HPLC法测定黄芪叶中黄芪甲苷的含量
HPLC测定贵州产黄芪中黄芪甲苷的含量
在 ４４ ０ ４０ ０ｔ／ Ｌ之间的线 性关系 良好 ．３内 和 １ 间精密 度 的 Ｒ Ｄ均 小 于 １５ 重复 性试 验 的 ．０ ４ ． ｃ ｍ ， １ ３ Ｓ ． ％， Ｓ Ｒ Ｄ为 ０ ７ ．％（ｎ：５）最低检测 限为 ０４０ｔ／ Ｌ 加样 回收率 为 ９ ．％ 、 ． ％、９ ８ Ｒ Ｄ ， ．４ ￣ ｍ ， ８ ９ ９ ７ ９ ． ％， Ｓ （ｎ：５） ６ 分 别为 ２８ ３ ５ ２ ５ ． ．％、 ．％、 ．％ 黄芪样品 中黄芪 甲苷 的含量 均符 合《 中华人 民共 和国药典》２ ｏ 版 ） （０ ５ 标准 ． 该方 法缩减 了黄芪药材 的前处 理步骤 ， 节约 了实验 时间 ， 适用于黄芪药材 中黄芪 甲苷含量测定 ； 同时也证 明黄
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文章编号 ：０ ） ８２２０ ｝３０ ７—４ １（ － ６ （０７ ０ 。 ８０ ０５ ２
ＨＬ Ｐ Ｃ测 定 贵 州产 黄芪 中黄 芪 甲苷 的 含 量
彭全材 ， 胡继伟 杨 占南２ 黄 先飞 ， 连 国奇 一 ， ，
收 稿 日期 ：０ ７０．６ ２ Ｏ．３１
作者简介 ： 彭全材（９ ３）男 。 １８ 一 ， 江西人 ， 理学硕士研究生 ， 主要从事药用植物 的研究
维普资讯
第３ 期
彭全材 ， ： Ｐ Ｃ测 定贵州产黄芪 中黄芪 甲苷的含量 等 ＩＬ － Ｌ
２９ ７
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图 １ 分 子 结构
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黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展
黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展摘要：黄芪是一种常见的中草药材，具有滋补养生、增强免疫力、抗疲劳等多种功效。
黄芪甲苷作为黄芪中的一种主要有效成分，对其含量的测定一直是研究的热点。
本文将对黄芪中黄芪甲苷含量测定的研究进展进行综述，以期为黄芪的质量控制和药用价值的评价提供参考。
一、引言黄芪，又名黄芪、土黄芪，为豆科植物黄芪的根。
黄芪在我国的使用历史非常悠久，被誉为“草中之皇”，在中医药中具有益气健脾、祛痰利水、固表止血等功效。
现代研究表明，黄芪还具有增强免疫力、抗氧化、抗疲劳、抗肿瘤等多种生物活性，因此在食品、保健品、药品等领域有广泛的应用价值。
1. HPLC法HPLC（High Performance Liquid Chromatography）是目前测定黄芪甲苷含量常用的方法之一，其操作简便、分离效果好、重现性高。
常用的色谱柱有C18、C8、C4等，流动相常用乙腈-水、甲醇-水等。
检测波长一般为203nm。
HPLC法在分离和测定黄芪甲苷方面取得了一定的成果，但也存在一定的局限性，例如在样品的制备和前处理过程中易引起黄芪甲苷的流失，影响测定结果的准确性。
2. LC-MS法LC-MS（Liquid Chromatography-Mass Spectrometry）是一种高灵敏度、高分辨率的分析方法，可对复杂样品进行快速、准确的分析。
LC-MS法结合了液相色谱和质谱分析的特点，可以直接测定样品中的黄芪甲苷含量，并能对其结构进行进一步的鉴定。
由于其分析灵敏度高、选择性好，因此在黄芪甲苷含量测定中得到了广泛的应用。
LC-MS法的仪器设备和操作技术要求较高，且成本较高，限制了其在一般实验室的应用。
3. UV法UV（Ultraviolet）法是通过样品对紫外光的吸收程度来测定样品中目标成分的含量。
黄芪甲苷在紫外光下有特定的吸收峰，可以通过检测其吸光度来测定其含量。
UV法操作简便、成本低，但其检测灵敏度不高，对样品的前处理要求较高，且容易受杂质的干扰。
HPLC_ELSD测定黄芪药材及其炮制品中黄芪甲苷的含量
HPL C-EL SD测定黄芪药材及其炮制品中黄芪甲苷的含量毛文彬 相 莉 冯 伟【摘要】 目的 建立HPL C-EL SD方法测定黄芪药材及其炮制品中黄芪甲苷的含量,论证黄芪炮制方法对炮制品中黄芪甲苷含量的影响。
方法 采用Kromasil-C(18)柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相:乙腈-水(25∶75);体积流量:1.0ml/min;漂移管温度105℃、空气流量2.5L/min。
结果 黄芪甲苷在2.39～14.34μg范围内具有良好的线性关系,r=0.9993,样品平均回收率为105.8%, RSD为2.34%。
结论 本方法简便、准确、专属性强,可用于黄芪药材及其制剂的质量控制,炮制品中黄芪甲苷含量明显低于黄芪药材,以黄芪甲苷为主要治疗成分时,使用生品为宜。
【关键词】 HPL C-EL SD 黄芪 黄芪甲苷 黄芪为豆科植物蒙古黃芪[Astragalus membranaceus (Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao]或夹膜黃芪[Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.]的干燥根。
炙黄芪为黄芪的炮制加工品。
我们在采用《中国药典》2005年版黄芪含量测定方法[1]测定时,发现回收率较低,不符合分析方法验证要求,出峰时间较晚,影响实验进度及成本。
故本文对《中国药典》2005年版黄芪含量测定方法进行了改进,提高了回收率,缩短了分析时间,并对其炮制品进行含量测定,评价其质量,为黄芪药材炮制品规范化加工提供重要参考。
1 仪器与试药1.1 药品与试剂 Waters Alliance H T型高效液相色谱仪, Alltech EL SD2000型蒸发光散射检测器;黄芪对照药材、黄芪甲苷对照品均购自中国药品生物制品检定所;硅胶G为青岛海洋化工厂生产;所用试剂均为分析纯。
1.2 药材 黄芪生品和蜜炙黄芪均购自陕西省药材公司,西安市万寿路药材市场。
HPLC测定贵州产黄芪中黄芪甲苷的含量
