抗核抗体检测和临床意义张瑾培训课件
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抗核抗体ANA检测与临床应用演示文稿
伴有狼疮肾炎的严重SLE的生物标记物
核均质: 抗核小体抗体(ANuA)
靶抗原: dsDNA-组蛋白-复合物的构象决定簇
方法: IIFA ELISA, Blot
临床意义: SLE, 阳性率 50-95% (特异性100%)
抗核小体 ELISA: 敏感性、特异性、疾病活动度
分组
n
抗核小体阳性
SLE
233
干燥综合症
41
皮肌炎/多肌炎
40
EUROIMMUN
HEp-2细胞: 筛查不同的自身抗体
均质型
核点型
着丝点型
核仁型
Scl-70
Sm/RNP
SS-A/SS-B
核膜型 核糖体P蛋白
AMA
高尔基体
溶酶体
肌动蛋白
波形蛋白
慢性炎症性结缔组织病 (CICTD)
Systemischer Lupus Erythematodes (SLE) 系统性红ds斑D狼NA疮 (SLE)
正常人
95－100 80－100
100 100 20－40 20－50 85－95 30－50 70－80 30－40
26 5-10
美国风湿学会(ACR)立场声明
• HEp-2 细胞包含大约100 至150 种自身抗原 • 其它初筛方法仅具有少量自身抗原
…大约 35% SLE患者和IFT-ANA阳性患 者在其它初筛实验中为阴性结果…
抗核抗体ANA检测与临床应用演示文稿
抗核抗体（ANA）
检测与临床应用
抗核抗体的定义
传统定义：针对细胞核成分的自身抗体的总称。
广义定义：针对细胞内所有抗原成分的自身抗体的总称。对ANA的理 解不再局限于核成分，而是指核酸和核蛋白抗体的总称
核均质: 抗核小体抗体(ANuA)
靶抗原: dsDNA-组蛋白-复合物的构象决定簇
方法: IIFA ELISA, Blot
临床意义: SLE, 阳性率 50-95% (特异性100%)
抗核小体 ELISA: 敏感性、特异性、疾病活动度
分组
n
抗核小体阳性
SLE
233
干燥综合症
41
皮肌炎/多肌炎
40
EUROIMMUN
HEp-2细胞: 筛查不同的自身抗体
均质型
核点型
着丝点型
核仁型
Scl-70
Sm/RNP
SS-A/SS-B
核膜型 核糖体P蛋白
AMA
高尔基体
溶酶体
肌动蛋白
波形蛋白
慢性炎症性结缔组织病 (CICTD)
Systemischer Lupus Erythematodes (SLE) 系统性红ds斑D狼NA疮 (SLE)
正常人
95－100 80－100
100 100 20－40 20－50 85－95 30－50 70－80 30－40
26 5-10
美国风湿学会(ACR)立场声明
• HEp-2 细胞包含大约100 至150 种自身抗原 • 其它初筛方法仅具有少量自身抗原
…大约 35% SLE患者和IFT-ANA阳性患 者在其它初筛实验中为阴性结果…
抗核抗体ANA检测与临床应用演示文稿
抗核抗体（ANA）
检测与临床应用
抗核抗体的定义
传统定义：针对细胞核成分的自身抗体的总称。
广义定义：针对细胞内所有抗原成分的自身抗体的总称。对ANA的理 解不再局限于核成分，而是指核酸和核蛋白抗体的总称
抗核抗体测定课件
6
.
抗组蛋白抗体
抗组蛋白抗体（anti-histonic antibody,AHA）： 由H1、H2A、H2B、H3和H4五个亚单位，各自都 有特异性抗体；
检 出 百 分 率
100
90
药物诱导 性狼疮只 能检出此
SLE
70 AHA
AHA
抗 dsDNA
50
AHA
7
.
抗ENA抗体
可提取性核抗原 (extractable nuclear antigen,ENA) 是盐水或磷酸盐缓冲液可提取性核抗原的总称，是非 组蛋白的核蛋白，属酸性核蛋白抗原，由许多小分子量 的RNA和多肽组成。
1.荧光免疫法
形成胞核基质—ANA—抗人Ig ·FITC 将患者血清先进行稀释，可以做定量试验，在1:80
稀释仍呈阳性时，对SLE的诊断有较大的参考价值。
13
.
