10.化学发光分析法
光化学分析技术new
光化学分析技术阿贝折射仪测定乙醇的含量分光光度计测定磷的含量分光光度计测定铁的含量凡是基于检测能量作用于待测物质后产生的辐射讯号或所引起的变化的分析方法均可称为光化学分析法。
光化学分析法愈来愈广泛应用于物理，化学和生物等各个学科领域，特别在物质组成和机构的研究、基团的识别、几何构型的确定以及表面分析等方面，更具有其优越性。
光化学分析法的分类光化学分析法可以分为非光谱法与光谱法两大类。
非光谱法是指那些不以光的波长为特征讯号，仅通过测量电磁辐射的某些基本性质（反射、折射、干涉、衍射和偏振）等的变化的分析方法。
这类方法主要有折射法、比浊法，旋光法、衍射法等。
光谱法主要是基于光的吸收、发射、拉曼散射等作用而建立的分析方法，它通过检测光谱的波长和强度来进行定性和定量分析。
1光谱法光谱法可分为3种基本类型：吸收光谱法、发射光谱法和散射光谱法。
吸收光谱法：吸收光谱是物质吸收相应的辐射能而产生的光谱。
其产生的必要条件是：所提供的辐射能恰好满足该吸收物质两能级间跃迁所需的能量。
具有较大能量的γ射线可被原子核吸收；X射线可被原子内层电子吸收；紫外和可见光可被原子和分子的外层电子吸收；红外线可产生分子的振动光谱；微波和射频可产生转动光谱。
所以，根据物质对不同波长的辐射能的吸收，可以建立各种光谱法，如表3.3.1所示。
方法名称辐射能作用物质检测信号莫斯鲍尔光谱法γ射线原子核吸收后的γ射线X射线吸收光谱 X射线 Z>10的重元素吸收后的X 射线放射性同位素原子的内层电子原子吸收光谱法紫外、可见光气态原子外层的电子吸收后的紫外、可见光紫外、可见分光光度法紫外、可见光分子外层的电子吸收后的紫外、可见光红外吸收光谱法炽热硅碳等2.5μm--15μm的红外光分子振动吸收后的红外光核磁共振波谱法 0.1MHz—100MHz的射频原子核磁共振磁量子吸收有机化合物分子的质子电磁自旋共振波谱法 10000MHz—800000MHz的微波未成对的电子吸收激光吸收光谱法激光分子（溶液）吸收激光光声光谱法激光分子（气体）声压分子（固体）分子（液体）激光热透镜光谱法 激光 分子（溶液） 吸收表3.3.1上述吸收光谱的形成过程，可用下式表达：*→+X hv X 辐射能的吸收hv X X +→* 辐射能以光的形式发射或 +→*X X 热能 辐射能以热能的形式释放式中：X 表示基态粒子； *X 表示激发态粒子； hv 表示辐射能。
体内药物分析复习题
一、简述与常规药物分析相比，体内药物分析有哪些特点。
一、简述与常规药物分析相比，体内药物分析有哪些特点。
体内药物分析，体内药物分析，是一门新兴学科，是一门新兴学科，是一门新兴学科，是药物分析的重要分支，是药物分析的重要分支，是药物分析的重要分支，也是现代药学的也是现代药学的创新、创新、延伸和发展。
延伸和发展。
延伸和发展。
体内药物分析旨在通过各种分析手段，体内药物分析旨在通过各种分析手段，体内药物分析旨在通过各种分析手段，了解药物在体内的数了解药物在体内的数量与质量变化，量与质量变化，获得药物动力学的各种参数、获得药物动力学的各种参数、获得药物动力学的各种参数、药物在体内的生物转化、药物在体内的生物转化、药物在体内的生物转化、代谢方式代谢方式和途径等信息。
和途径等信息。
与常规药物分析相比，体内药物分析有以下特点：1、干扰杂质多，样品一般需经过分离、净化才能进行分析。
2、样品量少（、样品量少（ng/ml-ug/ml ng/ml-ug/ml ng/ml-ug/ml）），不易重新获得，在测定前需要浓缩、富集。
3、药物浓度低，对分析方法的灵敏度和专属性要求高 。
4、要求较快提供结果（临床用药监护，中毒解救等）5、要有可以进行复杂样品分析的设备如GC-MS GC-MS、、HPLC 等。
等。
6、工作量大，测定数据的处理和结果的阐明不太容易。
二、简述常用生物样本的种类及采集、储存方式。
简述生物样品测定前除蛋白质的原因及常用方法。
前除蛋白质的原因及常用方法。
1、血液、血液采集：待药物在血液中分布均匀后取样，从静脉采血。
制备：血浆制备：血浆(plasma)(plasma)(plasma)：全血：全血：全血++抗凝剂（肝素等）—离心—上清液（淡黄色）血清血清(serum)(serum)(serum)：全血静置一段时间—离心—上清液（淡黄色）：全血静置一段时间—离心—上清液（淡黄色）全血全血(whole blood)(whole blood)(whole blood)：全血：全血：全血 + + + 抗凝剂（肝素等）—混合抗凝剂（肝素等）—混合抗凝剂（肝素等）—混合储存：采血后即使分离，不超过2h 2h，分离后置于冰箱或冷冻柜中保存；若不予先，分离后置于冰箱或冷冻柜中保存；若不予先分离，血凝后冰冻保存；短期分离，血凝后冰冻保存；短期44℃，长期℃，长期-20-20-20℃。