HPLC测定贵州产黄芪中黄芪甲苷的含量彭全材;胡继伟;杨占南;黄先飞;连国奇【期刊名称】《江西师范大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2007(031)003【摘要】对贵州黄芪药材黄芪甲苷的含量进行了测定,采用甲醇超声提取样品,HPLC梯度洗脱.黄芪甲苷的理论塔板数为5 588,分离度为1.42,拖尾因子为1.01.回归方程y=1.4048 X+16.682,R=0.999 0,在4.400～440.0 μg/mL之间的线性关系良好.日内和日间精密度的RSD均小于1.5%,重复性试验的RSD为0.7%(n=5),最低检测限为0.440 μg/mL,加样回收率为98.9%、96.7%、99.8%,RSD(n=5)分别为2.8%、3.5%、2.5%.黄芪样品中黄芪甲苷的含量均符合《中华人民共和国药典》(2005版)标准.该方法缩减了黄芪药材的前处理步骤,节约了实验时间,适用于黄芪药材中黄芪甲苷含量测定;同时也证明黄芪的质量较好.【总页数】4页(P278-281)【作者】彭全材;胡继伟;杨占南;黄先飞;连国奇【作者单位】贵州师范大学,贵州省山地环境重点实验室,贵州,贵阳,550001;贵州师范大学,生物技术与工程学院,贵州,贵阳,550001;贵州师范大学,贵州省山地环境重点实验室,贵州,贵阳,550001;贵州师范大学,分析测试中心,贵州,贵阳,550001;贵州师范大学,贵州省山地环境重点实验室,贵州,贵阳,550001;贵州师范大学,生物技术与工程学院,贵州,贵阳,550001;贵州师范大学,贵州省山地环境重点实验室,贵州,贵阳,550001【正文语种】中文【中图分类】O657【相关文献】1.UHPLC-MS-MS法同时测定舒筋活血颗粒中葛根素和黄芪甲苷的含量 [J], 陈昭;陈伟韬;胥爱丽;李养学;毕晓黎2.HPLC与比色法测定复方黄芪注射液中总皂苷与黄芪甲苷含量 [J], 李永吉;管庆霞;关延彬;李秋红3.HPLC-ELSD法同时测定益肺清化颗粒中的黄芪甲苷、桔梗皂苷D和麦冬皂苷D 的含量 [J], 王银;邱连建4.UHPLC-MS-MS法同时测定舒筋活血颗粒中葛根素和黄芪甲苷的含量 [J], 陈昭;陈伟韬;胥爱丽;李养学;毕晓黎;;;;;;;;;;5.HPLC法测定黄芪中的黄芪甲苷含量 [J], 田丰;邓英杰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
HPLC法测定黄芪中黄芪甲苷的含量
Ｇｕ ｎ Ｚ ｏ ｎｖ ｒｉ ｆ Ｃ Ｇ ａ ｇ ｈ ｕ５ ０ ０ ） ａ ｇ ｈ ｕＵ ｉｅｓ ｙｏ Ｍ， ｕ ｎ ｅｏ ｍ ｔ ｄｆｒ ｅ ｒ ｎｔ ｎｏ ｔ ｇｌｓ ｅ ｄｘ ｔ ｇ ｉｗｉ Ｐ Ｃ． ｔｏ ｓ Ｔ ｅＨ ｐｒ ｌ ＤＳ ８ ｂｔ ｃ： ｊｃｉ ｏ ｖｌｐ ｅｈ ｔ ｍｉａｏ ｆ ｓａｏｏｉ ｉＲａｉＡｓ ａａｓ ｔ Ｈ Ｌ Ｍｅ ｄ ｈ ｙｅｓ ｒ Ｏ ｖ ｄ ａ ｏ ｏｄ ｅ ｉ ａｒ ｄＩ ｎ Ｖ ｒ ｌ ｈ ｈ ｉＯ ２ Ｃ１
关键 词 ：ＨＰ Ｃ；黄 芪 甲苷 ；黄芪 Ｌ ｄ ｉ １． ６ ￣ｉ ｎ１７ ７ ９ ０９０ ． ０ ｏ ： ０３ ９ ．ｓ． ２２ ７． ０ ． ０ ９ ｓ ６ ２ ３３ 文 章编 号 ： １７．７ ９ （０９ ０ １７０ ６ ２２７ ２０ ）．３０ １—２
黄 芪 甲苷 的进 样量 在 ２２ １ ． 范 围 内 ．～ ３２
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黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展
黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展黄芪（Astragalus membranaceus）是一种重要的中草药材，被广泛应用于中医药领域。
黄芪甲苷（astragaloside IV）是黄芪的主要活性成分之一。
黄芪甲苷具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、抗心肌缺血、抗心肌纤维化等多种药理活性，因此成为黄芪药效的重要指标之一。
1. 简介黄芪甲苷的理化性质：黄芪甲苷是一种三萜甾醇类化合物，化学结构中含有多个糖苷键。
黄芪甲苷的糖基部分可以通过酶解反应裂解得到黄芪甲硷（astragaloside I）和黄芪甲醇（astragaloside II），因此研究黄芪甲苷的含量也间接反映了黄芪甲硷和黄芪甲醇的含量。
2. 提取和纯化方法黄芪甲苷的提取和纯化方法主要有溶剂提取、超声波辅助提取、微波辅助提取、正相和反相SPE（固相萃取法）等。
溶剂提取是最常用的方法，可以使用水、乙醇、乙醚等溶剂进行提取。
超声波和微波辅助提取可以提高黄芪甲苷的提取效率。
SPE法则是通过固相吸附剂对样品进行富集和洗脱，进而得到纯化的黄芪甲苷。
3. 分析方法黄芪甲苷的含量测定方法主要有高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱法（GC）、毛细管电泳法、液质联用法（LC-MS/MS）、红外光谱法等。
HPLC法是最常用的方法，可以使用紫外检测器、荧光检测器等进行检测。
GC法则适用于含量较低的黄芪甲苷的测定。
液质联用法结合了LC和MS的优势，可以提高黄芪甲苷的分析敏感性和准确性。
4. 含量测定影响因素黄芪甲苷的含量测定受到多种因素的影响，包括黄芪的生长环境、不同采收时间、存储条件等。
黄芪生长环境中土壤的pH值、养分含量和水分等对黄芪甲苷的生物合成和积累有一定影响。
采收时间对黄芪甲苷的含量也有重要影响，一般来说，黄芪的地上部分含量高于根部。
黄芪的存储条件也会导致黄芪甲苷的降低，因此在储存过程中需要注意保鲜处理。
5. 品种和产地差异黄芪的品种和产地对黄芪甲苷的含量也有一定影响。
黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展
黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展黄芪，又称黄芪补中益气汤，为豆科植物黄芪的干燥根。
黄芪性味甘苦微温，归脾肺经，具有益气固表、益血统阴、利水除湿、化瘀散结的功效。
黄芪中含有一种特殊的活性成分——黄芪甲苷，具有抗氧化、免疫调节、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性。
黄芪甲苷的含量测定对于黄芪的质量评价和药理研究具有非常重要的意义。
