食用菌母种制作技术.doc
食用菌母种制作的两种简易方法
食用菌母种制作的两种简易方法
一、灰树花母种制作
1. 收集准备
选择新鲜的床树花,将彩色的花芯拆开,将母种和母粉分离出来,然后收集并保存在干燥的玻璃杯中。
2.加工加工
将母粉放入清水中浸泡2~3小时,然后用手轻轻挤压,将母粉中的器官质质因子都细化拌和均匀,待水质变得透明后即可取出。
3.蒸煮蒸煮
将母粉放入不锈钢锅中,将水添加到母粉的一半位置,然后加入适量盐及其他调料,浓度不应过于浓稠,并将温度调节到90~100℃,蒸煮数小时,直到母粉颜色发生变色,再加入适量的植物油使其更加香,即熟母粉即可回收。
二、松露母种制作
1.收集准备
选择新鲜的松露,将其细切粉末,并加入少量水混合成浆,导出松露的母种。
2.提取精粹
将提取的母种放在碗里,过滤掉母粒状的淤泥,然后将其加入少量水重复搅拌,分离母粉与母粒,然后用一滤纸将母粉过滤至精粹完成。
3.蒸煮母粉
将精粹放入不锈钢锅中,然后加入水、盐、酱油等调料,并加入植物油以香,将温度控制在90~100℃,不时的翻动内容物蒸煮30分钟,再加入少量冷水即可取出。
做出的母粉可直接拌入食物中食用。
一般食用菌母种(一级种)制作
一般食用菌母种(一级种)制作母种制作的基本工艺流程为母种(由科研单位、大专院校、菌种保藏专门机构引进)一培养基制备一接种一培养检查一成品。
(一)常用培养基及配方培养基是食用菌菌种生长所需营养的基质。
培养基要具备四个条件,第一,要含有所培养的菌株生长所需要的各种营养物质,如糖类、有机氮、矿物质等。
第二,所含养分浓度和状态要利于食用菌的吸收和利用。
如食用菌母种培养基使用葡萄糖的浓度多在2%左右,过高和过低都不利于菌丝的生长;食用菌对氮素的吸收优先吸收有机氮,因此,原种和栽培种的培养基中应添加有机氮源,如麦麸、米糠等。
第三,要有适宜的酸碱度(pH),食用菌多数喜偏酸性,pH5.0~6.5。
第四,经过严格灭菌,保持无菌状态。
这最后一点是要通过灭菌才能达到的,然而,灭菌的高温能破坏培养基中的许多化学成分,并能降低pH。
这一点必须在配制时就考虑到。
这就要求从使用的营养型药品试剂上,要尽量选用热稳定性好的种类,配制时,灭菌前的pH要略高于使用时所需的适宜酸碱度。
一般高压蒸汽灭菌0.1~0.12兆帕30分钟,培养基的pH下降0.1~0.3。
高压灭菌切勿压力过高,时间过长,以利培养基保持良好的营养和适宜的pH。
目前食用菌母种生产上使用的都是固体培养基,以琼脂(洋菜)为凝固剂,琼脂的用量从10~24克不等,这依琼脂的质量而定,使用时用量要参考产品使用说明书。
此外,当制作相同培养基时,高温季节要较常量多用些,以利凝固,低温季节可按常量使用;较酸的培养基也要较pH较高的培养基琼脂用量多些。
1.通用培养基通用培养基有多种配方,几乎通用于各类食用菌,常用的配方如下:(1)PDA培养基(马铃薯葡萄糖琼脂培养基) 马铃薯(去皮)200克,葡萄糖20克,琼脂10或20克,水1升。
(2)综合马铃薯培养基马铃薯(去皮)200克,葡萄糖20克,磷酸二氢钾2克,硫酸镁0.5克,琼脂10或20克,水1升。
(3)马铃薯麦麸综合培养基马铃薯200克,麦麸100克,葡萄糖20克,磷酸二氢钾2克,硫酸镁0.5克,琼脂10或20克,水1升。
[基础]食用菌菌种制作技术图文2
[基础]食用菌菌种制作技术图文2三、原种繁殖培养将母种接在瓶或袋的木屑培养基上,通过培养,即成原种。
1、原种棉籽壳木屑培养基配方棉籽壳30kg,木屑50kg,麦麸15kg,复合肥1kg,水135kg。
将上述原、辅料混合拌匀,装入750ml的玻璃菌种瓶内,装料要求下松上紧。