间接法： 第一步：荧光素标记抗抗体
第二步：已知Ag固定＋待测Ab——洗涤
再加入抗Ab* ——洗涤——镜检。
Ag Ab（？）
抗－
Ab*
特点： 1.制备一种荧光抗体，可检测多种Ag或Ab。 2.既可检测Ag，又可检测Ab。 3.灵敏度高，但易产生非特异性荧光
27
.
Thank you!
28
在某些因素作用下改变细胞核某些成分性质， 激发机体产生许多抗不同核成分的抗体；
2
.
抗核抗体在多种自身免疫病中均呈不同程 度的阳性率
如系统性红斑狼疮（SLE，95%~100%）、 类风湿性关节炎（RA，10%~20%）、 混合性结缔组织病（MCTD，80%~100%）、 干燥综合症（SS,10%~40%）、 全身性硬皮病（85%~90%）、 狼疮性肝炎（95%~100%）、 原发性胆汁性肝硬化（95%~100%）等，
.
抗组蛋白抗体
抗组蛋白抗体（anti-histonic antibody,AHA）： 由H1、H2A、H2B、H3和H4五个亚单位，各自都 有特异性抗体；
检 出 百 分 率
100
90
药物诱导 性狼疮只 能检出此
SLE
70 AHA
AHA
抗 dsDNA
50
AHA
7
.
抗ENA抗体
可提取性核抗原 (extractable nuclear antigen,ENA) 是盐水或磷酸盐缓冲液可提取性核抗原的总称，是非 组蛋白的核蛋白，属酸性核蛋白抗原，由许多小分子量 的RNA和多肽组成。
1.荧光免疫法
形成胞核基质—ANA—抗人Ig ·FITC 将患者血清先进行稀释，可以做定量试验，在1:80
稀释仍呈阳性时，对SLE的诊断有较大的参考价值。
13
.
间接法： 第一步：荧光素标记抗抗体
第二步：已知Ag固定＋待测Ab——洗涤
再加入抗Ab* ——洗涤——镜检。
Ag Ab（？）
抗－
Ab*
特点： 1.制备一种荧光抗体，可检测多种Ag或Ab。 2.既可检测Ag，又可检测Ab。 3.灵敏度高，但易产生非特异性荧光
27
.
Thank you!
28
在某些因素作用下改变细胞核某些成分性质， 激发机体产生许多抗不同核成分的抗体；
2
.
抗核抗体在多种自身免疫病中均呈不同程 度的阳性率
如系统性红斑狼疮（SLE，95%~100%）、 类风湿性关节炎（RA，10%~20%）、 混合性结缔组织病（MCTD，80%~100%）、 干燥综合症（SS,10%~40%）、 全身性硬皮病（85%~90%）、 狼疮性肝炎（95%~100%）、 原发性胆汁性肝硬化（95%~100%）等，
抗核抗体检测及临床意义-张瑾
有助于弥漫性结缔组织病的分类和诊断 抗Sm抗体是SLE的标记抗体； 抗Scl-70抗体是SSc的标记抗体； 抗Jo-1抗体是PM/DM的标记抗体； 观察疾病活动度和治疗反应 抗dsDNA抗体 研究发病机理 抗核小体抗体、抗dsDNA抗体
基本概念
ANA荧光核型 ANAs中的常见抗体
抗核抗体
抗核抗体谱（ANAs）
dsDNA 抗核不溶成分
抗DNA抗体 抗核小体抗体
ssDNA
抗组蛋白 H1,H2A, H2B, H3,H4
ANAs
抗Sm,U1RNP,SSA,SSB
抗核可溶成分 （抗ENA）
抗染色体DNA蛋白 抗核仁抗体
抗Scl-70,Jo-1,PM-1
抗rRNP,PCNA…….