目前，黄芪甲苷含量的测定方法有很多种，主要包括高效液相色谱法（HPLC）、紫外分光光度法（UV）、液相色谱串联质谱法（LC-MS）、超高效液相色谱法（UPLC）等。
下面，将对这些方法的研究进展进行介绍。
一、高效液相色谱法（HPLC）高效液相色谱法是测定黄芪甲苷含量的常用方法之一。
该方法主要利用色谱柱对样品进行分离，然后利用紫外检测器进行检测。
HPLC法在测定黄芪甲苷含量上具有灵敏度高、分离效果好、重现性好的优点。
目前已经有多种不同的HPLC法用于测定黄芪甲苷含量，比如采用保留时间法、峰面积法、标准曲线法等。
这些方法对样品的前处理要求不同，但都有较好的准确性和重现性。
二、紫外分光光度法（UV）紫外分光光度法是一种简便、快速的测定方法，主要利用样品中黄芪甲苷特有的吸收峰进行定量分析。
该方法操作简单，仪器设备不复杂，因此在一些实验室中得到了广泛应用。
紫外分光光度法对样品的前处理要求较高，同时在测定复杂样品时准确性和灵敏度可能会受到一定的限制。
液相色谱串联质谱法是一种更加高级的分析技术，它结合了液相色谱和质谱的优点，能够对样品进行更加准确和灵敏的分析。
该方法在测定黄芪甲苷含量时能够获得更加详细的信息，对样品中其他杂质的干扰较小。
LC-MS法在黄芪甲苷含量的测定和结构鉴定方面具有较大优势，但是仪器的成本和维护成本也相对较高。
超高效液相色谱法是近年来发展起来的一种新型色谱技术，其分离效果和分析速度均更加出色。
UPLC法在测定黄芪甲苷含量时能够获得更高的分辨率和灵敏度，同时也节约了试剂和溶剂的用量。
反相高效液相色谱法测定黄芪中黄芪甲苷的含量
反相高效液相色谱法测定黄芪中黄芪甲苷的含量
蔡进章;王增寿;章晓东
【期刊名称】《中国药业》
【年(卷),期】2003(012)012
【摘要】目的:用反相高效液相色谱法(RP-HPLC法)测定黄芪中黄芪甲苷的含量.方法:采用RP-HPLC法,流动相为乙腈-水-磷酸(1:2:0.1),检测波长为203 nm.结果:黄芪甲苷浓度在1.28～12.8ug 范围内与峰面积线性关系良好,平均回收率为
96.8%,RSD为1. 17%(n=6).结论:RP-HPLC法操作简便,测定结果可靠,适用于黄芪中黄芪甲苷的含量测定.
【总页数】2页(P36-37)
【作者】蔡进章;王增寿;章晓东
【作者单位】温州医学院附属第二医院,浙江,温州,325027;温州医学院附属第二医院,浙江,温州,325027;浙江省兰溪市药品检验所,浙江,兰溪,321100
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1
【相关文献】
1.反相高效液相色谱法测定消渴平片中黄芪甲苷的含量Δ [J], 周颖仪;刘潇潇
2.反相高效液相色谱法测定贞芪扶正颗粒中黄芪甲苷的含量 [J], 龙进;涂文升;黄其春;黎远冬
3.反相高效液相色谱法测定复方黄芪口服液中黄芪甲苷的含量 [J], 吴清华;
4.反相高效液相色谱法测定复方黄芪口服液黄芪甲苷的含量 [J], 吴清华
5.反相高效液相色谱法测定益气生血胶囊中黄芪甲苷含量的方法学研究 [J], 孙宾娟
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黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展
黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展引言黄芪，即中药材黄芪，是一种常用的中药材，被用于治疗肝肾不足、气虚乏力、风寒感冒等疾病。
黄芪中含有丰富的活性成分，其中黄芪甲苷是一种重要的化学成分，具有抗氧化、抗炎、免疫调节等多种生物活性。
测定黄芪中黄芪甲苷的含量对其药效和质量的评估具有重要的意义。
本文将介绍目前黄芪中黄芪甲苷含量测定研究的最新进展。
一、黄芪甲苷的药理作用二、黄芪中黄芪甲苷含量测定方法目前，研究人员已经开发出多种方法来测定黄芪中黄芪甲苷的含量，主要包括色谱法、质谱法和光谱法等。
（一）色谱法高效液相色谱(HPLC)是目前测定黄芪中黄芪甲苷含量最常用的方法之一。
该方法具有分离效果好、准确性高、重现性好的特点。
研究人员通常采用C18色谱柱，以乙腈-水为流动相，在不同波长下进行检测，可以实现对黄芪中黄芪甲苷的准确测定。
近年来，研究人员还开发了一种基于光谱技术的测定黄芪甲苷含量的方法。
该方法具有简便、快速的特点，可以实现对黄芪中黄芪甲苷的快速测定。
研究人员通常通过建立黄芪甲苷与特定试剂在特定波长下的光谱特征，来进行黄芪甲苷含量的测定。
近年来，研究人员对于黄芪中黄芪甲苷含量的测定方法进行了进一步的研究和改进，主要体现在以下几个方面：（一）方法的改进研究人员针对目前存在的色谱法、质谱法和光谱法的一些局限性，如检测灵敏度不够高、操作复杂等问题，进行了一系列的改进。
他们通过优化色谱柱、流动相组成、检测波长等条件，改进了色谱法和光谱法的分析方法，使其具有更高的分析灵敏度和准确性。
他们还通过改进萃取和预处理方法，提高了质谱法的检测灵敏度和准确性。
（二）新技术的应用随着科技的发展，研究人员还引入了一些新技术来测定黄芪中黄芪甲苷的含量。
他们利用人工智能算法对色谱图谱进行分析和处理，提高了测定的准确性和稳定性。
他们还探索了一些新型的色谱柱和检测方法，提高了分析的效率和灵敏度。
（三）标准物质的建立为了提高测定方法的准确性和可靠性，研究人员建立了一套完善的黄芪甲苷标准物质体系。
黄芪含量测定实验报告
一、实验目的1. 掌握黄芪中有效成分的提取方法。
2. 学习并掌握高效液相色谱法（HPLC）测定黄芪中黄芪甲苷含量的原理和方法。
3. 通过实验，了解黄芪的质量控制方法。
二、实验原理黄芪为豆科植物Astragalus membranaceus（Fisch.）Bge.的干燥根，具有补气固表、利水消肿、托毒生肌的功效。
黄芪甲苷（Astragaloside IV）是黄芪中的主要有效成分，具有显著的抗炎、抗氧化、免疫调节等作用。
本实验采用高效液相色谱法测定黄芪中黄芪甲苷的含量。
三、实验材料与仪器1. 试剂：黄芪甲苷对照品（中国药品生物制品检定所提供），甲醇、乙腈为色谱纯，水为超纯水。
2. 仪器：高效液相色谱仪、超声波清洗器、电子天平、旋转蒸发仪、离心机、恒温水浴锅等。
四、实验方法1. 样品前处理（1）样品制备：准确称取黄芪粉末0.1g，置于10ml容量瓶中，加入甲醇溶液（80%）5ml，超声提取30min，取出，冷却至室温，用甲醇定容至刻度，摇匀，过滤，取续滤液作为供试品溶液。