瓶口塞紧棉花塞,再用牛皮纸包住瓶颈与棉塞。
然后置于高压灭菌锅内,在147千帕/cm2压力下灭菌2~2.5小时。
也可进行常压灭菌,在100℃下保持10~11小时,达标后趁热取出,让其冷却。
2、接入菌种待料温降至25℃以下时,在灭菌条件下,将试管种分割成若干块,通过酒精灯火焰迅速接入原种培养基上,每支母种可接4~6瓶原种。
3、发菌培养,去杂选优接种后及时将玻璃菌种瓶移入25℃菌种培养室内进行培养。
空间相对湿度控制在70%以上,避免强光照射。
原种培养时间一般需要30~50天即可。
原种培育过程中,要每天进行观察,如发现有杂菌污染的,则应立即淘汰。
四、栽培种扩大培育1、栽培种制作栽培种的接种、培养方法与原种相似。
就是用原种作菌种扩大。
每瓶原种可扩大50~80瓶。
原种表面菌膜不能作接种用。
在适温条件下培养30~35天即为栽培种,可用于生产栽培。
栽培种可用750ml 菌种专用瓶。
栽培种接种示意图2、使用菌种袋制种由于栽培种使用量大,所以通常多采用聚丙烯菌种袋。
袋的规格有14cm ×28cm、17cm×33cm等,可根据各地习惯选择使用。
培养基灭菌采用常压灭菌灶灭菌,要求灭菌温度达100℃,保持8~10小时,达标后趁热卸袋冷却。
待料温降至25℃以下时,在无菌条件下接入选定品种的原种。
每瓶原种可扩接成50~60瓶栽培种。
菌种培育室要求干净,防强光,室温掌握在23~25℃。
并经常检查,发现杂菌污染应及时淘汰,不断选优去劣。
当菌丝长满袋,尖端菌丝反转上爬1~3cm时,为适龄的栽培种。
五、无菌条件下制种1、接种室的消毒为减少接种过程的杂菌感染,接种室要在接种前进行消毒灭菌。
食用菌母种生产技术
食用菌母种生产技术食用菌母种生产技术母种生产主要包括培养基制备、纯种分离或转管扩大、培养等环节。
一、母种培养基制备1.母种培养基常用配方(1)PDA培养基:马铃薯(去皮,下同)200克,葡萄糖20克,琼脂18-20克,水l000毫升。
(2)加富PDA培养基①综合PDA培养基:马铃薯200克,葡萄糖20克,磷酸二氢钾3克,硫酸镁1.5克,维生素B110毫克,琼脂18-20克,水1000毫升。
②蛋白胨-综合PDA培养基:在加富PDA培养基①中添加5克蛋白胨。
③麦麸-PDA培养基:在培养基(1)中添加100克麦麸。
④麦芽汁-PDA培养基:在培养基(1)中添加50克大麦芽。
(3)鲜蘑菇浸出液培养基:鲜蘑菇200-250克,葡萄糖20克,琼脂18-20克,水1000毫升。
将蘑菇切碎,煮30分钟,取其液汁。
(4)粪汁培养基:干马粪或牛粪150克,葡萄糖20克,琼脂20克,水1000毫升。
将马粪或牛粪打碎,煮沸30分钟,取其溶液。
(5)完全培养基(CM)培养基:蛋白胨2克,葡萄糖20克,磷酸二氢钾0.46克,硫酸镁0.5克,磷酸氢二钾1克,琼脂18-20克,水1000毫升。
2.母种培养基制作方法不同配方培养其制作方法基本相同,现以综合PDA培养基为例介绍其制作方法。
(1)培养基制作。
将土豆洗净、去皮、挖去芽眼及变青绿部分,称取200克,切成约长宽各2厘米厚3毫米左右的薄片,在1200毫升水煮沸10-15分钟,然后用4-6层纱布过滤,倒掉残渣并洗净铝锅。
将滤液倒入锅内,加清水补足 1000毫升,同时放入琼脂并重新开始加热,最好小火加热,不断搅拌至琼脂完全溶化,再用纱布过滤一次,补水至1000毫升。
最后依次将称好的葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁和维生素加入,继续加热并搅拌至全部溶化,停止加热。
如果要加入蛋白胨需将蛋白胨用冷水溶化后加入,可以避免蛋白胨因结块而分散不均。