抗着丝点抗体（ACA) 抗5sRNA
与预后相关的抗体：抗Scl-70（差）、ACA（好）
案例1
女性，34岁 游走性多关节痛，雷诺现象半年 RF 56U/L；抗CCP抗体阴性； ANA 1：320 （核仁型） 胸部CT：轻度肺间质病变 诊断？治疗？
UCTD ILD 发展为 SSc可能性大 Pred+CTX
抗均质型或核膜型抗体常与SLE有关。
Take Home Massage
抗dsDNA：SLE特异性抗体，与LN及疾病活动度 有关，至少两种方法联合检测（如：
IIF法+ ELISA法）。
抗核小体、抗组蛋白、抗dsDNA三抗体阳性者强烈 提示增殖性LN。 与疾病活动性相关的抗体：抗dsDNA、抗核小体、 抗组蛋白、抗Jo-1、抗rRNP
核 膜
型 (M)
斑 点 型 (S)
抗核抗体检测及临床意义-张瑾(共52张PPT)
减少等有关
抗组蛋白抗体〔AHA〕 〔酶联免疫吸附法 X 2SD)
❖ 可出现于多种结缔组织病，不具有诊断特异性
❖ SLE ：50% 活动期SLE 可达90.2%
❖ 与LN相关，与SLE疾病活动性存在一定意义的相关性
❖ 药物性狼疮〔DIL〕：>90%
❖ 如：异烟肼、苯妥因钠、青霉胺、雌激素等 ❖ 仅有AHA而无其他ANA，强烈支持DIL
❖ ANA：指抗细胞核成分〔DNA，RNA，蛋白质和酶〕 的抗体。ANA存在一个谱。
❖ ANA新概念：抗核酸(Nucleic acid)和核蛋白 (Nucleoprotein)抗体总称
❖ 某些核抗原成分在核仁和 ❖ 胞浆内比核质内更丰富 ❖ (如SSA/RO,Jo-1,rRNP等)
ANA检测方法-IIF法
❖
缺点：过于敏感，同时可能检测到ssDNA抗体和低亲和力dsDNA抗体,而
❖
这两种致病力均不强
❖ 放射免疫法(Farr): ≥20%
❖
优点：对高亲和度DNA抗体的检测优于CL-IIF
❖
缺点：具有放射性，对技术人员身体造成一定影响
❖ 蛋白印迹法〔WB〕
❖ 缺点： dsDNA抗原在纯化包备过程中可变性解链，变成ssDNA,导致假阳性结果
❖ 高滴度抗U1RNP+抗Sm-
MCTD
❖ 抗U1RNP+ 抗Sm+
SLE
❖ 抗U1RNP- 抗Sm+
实验室误差? U1RNP丧失 ?
抗rRNP抗体
❖ 靶抗原：胞浆中60S核糖体大亚基上的磷酸化蛋白
抗rRNP抗体
❖ SLE的高度特异性抗体，与SLE脑病相关 ❖ 常在SLE活动期存在,但不会随病情的缓解立
抗组蛋白抗体〔AHA〕 〔酶联免疫吸附法 X 2SD)
❖ 可出现于多种结缔组织病，不具有诊断特异性
❖ SLE ：50% 活动期SLE 可达90.2%
❖ 与LN相关，与SLE疾病活动性存在一定意义的相关性
❖ 药物性狼疮〔DIL〕：>90%
❖ 如：异烟肼、苯妥因钠、青霉胺、雌激素等 ❖ 仅有AHA而无其他ANA，强烈支持DIL
❖ ANA：指抗细胞核成分〔DNA，RNA，蛋白质和酶〕 的抗体。ANA存在一个谱。
❖ ANA新概念：抗核酸(Nucleic acid)和核蛋白 (Nucleoprotein)抗体总称
❖ 某些核抗原成分在核仁和 ❖ 胞浆内比核质内更丰富 ❖ (如SSA/RO,Jo-1,rRNP等)
ANA检测方法-IIF法
❖
缺点：过于敏感，同时可能检测到ssDNA抗体和低亲和力dsDNA抗体,而
❖
这两种致病力均不强
❖ 放射免疫法(Farr): ≥20%
❖
优点：对高亲和度DNA抗体的检测优于CL-IIF
❖
缺点：具有放射性，对技术人员身体造成一定影响
❖ 蛋白印迹法〔WB〕
❖ 缺点： dsDNA抗原在纯化包备过程中可变性解链，变成ssDNA,导致假阳性结果
❖ 高滴度抗U1RNP+抗Sm-
MCTD
❖ 抗U1RNP+ 抗Sm+
SLE
❖ 抗U1RNP- 抗Sm+
实验室误差? U1RNP丧失 ?