仪器分析习题(附答案)
1。
仪器分析法的主要特点是( D ）A。
分析速度快但重现性低，样品用量少但选择性不高B。
灵敏度高但重现性低,选择性高但样品用量大C。
分析速度快，灵敏度高，重现性好，样品用量少，准确度高D. 分析速度快，灵敏度高,重现性好，样品用量少,选择性高2. 仪器分析法的主要不足是（B ）A. 样品用量大B。
相对误差大 C. 选择性差D。
重现性低3. 下列方法不属于光分析法的是( D )A。
原子吸收分析法 B. 原子发射分析法 C. 核磁共振分析法D。
质谱分析法4。
不属于电分析法的是（D )A。
伏安分析法B。
电位分析法C。
永停滴定法 D. 毛细管电泳分析法5. Ag-AgCl参比电极的电极电位取决于电极内部溶液中的( B )。
A. Ag+活度B。
C1－活度 C. AgCl活度D。
Ag+和C1－活度之和6. 玻璃电极使用前，需要（ C ）.A. 在酸性溶液中浸泡1 h B。
在碱性溶液中浸泡1 hC。
在水溶液中浸泡24 h D。
测量的pH不同，浸泡溶液不同7。
根据氟离子选择电极的膜电位和内参比电极来分析，其电极的内充液中一定含有( A )。
A. 一定浓度的F－和Cl－B. 一定浓度的H+C. 一定浓度的F－和H+ D。
一定浓度的Cl－和H+8. 测量pH时,需要用标准pH溶液定位，这是为了( D ）.A。
避免产生酸差 B. 避免产生碱差C。
消除温度的影响 D. 消除不对称电位和液接电位的影响9. 玻璃电极不包括( C ）。
A. Ag—AgCl内参比电极B. 一定浓度的HCl溶液C. 饱和KCl溶液D. 玻璃膜10. 测量溶液pH通常所使用的两支电极为（ A ）。
A. 玻璃电极和饱和甘汞电极B。
玻璃电极和Ag-AgCl电极C。
玻璃电极和标准甘汞电极D。
饱和甘汞电极和Ag-AgCl电极11. 液接电位的产生是由于（ B ）。
A. 两种溶液接触前带有电荷B. 两种溶液中离子扩散速度不同所产生的C. 电极电位对溶液作用的结果D. 溶液表面张力不同所致12. 离子选择性电极多用于测定低价离子，这是由于( A ）。
分析化学标准标准答案(师版下册)
第一章 绪论1． 解释下列名词：（1）仪器分析和化学分析；（2）标准曲线与线性范围；（3）灵敏度、精密度、准确度和检出限. 答：（1）仪器分析和化学分析：以物质地物理性质和物理化学性质（光、电、热、磁等）为基础地分析方法，这类方法一般需要特殊地仪器，又称为仪器分析法；化学分析是以物质化学反应为基础地分析方法.b5E2R 。
（2）标准曲线与线性范围：标准曲线是被测物质地浓度或含量与仪器响应信号地关系曲线；标准曲线地直线部分所对应地被测物质浓度（或含量）地范围称为该方法地线性范围.p1Ean 。
（3）灵敏度、精密度、准确度和检出限：物质单位浓度或单位质量地变化引起响应信号值变化地程度，称为方法地灵敏度；精密度是指使用同一方法，对同一试样进行多次测定所得测定结果地一致程度；试样含量地测定值与试样含量地真实值（或标准值）相符合地程度称为准确度；某一方法在给定地置信水平上可以检出被测物质地最小浓度或最小质量，称为这种方法对该物质地检出限.DXDiT 。
2． 对试样中某一成分进行5次测定，所得测定结果（单位μg ⋅mL -1）分别为 0.36，0.38，0.35，0.37，0.39.RTCrp 。
（1） 计算测定结果地相对标准偏差；（2） 如果试样中该成分地真实含量是0.38 μg ⋅mL -1，试计算测定结果地相对误差.解：（1）测定结果地平均值37.0539.037.035.038.036.0=++++=x μg ⋅mL -1 标准偏差122222120158.015)37.039.0()37.037.0()37.035.0()37.038.0()37.036.0(1)(-=⋅=--+-+-+-+-=--=∑mL g n x x s n i iμ相对标准偏差 %27.4%10037.00158.0%100=⨯=⨯=xs s r （2）相对误差 %63.2%10038.038.037.0%100-=⨯-=⨯-=μμx E r .3． 用次甲基蓝-二氯乙烷光度法测定试样中硼时，为制作标准曲线，配制一系列质量浓度ρB （单位mg ⋅L -1）分别为0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0地标准溶液，测得吸光度A 分别为0.140，0.160，0.280，0.380，0.410，0.540.试写出该标准曲线地一元线性回归方程，并求出相关系数.5PCzV 。
化学发光法的原理
化学发光法的原理化学发光法是一种利用化学方法产生可见光的技术，也称为化学发光分析法。