图3-11 试管分装(2)分装试管。
左手持3-4支试管,管口朝上,令下端整齐,上移试管至漏斗软管,插入试管内约3厘米。
工艺方法——食用菌菌种制作技术
工艺方法——食用菌菌种制作技术工艺简介首先制作优质母种,同时制备母种培养基。
然后将母种放入培养室内,待菌丝长满培养基斜面后,就能用来接原种了。
接着制作原种,并同时制备培养基,当培养基冷却至室温时进行接种,一般经20-25天后便能长满瓶子。
最后制作栽培种,等其长满瓶壁后即可播种。
1、母种培养基配方马铃薯200克,葡萄糖20克,琼脂20克,磷酸二氢钾1克,硫酸镁0.50克,水1000毫升pH值5.50-6.50。
接种培养:按常规法接种后将母种放入培养室内,温度23-25℃,空气相对湿度65%左右培养7-10天,菌丝长满培养基斜面,即可用来接原种。
2、原种配方小麦(玉米):95%;石膏粉:20%过磷酸钙:20%;尿素:0.50%;白糖:0.50%;pH值:5.50-6.50。
2.1.2籽壳:87%;麸皮:10%;蔗糖白糖:0.50%;石膏粉:1%;过磷酸钙:1%;尿素:0.50%;加水120%-130%。
接种培养:A菌的培养基出锅冷却至室温时进行接种,每只试管可接5-6瓶原种。
培养条件同母种,一般经20-25天即可长满瓶子。
注意:酒瓶培养到10-12天需摇瓶,然后再培养。
优质原种的特征是菌丝洁白、整齐,瓶壁及表面布满菌丝,有菇香味。
3、栽培种的制作接种培养:首先用75%酒精或3%来苏儿擦手及原种瓶外消毒,然后用消毒的接种铲翻松原种,在接种箱内(超净工作台上)的酒精灯火焰上方倒少许原种于灭菌的瓶料中,每瓶原种接20-25瓶,培养条件同原种。
一般20-25天即可长满,长满后应立即播种。
若暂时不用,可在10-14摄氏度下干燥保存,时间不超过10天;2-4摄氏度时保存不超过20天。
经低温保存的栽培种,在使用前将菌种放在常温下恢复1-2天。
食用菌固体母种培养技术
食用菌固体母种培养技术食用菌固体母种培养技术1.培养基配方。
①木粒或木屑78%,麦麸20%,白糖、石膏各1%,适用于木腐菌类和需要储存的分离菌种;②高粱78%,麦麸20%,白糖、石膏各1%;③木屑或锯末60%,棉籽壳20%,麦麸18%,白糖、石膏各1%。
2.拌料装瓶。
合成培养基含水率在50%~55%,装入洗净的医用500毫升或250毫升的玻璃瓶至瓶肩或半瓶,在基料中心扎一个到底的透气孔,盛入少量清水,涮去瓶口内壁残留培养基后,倒出多余水分,洗涮时使培养料上层1厘米深度含水量大于55%。
盖上原来的胶盖(胶盖中心提前打直径5毫米的孔,并塞入透气棉塞),高压或常压灭菌。
3.子实体分离培养。
选优质未开伞的子实体,在无菌箱中用75%的酒精冲洗一遍(切勿津洗),把剃须刀片过火消毒后,削去酒精津蚀的菇蕾表面,分割成黄豆粒大小的碎块,放在无菌器皿上。
接种瓶口在酒精灯上烧一圈,将接种针灼烧消毒,稍凉后在酒精灯下粘(或扎牢)分离的接种块,并迅速放入培养基瓶中,瓶盖在酒精灯上烤一遍盖严,在室温24~26℃下按常规方法养菌。
需要长期保存的母种,在菌丝长过培养料四分之一时,用石蜡封住瓶盖中心的棉塞孔,避光、常温下可存放两年以上。
4.出菇试验。
菌丝长到瓶底后,按分离菌种品种的出菇特性催菇。
催菇时不要打开瓶盖,每天给予一次光亮和下行温差刺激,连续进行5~6天,再按子实体需要的温度培养,直到长出菇蕾或子实体成熟。
其中,晚熟型香菇品种,适宜在瓶内菌种的上沿出现黄褐色斑时进行出菇试验。
在封闭的无菌条件下做过出菇试验的菌种,仍然可以按照菌丝体分离法扩制第一代母种或零代原种。