抗rRNP抗体
❖ 靶抗原：胞浆中60S核糖体大亚基上的磷酸化蛋白
抗rRNP抗体
❖ SLE的高度特异性抗体，与SLE脑病相关 ❖ 常在SLE活动期存在,但不会随病情的缓解立
抗核抗体课稿课件
结缔组织病的诊断
结缔组织病是一类以结缔组织病 变为主要表现的疾病，抗核抗体 在结缔组织病的诊断中也具有重
要价值。
抗核抗体在结缔组织病中的阳性 率较高，如系统性红斑狼疮、类
风湿性关节炎等。
通过检测抗核抗体，可以协助诊 断结缔组织病，并对其活动性和
预后做出判断。
系统性红斑狼疮的诊断
系统性红斑狼疮是一种典型的 自身免疫性疾病，抗核抗体在 系统性红斑狼疮的诊断中具有 重要地位。
害密切相关。
在临床实践中的应用价值和发展前景
指导治疗和判断预后
抗核抗体检测在临床实践中可以帮助医生判断疾病的严重程度、 活动性和预后，从而指导治疗。
预测疾病风险
抗核抗体检测可以预测某些自身免疫性疾病的风险，如预测SLE的 风险。
评估治疗效果
抗核抗体检测可以评估治疗效果，例如在RA的治疗中，抗核抗体 滴度的变化可以反映治疗效果。
抗核抗体检测的临床意 义与评估
抗核抗体检测的临床意义
1 2
自身免疫性疾病的诊断
抗核抗体检测对于诊断自身免疫性疾病具有重要 的价值，如系统性红斑狼疮（SLE）、类风湿关 节炎（RA）等。
多种疾病的辅助诊断
抗核抗体检测可辅助诊断多种疾病，如干燥综合 征（SS）、硬皮病（SSc）等。
3
判断疾病的活动性和预后
抗核抗体的产生原因
01
02
03
04
ANA的产生原因尚不明确， 可能与遗传、环境、感染等因
素有关。
遗传因素在ANA的产生中起 着重要作用，如SLE患者的遗
传易感性较高。
环境因素如长期吸烟、接触化 学物质等也可能导致ANA的
产生。
感染因素如病毒或细菌感染也 可能诱发ANA的产生。
抗核抗体检测与临床应用PPT【42页】
52KD, 60KD。
健康人
17%
抗SSA抗体阳性SLE和SS一级亲属 25%
• 抗SSB抗体： 常与抗 SSA抗体伴随出现
• Ro-52 为线性结构 ，可以非特异的与血 清中蛋白结合
(3)抗核糖体P蛋白抗体
抗原: 核糖体60S 亚基中的3种蛋白质
SLE
10%～40%
SLE的高特异性血清标志抗体，特异性为100％
抗nRNP/Sm和Sm抗体的结果解释
抗nRNP/Sm抗 体
73KD RNP
阴性
60KD
55KD
52KD
阳性 5 2 K D
D
32KD RNP
RNP
sm 2 9 K D
28KD
阳性
RNP 1 7 .5 K D
13.5KD
阴性 CO
阳性
Sm、 U1R N P、 RA、
SSA抗 体 阳 性
SSA抗 体 阳 性
Stinton et al., Lupus 15: 394-400, 2007
(3)抗组蛋白抗体
抗原: 组蛋白H1, H2A, H2B, H3, H4 (主要的靶抗原为H1和H2B)
功能: 核小体的组成结构
临床意义: 药物诱导性LE: 100%
(抗组蛋白抗体是该病唯一的标志性抗体)
SLE:
40% - 80%
抗原：动粒中的4种蛋白：A (17 kDa), B(80 kDa), C(140 kDa), D蛋白(50 kDa)。 着丝点蛋白B为主要的靶抗原
功能: 分裂期纺锤体的附着点
相关疾病: 硬化症: 局限型: (CREST综合征) 原发性胆汁性肝硬化
18% 80% - 95%
10%～20%
抗核抗体基本概念及对应临床疾病概述ppt课件
抗体滴度
临床意义
1:80 1:160 1:320 1:640 1:1280 1:2560
阳性，需结合临床表现综合判断 阳性，提示可能存在相关疾病 明确阳性，提示可能存在相关疾病 中等阳性，提示可能存在相关疾病 强阳性，高度提示存在相关疾病 极强的阳性，高度提示存在相关疾病。
H
14
HHOEBp公-2司细间胞接产免品疫系荧列光法（产举品例系）列
考虑到荧光法筛查试验存在主观性强的特点，因此应 以一种客观和现实的态度去面对筛查试验结果
H
10
几个相对常见且重要的荧光核型
均质型
粗颗粒型
着丝点型
核仁型
核膜型.