它利用发光试剂在特定条件下，通过化学反应产生光，可以被用于定量分析、生物标记和其他各种应用。
化学发光法的原理是基于某些特定的化学反应在产生产生光的过程中释放能量，这种能量通过光的形式被观测和测量，用于分析和检测目标物质。
化学发光法主要由两个部分组成：发光试剂和检测系统。
首先，发光试剂是化学发光反应的关键。
发光试剂通常由发光底物和触发剂组成。
发光底物是一种化学物质，可以与触发剂发生特定的化学反应，产生激发态粒子。
而触发剂则通常是一种促进化学反应发生的催化剂或者能量传递剂。
当发光试剂与目标物质接触时，发光试剂中的发光底物被激发，激发态的粒子释放出能量，产生光。
这种化学反应通常是一个连续的过程，发生在短时间内产生大量的光。
这种光通常具有特定的波长和强度，可以被用来计量反应物质的浓度或者进行定量分析。
在化学发光法中，检测系统是至关重要的部分。
检测系统通常由光源、光学系统和检测器组成。
光源通常是一种灯或者激光器，用于提供激发发光试剂所需的能量。
光学系统用于聚焦和收集发光产生的光，并将光信号传输到检测器中进行测量和分析。
检测器则用于测量光的强度或者其他光学特性，将信号转换成电信号，并进行信号处理和数据分析。
化学发光法可分为化学发光熄灭法和化学发光增光法两种类型。
化学发光熄灭法是指在化学发光反应中，加入其他物质导致发生化学熄灭而产生弱光信号；化学发光增光法则是指通过其他物质的增光作用，使发光反应产生的弱光信号变得更强，从而提高测定灵敏度。
这两种类型的化学发光法在分析应用中经常被使用。
化学发光法在生物分析、环境监测、食品安全等领域有着广泛的应用。
在生物学研究中，化学发光法被用于检测生物分子的含量和活性，例如酶活性、DNA含量和氧化还原反应等。
在临床诊断中，化学发光法也被用于检测特定生物标志物和药物浓度，用于疾病诊断和治疗监测。
此外，化学发光法也可以用于环境中有毒物质和污染物的检测和监测，以及食品中有害物质的快速检测。
化学发光免疫分析技术
• 化学发光免疫分析仪是通过检测患者血清内待测物质从而 对人体进行免疫分析的医学检验仪器。将定量的患者血清 和辣根过氧化物（HRP）加入到固相包被有抗体的白色不 透明微孔板中，血清中的待测分子与辣根过氧化物酶的结 合物和固相载体上的抗体特异性结合。分离洗涤未反应的 游离成分。然后，加入鲁米诺Luminol发光底液 ，利用化 学反应释放的自由能激发中间体，从基态回到激发态，能 量以光子的形式释放。此时，将微孔板置入分析仪内，通 过仪器内部的三维传动系统，依次由光子计数器读出各孔 的光子数。样品中的待测分子浓度根据标准品建立的数学 模型进行定量分析。最后，打印数据报告，以辅助临床诊 断。
血清FT3和FT4降低： ⑴甲减病人两者皆下降，但轻型甲减、甲减初期多 以FT4下降为主；⑵低T3综合征仅有FT3下降； ⑶某些药物，如苯妥英 钠、多巴胺、糖皮质激素也可使FT3和FT4降低。
• T3、T4均升高：高TBG血症、甲亢、甲状腺激素不敏感综合征。
化学发光免疫分析
一、化学发光免疫技术的概念 二、化学发光免疫分析基本原理 三、化学发光免疫分析的类型 四、临床应用 五、发展与展望
一、化学发光免疫技术的概念
化学发光免疫技术：化学发光分析是根据化学反应统与免疫反应相结合，用化学发光相关的物质标记抗体或抗原，与 待测的抗原或抗体反应后，经过分离游离态的化学发光标记物，加入 化学发光系统的其它相关物产生化学发光，进行抗原或抗体的定量或 定性检测。
磁微粒模式图
特点 – 抗原和抗体结合与未结合 部分的易分离
Y
3.2、化学发光酶免疫分析
化学发光酶免疫分析（chemiluminescence enzyme immunoassay，CLEIA）是用参与催化某一化学发光反应的酶 如辣根过氧化物酶（HRP）或碱性磷酸酶(ALP)来标记抗原或抗 体，在与待测标本中相应的抗原(抗体)发生免疫反应后，形成固 相包被抗体-待测抗原-酶标记抗体复合物，经洗涤后，加入底物 (发光剂)，酶催化和分解底物发光，由光量子阅读系统接收，光 电倍增管将光信号转变为电信号并加以放大，再把它们传送至 计算机数据处理系统，计算出测定物的浓度。
10.化学发光分析法
18
快速、高通量催化剂筛选新方法
CL Intensity (A.U) CO Conversion ( % )
CO Conversion
CO在不同催 化剂上的化 学发光信号
化学发光信号 与催化剂活性 的相关性
B 80000
84 82
70000
80
CL Intensity
78
60000
CO Conversion
16
纳米材料表面化学发光的化学选择性
同一样品在不同纳米
材料上的化学发光强
乙
度不同
醇
硫化氢 三甲胺
不同的样品在相同纳 米材料上的化学发光 强度也不同
17
化学发光阵列传感器及分子识别原理