出菇后的菌种,宜在子实体长成菇蕾之前扩种。
实验7 食用菌母种的制作与转管技术
食用菌母种制作与转管技术
实验目 的
掌握了解食用菌组织分离的方法和实际操 作技术;
明确食用菌组织分离在食用菌生产中的重 要性。
实验原理
母种
原种
栽培种
实验原理
1.组织分离法:用子实体的某一部 分来分离菌种的方法。
优势:方法简便,后代不易发生变 异,是食用菌栽培中防止品性退化, 保持优良品种特性常用的一种手段。
121℃高压灭菌15min。
实 验 步骤
2.种菇的选择 选择无病虫害、典型、八成成熟的食用菌子实体。
3. 环境和种菇消毒 在接种箱内,用镊子夹着燃烧的酒精棉球迅速擦拭菇
体。 或选用的子实体用0.1%开汞水或70%酒精表面消毒,
用无菌水冲洗并用无菌纱布擦去表面水分。
实 验 步骤
4.取接组织 将菇体撕开,用无菌尖头镊在柄盖交界处取绿豆粒
应用:此法适宜多数食用菌,是野外工作者和种菇专 业户必须掌握的一种方法。
实验原理
2.钩悬法 是一种特别适用于耳类,也适用于伞菌类的多孢分离
法。
实验原理
3.孢子印分离法 取成熟子实体经表面消毒
后,切去菌柄,在20~ 24℃静置一天,大量孢子 落下形成孢子印。 接种环沾少量孢子在试管 培养基上划线培养。
母种转管视频
实验注意事项
(1)组织块分离法对于胶质的耳类及菇体较小较薄的菇类,如金 针菇等不太适宜。 (2) 此法应严格遵循无菌操作。 (3)纯化菌丝长至斜面1/2时,挑尖丝转管,培养成再生母种。 (4)控制菌龄菌丝即将长满斜面(一般7~10天)终止培养。分 别用于菌种保藏或繁衍原种。 (5)出菇试验将再生母种扩成原种、栽培种,使其出菇。看产量、 质量、形态、长势、抗性如何,鉴定为优质菌种后,才可供生产 使用。
食用菌母种制作方法
食用菌母种制作方法一、食用菌种瓶的选择用100毫升医用盐水瓶代替试管作盛装培养基的容器。
二、培养基的配制1.配方:马铃薯200克,葡萄糖20克,琼脂18~20克,水1000毫升。
2.制作:马铃薯挖去芽眼,去皮洗净,切成薄片后加水,在铝锅中煮沸25~30分钟,用4层纱布过滤,取滤液放入铝锅中,加入琼脂,小火加热并不断搅拌,待琼脂溶化后加入葡萄糖,加开水补足1000毫升,搅匀,趁热装入盐水瓶中,每瓶装8~10毫升,塞上棉塞棉塞要求干燥、松紧、长度合适,再用牛皮纸包住棉塞及瓶口部分,用胶圈扎紧瓶口。
三、灭菌采用高压灭菌,若没有专用高压锅,可用家用高压锅进行灭菌。
方法是:将装好培养基的菌种瓶放置在高压锅中,瓶间留有空隙,不可堆放过紧,以利蒸汽循环,灭菌彻底。
当压力表指针指到0.05时,打开放气阀,集中排出冷空气,使压力降到零时,关闭排气阀进行升压灭菌,自动放气后保持30分钟家用普通高压锅灭菌1.5小时,让其自然冷却,取出放置在接种箱中备用。
四、菌种分离主要采用组织分离法。
通常是从食用菌子实体内部分离纯菌种,操作时,从子实体内切取一小块组织,放在培养基中培养可长出纯菌种,且菌丝萌发快,遗传性状稳定,后代不易发生变异。
1.种菇消毒:种菇采下后,切去菌柄,放入洗净的盘内,在装有紫外灯的接种箱内照射20~30分钟。
2.接种块切取:在已消毒的接种箱内,撕开子实体,用经酒精灯火焰杀菌冷却的小刀,在菌柄与菌盖交接处内部切取黄豆大小组织块,放入菌种瓶内培养基上培养。
3.接种块选择部位:接种块选择部位因食用菌种类不同而异,菇体肥厚的种菇,在菌盖外缘菌盖皮和菌褶交接处切取组织块进行分离。
菌体小、盖薄、柄空的菌类如金针菇,应快速击掉菌盖,用接种针钩取菌柄顶端生长点组织进行分离。
菌肉极薄菌柄中空孢子不易萌发的伞菌类,可采用子实层分离法,选取半破膜的子实体,移入培养基上,菌丝萌发后即转入新的培养基上。
