_奥美拉唑胶囊的人体药代动力学及生物等效性试验研究

药学研究
收稿日期:2007-07-22
作者单位:青岛大学医学院附属医院,青岛266003。

奥美拉唑胶囊的人体药代动力学及生物等效性试验研究
马 霖,韩志武,曹 玉
[摘 要] 目的 建立测定奥美拉唑血药浓度的高效液相色谱法,并考察奥美拉唑胶囊人体药代动力学,比较两种制剂的生物等效性。

方法 采用双周期随机交叉试验设计,18例男性健康志愿者随机分为2组,分别单
剂量交叉口服奥美拉唑胶囊(受试制剂)和奥美拉唑肠溶胶囊(参比制剂)40mg,以反相高效液相色谱法测定给药后不同时间点的奥美拉唑血药浓度,采用DA S 房室模型法和生物等效性计算程序进行统计分析。

结果 奥美拉唑胶囊(受试制剂)和奥美拉唑胶囊(参比制剂)血药浓度 时间曲线符合一室开放模型。

主要药动学参数:t 1/2分别为(1 76 0 79)h 和(1 66 0 52)h,T max 分别为(2 73 0 35)h 和(2 61 0 4)h 。

C max 分别为(1271 09 351 72)ng/mL 和(1219 02 325 53)ng/mL,AU C 0 分别为(2941 85 807 18)ng/(h mL )和(2960 57 802 91)ng /(h mL )。

受试制剂对参比制剂的相对生物利用度为(99 63 12 04)%。

结论 受试制剂与对照制剂比较,其奥美拉唑的t 1/2、T max 、C max 和A UC 0 均无显著性差异,两种制剂具有生物等效性。

[关键词] 奥美拉唑胶囊;反相高效液相色谱法;药代动力学;生物等效性
Pharmacokinetics and bioequivalence of omeprazole capsules M A L in,HAN Zhi wu,CAO Yu(A ffiliated Hospit al of Qingdao M edical U niversity ,Q ingdao 266003,China)
[Abstract] Objective T o dev elop a HPL C method for determinating the co ntent of omeprazole capsules in hu
man plasma and study the pharmacolinetics and bioavailability of them.Methods A randomized two way cross over study desig n was adopted.18volunteers w er e randomly div ided into tw o omeprazole formulat ions respectively,the results were analyzed by pr ogram DAS 2 0.Results T he concentr ation time cur ves of two omepr azole capsules w ere confo rmed to the one compartment open model.T he main pharmaco kinetic parameters w er e as follo ws:T 1/2w ere (1 76 0 79)h and (1 66 0 52)h,T max w er e (2 73 0 35)h and (2 61 0 4)h,C max w er e (1271 09 351 72)ng /mL and (1219 02 325 53)ng/mL,AU C 0 were (2941 85 807 18)ng/(h mL)and (2960 57 802 91)ng /(h mL)re spectiv ely.T he relative bioequivalence w as (99 63 12 04)%.Conclusion T he fomulations were bioequivalent.
Key words:O meprazole capsules;RH HPL C;Pharmacokinetics;Bioequv alence
奥美拉唑(Omeprazole,OM )是咪唑类质子泵抑制剂,能特异性地作用于胃壁细胞顶端膜构成的分泌性微管和胞浆内的管状泡上,即胃壁细胞质子泵H + K + AT P 酶所在部位。

其抑制壁细胞泌酸的最后步骤,使壁细胞内的H
+
不能转运到胃腔中去,以致胃液中胃酸量大为减少,对各种刺激因素引起的胃酸分泌均有很强的抑制作用,临床主要用于胃溃疡、十二指肠溃疡、应激性溃疡和反流性食管炎和卓一艾综合征(胃泌素瘤)
[1]
的治疗。

笔者对18名健康男
性志愿者采用双周期随机交叉试验设计,采用RH HPL C 法测定血浆中奥美拉唑浓度,并计算主要药动学参数,并评价两种药物的生物等效性。

1 材料与方法
1 1 仪器与试剂 Waters 2695高效液相色谱仪(美国,沃特斯公司);W aters 996二级阵列管紫外检测器;色谱柱:Venusil HP C18柱,4 6mm 250mm,粒径5 m (美国A gela T echnolog ies Inc)。