纳米材料表面化 学发光阵列传感 器原理图
不同种类 样品图案
结构相似的 同系物图案
空白
乙醇
三甲胺
硫化氢
甲醇
乙醇
丙醇
丁醇
Au/TiO2 Au/MgO Au/SiO2 Au/ZrO2 Au/ZnO
-19℃
42℃65℃74℃84℃
-80
catalytic activity
Au/TiO 2 Au/MgO
Au/SiO2 Au/ZrO2 Au/ZnO
0
40
80
T (℃)
100%
-40
0
40 80 120 160
Temperature (℃)
自然界奇妙之事
化学发光
1
生活中常见的化学发光现象
2
化学发光定义
化学反应的能量把体系中共存的某种分子从基态激 发到激发态从而产生发光的现象。
3
电致化学发光（ECL)
化学发光法全自动免疫分析仪技术参数
根据需求优先处理单个样本架，或者设定多个固定优先位置
4.样本类型
血清、血浆、全血、尿液
5.死腔量
50 μL (样本杯)
6.吸样量
2-200μL
7.试剂类型
100% 即开即用型液体试剂
8.机载试剂稳定性
15–30天
9.定标频率
15–30 天
10.样本凝块和气泡检测
有
11.试剂压力监测
10.样本凝块和气泡检测
有
11.试剂压力监测
有
12.样本干扰测量
无
13.机上保养记录
有
14.错误代码联机帮助
有
15.远程诊断
有
16.用水要求
平均 <10 L/H ，最大<30 L/H
17.实验室自动化轨道连接
可以
全自动免疫分析仪技术参数
全自动免疫分析仪（一）
1.方法学
化学发光法
2.最快检测速度
200测试/小时
1.方法学
化学发光法
2.最快检测速度
200测试/小时
3.灵活的急诊检测选项
根据需求优先处理单个样本架，或者设定多个固定优先位置
4.样本类型
血清、血浆、全血、尿液
5.死腔量
50 μL (样本杯)
6.吸样量
2-200μL
7.试剂类型
100% 即开即用型液体试剂
8.机载试剂稳定性
15–30天
9.定标频率
15–30 天
有
12.样本干扰测量
无
13.机上保养记录
有
14.错误代码联机帮助
有
15.远程诊断
有
16.用水要求
化学发光法 原始记录
化学发光法原始记录
时间：2022年5月20日
实验目的：利用化学发光法观测某化合物的发光现象，并记录实验过程。
实验步骤：
1. 准备工作：取出所需的试剂及仪器，并检查是否完好无损。
2. 实验组装：将物质A溶解在适量的溶剂中，得到溶液A。
3. 加入触发剂：将适量的触发剂B加入溶液A中，实验开始。
4. 测量发光：将混合液尽快转移到检测仪器中，观测发光强度随时间
的变化。
5. 记录数据：根据检测仪器显示的值，记录下每个时间点的发光强度。
继续观测一段时间，直至发光停止。
6. 分析结果：根据数据分析发光强度和发光持续时间的关系，得出结论。
结果与讨论：
根据实验观察，溶液A在加入触发剂B后迅速发生发光反应。
发光强
度随时间的增加先快后慢，最终趋于稳定。
发光持续时间约为30分钟。
通过分析数据，我们得出了某化合物的发光特性。
结论：
本实验利用化学发光法成功观测到某化合物的发光现象，并记录了其
发光强度随时间的变化。
实验结果表明该化合物具有较强的发光性质，并且能够持续一段时间的发光。
该发光现象可能与其分子结构和特定
的化学反应有关，需要进一步研究和分析。
第五章分子发光—荧光、磷光和化学发光法
2.化学发光效率
发射光子的分子数 cl ce em 参加反应的分子数
激发态分子数 化学效率： ce 参加反应分子数
发光效率：
em
产生光子数 激发态分子数
时刻t 的化学发光强度(单位时间发射的光量子数)：
dc I cl t cl dt
dc/dt 分析物参加反应的速率；
目 录
5-1 荧光和磷光光谱法
5-1-1 5-1-2 5-1-3 5-1-4 基本原理 荧光分析仪器 荧光分析方法的特点与应用 磷光分析法
5-2 化学发光与生物发光分析法
5-1-1 基本原理
5-1-1-1 5-1-1-2 5-1-1-3 5-1-1-4 荧光和磷光的产生 光谱曲线 荧光的影响因素 荧光强度的定量关系
5-1-1-4 荧光强度的定量关系
根据Parker方程，荧光强度F与荧光物质的浓度c 之间的关系是：
F 2.3kI 0 Fcl[1 (2.3cl) / 2! (2.3cl) 2 / 3! ]
k 与仪器有关的常数
I0 激发光的强度 F 荧光量子产率 荧光物质在激发波长处的摩尔吸光系数 l 光程长度。
当cl项很小时，括号内第二项及以后的高次项均 可忽略不计，Parker方程可简化为： F 2.3kI 0 Fcl F = Kc
5-1-2 荧光分析仪器
5-1-2-1 荧光分析仪器框图
光源
消除溶液中可能共存的其它 光线的干扰,以获得所需要 的荧光.