对子实体较大、质地结实的多孔菌类,应取子实体外缘菌肉组织块。
第三章食用菌制种技术五
一、食用菌菌种的分离技术 2.孢子分离
①单孢子分离 ②孢子印分离 ③孢子弹射分离法
一、食用菌菌种的分离技术
4.生物技术育种
①紫外光照射 ②原生质体融合 ③化学药物诱变
一、食用菌菌种的分离技术
5.野生菌菇的驯化
菌种驯化的原理:驯化是通过人工措施使食用菌菌种逐步 适应某一条件,而定向选育菌种的方法。通过驯化可取得 具有较高耐受力、活动能力以及产量的菌株。驯化常用于 野生蘑菇的选育,以获得对人工环境具有较高的适应能力 的高产菌株。
②原种、栽培种质量的鉴定
具有
菌丝白(符合该菌种的颜色) 均匀、粗壮、有菇香味 接种后萌发快
没有
无杂色、无黄水、无结皮、 无原基、无干缩脱壁等现象
菌种种类 品种名称 菌种级别 代时 生产厂家 接种日期
用于生产
产生原基
污染
黄 水
一、菌种的提纯复壮
1.良种的标准和良种的退化
(二)良种的退化 菌种退化是指突然或逐渐丧失原有的生命力和生产性能的 现象。随着菌种保藏时间的延长或菌种的多次转管继代, 菌种本身所具有的优良遗传性状可能得到延续,也可能发 生变异。
外观
好
菌丝白、整齐、粗壮、 有弹性、萌发快等
差Байду номын сангаас
丝干燥、收缩、自溶 产生红褐色液体等
好母种
退化母种
一、菌种的提纯复壮
1.良种的标准和良种的退化
(一)良种的标准 ②二级菌种和三级菌种 二级菌种和三级菌种无 病虫害、无杂菌感染,菌丝洁白,均匀,粗壮浓 密,不萎缩,不发黄,再生力强,移接后萌发快, 吃料快。长满菌种的培养料有菌种特有的香味。
外因 传代过多,条件不适宜
食用菌母种制作-实验一
实验一食用菌母种制作一、目的要求:1、了解母种培养基制作过程,理解灭菌原理;2、掌握母种培养基的制备方法;3、了解无菌操作基本原理,掌握母种的无菌接种培养方法。
4、了解和掌握食用菌组织分离法的方法步骤;5、熟练分离出栽培用菌种。
二、主要仪器设备及药品材料:灭菌锅、超净工作台、酒精灯、电炉、铝锅、漏斗、纱布、菜刀、砧板、烧杯、捆扎绳、硅胶试管塞、试管(18x180mm)、手术刀、镊子、75%酒精、马铃薯、葡萄糖、琼脂、平菇子实体。
三、实验步骤与方法:①培养基的制作1 PDA培养基配方马铃薯200克,葡萄糖20克,琼脂20克,水1000毫升.2. 母种培养基的配制(1)熬制。
马铃薯洗净,挖芽去皮。
称取200克,切成玉米大小颗粒或薄片。
量筒量取1000毫升水,铝锅中煮沸后记时30分钟。
四层纱布过滤于量杯中。
滤液倒入锅中文火加热,加入葡萄糖和琼脂,不断搅拌,直到琼脂溶化。
补足水量至1000毫升。
(2)分装试管。
将熬制的培养基用小漏斗趁热分装。
培养基高度为试管长度的1/5左右,注意避免培养基沾于试管口外。
分装完成后,盖紧硅胶塞。
(3)捆把。
7支试管为一捆,用牛皮纸包裹试管口,用捆扎绳扎紧。
贴上标签,准备灭菌。
(4)灭菌。
注意加足水量和排气,灭菌完成后降压不能太快。
(5)摆斜面,培养基长度约为试管长度的1/2。
斜面试管上覆盖洁净的厚毛巾或几层纱布,防止试管内产生过多的冷凝水。
①菌种分离与培养(1)种菇选择。
选取无杂菌感染,无病虫害,出菇均匀,适应性强的子实体,要求个体健壮,朵大肉厚,外形规整,出菇早,约七八成熟的新鲜子实体。
子实体采收后切去大部分菌柄,放入干净器皿内备用。
(2)母种分离(组织分离法)。
在分离前用75%的酒精棉球擦菇体进行表面消毒,在超净工作台内将子实体撕开,用消毒刀片在菌盖与菌柄交接处的组织上取一小块(绿豆大小)移至试管斜面培养基的适当位置,迅速塞上硅胶塞。