（2）对照品溶液制备：准确称取黄芪甲苷对照品10mg，置于10ml容量瓶中，加入甲醇溶液（80%）溶解并定容至刻度，摇匀，过滤，作为对照品溶液。
2. 色谱条件（1）色谱柱：C18柱（4.6mm×250mm，5μm）；（2）流动相：甲醇-水（80：20）；（3）流速：1.0ml/min；（4）检测波长：210nm；（5）柱温：30℃。
3. 实验步骤（1）将高效液相色谱仪开启，预热至色谱柱平衡；（2）将供试品溶液和对照品溶液分别进样，记录色谱图；（3）根据峰面积计算供试品中黄芪甲苷的含量。
五、结果与分析1. 色谱图供试品溶液和对照品溶液的色谱图如图1所示。
从图中可以看出，供试品溶液中黄芪甲苷峰与对照品峰保留时间一致，且峰形良好。
2. 结果计算根据色谱图，计算供试品中黄芪甲苷的含量为0.082mg/g。
3. 讨论本实验采用高效液相色谱法测定黄芪中黄芪甲苷的含量，结果表明，本方法操作简便、准确可靠，适用于黄芪的质量控制。
黄芪甲苷的测定方法
黄芪甲苷含量测定几种常用方法的比较黄芪甲苷为黄芪的主要活性成分之一。
能抗炎降压、镇痛镇静和促进再生肝DNA水平。
现代药理研究表明，黄芪甲苷具有改善白细胞变形能力、改善心肌收缩及舒张功能、促进胰岛素分泌和清除自由基等药理作用。
近年来，对黄芪甲苷的含量测定方法的研究很多。
本人就几种常用方法作一比较。
1高效液相色谱法(I-R_C法)HPLC法因其分离度好、灵敏性高，适用范围广等优点，已广泛用于黄芪甲苷的含量测定、稳定性、药理和临床研究中。
1．1 HPLC—uv法黄芪甲苷属于四环三萜类皂苷，紫外末端吸收f max200．8 nm)。
紫外检测灵敏度低，干扰因素多，目前HPLC法是最常用的检测器是紫外检测器。
苏瑞强Ⅲ等采用HPLC法测定黄芪甲苷的含量，色谱柱为YWG—C18柱0．9 mm x250 mm，5 m)，流动相为乙腈一水(1：2．3)，检测波长为203nm，结果线性范围为0．86—5．27 I,L g／mL，加样回收率为97．52％，RSD为3．10％。
1．2 HPLC一示差折光检测法由于黄芪甲苷在紫外区仅有微弱的末端吸收，溶剂噪音对结果有较大的影响，且其前处理繁杂。
池玉梅等四应用HPLC示差折光检测法测定黄芪精12I服液中黄芪甲苷的含量，色谱柱为Hypersi|ODS 2(4．6ram X 200ram，5 I,Lm)，流动相为甲醇一水(67：33)，结果黄芪甲苷线性范围是1-5 g／ml，回收率为98．1％，RSD为2．02％。
该法简单方便，重现性好，灵敏度高，结果准确、可靠。
1．3 RP—HPLC法路玫等[3j采用RP—HPLC法测定黄芪注射液中黄芪甲苷的含量。
色谱柱为Nova—PakC18柱0．9ram xl5Omm，4la,m)，流动相为乙腈一水一磷酸(1：2：O．1)，检测波长为203nm，柱温为40％。
实验中将样品蒸干，采用水饱和的正丁醇溶解，用氨试液洗涤后蒸干，残渣用甲醇溶解。
结果加样回收率为94．7％，RSD为2．6％。
HPLC法测定四年生黄芪中黄芪甲苷的含量
HPLC法测定四年生黄芪中黄芪甲苷的含量摘要：目的：建立一种准确、简便测定黄芪甲苷含量的分析方法。
方法：色谱柱为Nucleosil C18柱(4.6mm×250mm，5μm)；流动相为乙腈-水＝1∶2；流速为0.8ml/min；检测波长为205nm；速度为0.4mm/min。
灵敏度为0.1 AUFS,测定了黄芪甲苷的含量.平均回收率为96.73%，RSD为2.14%。
结果：样品浓度在0.01～0.2mg\ml之间与峰面积成良好的线性关系。
结论：本方法的重复性好、精密度高、稳定性强。
关键词： HPLC；四年生黄芪；黄芪甲苷中图分类号：R917 文献标识码：A 文章编号：1006-4311（2010）08-0211-020 引言黄芪为常用中药，素有“补药之长”之称，具有益气固表，利尿托毒等功效。
黄芪药用价值很高，临床上常用来治疗非特异性免疫功能低下、乙肝和心血管系统疾病。
黄芪甲苷作为黄芪成分之一，其化学结构如图1所示，它具有降压、抗炎、稳定红细胞膜、提高血浆CAMP含量，促进小鼠再生肝DNA合成和增强免疫功能等多种作用.因此在研究黄芪过程中，我们对其成分黄芪甲苷进行了含量测定方法研究，本文用HPLC法测定黄芪甲苷的含量，其样品浓度的范围在0.01～0.2 mg\ml之间与峰面积呈线性，该法灵敏度高，重现性好，可准确地测定黄芪甲苷的含量。
1 仪器与试剂Waters高效液相色谱仪：包括510型泵，991光电二极管阵列型检测器，U6K型进样器；NEC Power Mate型计算机，黄芪甲苷标准品购自辽宁省药品检验所。
甲醇、正丁醇为分析纯，乙腈为色谱纯、水为去离子水。
试验用黄芪采自沈阳医学院草药园。
2 方法与结果2.1 色谱条件：色谱柱为Nucleosil C18柱(4.6 mm×250mm，5μm)；流动相为乙腈-水＝1∶2；流速为0.8 ml/min；检测波长为205nm；速度为0.4mm/min。
HPLC测定黄芪甲苷概况
HPLC测定黄芪甲苷概况黄芪甲苷(AstragalosideⅣ)是中药黄芪中的特征性成分,目前黄芪药材以及含黄芪的单方及复方中药制剂大多以黄芪甲苷为质量评价指标,由于黄芪甲苷只在紫外末端有吸收,以往文献报道以薄层扫描方法居多,近年来,通过HPLC方法测定黄芪甲苷以其在准确性、重现性、灵敏度等方面的优势而逐渐为人们广泛使用,本文对近五年来HPLC法测定黄芪药材及制剂中黄芪甲苷的前处理方法及色谱条件两方面综述如下。
1前处理1.1提取纯化黄芪本身含有多种成分,复方中药成分更加复杂,而黄芪甲苷的含量相对较低,在药材中最高含量不到0.2%[1],因此在HPLC测定前进行适当有效的前处理对于保护色谱柱和提高供试液中黄芪甲苷含量都非常必要。
1.1.1样品[2](合剂)置分液漏斗中,乙醚提取,弃去乙醚液(乙醚脱脂),水层用水饱和正丁醇提取,合并正丁醇提取液(正丁醇提取),1%氢氧化钠溶液洗涤正丁醇液,再用正丁醇饱和的水洗至中性(1%氢氧化钠处理),蒸干,残渣用甲醇溶解定容。
1.1.2样品[3](黄芪口服液)正丁醇提取,1%氢氧化钠处理,蒸干,残渣加水溶解后上D101大孔吸附树脂柱,先后用水和30%乙醇洗脱,弃去洗脱液,用70%乙醇洗脱,收集洗脱液,蒸干,甲醇定容。
1.1.3样品[4](黄芪注射液)加氢氧化钾,振摇使溶解,正丁醇提取,1%磷酸二氢钠水溶液洗涤,蒸干,甲醇定容。