显示
激发光单色器
信号处理
I0
样品池 F 发射光单色器 (荧光单色器) 检测器
4.化学发光反应的类型
（1）气相化学发光反应 a. 一氧化氮与O3的发光反应(可测定空气中NO2的含量） NO + O3 → NO2* NO2* → NO2 + h
五大化学发光标记材料原理详解及检测应用
化学发光及生物发光的原理及其应用第一部分概述化学发光 (ChemiLuminescence ，简称为 CL) 分析法是分子发光光谱分析法中的一类，它主要是依据化学检测体系中待测物浓度与体系的化学发光强度在一定条件下呈线性定量关系的原理，利用仪器对体系化学发光强度的检测，而确定待测物含量的一种痕量分析方法。
化学发光与其它发光分析的本质区别是体系产生发光 ( 光辐射 ) 所吸收的能量来源不同。
体系产生化学发光，必须具有一个产生可检信号的光辐射反应和一个可一次提供导致发光现象足够能量的单独反应步骤的化学反应。
化学发光体系用化学式表示为：依据供能反应的特点，可将化学发光分析法分为： 1 ）普通化学发光分析法 ( 供能反应为一般化学反应 ) ； 2 ）生物化学发光分析法 ( 供能反应为生物化学反应；简称 BCL) ； 3 ）电致化学发光分析法 ( 供能反应为电化学反应，简称ECL) 等。
根据测定方法该法又可分为：1 ）直接测定 CL 分析法；2 ）偶合反应 CL 分析法 ( 通过反应的偶合，测定体系中某一组份；3) 时间分辨 CL 分析法 ( 即利用多组份对同一化学发光反应影响的时间差实现多组份测定 ) ；4 ）固相、气相、掖相 CL 。
分析法；5 ）酵联免疫 CL 分析法等。
化学发光的系统一般可以表示为：在整个的检测系统中其关键的部分为 PMT ，其直接影响到仪器的检测性能，其最高检测极限为 10 － 22 mol/L 。
不同型号的仪器其检测技术不一样，但基本原理都是利用待测组份与体系的化学发光强度呈线性定量关系，而化学发光强度随体系反应进行的速度增强或衰弱。
记录仪记录峰形，以峰高定量，也可以峰面积定量。
因化学发光多为闪烁式发光 (1—2s 左右 ) ，故进样与记录时差短，分析速度快。
第二部分、化学发光常用的化学试剂及其原理化学发光是某种物质分子吸收化学能而产生的光辐射。
任何一个化学发光反应都包括两个关键步骤，即化学激发和发光。
化学发光
化学发光(ChemiLuminescence ，简称为CL) 分析法是分子发光光谱分析法中的一类，它主要是依据化学检测体系中待测物浓度与体系的化学发光强度在一定条件下呈线性定量关系的原理，利用仪器对体系化学发光强度的检测，而确定待测物含量的一种痕量分析方法。
化学发光与其它发光分析的本质区别是体系产生发光( 光辐射) 所吸收的能量来源不同。
体系产生化学发光，必须具有一个产生可检信号的光辐射反应和一个可一次提供导致发光现象足够能量的单独反应步骤的化学反应。
化学发光体系用化学式表示为：依据供能反应的特点，可将化学发光分析法分为：1 ）普通化学发光分析法( 供能反应为一般化学反应) ；2 ）生物化学发光分析法( 供能反应为生物化学反应；简称BCL) ； 3 ）电致化学发光分析法( 供能反应为电化学反应，简称ECL) 等。
根据测定方法该法又可分为： 1 ）直接测定CL 分析法；2 ）偶合反应CL 分析法(通过反应的偶合，测定体系中某一组份；3) 时间分辨CL 分析法( 即利用多组份对同一化学发光反应影响的时间差实现多组份测定) ；4 ）固相、气相、掖相CL 。
分析法；5 ）酵联免疫CL 分析法等。
化学发光的系统一般可以表示为：在整个的检测系统中其关键的部分为PMT ，其直接影响到仪器的检测性能，其最高检测极限为10 －22 mol/L 。
不同型号的仪器其检测技术不一样，但基本原理都是利用待测组份与体系的化学发光强度呈线性定量关系，而化学发光强度随体系反应进行的速度增强或衰弱。
记录仪记录峰形，以峰高定量，也可以峰面积定量。
因化学发光多为闪烁式发光(1—2s 左右) ，故进样与记录时差短，分析速度快。
第二部分、化学发光常用的化学试剂及其原理化学发光是某种物质分子吸收化学能而产生的光辐射。
任何一个化学发光反应都包括两个关键步骤，即化学激发和发光。
因此，一个化学反应要成为发光反应，必须满足两个条件：第一：反应必须提供足够的能量（170 ～300 KJ ／mol ），第二，这些化学能必须能被某种物质分子吸收而产生电子激发态，并且有足够的荧光量子产率。
2020年智慧树知道网课《仪器分析》课后章节测试满分答案1
第一章测试1【单选题】(10分)下列哪个参数是电化学分析中电位法的被测参数A.电量B.电极电位C.电阻D.电流2【单选题】(10分)下列不属于光谱法的是A.拉曼光谱法B.旋光法C.核磁共振波谱法D.原子吸收光谱法3【单选题】(10分)助色团对谱带的影响是使谱带A.波长变长B.波长变短C.波长不变D.谱带蓝移4【判断题】(10分)仪器分析是高纯度原料药首选的含量测定方法A.错B.对5【判断题】(10分)光谱法一般都可以作为定量分析方法使用A.错B.对6【判断题】(10分)仪器分析技术不但可用于定性、定量分析，还可以进行结构解析。
A.对B.错7【判断题】(10分)光谱法是以被测物质对光的发射、吸收、散射或荧光为基础建立的分析方法。
A.错B.对8【判断题】(10分)仪器分析方法常作为独立的方法来使用。
A.对B.错9【判断题】(10分)仪器分析在食品检测工作发挥着重要的作用，广泛应用于食品中营养成分、添加剂、重金属、农药和兽药残留、微生物毒素等检测。