将分离的试管放在室内避光培养7-8天,检查菌丝生长情况。
食用菌母种、原种、栽培种制作步骤
食用菌母种、原种、栽培种制作步骤食用菌菌种的质量对食用菌生产至关重要。
菌种的好坏,菌种的保存直接影响到食用菌的产品质量和产量、效益和成败,所以我们要制作优良的食用菌菌种,更要有优良的菌种保存方法,以保存菌种的生活力和优良性状,确保菌种纯种、无污染。
一、菌种制作食用菌菌种分三种即母种(一级种)、原种(二级种)、栽培种(三级种)1.制作母种(一级种)1.1菌种采集选择健壮无病虫害的食用菌子实体。
经表面消毒后,放在无菌的厚纸上,使子实体菌褶向下,在通风条件下经过12--24h,等子实体放出孢子后,将纸折叠起来风干,放入塑料袋中,里面放几粒干硅胶,封好口,放入2--4℃冰箱中,可保存起来长期备用。
1.2母种培养基制作配方:马铃薯200g、琼脂20g、葡萄糖20g、纯净水1000ml。
先把马铃薯切成大约1cm大的小方块,放入1000ml 纯净水中煮30min,过滤后加入琼脂、0.2-0.3%的磷酸二氢钾、再加入20g葡萄糖,溶解后分别装入试管,每个试管装量1/5-1/4,用棉塞封好试管口,外加塑料膜扎紧,放入压力灭菌锅1.3㎏/cm灭菌30min,待温度降至60℃将试管摆成30-35度倾斜面,冷却后观察几天,无受到杂菌污染即可接种,孢子液用灭菌的自来水将孢子稀释,在无菌操作环境下将孢子悬浮液移到试管琼脂斜面上,在25℃下培养,很容易萌发生长成菌丝,然后用石蜡封口置于4-5℃恒温箱中可保存6个月。
2.制作原种(二级种)将木屑78%、麦麸20%、糖1%、石膏1%加入水拌匀(100kg料加125kg水),培养基原料拌匀后拿试纸测ph 值,ph值在6-7为宜,然后装入大口的罐头瓶至瓶肩部,将培养料压平压紧,抹干净瓶的培养料,拿完好无破损的塑料薄膜扎紧瓶口,放入压力灭菌锅1.4-1.5㎏/cm灭菌1.5-2h,冷却至25℃即可进行无菌接种,用接种针从母种试管斜面上挑取少量菌丝体接入瓶中,接种后在25℃恒温箱中培养30d菌丝可长满,即可作为原种(二级种)。
菌种繁育—母种制作(食用菌生产技术课件)
目录
一、 采集种源 二、 培养基配制琼脂培养基 三、 分离与适温培养 四、 一级种转接 五、 注意事项
母种主要采用人工选择、诱 变育种、杂交育种和原生质 融合等手段获得。作为一般 制种专业户,可以采用人工 选择方式分离培育母种。
菌种
野生 担孢子或子囊孢子或组织体 栽培 扩大繁殖后的纯次生菌丝体
①选择种菇:前已述及。 ②种菇消毒:在种菇中部取最大的3-4张菇片,
用70%的酒精轻擦表面后置于接种箱内消毒;
③菇肉接种:将菇片纵向撕开,在每个裂面靠近菇片边缘处取一 米粒大小的菇肉组织接于PDA培养基上。每张菇片共撕10个裂面 ,接10支试管,一次分离共接30~40支试管;
④培养:将试管置于15~30℃下培养; ⑤纯化 : 培养期间每天都要检查发菌情况,从中选择菌丝浓白粗
孢子的特点:菌龄小、生命力强、变异率高。
孢子 分离法
单孢分离 多孢分离
难度较大 较简易
单孢分离
多孢分离
概念 步骤
使许多孢子在同一培养基上, 萌发后自由交配成次生菌丝的方法
种菇消毒 采收孢子 接种孢子 出菇试验
整菇插种法 钩悬法 孢子印法
(1) 种菇消毒
菌柄去2/3
苞被
有:75%酒精棉球擦试
➢ 一般操作流程
野生菌驯化 原菌株改良 生物技术创新
优良 菌株
扩大 繁殖Leabharlann 实行纯培养基要 本求
不含任何杂菌
用于 生产
一、采集种源