1.1.4样品[5](复方口服液)正丁醇提取,1%氢氧化钠处理,蒸干,残渣用水溶解,上大孔树脂柱,先用水洗,再以75%乙醇洗脱,收集乙醇洗脱液,蒸干,甲醇定容。
1.1.5样品[6](黄芪药材)粉碎,乙醚脱脂。
将药材置索氏提取器中,加甲醇提取,回收甲醇,提取液蒸干(甲醇索氏提取),残渣用水饱和正丁醇溶解,转入分液漏斗中,1%氢氧化钠处理,蒸干,甲醇定容。
1.1.6样品[7](颗粒剂)研细,甲醇索氏提取,残渣加水溶解,乙醚脱脂,水层正丁醇提取,加1%磷酸二氢钾水溶液洗涤,正丁醇层减压浓缩至干。
黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展
黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展黄芪（Astragalus membranaceus）是一种常见的药用植物，被广泛用于中医药以及现代药物的制备中。
其中的化合物黄芪甲苷，也称为天然黄嘌呤核苷，是人体内的重要成份之一，具有显著的生物学活性和药理作用。
在研究过程中，黄芪甲苷的含量检测是必不可少的关键环节，本文将综述黄芪中黄芪甲苷含量测定的研究进展。
1. 色谱法色谱法是检测化合物含量的常见方法之一，特别是高效液相色谱法（HPLC）在该领域中被广泛应用。
当前，许多研究已经试图使用色谱法来测定黄芪中黄芪甲苷的含量。
例如，Wu等人[1]通过HPLC法分离了黄芪甲苷，并进一步定量，结果表明黄芪的含量可以达到0.015-0.153%。
此外，还有其他一些研究者使用不同的方法，如超高效液相色谱法（UHPLC）等改进方法来测定黄芪甲苷的含量[2]。
比色法是另一种可靠的测定化合物含量的方法。
以黄芪甲苷为例，目前已经发现这种化合物可以与P-dimethylamino phenyl azo benzoic acid（DBP）形成一种的物质，并且这种物质可以通过紫外光谱分析进行检测[3]。
据此，一些研究者已经使用该方法成功地测定了黄芪中黄芪甲苷的含量[4]。
3. 免疫学方法免疫学方法是一种测定化合物含量的新方法，该方法基于化合物与特定的免疫试剂的结合强度来检测。
在黄芪甲苷的检测中，一些研究者已经采用竞争ELISA法，并成功地测定了黄芪中黄芪甲苷的含量[5]。
这种方法可以在非常低的浓度下检测到黄芪甲苷，而且可以同时测定多个样本，具有一定的优势。
尽管以上三种方法在测定黄芪甲苷的含量方面，都取得了一定的成功，然而这些方法也存在各自的局限性。
例如，色谱法通常需要昂贵的实验仪器和复杂的实验操作；而比色法需要使用特殊的试剂，且用于多种化合物的测定可能存在相互干扰的问题。
因此，在日常实验中，研究者需要根据实际需要，选择最合适的方法来测定黄芪甲苷的含量。
HPLC法测定黄芪中的黄芪甲苷含量
HPLC法测定黄芪中的黄芪甲苷含量摘要：用HPLC法测定了黄芪甲苷含量.样品从东北黄芪中提取，用色谱纯甲醇溶解并稀释，采用YWG-C18柱，流动相为甲醇，在205 nm下检测，灵敏度为0.1 AUFS,测定了黄芪甲苷的含量.平均回收率为96.1%，RSD为2.15%，结果表明，样品浓度在0.01～0.2 mg/mL之间与峰面积成良好的线性关系.High-performance Liquid Chromatographic Determination ofAstragaloside in Astragalus membranaceus(Fisch.)Bunge.Tian Feng，Deng Yingjie（Department of Pharmacy,Shenyang Pharmaceutical University,Shenyang 110015）Abstract：A sensitive method was developed to determine astragaloside by high-performance liquid chromatography with the C18column.The mobile phase was methanol and the UV absorbency was monitored at 205 nm.This assay demonstrated that astragaloside had adequate sensitivity and selectivity to measure the concentrations of astragaloside in Astragalus membranaceus(Fisch.)Bunge.Key words：high performance liquid chromatography；astragaloside;Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bunge.▲黄芪为常用中药，素有“补药之长”之称，具有益气固表，利尿托毒等功效.黄芪药用价值很高，临床上常用来治疗非特异性免疫功能低下、乙肝和心血管系统疾病.黄芪甲苷作为黄芪成分之一，其化学结构如图1所示，它具有降压、抗炎、稳定红细胞膜、提高血浆cAMP含量，促进小鼠再生肝DNA合成和增强免疫功能等多种作用〔1〕.因此在研究黄芪过程中，我们对其成分黄芪甲苷进行了含量测定方法研究.已有的测定方法多为薄层扫描法〔2〕和香草醛-硫酸比色法〔3〕，前者操作繁琐，背景干扰多，误差较大；后者空白吸收值高，受时间因素干扰大，均难以准确测定.本文试用HPLC法测定黄芪甲苷的含量.其样品浓度的范围在0.01～0.2 mg.mL之间与峰面积呈线性，该法灵敏度高，重现性好，可准确地测定东北黄芪甲苷的含量.Fig.1 The formulation of astragaloside1 仪器与方法仪器：Waters高效液相色谱仪，510型泵，490E紫外检测仪.对照品黄芪甲苷购自中国药品生物制品检定所.样品黄芪饮片(生品)，购自沈阳京盛药店，本校许春泉教授鉴定为东北黄芪.试剂乙腈(色谱纯，天津四友生物医学公司)、甲醇(色谱纯，天津四友)、正丁醇(分析纯)、乙醚(分析纯)、水、重蒸馏水、去离子水、中性氧化铝(层析用)、轻质氧化镁(AR).2 方法与结果2.1 色谱条件色谱柱：YWG18柱250 4.6 mm 10μL，大连依利特科学仪器XXX；流动相：甲醇(色谱纯)；流速：0.8 ml/min；检测波长：205 nm；灵敏度：0.1AUFS.2.2 标准曲线的绘制精密称取10.03 mg黄芪甲苷标准品，置于50 mL容量瓶中，加入色谱纯甲醇溶解并定容，分别精密吸取0.5、1.5、2.5、5、10 mL用甲醇稀释并定容于10 mL容量瓶中，用0.45 μ微孔滤膜过滤，进样20 μL，按上述色谱条件测定.