核点型
核糖体P蛋白
线粒体型
肌动蛋白
H
常见且重要核型的标准 核型表现相对典型 阳性率相对较高 靶抗原相对明确
11
应重视ANA滴度的检测
抗体滴度的临床意义 1、明确界定自身免疫性疾病患者； 2、作为疾病进程、临床疗效和病情预后及转归等的判断指标
类风湿性关节炎 进行性系统性硬化症 多发性肌炎及皮肌炎
干燥综合征 慢性活动性肝炎
溃疡性结肠炎 其它风湿病 正常人
95－100 80－100 100 100 20－40 20－50 85－95 30－50 70－80 30－40 26 5-10
H
4
ANA实验室检测策略推荐
H
5
ANA间接免疫荧光法筛查实验
40 S 亚基
P1 P1
P0
60 S
亚基
P2 P2
▪相关疾病: SLE: 为SLE的高特异性指标，阳性率为5-15%，常见于神经狼疮。
H
31
AMA与AMA-M2
抗核抗体PPT课件
10
ANA阳性核型示意图
11
1、CTD:SLE、RA、SSc、PM/DM、SS、MCTD、 DIL等 2、SLE、SSc、SS的一级亲属中近一半者 3、肺疾病：原发性肺纤维化、原发性肺动脉高
压、石棉肺等 4、肝脏病：慢性活动性肝炎（CAH）、原发性
胆汁性肝硬化（PBC）酒精性肝病、自身免 疫性肝炎（AIH）等
抗核抗体谱及其临床意义
中国医科大学附属第一医院 风湿免疫科 侯平
1
常见的结缔组织病（CTD） 系统性红斑狼疮SLE 类风湿关节炎RA 系统性硬化症SSc 多发性肌炎/皮肌炎 PM/DM 干燥综合征 Sjögren sydrome, SS 混合性结缔组织病mixed CTD, MCTD 重叠综合征overlapping syndrome,OLS 药物性狼疮drug-induced lupus,DIL
5
三 对流免疫电泳法（counter immunoelectrophorsesis, CIE）
ID的改良方法，是其它检测方法的补充试验 四、免疫印迹法（immuno blot test, IBT）
从分子水平测定各种抗体，但不能作滴度测 定 五、酶联免疫吸附法（ELISA） 是一种定量检测法，敏感性高，特异性较强
15
抗DNA抗体及其临床意义 抗脱氧核糖核酸抗体 简称抗DNA抗体。
分为两种。 (一)抗双链DNA(double-stranded DNA)抗体
即 抗ds-DNA抗体。用马疫锥虫间接免疫荧光 方法（TE-IIF），在SLE阳性率40%。 临床意义： 1、是SLE的标志抗体 2、抗体效价的高低与疾病活动程度呈正相关。 3、用于观测SLE病情变化及药物治疗效果。 4、此抗体阳性易致狼疮性肾炎（LN）
ANA阳性核型示意图
11
1、CTD:SLE、RA、SSc、PM/DM、SS、MCTD、 DIL等 2、SLE、SSc、SS的一级亲属中近一半者 3、肺疾病：原发性肺纤维化、原发性肺动脉高
压、石棉肺等 4、肝脏病：慢性活动性肝炎（CAH）、原发性
胆汁性肝硬化（PBC）酒精性肝病、自身免 疫性肝炎（AIH）等
抗核抗体谱及其临床意义
中国医科大学附属第一医院 风湿免疫科 侯平
1
常见的结缔组织病（CTD） 系统性红斑狼疮SLE 类风湿关节炎RA 系统性硬化症SSc 多发性肌炎/皮肌炎 PM/DM 干燥综合征 Sjögren sydrome, SS 混合性结缔组织病mixed CTD, MCTD 重叠综合征overlapping syndrome,OLS 药物性狼疮drug-induced lupus,DIL
5
三 对流免疫电泳法（counter immunoelectrophorsesis, CIE）
ID的改良方法，是其它检测方法的补充试验 四、免疫印迹法（immuno blot test, IBT）
从分子水平测定各种抗体，但不能作滴度测 定 五、酶联免疫吸附法（ELISA） 是一种定量检测法，敏感性高，特异性较强
15
抗DNA抗体及其临床意义 抗脱氧核糖核酸抗体 简称抗DNA抗体。