M S1M inishaker 漩涡混和器(IK A 公司),80 Z 台式离心机(上海手术仪器厂),M illi Q 纯水发生器(美国密理博公司)。

受试制剂奥美拉唑胶囊由山东省某制药厂提供,规格:20mg ,批号:031013;参比制剂为上海信谊制药厂生产的奥美拉唑肠溶胶囊,规格20mg ,批号:031001;内标物为卡马西平(中国药品生物制品检定所标准品)。

叔丁基甲醚、二氯甲烷、乙腈、异丙醇为色谱纯,三乙胺、磷酸二氢铵为分析
纯,空白人血浆由青岛市血站提供。

1 2 试验设计
1 2 1 研究对象 试验经医学伦理委员会批准,选择健康男性志愿受试者18名,年龄22~25岁,身高169~178cm,体重指数19~24。

受试者签署知情同意书,于实验前在医院接受全面的体格检查,对肝、肾功能测定,并进行心电图检查,结果均属正常。

受试者无既往病史和药物过敏史,精神状态良好,不嗜烟酒,试验前2周及试验期间未用任何其他药物。

1 2 2 给药方案 本试验采用双周期随机交叉试验设计,两周期间隔为7d 。

将18名受试者随机分为2组,于试验前一日晚住一期病房,禁食12h,试验当日晨7 00按实验安排,分别服用受试制剂或参比制剂2粒(相当于奥美拉唑40mg),用200mL 温开水送服。

而后按设计的时间点采血。

受试者服药后4、10h 按规定统一进标准餐。

1 2 3 样品采集与处理 于服药前(0h)和服药后0 5、1 0、1 5、2 0、2 5、3 0、3 5、4 0、5 0、6 0、8 0、10 0h 由前臂静脉采血5mL 。

血样取出后立即移入肝素试管,离心(3500r pm)10min,分离血浆,于-20 冷冻保存待测。

1 2 4 临床观察 试验前一天,受试者安排在一期病房内,采血期间不得离开,避免剧烈运动。

由两名医药专业人员严格掌握采血时间,两名护士负责采血,一名医师和两名护士进行临床监护,各种急救药品齐全,设施运转正常,能自始至终保证受试者的安全与健康。

1 3 奥美拉唑血药浓度测定 参照文献方法,建立了测定
血浆中奥美拉唑的HPLC 方法[1-
2]。

1 3 1 色谱条件 流动相:乙腈 0 025mol/L 磷酸二氢铵(40 60,v/v ),加三乙胺调pH 为7 4;流速:1 0mL/min;检测波长:U V 300nm,柱温:30 。

1 3
2 储备液和系列标准液的制备 储备液的配制:精密量取奥美拉唑标准品5 0mg,用甲醇定容10mL ,振荡混匀,得浓度为500 g/mL 的储备液。

系列标准液的配制:精密量取储备液适量,分别置于10mL 容量瓶中,配制成浓度为0 5、1 25、2 5、5、12 5、25、50 g/mL 的系列标准溶液。

内标溶液的配制:精密量取卡马西平标准品6 0mg,用甲醇定容10mL,得到600 g/mL 的卡马西平储备液,取储备液1mL,甲醇稀释至100mL ,得内标卡马西平溶液(6 g/mL)。

1
3 3 血浆样品的预处理 取0 5mL 血浆样品置具塞试管中,加入内标溶液(6 g/mL 卡马西平甲醇溶液)50 L ,10%氨水100 L ,混合提取溶液(叔丁基甲醚 二氯甲烷 异丙醇6
4 33 3)4mL ,振摇提取3min,离心10min (3500rpm),吸取上清液,50 水浴下氮气流吹干,残渣加入100 L 甲醇溶解,进样40 L ,记录色谱图。

1 4 方法学评价
1 4 1 方法特异性 空白血浆、空白血浆加奥美拉唑和口服奥美拉唑胶囊后的志愿者血浆按 1 3 3 项下操作,进样分析,得到色谱峰见图1。

由图可见奥美拉唑与血浆中内源性杂质能分离完全,峰形尖锐,无拖尾现象,奥美拉唑和内标(卡马西平)的保留时间分别为6 97min 和8 95min。

图1 HPLC 法测定血浆中奥美拉唑和内标(卡马西平)色谱图
注:a.空白血浆;b.空白血浆加奥美拉唑(峰1,t R =6 97)和内标(峰2,t R =8 95); c.受试者口服药后血浆样品色谱图
1 4
2 标准曲线和线性范围 取空白血浆0 5mL ,依次加入奥美拉唑标准系列溶液20 L,配制相当于浓度为
20 0、50 0、100 0、200 0、500 0、1000 0、2000 0ng/mL
的血浆样品,加入内标液(6 0 g/mL 卡马西平甲醇溶液)50 L,按 血浆样品的分析方法 项下操作,制备标准曲线。