A.错B.对10【多选题】(10分)仪器分析的优点A.选择性好，适用于复杂组分的试样B.分析速度快，自动化程度高C.适应性强，应用广泛D.灵敏度高，样品用量少第二章测试1【单选题】(10分)关于pH值标准缓冲液以下说法的是A.pH值标准缓冲液最多可保存1周B.pH值标准缓冲液的规格一般是指25℃下配制成溶液的pH值C.pH值标准缓冲液常见的有5种规格D.pH值标准缓冲液一般可保存2-3个月2【单选题】(10分)配制pH标准缓冲液选用的溶剂是A.自来水B.蒸馏水C.新煮沸放冷的蒸馏水D.煮沸的蒸馏水3【单选题】(10分)配制规格为pH6.86的标准缓冲液选用A.硼砂B.草酸盐C.磷酸盐D.苯二甲酸盐4【单选题】(10分)配制规格为pH4.00的标准缓冲液选用A.磷酸盐B.草酸盐C.苯二甲酸盐D.硼砂5【单选题】(10分)永停滴定法的测定参数是A.电阻B.电极电位C.电流D.电量6【单选题】(10分)化学电池的组成不包括A.一对电极B.外电路C.电解质溶液D.吸收池7【单选题】(10分)以下不符合电池符号的书写规则是A.同一相中不同物质用“丨”隔开B.以化学式表示电池中各物质的组成和状态C.溶液要标上活动,气体要注明分压和温度D.一般把负极写在电池符号左边8【单选题】(10分)以下关于化学电池说法的是A.可以分为原电池和电解池B.电极的正负根据电极电位的正负程度来确定C.将发生氧化反应的电极称为阴极D.将发生氧化反应的电极称为阳极9【单选题】(10分)关于电池电动势说法的是A.电池电动势是指流过电流为零或接近于零时电极间的电位差B.电动势为负值是电解池C.电动势为正值是电解池D.电动势为正值是原电池10【判断题】(10分)不受溶液浑浊、有色限制是电位滴定法的优点之一。
分析化学课后题答案
第一章 绪论1． 解释下列名词：（1）仪器分析和化学分析；（2）标准曲线与线性范围；（3）灵敏度、精密度、准确度和检出限。
答：（1）仪器分析和化学分析：以物质的物理性质和物理化学性质（光、电、热、磁等）为基础的分析方法，这类方法一般需要特殊的仪器，又称为仪器分析法；化学分析是以物质化学反应为基础的分析方法。
（2）标准曲线与线性范围：标准曲线是被测物质的浓度或含量与仪器响应信号的关系曲线；标准曲线的直线部分所对应的被测物质浓度（或含量）的范围称为该方法的线性范围。
（3）灵敏度、精密度、准确度和检出限：物质单位浓度或单位质量的变化引起响应信号值变化的程度，称为方法的灵敏度；精密度是指使用同一方法，对同一试样进行多次测定所得测定结果的一致程度；试样含量的测定值与试样含量的真实值（或标准值）相符合的程度称为准确度；某一方法在给定的置信水平上可以检出被测物质的最小浓度或最小质量，称为这种方法对该物质的检出限。
2． 对试样中某一成分进行5次测定，所得测定结果（单位μg ⋅mL -1）分别为 0.36，0.38，0.35，0.37，0.39。
（1） 计算测定结果的相对标准偏差；（2） 如果试样中该成分的真实含量是0.38 μg ⋅mL -1，试计算测定结果的相对误差。
解：（1）测定结果的平均值37.0539.037.035.038.036.0=++++=x μg ⋅mL -1 标准偏差122222120158.015)37.039.0()37.037.0()37.035.0()37.038.0()37.036.0(1)(-=⋅=--+-+-+-+-=--=∑mL g n x x s n i iμ相对标准偏差 %27.4%10037.00158.0%100=⨯=⨯=xs s r （2）相对误差 %63.2%10038.038.037.0%100-=⨯-=⨯-=μμx E r 。
3． 用次甲基蓝-二氯乙烷光度法测定试样中硼时，为制作标准曲线，配制一系列质量浓度ρB （单位mg ⋅L -1）分别为0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0的标准溶液，测得吸光度A 分别为0.140，0.160，0.280，0.380，0.410，0.540。
主管检验师资格考试临床免疫学和免疫检验 复习习题 第十章 化学发光免疫分析技术(附答案解析)
主管检验师资格考试临床免疫学和免疫检验复习习题第十章化学发光免疫分析技术（附答案解析）1、电化学发光免疫分析临床应用广泛，在日常工作中一般不用于检测（）A、肿瘤标记物B、甲状腺素C、病毒标记物D、血药浓度E、免疫球蛋白2、电化学发光法的检测范围很广，其检测灵敏度可达（）A、g/LB、mg/dlC、pg/mlD、ng/mlE、mg/L3、电化学发光免疫分析（ECUA）常采用的标记物是（）A、吖啶酯B、HRPC、ALPD、三丙胺E、三联吡啶钌4、作为电化学发光反应的底物是（）A、鲁米诺B、吖啶酯C、碱性磷酸酶D、三丙胺E、三联吡啶钌5、下列关于化学发光效率说法错误的是（）A、又称化学发光反应量子产率B、发光效率决定于生成激发态产物分子的化学激发效率C、发光效率决定于激发态分子发射效率D、发光效率、光辐射的能量大小以及光谱范围，完全有发光物质的性质决定E、所有的发光反应都具有相同的化学发光效率6、下列有关化学发光错误的说法是（）A、化学发光是指伴随着化学反应过程所产生的光的发射现象B、化学发光与荧光形成激发态分子的激发能相同C、化学发光是吸收了化学能使分子激发而发射的光D、大多数化学发光反应为氧化还原反应E、化学发光必须提供足够的化学能7、具备化学发光免疫分析的最重要的条件是（）A、反应过程中必须保证信号接收的灵敏度B、反应过程中必须保证产生足够的先量子C、反应过程中必须保证有发光物质对光的吸收D、反应过程中必须保证产生足够的激发能E、反应过程中必须保证有发光物质对光的发射8、电化学发光法的检测范围很广，其检测灵敏度可达（）A、g/LB、mg/dlC、pg/mlD、ng/dlE、mg/L9、电化学发光免疫分析临床应用广泛，在日常工作中一般不用于检测（）A、肿瘤标记物B、甲状腺素C、病毒标记物D、血药浓度E、免疫球蛋白10、发光物吖啶酯标记的化学发光反应体系应在何种环境中进行（）A、酸性B、碱性C、中性D、酸性或中性E、碱性或中性11、化学发光免疫测定的荧光剂不包括（）A、鲁米诺B、吖啶酯C、碱性磷酸酶D、异鲁米诺E、三联吡啶钌12、影响发光剂标记的因素有（）A、被标记蛋白的性质B、原料比C、标记率D、温度E、以上都是答案部分1、【正确答案】 E【答案解析】除选项E外，其余选项均常用电化学发光免疫分析法检测。