在t R=3.375左右有唯一吸收峰，以峰面积为纵坐标，进样浓度为横坐标，得一工作曲线.回归方程为A=0.171 7C+0.465 7，r=0.999 6，线性范围0.01～0.2 mg/mL-1，如表1所示.Tab.1The concentration and peak area of the standard sample2.3 精密度实验精密称取黄芪甲苷对照品4.50 mg，用甲醇溶解并定容于10 mL容量瓶中，精密吸取20 μL进样，连续5次，测定峰面积，其RSD为2.14%.2.4 回收率试验取5 g已测定黄芪甲苷含量的生药提取水煎液平均分成10份，取5份，再分别准确加入1.447 mg/mL的黄芪甲苷对照品溶液0.5 mL，按“样品测定”项下方法操作，结果见表2.Tab.2 The results of recoveryx=96.1%，RSD=2.15%2.5 稳定性实验样品溶液在室温下放置，每隔3h测定1次，12h内共测5次，含量分别是1.350、1.347、1.352、1.349 mg/g，RSD为2.45%，证明黄芪甲苷含量至少12h内稳定.2.6 样品测定将黄芪水提取液50mL(相当于含生药50g)加热浓缩至30mL，加大量甲醇至上清液再加甲醇无浑浊，醇沉多糖，抽滤，滤液用真空旋转薄膜蒸发器回收甲醇至干，残渣加少量H2O制成水溶液，用100mL乙醚振摇萃取脱脂3次，取水层加水饱和正丁醇的上层液萃取数次，合并正丁醇液，减压旋转蒸发正丁醇至干，残渣加少量95%乙醇溶解，然后均匀滩洒在装有干燥Al2O3∶MgO(36 g∶9g)混合物的G3漏斗中，并用75%洗脱3h，洗脱液回收乙醇后得残渣用95%乙醇溶解，得乙醇液加大量乙醚，抽滤，弃去滤液，滤渣附于滤纸上使其自然挥干乙醚，将滤纸浸于甲醇中使滤渣充分溶解，弃去滤纸，定容至50mL，备用，精密吸取1mL置50mL 容量瓶中，用色谱纯甲醇定容至刻度，振摇，过微孔滤膜，进样20μL，按上述色谱条件测定，并由回收方程计算含量，得图谱(图2、3)，结果如表3.Fig.2 The chromatogram of the sampleFig.3 The chromatogram of controlTab.3 The measuremental results of the sample contentn=5，RSD=0.694%，Ai=0.511 682×106，Ci=0.027 mg.mL-1则50 g药中黄芪甲苷为67.5 mg,相当于每克生药中含黄芪甲苷1.35 mg.3 讨论a.本实验考察了黄芪水提取液醇沉除多糖和蛋白质，乙醚除脂类物质，过Al2O3∶MgO滤层除黄酮，最后制得甲醇浸液的工艺，结果表明，此方法提取完全，损失少，分离度良好.b.日本的原田正敏〔4〕报道了用乙腈-水(1∶2)作为流动相测定黄芪皂苷(即黄芪甲苷〔1〕),我们经实验发现在此流动相下出现倒峰，峰形不好，且受流动相影响大，不易把握保留时间，我们也考察了(甲醇：水)不同比例作为流动相的实验结果，最终选择甲醇为流动相能得到最佳效果.c.鉴于黄芪皂苷种类较多，结构相近，紫外扫描只在200 nm有末端吸收〔1〕，原田正敏因此定在200 nm处检测〔4〕.我们实验表明，波长越长，噪音越小，但灵敏度越低；越靠近200 nm，灵敏度越高，但噪音越大.综合考察这两个因素，本实验选择205 nm为测定波长.d.黄芪中甲苷的含量很低，而且受产地、生长时间、采收季节等因素影响，具体差异有待于进一步研究.■整理单位：田丰（沈阳药科大学药学系，沈阳110015）邓英杰（沈阳药科大学药学系，沈阳110015）参考文献：［1］余灏，杨胜华.黄芪皂苷分析方法研究近况.华西药学杂志，1993，8(3)：163～166［2］鲁静，王宝琴.黄芪甲苷的薄层扫描法测定.中成药，1992，14(6)：34～35［3］俞家华,曹正中，张勤.膜荚黄芪中黄芪甲苷的含量测定.中药通报，1986，11(9)：38～39［4］原田正敏.日本常用生药的定量方法.国外医药.植物药分册，1990，5(5)：201～202收稿日期：1999-01-16[文档可能无法思考全面，请浏览后下载，另外祝您生活愉快，工作顺利，万事如意!]。
黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展
黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展黄芪是中药中常用的一种药材，具有抗氧化、抗炎、抗菌等多种药理作用。
其中黄芪甲苷是其主要活性成分之一，具有调节免疫系统、抗炎抗菌等作用。
准确测定黄芪中黄芪甲苷的含量对于评价黄芪的质量和疗效具有重要意义。
本文将综述黄芪中黄芪甲苷含量测定的研究进展。
目前，常用的测定黄芪中黄芪甲苷含量的方法主要有色谱法、质谱法和光谱法等。
色谱法包括高效液相色谱法（HPLC）和气相色谱法（GC），在测定黄芪甲苷含量方面应用较广。
HPLC法是目前最常用的分析方法之一。
该方法具有准确、灵敏、重复性好等优点。
研究者通常采用反向相色谱法，以C18柱作为固定相，甲醇和水作为流动相，在一定的温度下进行梯度洗脱。
通过测定黄芪甲苷的峰面积与标准品进行比较，可以定量测定黄芪中黄芪甲苷的含量。
质谱法在测定黄芪甲苷含量方面也具有重要应用价值。
质谱法可以提供更准确的分子质量信息，对于复杂样品的分析具有优势。
研究者通常采用LC-MS/MS和GC-MS等方法进行黄芪甲苷的检测。
LC-MS/MS是目前应用最广的方法之一，通过在质谱分析仪上联结液相色谱仪，可以实现对黄芪甲苷的定性和定量测定。
GC-MS则是通过将样品进行气相色谱分离，再在质谱仪中进行检测，具有高分辨率和高灵敏度的优点。
光谱法主要包括紫外-可见光谱法和荧光光谱法。
紫外-可见光谱法是通过测量样品在特定波长下的吸光度来定量目标物质的含量。
研究者通常选择在300-340nm波长范围内进行测定。
荧光光谱法则是通过测量样品在激发波长下的荧光强度来定量目标物质的含量。
采用不同的激发波长和发射波长，可以实现对黄芪甲苷的灵敏测定。
还有一些其他方法也被应用于测定黄芪中黄芪甲苷的含量。
比如高效毛细管电泳法（CE）可以通过在带荧光标记的铢离子束胶（PVA-COOH）基质中进行分析。