从野生或人工栽培群体中,选择有代表性的优良菇体作为种源 。在菇床、菌墙中选择出菇早、无杂菌侵染、株型紧凑、圆整 肉厚、色泽美观、七八成熟的第一潮菇的肥壮菇体作种菇(茯苓 类选择菌核或菌索);
银耳菌种的生产技术.doc
银耳菌种的生产技术银耳是一种营养价值很高的可食用菌类,下面小编就为大家介绍下银耳菌种的生产技术。
(一)母种及原种把分离提纯后的银耳菌丝和香灰菌丝单独分开培养于试管中。
生产母种时,先取出银耳菌丝,并扩大到所需要的管数。
然后放在25℃培养到银耳菌落直径约lcm左右。
此时,再在每支长了银耳菌丝的试管中,接种极少量香灰菌丝,待两者长在一起时,就可以出售或用于原种生产了。
如先接香灰菌丝,因香灰菌丝生长快,很快覆盖斜面,并很快消耗养料,其后接上的银耳菌丝就不易生长。
若香灰菌丝和银耳菌丝同时接种在一支试管中,同样会出现银耳菌丝少、香灰菌丝数量多的缺陷。
因此,生产银耳母种(试管种)时一定要注意接种的先后,以及注意控制两者的比例。
(二)银耳及其“伴生菌”在可以人工种植的食药用中,属于这种类型的菌目前仅有银耳和金耳。
它们子实体的形成,银耳除了要有纯银耳菌丝外,还必须有“伴生菌”即香灰菌的帮助;金耳除了要有纯金耳菌丝外,还必须有粗毛硬革菌的帮助,两者缺一不可。
在一般条件下,银耳和金耳的纯菌丝体生长相当缓慢,分解木质素、纤维素能力极弱,分别要依赖于香灰菌丝和粗毛硬革菌丝分解基质,提供它们生长发育所需的养分,否则便不可能形成子实体。
所以在扩繁银耳、金耳母种时,必须将两种相应的菌丝体,移接在同一培养基上进行混合培养。
现以银耳为实例介绍两种菌丝混合制种技术:1、斜面母种混接法取纯银耳菌丝试管母种和新配制的PDA斜面试管各一支,连同接种器具一起放入接种室(箱)中,按无菌操作进行转接,即挑取米粒大小、带培养基菌种一块,移接于空白试管斜面培养基上,加棉塞后置22-24℃下恒温培养6-8天。
当银耳菌丝长至似绣球状如黄豆大小时,再连同香灰母种一起移入接种室(箱)里,按无菌操作用接种铲在距银耳纯菌丝团约2厘米处,接入一小块香灰菌丝母种,培养2天在接种块上便可见到白色菌丝,7天左右即形成白毛团而覆盖银耳纯菌丝团,12-15天在白毛团的上方可见到有红、黄色水珠即为成功。
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食用菌母种制作技术
食用菌母种制作技术
制作培养基
先将新鲜无病害的马铃薯洗净,去皮后切成小薄片,称200克,加水1000毫升,煮沸20分钟后过滤,其滤汁为马铃薯煮汁。
然后在马铃薯煮汁中加琼脂20克和蔗糖20克煮溶,后补足水至1000毫升,调节pH值在5.5~6。
调好pH值后进行分装,一般将培养基装至试管的1/4处,而后加盖棉塞,再用牛皮纸将试管每10支捆成一捆。
分装时,注意培养基不可沾在近试管口的壁上,以免日后生霉菌。
分装后要立即进行高压灭菌,不可过夜。
高压灭菌
将用牛皮纸捆好的试管(棉塞朝上)竖直放入高压锅内进行灭菌。
在0.11兆帕压力下维持30分钟,即可达到灭菌目的。
灭菌时,放汽要充分,否则影响灭菌效果。
开锅取出试管后趁热摆放,使培养基成斜面。
试管的斜面以距棉塞3厘米为宜,斜面摆成后,不宜再摆动。
一级菌种扩管
扩管要在无菌条件下进行,先将扩管工具、培养基及菌种放到扩管箱内,然后按每立方米用高锰酸钾5克、40%的甲醛溶液10
毫升的量进行熏蒸消毒30分钟。
扩管方法:先将扩管铲在酒精灯火焰上灼烧消毒,然后拔掉母种管上的棉塞,铲一块米粒大的母种,在酒精灯火焰无菌区内迅速送入菌种试管内。
扩管后的母种培育10~15天即可投入生产。
食用菌母种怎么制作
母种制作:
母种培养基配制:母种培养基的原料是马铃薯,葡萄糖,蛋白胨,水,琼脂粉,以配制一千毫升的母种培养基为例,将马铃薯去皮后称重200克,葡萄糖20克,琼脂粉20克,蛋白胨10克,用量杯量取1000毫升的水倒入锅中,用刀将马铃薯切成片加入锅中,用文火煮沸,煮至用筷子轻轻一插既可插入,这时可以用四层的纱布过滤煮好的马铃薯汁,然后倒在量桶里,看一下,如果不足一千毫升可加水补足一千毫升,在倒入锅中煮,最后加入称好的葡萄糖、琼脂粉、蛋白胨,为了防止锅底烧焦要边加热边搅拌,煮至完全溶化,母种培养基就配制好了。
母种培养基的分装:
母种培养基配制好后要分装以试管中,这里用到的试管规格为18毫米X200毫米,每7根试管扎成一捆,分装培养基时用漏斗下面接一根塑料管,在通塑料管接装到试管内,分装量为试管高度的五分之一左右,分装完后及时用棉塞装试管口塞住,防止其
它杂菌侵蚀。
要注意,母种培养基的温度降到45度以下时凝固,所以分装过程要在母种培养基凝固之前完成。
母种培养基的灭菌:
用白纸包裹试管口,在用绳子将白纸扎紧,将试管放入高压来菌锅中高压来菌,盖上锅盖,压紧螺帽,在压力为0.5MPa条件下持续来菌30分钟,来菌完后在让其在锅内自然冷却一小时,待压力为零时就可以打开锅将试管取出来,这样母种的培养基就制作好了。
制作母种:
母种接种:母种的接种也是在无菌工作室的无菌箱中进行的,另外要选取品质优,长势好的蘑菇来提取菌丝,分别用酒精棉球擦拭双手和蘑菇表面进行消毒,点燃酒精灯然后把长柄小刀放在酒精灯火焰上消毒2至3秒钟,用消毒后的小刀割开新鲜蘑菇的菌柄,在菌柄与菌盖连接处用小刀切割一小块蘑菇组织,打开母种培养基试管瓶塞,为了避免杂菌感染,要将试管口靠近酒精灯火焰,用长柄钩针钩取切割好的蘑菇组织带到试管中,放在试管培养基斜面的中部,退出长柄钩针,将棉塞在火焰上消毒,塞住试管口,母种的接种工作就完成了。
接种以后把试管放在摄氏25度的培养箱里进行培养。
蘑菇的种子在适宜的温度下开始了生长发育,长出了嫩嫩的菌丝,蘑菇一
生的大部分时间都是以菌丝体的形式积累和吸取营养,逐渐发育的。
5 10天左右,培养基里长满了菌丝体,这就是蘑菇的母种。
由于母种的数量少还需要扩大种源增加繁殖。
食用菌母种其他制作方法
母种多用半合成培养基培养。
母种的生产应有一个计划,即预计某一时期内所用生产种的数量,从而确定母种生产的数量。
母种第一代尽量多转出斜面管,减少转管的代次,避免造成菌丝生活力下降、出菇率低等现象。
斜面管在摄氏4度冰箱可保存3个月,但最好在一个月内使用。
加石蜡油的斜面在摄氏4度时保藏时间可长些。
母种扩大生产前要经严格检查是否污染病虫害、标签是否齐全,是否经过出菇试验等全面考核才能进行扩大生产。
第一次母种转管,每管可转出60-80管第二次母种。
第二次母种一部分用于转接原种使用,一部分保藏。
同样做法,一般母种经3-4次代转传为好。
斜面母种转管方法:转管过程应在无菌箱或无菌室进行。
工作人员、工作环境、一切器材要经严格消毒或灭菌。
接种前斜面试管用75%酒精抹擦,酒精灯旁用拿接种铲的手的指间拔下棉塞向外夹着,火焰轻轻烧过管口才转管,已灭菌后稍凉的接种铲先在母种斜面上纵向切成2毫米宽的长条,再用接种铲沿斜面的水平方向深约2-3毫米铲离,然后用接种锄将斜面横向切成宽2毫米、
长4毫米的小块。
用接种铲把斜面前段约1厘米的部分除去,其余菌种逐一小块接入空白斜面培养基内,菌种块放在空白斜面的中部为好。
把管口烧过,塞上棉塞。
以上操作在无杂菌条件下进行,称为无菌操作。
离开酒精灯,写上标签。
新接上的菌种立即进行适温培养。
当原菌丝块的菌丝萌发新菌丝时,可将原来温度调低摄氏2-3度,让菌丝缓慢生长,会更强壮,更有生命力。
至菌丝长满斜面即为菌种成熟。