以待测物浓度为横坐标,待测物与内标的峰面积比值为纵坐标,用加权(W =1/X 2)最小二乘法进行回归运算,求得标准曲线为Y =0 00109C-0 00326(r =0 998)。

根据标准曲线,奥美拉唑的线性范围为20 0~2000 0ng/mL ,最低定量浓度为10 0ng/mL 。

1 4 3 精密度 按 标准曲线的制备 项下操作,制备奥美拉唑低、中、高3个浓度(分别为20 0、100 0、1000 0ng/mL )各5个样本,与标准曲线同批测定,以该批的标准曲线计算的测得浓度与配制的浓度对照,求得本法的精密度。

日内精密度分别为11 81%、9 40%、5 48%,日间精密度分别为11 64%、7 22%、3 25%。

1 4 4 血浆样品提取回收率 奥美拉唑在20 0、100 0、1000 0ng/mL 3个浓度的血浆样品提取回收率分别为81 09%、78 46%、76 05%。

1 4 5 稳定性考察 考察含药血浆样品在反复冻融条件下30d 的存放时间,生物样品处理后在自动进样器室温条件下12h 的稳定性。

结果表明,血浆样品中奥美拉唑稳定性良好,样品浓度测定结果,RSD 均小于5%。

结果表明,测定血浆中奥美拉唑的分析方法符合有关规范要求,可用于药物动力学试验。

1 5 数据处理 列出受试者给药后各时间点血浆中的浓度,并绘出血药浓度 时间曲线,计算各药动学参数,采用梯形法计算AU C 值,以半对数作图法,由消除相的浓度点计算t 1/2,T max 和C max 为实测值。

将A U C 和C max 对数转换后,进行方差分析,采用双单侧t 检验和(1
2 )置信区间检验,进行两制剂的生物等效性分析。

应用软件为DAS 2 0。

2 结果分析
2 1 血药浓度 时间曲线 根据18名受试者不同时刻血浆中奥美拉唑的浓度,根据DAS 2 0统计软件拟合计算,受试制剂与参比制剂给药后的平均药 时曲线见图2。

图2 18名受试者口服奥美拉唑受试制剂和参比制剂后
奥美拉唑的平均药 时曲线
2 2 药动学参数 受试制剂与参比制剂的主要药动学参数以及实测值C max 和T max 结果见表1。

2 3 相对生物利用度 单剂量口服受试制剂和参比制剂奥美拉唑后,C max 分别为(1271 09 351 72)和(1219 02 325 53)ng/mL,T max 分别为(2 72 0 35)和(2 61 0 40),t 1/2分别为(1 76 0 79)和(1 66 0 52)h,AUC 0 t 分别为(2941 85 807 18)和(2960 57 802 91)ng h/mL ,AUC 0 分别为(3021 78 803 54)和(3043 30 814 13)ng
h/mL 。

根据AUC 0 t 计算得到的受试制剂相对参比制剂的生物利用度为(99 63 12 04)。

表1 单剂量口服受试制剂和参比制剂奥美拉唑后
的主要药动学参数
参数
受试制剂参比制剂C max (ng/mL)1271 09 351 72
1219 02 325 53
T max (h)2 72 0 352 61 0 40T 1/2(h)
1 76 0 791 66 0 52AUC 0 t (ng h/mL)2941 85 807 182960 57 80
2 91AUC 0 (ng h/mL)
3021 78 803 54
3043 30 814 13
2 4 生物等效性评价 18名受试者单剂量口服受试制剂和参比制剂的药动学参数AU C 0 t 、AU C 0 的方差分析结果为药物制剂间、周期间均无显著性差异(P >0 05),个体间有显著差异(P <0 05),以C max 、T max 进行评价时,药物制剂间、周期间和个体间均无显著性差异(P >0 05)。

经双单侧t 检验和90置信区间评价结果表明,A UC 、C max 均拒绝生物不等效假设,两种制剂具有生物等效性。

2 5 临床观察结果 整个试验期间未观察到临床不良反应现象,18例受试者试验前后的血液、血液生化、尿常规以及心电图检查未见异常,说明本制剂在试验剂量下表现出
良好的安全性。

