天然药物化学试验指导试验室注意事项￣.doc

天然药物化学实验指导

目录

室注意事⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯（ 1）一芦丁的提取分离与定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯（ 2）二艾叶及丁香中油的提取定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯（ 5）三从辣椒中分离色素⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯（ 7）四咖啡因的提取与分离⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯（ 8）自薯皂苷元的提取与分离⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯（10）自甘草皂苷元的提取与分离⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯（10）自主⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯（15）

实验室注意事项

天然药物化学实验课具有实验周期长、使用有机溶剂品种多，用量较大等特点，

所用的药品多数是挥发性、易燃、有毒、有腐蚀性、刺激性、实验操作经常在加温，减

压下进行，需要使用各种热源和电器，再加上实验室较为拥挤，若操作不慎，易引起着

火、触电、中毒、爆炸等事故，为确保实验安全顺利进行，特作如下要求。

一、实验前必须预习实验内容，了解实验原理和操作程序，检查仪器是否完整，

装置是否正确，检查合格后方可开始实验。

二、实验室内要保持严肃、安静，不得大声说话打闹；室内严禁吸烟，实验进行

时不得擅自离开，必要时委托专人看管。

三、未经教师允许不得擅自使用明火，需使用明火时，实验台周围不得放置易燃

有机溶剂，如发生火情 ,应保持镇静，立即报告指导教师，同时切断火源，移走易燃品！用湿布闷盖或用灭火器进行灭火，切勿轻易用水，以免扩大火势。

四、实验时要做到整齐、清洁、用过的仪器要及时清洗并收人仪器柜内，保持水

槽、仪器、桌面、地面四洁。

五、回流、蒸馏有机溶剂时，注意检查冷凝水是否通畅，装置不得密闭，接收有

机溶剂时不得使用广口仪器，溶剂瓶不得敞口存放。在进行减压操作时，必须使用安

全瓶，弄清操作程序，以免造成回水等事故。

六、使用挥发性试剂或喷显色剂时，应在窗口或通风橱内操作，不慎溅在桌面上

的化学药品必须立即清除。身体直接接触化学物品后应及时用肥皂及大量水冲洗，如

碱性试剂可用 l ％ HAc 溶液冲洗，酸性试剂可用 3％ NaHCO 3溶液冲洗。不要用酒精、丙酮等洗涤皮肤上的有机物，以免增加皮肤对有毒物质的吸收，眼睛里溅入化学试剂

后，应立即用大量水冲洗，及时到校医室就诊。

七、使用电器设备（如水浴锅、紫外灯、旋转蒸发仪、循环水泵等）一定要按操

作规程进行，不得在烘箱内干燥带有易燃性有机溶剂的仪器或物品，仪器发生故障时

及时报告指导教师，不得擅自拆卸。

八、每次实验结果后的产品，应妥善包装好，贴好标签，写明级别、产率等，放

入干燥器内保存，不得随意丢失。

九、实验结束后，值日生应做好实验室清洁卫生工作，整理好公共仪器、药品，

检查水、电、门窗，经教师检查后方可离去。

实验一芦丁的提取分离与鉴定

一、实验目的

1、掌握碱－酸法提取黄酮类化合物的原理和操作。

2、掌握化学鉴别试验、苷水解、衍生物制备、熔点和薄层层析检查等手段在

苷类结构鉴定中的应用。

二、黄酮类化合物的结构与性质

芦丁（ Rutin ）广泛存在于植物界中，现已发现的含芦丁植物至少在70 种以上，如烟叶，槐花米、荞麦和蒲公英中均含有，其中尤以槐花米（为植物 Sophoru japonica 的未开放的花蕾）和荞麦中含量最高，可作为大量提取芦丁的原料。

提取芦丁的方法很多，目前我国多采用碱提取－酸沉淀法，其提取原理是依据芦

丁结构中含有酚羟基，能与碱反应，生成盐而溶于水中，向此盐溶液中加入酸．则芦

丁游离析出，此外，还可采用水和醇提取法。

芦丁具有 Vp 样作用，有助于保持及恢复毛细血管的正常弹性。主要用作防治高

血压病的辅助治疗剂，多作口服，也可作注射用。

芦丁为淡黄色针晶，含三分子结晶水物的熔点174～ 178℃。无水物熔点188～190℃，微溶于乙酸乙酯、丙酮，不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚等溶剂。