化学发光试题及答案
化学发光试题及答案一、选择题（每题2分，共20分）1. 化学发光是指在化学反应中，系统吸收的能量以光的形式释放出来的现象。
以下哪种物质不是化学发光的典型物质？A. 荧光素B. 磷C. 硫化氢D. 镧系元素2. 以下哪种化学反应不会产生化学发光？A. 氧化还原反应B. 酸碱中和反应C. 电子转移反应D. 光合作用3. 化学发光检测技术在生物医学领域的应用包括以下哪项？A. DNA检测B. 蛋白质分析C. 细胞培养D. 药物筛选4. 以下哪种物质不是化学发光反应的催化剂？A. 过氧化氢酶B. 荧光素酶C. 过氧化氢D. 氧化酶5. 化学发光检测技术的优势包括以下哪项？A. 高灵敏度B. 高特异性C. 快速检测D. 所有以上选项二、填空题（每题2分，共20分）1. 化学发光反应中，能量的转换形式是从______能到光能。
2. 荧光素-荧光素酶体系是生物化学发光中常用的一种体系，其中荧光素酶催化荧光素与______发生反应。
3. 在化学发光检测中，为了提高检测灵敏度，常采用______技术。
4. 化学发光检测技术在环境监测中的应用包括______污染检测。
5. 化学发光免疫分析是一种将______技术与化学发光检测技术相结合的方法。
三、简答题（每题10分，共30分）1. 简述化学发光反应的基本原理。
2. 描述化学发光检测技术在食品安全检测中的应用。
3. 阐述化学发光检测技术在临床诊断中的优势和局限性。
四、计算题（每题15分，共30分）1. 假设在一次化学发光实验中，荧光素的初始浓度为1×10^-6 M，荧光素酶的催化效率为每分钟每摩尔荧光素产生5×10^4个光子。
计算在反应开始后的10分钟内，总共产生了多少个光子。
2. 在一个化学发光检测系统中，如果检测到的光强度是背景光强度的10倍，且已知背景光强度为1×10^-9 W/m^2，求检测到的光强度。
答案：一、选择题1. C2. B3. A4. C5. D二、填空题1. 化学2. 氧气3. 增强4. 重金属5. 免疫三、简答题1. 化学发光反应的基本原理是某些化学反应在进行过程中，反应物或中间产物吸收能量后，从激发态返回到基态时，以光的形式释放能量。
11化学发光法测血清TSH
实验十一化学发光法测血清TSH促甲状腺激素（thyroid stimulating hormone，TSH）由垂体前叶细胞分泌，它可促进甲状腺细胞对碘的摄取与甲状腺球蛋白的碘化，从而增加甲状腺激素的合成与分泌。
TSH的分泌受下丘脑分泌的促甲状腺激素释放激素的调节，还受血循中甲状腺激素的负反馈调节。
TSH的测定是诊断甲状腺功能和研究下丘脑-垂体-甲状腺的重要指标之一。
当下丘脑和垂体功能正常时，TSH的测定是判断甲状腺激素过多或缺乏的敏感指标。
【实验原理】本方法为化学发光（CLIA）夹心法，是两步骤免疫检测。
在第一步骤中，样品和抗-βTSH抗体包被的顺磁性微粒以及TSH检测稀释液相结合。
存在于样品中的TSH结合到抗TSH抗体包被的微粒上。
冲洗后，将抗-αTSH吖啶标志物结合物添加到第二步骤中。
随后将前激发和激发溶液添加到反应混合物中；产生的化学发光反应作为相对光单位（RLU）进行检测。
样品中TSH量与检测的RLU成正比。
【试剂】：仪器配套原装试剂1.试剂主要成份微粒子包被的抗体标记结合物样品稀释液2.试剂的准备、贮存及稳定性1）试剂准备与检查●检查仪器上原有试剂量，如原有试剂量不足，取所需试剂放入仪器。
●检查激发液、预激发液、缓冲液的量及有效期。
2）试剂的贮存●试剂盒必须贮存于2-8℃下，从该温度下取出后应立即使用。
●试剂可以在仪器试剂舱中贮存，贮存时须确保其朝上放置。
3）试剂的稳定性在按照指导进行贮存和处理的情况下，试剂稳定性可以直达效期。
【仪器】全自动化学发光、电化学发光分析仪【样本采集与准备】1.样本采集：人血清或用EDTA三钾，肝素锂和肝素钠抗凝的血浆可在检测中使用。
2.样本的准备1）离心（2500-3000r/min，10分钟）分离血清（浆）。
2）样本上机前应确保样本中无泡沫、纤维、红细胞或其它颗粒，否则会导致错误结果。
3.样本的保存及稳定性：如果放置时间超过24小时，须分离血清或血浆。
样品可以在2-8℃下放至7天。
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Au/TiO2 Au/MgO Au/SiO2 Au/ZrO2 Au/ZnO
-19℃
42℃65℃74℃84℃
-80
catalytic activity
Au/TiO 2 Au/MgO
Au/SiO2 Au/ZrO2 Au/ZnO
0
40
80
T (℃)
100%
-40
0
40 80 120 160
Temperature (℃)
阵列中不同活 性的催化剂显 示不同的亮度
18