分为两种。 (一)抗双链DNA(double-stranded DNA)抗体
即 抗ds-DNA抗体。用马疫锥虫间接免疫荧光 方法（TE-IIF），在SLE阳性率40%。 临床意义： 1、是SLE的标志抗体 2、抗体效价的高低与疾病活动程度呈正相关。 3、用于观测SLE病情变化及药物治疗效果。 4、此抗体阳性易致狼疮性肾炎（LN）
抗核抗体谱ppt课件
10
抗JO-1抗体
见于多肌炎，阳性率为2535%。常与合并肺间质纤维化 相关。
11
Hale Waihona Puke 抗CENP B抗体 与局限型进行性系统性硬化症（食管功能 障碍、指硬皮病、远端血管扩张）有关， 阳性率为70-90%。在原发性胆汁性肝硬 化患者中也可检测到该抗体（阳性率1030%）。还可出现于雷诺氏综合征中。
12
抗PCNA抗体
PCNA为增殖细胞核抗原，其表达与 细胞周期有关。抗PCNA抗体为系统 性红斑狼疮的特异性抗体，但阳性率 仅为3%。有文献报道，抗PCNA抗体 可能与系统性红斑狼疮患者发展为弥 散性增殖性肾小球肾炎有关。
13
抗DSDNA抗体
对系统性红斑狼疮具有很高的特异性。 除抗Sm抗体外，抗dsDNA抗体也可 作为该病的一个血清学标志，阳性率 为40-90%，并且抗dsDNA抗体滴度 与疾病的活动度相关，可用于疗效监 控。
5
抗SS-A抗体
与各类自身免疫性疾病相关，最常见于干 燥综合征（40-80%）、也见于系统性红 斑狼疮（30-40%）和原发性胆汁性肝硬 化（20%）中，偶见于慢性活动性肝炎。 此外，在100%的新生儿红斑狼疮中抗SSA抗体阳性。该抗体可经胎盘传给胎儿引 起炎症反应和新生儿先天性心脏传导阻滞。
8
抗SCL-70抗体
见于25-75%的进行性系统性硬化 症（弥散型）患者中，因实验方 法和疾病活动性而异。在局限型 硬化症中不出现。（Sclerosis）
9
抗PM-SCL抗体
常见于多肌炎与硬化症的重叠综合 征中，50%的该抗体阳性患者为肌炎 与硬化症的重叠综合征，抗PM-Scl 抗体也可见于单独的多肌炎患者中， 阳性率为8%，在弥散型硬化症中的 阳性率为2-5%。
抗JO-1抗体
见于多肌炎，阳性率为2535%。常与合并肺间质纤维化 相关。
11
Hale Waihona Puke 抗CENP B抗体 与局限型进行性系统性硬化症（食管功能 障碍、指硬皮病、远端血管扩张）有关， 阳性率为70-90%。在原发性胆汁性肝硬 化患者中也可检测到该抗体（阳性率1030%）。还可出现于雷诺氏综合征中。
12
抗PCNA抗体
PCNA为增殖细胞核抗原，其表达与 细胞周期有关。抗PCNA抗体为系统 性红斑狼疮的特异性抗体，但阳性率 仅为3%。有文献报道，抗PCNA抗体 可能与系统性红斑狼疮患者发展为弥 散性增殖性肾小球肾炎有关。
13
抗DSDNA抗体
对系统性红斑狼疮具有很高的特异性。 除抗Sm抗体外，抗dsDNA抗体也可 作为该病的一个血清学标志，阳性率 为40-90%，并且抗dsDNA抗体滴度 与疾病的活动度相关，可用于疗效监 控。
5
抗SS-A抗体
与各类自身免疫性疾病相关，最常见于干 燥综合征（40-80%）、也见于系统性红 斑狼疮（30-40%）和原发性胆汁性肝硬 化（20%）中，偶见于慢性活动性肝炎。 此外，在100%的新生儿红斑狼疮中抗SSA抗体阳性。该抗体可经胎盘传给胎儿引 起炎症反应和新生儿先天性心脏传导阻滞。
8
抗SCL-70抗体
见于25-75%的进行性系统性硬化 症（弥散型）患者中，因实验方 法和疾病活动性而异。在局限型 硬化症中不出现。（Sclerosis）
9
抗PM-SCL抗体
常见于多肌炎与硬化症的重叠综合 征中，50%的该抗体阳性患者为肌炎 与硬化症的重叠综合征，抗PM-Scl 抗体也可见于单独的多肌炎患者中， 阳性率为8%，在弥散型硬化症中的 阳性率为2-5%。
抗核抗体ANA检测与临床应用77页PPT