溶解度情况见下表：

结构式如下：

OH

HO O OH OH

OH

O

OH O

OH

O

O CH

2

CH 3 O

OH

OH OH

OH

OH

HO O

OH

OH O 芦丁槲皮素

槲皮素为芦丁的苷元，含两分子结晶水物为黄色针晶（稀乙醇），于95～ 97℃失水， 313～ 314℃分解，槲皮素可溶于甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、吡啶，不溶于水、

乙醚、苯、氯仿、石油醚。

三、芦丁的提取分离和纯化

1、于 500ml 烧杯中加入水 300ml ，硼砂 1g

［ 1

］

加热至沸，投人槐花米粗粉

20g ，

继续直火煮沸 2～ 3 分钟，在搅拌下小心加入石灰乳（

1gCaO+10ml 蒸馏水），调 PH

至 8.5－ 9 ［2 ］

，保持微沸 30 分钟，趁热滤。

2、将滤液放冷至室温，在 60～ 70℃下用浓盐酸调 PH 至 4 ［ ］

3 ，静置 6 小时以上，

析出沉淀，抽滤，用蒸馏水洗沉淀 1～ 2 次至中性。所得沉淀为芦丁粗品。

3、重结晶，将沉淀悬浮于蒸馏水中，加热煮沸 15 分钟，趁热抽滤。滤液充分静

置至不再析出沉淀，过滤，所得沉淀于

60～70℃干燥，得芦丁精制品。

注：［ 1］加硼砂目的是因其能与芦丁结合， 起保护邻二羟基不被氧化破坏的作用，

实验证明提取时加入硼砂，产品质量要好些。

［ 2］加入石灰乳既可达到碱溶解提取芦丁的目的，又可除去槐花米中大量的多糖类粘液质，但 pH 不能过高，否则钙能与芦丁形成螯合物而沉淀析出，煮沸时间不可过长，因其可导致芦丁的降解。

［ 3］ pH 过低会使芦丁形成烊盐而降低收率。

［ 4］利用芦丁冷热水中溶解度差异来达到结晶目的。得到的沉淀要粗称一下，

按照芦丁在热水中 1∶ 200 的溶解度加蒸馏水进行重结晶。

四、芦丁的鉴定

1、芦丁的定性反应：取芦丁 3～4mg ，加乙醇 5～ 6ml 使溶，分成 3 份，做下述试验：

（ 1）取上述溶液 1～ 2rn ｜，加少许镁粉，再加 2 滴浓盐酸，注意观察颜色变化。

（ 2）取上述溶液 1～ 2ml ，滴加 2%的 ZrOCl 2 的乙醇溶液，注意观察颜色变化情况，

再加 2%柠檬酸乙醇溶液，详细记录颜色变化情况 ［ ］

5 。

（ 3）α 一萘酚反应（ Molish ＇ s Reaction ）：取上述溶液 1～ 2ml ，然后加等体积的

10％ α一茶酚乙醇溶液， 摇匀，沿管壁滴加硫酸， 注意观察两液界面产生的颜色变化。

注：［ 5］在样品溶液中加入 2％ ZrOCl 2 的乙醇溶液后，如溶液呈黄色示可能有

C 3-OH 或 C 5-OH ，如再加入 2％柠檬酸乙醇溶液， 黄色不褪示有 C 3-OH ，如黄色褪去，

加水稀释后转为无色，示无 C 3-OH ，但有 C 5 -OH 。（上述两种条件下生成的络合物对

酸的稳定性不同，其中

C 3-OH 、 4 一酮基络合物稳定性大于

C 5-OH 、 4 一酮基络合物

的稳定性）。

2、芦丁水解后苷元与糖的鉴定

（ 1）芦丁水解：称取精制芦丁约1g ，研细，加 2％ H 2SO 4100ml 装人 250ml 锥形瓶

中，加入沸石，直火沸腾后保持2 小时，放冷后抽滤，滤液保留作糖的鉴定。水洗沉 淀后，粗品用 95％乙醇约 10rnl 煮溶回流，趁热过滤，放置加水至 50％左右浓度，得

黄色针晶。 （ 2）苷元的鉴定 1＞苷元的碱降解