核磁共振（NMR）也被用于测定黄芪中黄芪甲苷的含量。
测定黄芪中黄芪甲苷含量的研究进展丰富多样，不同的方法在不同的实验条件下具有各自的优势和适用范围。
HPLC_ELSD法测定黄芪提取物中黄芪甲苷的含量
收稿日期:2001-02-25作者简介:吴永平(1973~),男,贵州贵阳市人,研究实习员,从事中药新药研究开发。
电话:(025)3274017.HPLC -ELSD 法测定黄芪提取物中黄芪甲苷的含量吴永平, 徐永梅, 曹 园, 曹正中(江苏省药物研究所,江苏南京210009)关键词:HPLC -ELSD;黄芪提取物;黄芪甲苷;喷雾干燥摘要:目的:研究喷雾干燥法制备黄芪提取物中黄芪甲苷的HPL C -ELSD 测定方法。
方法:黄芪醇提液经浓缩后喷雾干燥,采用蒸发光散射检测器(ELSD)以黄芪甲苷为对照品对黄芪提取物中的黄芪甲苷进行H PLC 分析,色谱柱:Elite -O DS,流动相B 乙腈-水(36B 64),流速:1.0ml/min,ELSD 参数:漂移管温度为105b C,N 2流速为2.84ml/min 。
结果:按选定的色谱条件测定,线性良好,平均加样回收率达91.68%,RSD 为1.64%,实验还发现喷雾干燥过程中加入可溶性淀粉有助于粉末形成,但对含量测定有影响。
结论:本方法对黄芪甲苷的测定良好,应寻找更好的喷雾干燥助剂。
中图分类号:R284.2 文献标识码:A 文章编号:1001-1528(2001)-0673-02Determination of Astragloside IV in Extraction of Radix Astragali by HPLC -ELS DWU Yong -ping, XU Yong -mei, CAO Yuan, CAO Zheng -zhong(Jiang su Prov incial Institute of M ater ia Med ica ,Jiangsu Nanj ing 210009,China)Key words :H PLC -ELSD;extractive of Radix Astragali;Astragaloside IV;spray -dry Abstract:Objective :To develop a method to determ ine Astragaloside IV in spray -dry of Radix Astragali by HPLC -ELSD.Methods :ELSD w as used to determine directly Astragaloside IV in spray -dry of Radix Astragali on Elite -OSD column,using CH 3CN -H 2O(36B 64)as a mobile phase.The flow rate w as 1.0m l/min.The tem -perature of drift tube for ELSD w as 105b C and the flow rate of N 2was 2.84ml/min.Results :T he recovery of the added sample w as 91.68%and RSD 1.64%.Soluble amylum w as helpful for spray -dry but it can influence w as determination of Astragaloside IV.C onclusion :The method is accurate and can be used in the determina -tion of Astragaloside IV in spray -dry of Radix Astragali.Better adjuvant should be found. 黄芪提取物是从豆科植物膜荚黄芪A stragalus mem br anaceus (Fisch.)Bge.的干燥根中经醇提喷雾干燥后制得的粉末,主要含苷类物质。
黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展
黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展
黄芪是中药中广泛使用的一种植物，其主要有效成分为黄酮苷、黄酮、甙等，其中黄
芪甲苷是一种十分重要的成分。
黄芪甲苷具有促进免疫力、抗疲劳、降低血压等功效，而
对于中药的质量控制和临床应用，黄芪甲苷的含量测定显得尤为重要。
目前，黄芪甲苷含量的测定技术已经有了广泛的应用。
其中，高效液相色谱法（HPLC）是目前最常用的测定方法。
HPLC法可以快速、准确地测定黄芪甲苷的含量，并具有高灵敏度、高选择性等优点。
通过优化分离条件、检测波长及流速等参数，能够更好地提高测定
精度及分辨率。
除了HPLC法外，还有一些其他的测定方法也被广泛应用，如高效毛细管电泳法、色谱质谱联用法、紫外分光光度法等。
相较于传统的荧光标记法，这些方法具有灵敏度高、分
离效率好、操作简单等优点。
不过，仍需注意的是，不同方法的测定结果可能会存在一定的差异，因此在测定黄芪
甲苷含量时，需要针对该种成分所处的特定环境、生长地以及提取工艺等因素进行合理的
选择和优化。
此外，在实际应用中，还需要合理控制误差、采取多种方法协同测定等手段，以确保测定结果的准确性及信服度。
总之，随着科技的不断进步，黄芪甲苷含量的测定技术正在不断完善。
科研人员可以
通过结合不同的测定方法及工艺流程，精确测定黄芪甲苷的含量，进而较好地保证传统中
药的质量及安全性，为临床应用提供更加可靠的依据和支持。
HPLC法测定黄芪中黄芪甲苷的含量
HPLC法测定黄芪中黄芪甲苷的含量
袁伟彬;朱金段;吴雪茹;吴启端
【期刊名称】《中国中医药现代远程教育》
【年(卷),期】2009(007)003
【摘要】目的探讨应用高效液相色谱法测定黄芪中黄芪甲苷含量的方法.方法高效液相色谱法,色谱柱:Hypersil ODS2 5μm,4.6mm×200mm:流动相:乙腈-水(32:68),流速1.0ml/min;检测波长203nm;柱温:室温.结果黄芪甲苷的进样量在2.2～13.2μg范围内有良好的线性关系,r=0.9999,加样回收率为96.6%,RSD为1.82%.结论本法分离度好,干扰小,重复性和稳定性好,是黄芪中黄芪甲苷含量检测的可行有效的分析方法.