抗核抗体ANA检测与临床应用
1、纪律是管理关系的形式。——阿法 纳西耶 夫 2、改革如果不讲纪律，就难以成功。
3、道德行为训练，不是通过语言影响 ， 守纪律 、颓废 等不良 行为。 4、学校没有纪律便如磨房里没有水。 ——夸 美纽斯
5、教导儿童服从真理、服从集体，养 成儿童 自觉的 纪律性 ，这是 儿童道 德教育 最重要 的部分 。—— 陈鹤琴
谢谢你的阅读
❖ 知识就是财富 ❖ 丰富你的人生
71、既然我已经踏上这条道路，那么，任何东西都不应妨碍我沿着这条路走下去。——康德 72、家庭成为快乐的种子在外也不致成为障碍物但在旅行之际却是夜间的伴侣。——西塞罗 73、坚持意志伟大的事业需要始终不渝的精神。——伏尔泰 74、路漫漫其修道远，吾将上下而求索。——屈原 75、内外相应，言行相称。——韩非
1、纪律是管理关系的形式。——阿法 纳西耶 夫 2、改革如果不讲纪律，就难以成功。
3、道德行为训练，不是通过语言影响 ， 守纪律 、颓废 等不良 行为。 4、学校没有纪律便如磨房里没有水。 ——夸 美纽斯
5、教导儿童服从真理、服从集体，养 成儿童 自觉的 纪律性 ，这是 儿童道 德教育 最重要 的部分 。—— 陈鹤琴
谢谢你的阅读
❖ 知识就是财富 ❖ 丰富你的人生
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抗核抗体检测和临床意义张瑾
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着 丝 点 型(ACA)
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胞 浆 型 (C)
❖ 与抗胞浆成分有关 ❖ 抗核糖体P蛋白（rRNP）：出现在SLE中 ❖ 抗合成酶：Jo-1、PL-12、PL-7、OJ、EJ ❖ 抗信号识别颗粒（SRP) ❖ 抗线粒体：出现在PBC中 ❖ 抗高尔基体 ❖ 抗溶酶体 ❖ 等等
❖ 某些核抗原成分在核仁和 胞浆内比核质内更丰富 (如SSA/RO,Jo-1,rRNP等)
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ANA检测方法-IIF法
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ANA滴度 ANA核型
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ANA滴度的意义
❖ 结缔组织病的粗筛（>1:160） ❖ 阳性标本还需进一步识别 ❖ 感染、肿瘤及5%正常人可出现低滴度阳性 ❖ ANA阴性基本可以除外SLE ❖ ANA滴度与疾病活动性无明确相关性
见于 PM/DM
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胞 浆 型 (C)
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ANA荧光核型小结
❖ 均质型（H）：像大饼，SLE相关 ❖ 核膜型（M)： 像圈圈，SLE相关 ❖ 斑点型（S）：像藕片，抗ENA ❖ 核仁型（N）：像纽扣，SD相关 ❖ 着丝点型（ACA）：像满天星，抗ACA ❖ 胞浆型（C）：像空心大饼,SLE PM/DM PBC相关 ❖ 混合型：稀释后检测有助于区分
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抗核抗体谱（ANAs）
抗核不溶成分 抗DNA抗体
抗核小体抗体
dsDNA ssDNA
ANAs
抗核可溶成分 （抗ENA）
抗组蛋白 H1,H2A, H2B, H3,H4 抗Sm,U1RNP,SSA,SSB 抗Scl-70,Jo-1,PM-1 抗rRNP,PCNA…….
