炎性腹泻、麦胶肠病及乳糜泻）

发病机制

叶酸缺乏，DNA合成障碍，细胞核发育障碍，细胞分裂减慢，与胞浆的发育不同步，细胞体积增大，呈现形态与功能均不正常的巨型改变，可涉及红、粒、巨核细胞三系，表现为成熟障碍，细胞无效应生成。

维生素B

12缺乏，使甲基四氢叶酸不能形

成四氢叶酸，间接影响DNA的合成。

实验室检查

1、血象

•大细胞性贫血：MCV MCH 均增高•网织红细胞计数可正常

•重者全血细胞减少

•血片：可见红细胞大小不一，中央淡染区小，有大椭圆形红细胞、点彩红细胞

•中性粒细胞核分叶过多

巨幼细胞贫血血象

2、骨髓象

•增生活跃或者明显活跃

•红系增生显著

•巨幼变（胞体大，胞浆成熟，核幼浆老）

•粒系亦有巨幼变

•成熟粒细胞多分叶

•巨核细胞体积增大，分叶过多

•骨髓铁染色增多

巨幼细胞贫血骨髓象

巨幼细胞贫血骨髓象

3、叶酸和维生素B12的检验•血清和红细胞叶酸测定

•血清维生素B12测定

•血清维生素B12吸收试验

•血清内因子阻断抗体测定

血清和红细胞叶酸测定

【原理】

常用化学发光法，样本中叶酸(Folate)与叶酸-ALP结合物争夺一定数量叶酸结合蛋白上的结合位点。产生的复合物再通过小鼠抗叶酸结合蛋白与固相结合。反应完成后，结合在固相上物质置于一个磁场内被吸住，而未结合的物质被冲洗除去。将化学发光底物AMPPD添加到反应管内，已与固相结合的ALP会使该底物发出光子并被光电比色计所检测，反应产生的光子与样品FOL的含量成反比。

【参考值】

血清叶酸

成年男性 8.61 ~ 23.8 nmol/L

女性 7.93 ~ 20.4 nmol/L

红细胞叶酸

成人 340 ~ 1020 nmol/L红细胞

临床意义

(1)血清叶酸缺乏常见于巨幼细胞性贫血，血细胞的发育和成熟在叶酸缺乏时

会受影响，引起细胞巨幼性改变，导致

巨幼细胞性贫血发生。

(2)在细胞增殖性疾患，如急性白血病、慢性溶血及肿瘤时，叶酸的需要量增加，也会表现血清叶酸相对缺乏。

•红细胞与血清的叶酸浓度相差几十倍，体内组织叶酸缺乏但未发生巨幼细胞贫血时，对判断叶酸缺乏更有价值。红细胞叶酸减低有助于诊断由于叶酸缺乏引起的巨幼细胞贫血。

•由于红细胞叶酸不受叶酸摄入情况的影响，红细胞叶酸测定能反映机体总体及组织叶酸水平，更能代表体内叶酸的实际情况。

血清维生素B

测定

12

【原理】

采用化学发光法，样本中的VB

与内因子-ALP结

12

合物进行结合，以阻止结合物与固相抗内因子的结合。

反应完成后，结合在固相上物质置于一个磁场内被吸住，而未结合的物质被冲洗除去。将化学发光底物AMPPD添加到反应管内，已结合的ALP会使该底物发出光子并被光电比色计所检测，反应产生的光子与样的含量成反比。

品中VB

12

【参考值】

成人 148 - 660 pmol/L／L