3 讨论
根据奥美拉唑不稳定(见光易分解[3])的特点,笔者采血后立即分离血浆,置低温冷冻保存。

操作时注意避光,并在每批次建立一条标准曲线,使测试结果更加准确。

在此色谱条件下,奥美拉唑和代谢物得到很好的分离。

奥美拉唑胶囊受试制剂与参比制剂的药代动力学参数经对数转化后,受试制剂AU C 0 t 的90%置信区间为参比制剂相应参数的95 3%~102 8%,受试制剂C max 的90%置信区间为参比制剂相应参数的99 2%~108 7%。

与参比制剂比较,受试者AU C 和C max 均拒绝不等效假设,且18名受试者在试验期间均无不良反应发生,显示本制剂在试验中有良好的安全性。

参考文献:
[1] 霍保方,邱枫,肇丽梅,等.HPLC 测定血浆中奥美拉唑及人体药动学研究[J].沈阳药科大学学报,2004,21(5):377 340.
[2] 孙华,袁福荣,陈波,等.单剂量口服奥美拉唑胶囊的人体药
代动力学和相对生物利用度[J].中国临床药理学杂志,2002,18(2):112 115.[3] 丁黎,杨劲,闫花丽,等.人血浆中奥美拉唑高效液相色谱测定法及其药代动力学研究[J].药物分析杂志,1999,19(5):
301 303.
收稿日期:2007-04-11
作者单位:中国医科大学附属盛京医院药剂科,沈阳110004。

利培酮口腔崩解片的研制
曹 岸,张志伟
[摘 要] 目的 研究利培酮口腔崩解片的最佳处方和制备工艺。

方法 选用微晶纤维素和交联羧甲基纤
维素钠作为崩解剂,通过湿法制粒压片制备,以体外崩解时间为指标,正交试验优化处方,并测定体外崩解时间及
口感等质量评价指标。

结果 优选处方的口腔崩解片的体外崩解时间为(18 26 0 1)s,口感佳。

结论 本研究所得的处方可以制备性能优良的利培酮口腔崩解片。

[关键词] 利培酮;口腔崩解片;正交试验
Preparation of risperidone orally disintegrating tablets CAO An,ZHA NG Zhi w ei(Sheng jing Hospital of China M edi cal U niversity,Sheny ang 110004,China)
[Abstract] Objective T o develop the optimal formula and preparation for Risperidone orally di sinteg rating
tablets.Methods CCM C Na w ere employ ed as disintegr ants,the wet process compression method was used for prepara tion,and the o ptimal formula w as obtained by orthogonal test according to disinteg rating time in vitro.T he properties of the tablets,such as disinteg rating time in vitro was determined.Results Disintegrating time both in vitro was (18 26 0 1)s.Conclusion T he preparation methods of risper idone or ally di sinteg rating tablets is suitable.
Key words:R isperidone;Orally disintegrating tablets;Orthogonal test
利培酮(Risperidone)为苯并异恶唑衍生物,是一种具有独特性质的选择性单胺能拮抗剂。

用于治疗急性和慢性精神分裂症,可减轻与精神分裂症有关的情感症状[1]。

口腔崩解片(Orally disintegr ating tablets),简称口崩片,系一种在口腔内不需水即能崩解或溶解的片剂。

与普通片剂相比,口崩片的优点为:起效快,生物利用度高,服用方便,减少药物对食管和胃肠道的刺激,适用于拒绝服药的患者,提高患者的依从性
[2]。

笔者分析利培酮中的 环糊精包合
物,研制利培酮口腔崩解片。

1 仪器与试药
1 1 仪器 分析筛(浙江上虞东关仪器纱筛厂);硬度仪(上海黄海药检仪器厂,Y PJ 200B 型);单冲压片机(北京国药龙立科技集团DP/30);硬度仪(上海黄海药检仪器厂,Y PJ 200B 型);智能崩解仪(天津大学无线电厂,ZBS 6型)。

1
2 试药 利培酮(石药集团外贸公司); 环糊精(陕西礼泉 环糊精厂);甘露醇(山东青岛宇龙海藻有限责任公司);乳糖(上海汉唐化学有限责任公司);淀粉、微晶纤维分素、羧甲基淀粉钠、低取代羟丙基纤维素(营口奥达制药有限公司);交联羧甲基纤维素钠(A VEBE,荷兰);交联聚乙烯吡咯烷酮(上海厚诚精细化工有限公司);阿斯巴甜(江苏。