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抗染色体DNA蛋白 抗核仁抗体
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抗着丝点抗体（ACA) 抗5sRNA
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抗dsDNA检测方法
❖ 以短膜虫或马疫锥虫为底物的间接免疫荧光法(IIF) ：≥1:5
❖ 短膜虫或马疫锥虫的动基体 内含有天然纯dsDNA，未经 人工处理，不含组蛋白与 ssDNA，抗原性纯一特异。
❖ 蛋白印迹法（WB） 缺点： dsDNA抗原在纯化包备过程中可变性解链，变成ssDNA,导致假阳性结果
❖ 不同方法检测SLE患者抗dsDNA抗体的结果： everything is possible
❖ 至少用两种方法做（报告结果时注明方法学）,互为补充。 如：IIF法+ ELISA法
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抗核抗体谱检测的意义
❖ 有助于弥漫性结缔组织病的分类和诊断 抗Sm抗体是SLE的标记抗体； 抗Scl-70抗体是SSc的标记抗体； 抗Jo-1抗体是PM/DM的标记抗体；
❖ 观察疾病活动度和治疗反应 抗dsDNA抗体
❖ 研究发病机理 抗核小体抗体、抗dsDNA抗体
❖ 优点：特异性好
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抗dsDNA检测方法
❖ 酶联免疫吸附法（ELISA）: ≥100IU/ml 优点：敏感性最高 缺点：过于敏感，同时可能检测到ssDNA抗体和低亲和力dsDNA抗体,而 这两种致病力均不强
❖ 放射免疫法(Farr): ≥20% 优点：对高亲和度DNA抗体的检测优于CL-IIF 缺点：具有放射性，对技术人员身体造成一定影响
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核 膜 型 (M)
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斑 点 型 (S)
❖ 与抗ENA成分有关 抗Sm 抗RNP 抗SS-A 抗SS-B
❖ 出现在SLE、MCTD、pSS、SSc、PM/DM等
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斑 点 型 (S)
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荧光显微镜下ANA的染色型别
❖ 均质型（H）
❖ 核膜型（M)
❖ 斑点型（S）
❖ 核仁型（N）
❖ 着丝点型（ACA）
❖ 胞浆型（C）
❖ 混合型
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均 质 型 (H)
❖ 抗组蛋白 ❖ 抗ds/ssDNA ❖ 抗核小体 ❖ 主要出现在SLE中
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பைடு நூலகம்
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❖基本概念 ❖ANA荧光核型 ❖ANAs中的常见抗体
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抗核抗体
❖ 自身抗体：指抗自身组织、器官、细胞及其成分 的抗体
❖ ANA：指抗细胞核成分（DNA，RNA，蛋白质和酶） 的抗体。ANA存在一个谱。
❖ ANA新概念：抗核酸(Nucleic acid)和核蛋白 (Nucleoprotein)抗体总称
风湿免疫性疾病诊断方法
❖症状、体征
❖自身抗体 ❖影像学检查 ❖病理
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风湿免疫性疾病相关自身抗体
❖ 抗核抗体谱（ANAs） ❖ 类风湿关节炎相关抗体(RF, 抗CCP等) ❖ 抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA） ❖ 抗自身免疫性肌炎谱 ❖ 自身免疫性肝病相关抗体谱 ❖ 抗磷脂抗体谱
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均 质 型 (H)
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核 膜 型 (M)
❖ 主要与抗dsDNA有关 与抗原底物片固定方法和备制过程有关 出现在SLE中
❖ 部分与抗核包膜蛋白有关 抗板层素 抗gp210 出现在PBC中
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核 仁 型 (N)
❖ 与抗核仁蛋白有关 抗Scl-70 抗RNA多聚酶I 抗PM-Scl
❖ 出现在SSc中
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核 仁 型 (N)
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着 丝 点 型(ACA)
❖ 与抗着丝点染色质有关 存在于有丝分裂期
❖ 出现在SSc、CREST综合征等中