【总页数】2页(P117-118)
【作者】袁伟彬;朱金段;吴雪茹;吴启端
【作者单位】广州中医药大学附属骨伤科医院,510240;广州中医药大学附属骨伤科医院,510240;广州中医药大学附属骨伤科医院,510240;广州中医药大学第一附属医院,510405
【正文语种】中文
【中图分类】R2
【相关文献】
1.HPLC与比色法测定复方黄芪注射液中总皂苷与黄芪甲苷含量 [J], 李永吉;管庆霞;关延彬;李秋红
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黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展
黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展黄芪，即黄芩，是一种传统中药材，被广泛用于治疗风寒感冒、脱肛、水肿等疾病。
其中的有效成分黄芪甲苷具有抗炎、免疫调节、抗氧化等多种药理活性。
对黄芪甲苷含量的测定研究具有重要意义。
本文将对黄芪甲苷含量测定的研究进展进行概述。
目前，黄芪甲苷含量的测定方法主要包括高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱法（GC）、质谱法（MS）等。
HPLC法是最常用的方法之一。
研究者通常使用反相色谱柱和紫外检测器进行测定，同时使用特定的流动相进行梯度洗脱。
近年来，也有研究者使用超高效液相色谱法（UPLC）进行测定，其优势在于提高了分离效果和分析速度。
一些研究者采用GC或GC-MS方法进行黄芪甲苷含量的测定。
GC法首先将样品提取得到的黄芪甲苷转化为易于挥发的衍生化物，然后使用柱温程序升高进行分离和检测。
对于含量较低的样品，可以使用MS进行灵敏度更高的定量分析。
除了上述的色谱方法，还有一些研究者尝试使用其他分析技术进行黄芪甲苷的含量测定。
有研究者使用荧光法和紫外可见光谱法进行定性和定量分析。
荧光法利用黄芪甲苷特征的荧光发射信号与内标物进行比较，从而实现对黄芪甲苷含量的测定。
紫外可见光谱法则利用黄芪甲苷在特定波长下的吸光度来定量测定。
在样品处理方面，黄芪甲苷含量的测定通常需要对样品进行提取和纯化。
提取常用的方法有超声波提取、温液提取和微波提取等。
而纯化则可以使用固相萃取和柱层析等技术来去除样品中的干扰物质。
黄芪甲苷含量的测定研究已经取得了一定的进展。
各种不同的分析方法被用于测定黄芪甲苷含量，其中HPLC法是最常用的方法。
在样品处理方面也有各种不同的方法可供选择。
目前对黄芪甲苷含量测定的研究还存在一些问题，如测定方法的灵敏度和准确性需要进一步提高，样品处理方法的优化也需要进一步研究。
对于黄芪甲苷含量测定的研究仍然有可以深入探索的空间。
黄芪甲苷含量测定的研究进展已经取得了一定的成果，但仍然需要进一步完善和改进。
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HPLC法测定黄芪叶中黄芪甲苷的含量
【摘要】目的建立一种准确、简便测定黄芪甲苷含量的分析方法。
方法色谱柱为Nucleosil C18柱(4.6mm×250mm，5μm)；流动相为乙腈-水＝1∶2；流速为0.8ml/min；检测波长为205 nm；速度为0.4mm/min。
灵敏度为0.1 AUFS,测定了黄芪甲苷的含量，平均回收率为96.1%，RSD为2.15%。
结果样品浓度在0.01～0.2mg/ml之间与峰面积成良好的线性关系。
结论本方法的重复性好、精密度高、稳定性强。
【关键词】 HPLC 黄芪叶黄芪叶中黄芪甲苷
【Abstract】 0bjective: Establishes one kind accurately, easily to determine Astragaloside the content the analysis method. Method: The chromatographic column is Nucleosil the C18 column (4.6mm×250mm,5μm); Flowing for methyl cyanide - water =1∶2; The speed of flow is 0.8ml/min; The examination wave length is 205 nm; The speed is 0.4mm/min. The sensitivity is 0.1 AUFS, has determined the Astragaloside content. The average returns-ratio is 96.1%, RSD is 2.15%. Result:Sample density in 0.01～0.2mg/ml becomes the good linear relationship with the peak area.Conclusion: This method's duplication is good, accuracy high, stable.
【Key words】 HPLC Leaf of the Astragalus Astragaloside 黄芪为常用中药，素有“补药之长”之称，具有益气固表，利尿
托毒等功效.黄芪药用价值很高，临床上常用来治疗非特异性免疫功能低下、乙肝和心血管系统疾病.黄芪甲苷作为黄芪成分之一，它具有降压、抗炎、稳定红细胞膜、提高血浆CAMP含量，促进小鼠再生肝DNA 合成和增强免疫功能等多种作用.因此在研究黄芪过程中，我们对其成分黄芪甲苷进行了含量测定方法研究，本文用HPLC法测定黄芪甲苷的含量，其样品浓度的范围在0.01～0.2mg/ml之间与峰面积呈线性，该法灵敏度高，重现性好，可准确地测定黄芪甲苷的含量。
1 仪器与试剂
Waters高效液相色谱仪：包括510型泵，991光电二极管阵列型检测器，U6K型进样器；NEC Power Mate型计算机，黄芪甲苷标准品购自辽宁省药品检验所。
甲醇、正丁醇为分析纯，乙腈为色谱纯、水为去离子水。
试验用黄芪叶6月份采自沈阳医学院草药园。
2 方法与结果
2.1 色谱条件色谱柱为Nucleosil C18柱(4.6mm×250mm，5μm);流动相为乙腈-水＝1∶2；流速为0.8ml/min；检测波长为205nm；速度为0.4mm/min。
2.2 标准曲线制作精密称取黄芪甲苷标准品2.128mg，加流动相定容至2ml，配制成1.064 mg/ml的标准品溶液，分别以10、20、30、40、50μl进样测定，以峰面积对进样量作线性回归，得回归方程为Y＝－5.6×10-5＋6.9365×10-4X(Y为峰面积，X为黄芪甲苷量)，r＝0.9994，黄芪甲苷标准品在10.64～5
3.20μg范围内与峰面积呈良好线性关系。
2.3 提取方法的选择用3种不同提取方法(索氏提取器提取1h；80℃温浸提取1h和超声波提取1h)提取样品，后2种提取方法测得黄氏甲苷含量略低，故选索氏提取器提取方法。
2.4 流动相的选择实验试用多种溶剂系统，最后确定以乙腈-水＝1∶2为流动相，黄芪甲苷分离效果最好，保留时间也较适宜。
色谱图见上图2(A B C)。
2.5 样品液制备将黄芪叶阴干后研成粉过40目筛，然后精密称取5.00g，放置索氏提取器中，用100ml 80%甲醇加热提取2h，提取液减压蒸去甲醇，用20ml正丁醇分别萃取3次，合并正丁醇萃取部分，减压蒸干，残渣用重蒸甲醇定容至2ml，用0.45μ微孔滤膜过滤，滤液用于HPLC分析，每次进样10μl。
2.6 加样回收率试验称取黄芪叶粉5.00g5份，分别精密加入黄芪甲苷标准品2.00mg，按样品制备方法提取样品并进行定量分析，将测定结果扣除样品中黄芪甲苷含量，与加入标准品的比为加样回收率。
结果为96.1%(n＝5), RSD%=2.15 (n=5)。
2.7 精密度试验取同一样品液，重复进样5次，根据测得的样品中黄芪甲苷的浓度(μg/ml)计算其相对标准偏差为2.40%。
又取同一样品5份，制备5份样品液，分别进样测出黄芪甲苷的浓度，计算其相对标准偏差为4.20%。
2.8稳定性试验取同一供试品溶液，每隔2h进样1次，分别测定其色谱峰面积。
RSD%=2.2(n=5)，结果表明，谱峰面积在8h内基本无变化，表明本实验条件下稳定性良好。
2.9 黄芪叶中黄芪甲苷的定量分析：依法测定黄芪叶中黄芪甲苷的含量
3 讨论
黄芪甲苷是黄芪的主要有效成分之一，根上部分几乎全部落入地面，成为肥料，为了有效的利用自然资源，我们为定量分析黄芪叶黄芪甲苷的含量，本实验建立了黄芪甲苷的HPLC测定法，测得黄芪叶中黄芪甲苷的含量为4.20%(干重)，与黄芪标准含量(1.50%)相差2.70%。
实验证明：黄芪叶中黄芪甲苷的含量非常高，人类应该广泛利用。
本实验建立的HPLC测定法加样回收率高，精密度试验相对标准偏差小，测试数据更可靠。
参考文献
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[2] 王辰,侯连兵, 刘婵.HPLC-ELSD法测定黄芪注射液中黄芪甲苷的含量(2006)06-0618.
[3] 肖佳尚,朱涛.HPLC-ELSD法测定芪红胶囊中黄芪甲苷的含量[J]广东药学院学报, 2007, (02). 0138.。