Separation and Detection
0.01 M KIO4
0.06 M K2CO3 0.1 M KOH 1× 10-5 M Luminol
1.5 mL/min 20 cm Coil
C-18 ODS (4.6f, 25 cm)
Waste
50 mL 1.5 mL/min CH3CN:C2H5OCOCH3:0.05%H3PO412:0.6:90(v/v)
这种方法兼有发光分析的高灵敏度和抗原 抗体反应的高度特异性。
20
NO2 OO
O2N
O CC O
NO2+ H2O2
O2N
OO
NO2
C C + 2 O2N
OH
OO
OO
1,2-Dioxetanedione
C C + F(Fluorophore) OO
F + 2CO2 + Light
10
ONOO-与CO2化学发光机理研究
H2O2 + HNO2
HOONO OH-
HNO3
76
50000
74
72
40000
70
68
30000
66
20000
64
62
10000
60
58
0
56
140 145 150 155 160 165 170 175 180
Reaction Temperature (℃)
CO在不同 催化剂上 的转化率
100 90 80 70 60 50 40 30 20
-120
•NO + O2• -
ONOO-
ONOO- + CO2
ONOOCO2-
ONOOCO2-
•NO2 + •CO3-
•CO3- + H+
HCO3•
•NO2 + •NO2 + H2O
NO2- + NO3- + 2H+
•NO2 + •CO3-
NO3- + CO2
2HCO3•
CO2 + O2 + HCOOH + Light (443 nm)
H2O2 + HCO3-
H2O
+
HOOCO2-
•OH CO3•-
DCF
O2
1O2
DCF*
Light
HCO3-
O2•-
HO2•
H+
1）形成活性氧
2）能量转移
3) 实际应用
14
Possible mechanism for the luminol-H2O2-gold nanoparticles CL system
同其他的光谱系统一样，化学发光分析过程也有同样的一 些缺点，比如选择性差，会对一个系列的化合物做出反应， 而不是针对单个的某一化合物。另一个缺点是化学发光的 发射强度依赖于各种环境因素，在不同的环境体系中，发 射强度和时间的曲线有较大的差别，所以必须严格控制外 界的各种因素.
5
6
Luminol Chemiluminescent Phenomenon
生活中常见的化学发光现象
1
化学发光定义
化学反应的能量把体系中共存的某种分子从基态激 发到激发态从而产生发光的现象。
2
电致化学发光（ECL)
电致化学发光 (ECL) 是通过在电极上施加 一定电压或电流信号进行电解反应的产物之间 或与体系中共存组分反应产生化学发光的现象。
ECL与CL的差异在于ECL是电启动发光反 应，而CL是通过化合物混合启动发光反应。
11
Effect of Miceller on CL (Batch Method)
12
Mechanism of CL Reaction in Micellar HNO2
5× 10-11 A
HOONO
H2O2
+
OONO- +
+
1O2
+
OH-
+ Micellar +
O2
+
+
+
1 min
Light
HCO3ˉ与H2O2反应的化学发光机理初探
17
快速、高通量催化剂筛选新方法
CL Intensity (A.U) CO Conversion ( % )
CO Conversion
CO在不同催 化剂上的化 学发光信号
化学发光信号 与催化剂活性 的相关性
B 80000
84 82
70000
80
CL Intensity
78
60000
CO Conversion
3
化学发光两大类 C* Excited state F*
A+B
Light
Ｃ＊
Light
Energy transfer
C
F Base state
化学发光分析方法的特点
化学发光法由于它具有仪器简单、检测限低、线性范围宽 等优点，在化学分析方面越来越受到关注。
与分光光度法和荧光光度法相比，化学发光法不需要外来 的光源，从而减少了瑞利散射和拉曼散射，降低了噪音信 号的干扰，提高了检测的灵敏度，扩大了线性动态范围。
7
Luminol Chemiluminescent Reaction
NH2 O
Catalyst
NH NH + H2O2 + 2OH-
O
NH2 O OO-
O
+ N2 + 2H2O + LLiigghhtt
CL Reaction of Peroxyoxalate with RhB
9
Chemiluminescence of Peroxyoxalate
HPLC-CL System
Silicon photodiode Waste
IO4-
IO4-
+)
IO4-
-)
IO4-
OH-
CO32-
+)
Cffer solution
Chip-CL System
+)
Micellee
-) EOF
化学发光免疫分析（ CLIA）
CLIA是将化学发光分析和免疫反应相结合 而建立的一种新的免疫分析技术。
15
纳米材料表面化学发光的化学选择性
同一样品在不同纳米
材料上的化学发光强
乙
度不同
醇
硫化氢 三甲胺
不同的样品在相同纳 米材料上的化学发光 强度也不同
16
化学发光阵列传感器及分子识别原理
纳米材料表面化 学发光阵列传感 器原理图
不同种类 样品图案
结构相似的 同系物图案
空白
乙醇
三甲胺
硫化氢
甲醇
乙醇
丙醇
丁醇