血红蛋白测定
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
血红蛋白测定
苏州大学附属第二医院检验科
郭 敏 王 敏
一.血红蛋白的分子结构和组成
亚铁血红素（包括原卟啉，铁），珠蛋白
二.血红蛋白测定
（氰化高铁血红蛋白测定法----HiCN法).
HiCN法检测原理：
血红蛋白（SHb除外）中的亚铁离子（Fe2+）被 高铁氰化钾氧化为高铁离子（Fe3+），血红蛋白转 化成高铁血红蛋白（Hi）。Hi与氰化钾（KCN）中 的氰离子反应生成HiCN。HiCN最大吸收波峰为 540nm，波谷为504nm。在特定条件下，HiCN毫摩 尔消光系数为44L/（mmol•cm）。HiCN在540nm处 的吸光度与浓度成正比，根据测得吸光度可求得血 红蛋白浓度。
方法学评价
HiCN法的质量控制
1.标本 2.器材
脂血标本、高WBC、高PLT 定期校准
3.采血部位
4.操作
6.试剂
混匀
延长转化时间
5.反应时间
质量
7.标准曲线
参考范围
男：120~160 g/L；
女：110~150 g/L ； 新生儿：170~200 g/L。
临床意义
一.增高（同红细胞计数） 二.降低：见于各种原因的贫血 贫血的定义：血红蛋白低于参考范围。 贫血程度的判断： 轻度贫血：90~120（110） g/L 中度贫血：60~90 g/L 重度贫血：30~60 g/L 极度贫血：<30 g/L 贫血程度判断时应注意：大量失血未补充液体时 血红蛋白浓度变化不大，不能正确反映失血程度 。 失水时，使血红蛋白浓度升高，贫血亦不明显。
样本（uL ） 0 0 10 工作试剂（mL） 2.50 2.50 2.50 混匀，并在室温中放置5min. 4.用分光光度计在波长540nm处以空白管调零点，读取各管 吸光度。 计算方法 测定管Au 血红蛋白（g/L）=——————— X 标准管血红蛋白浓度 标准管As （g/L）
பைடு நூலகம்
实验步骤
1.测定参数 测定方法：终点法 比色杯直径 1cm 测定波长：540nm 试剂样本比 250:1 反应温度：室温 反应时间 5min 2.在测定前去适量的工作试剂，在室温下平衡 10min后使用.
实验步骤
3.具体操作见下表： 管号 空白管 生理盐水（uL ） 标准液（uL ） 10 0 标准管 0 10 测定管 0 0
苏州大学附属第二医院检验科
郭 敏 王 敏
一.血红蛋白的分子结构和组成
亚铁血红素（包括原卟啉，铁），珠蛋白
二.血红蛋白测定
（氰化高铁血红蛋白测定法----HiCN法).
HiCN法检测原理：
血红蛋白（SHb除外）中的亚铁离子（Fe2+）被 高铁氰化钾氧化为高铁离子（Fe3+），血红蛋白转 化成高铁血红蛋白（Hi）。Hi与氰化钾（KCN）中 的氰离子反应生成HiCN。HiCN最大吸收波峰为 540nm，波谷为504nm。在特定条件下，HiCN毫摩 尔消光系数为44L/（mmol•cm）。HiCN在540nm处 的吸光度与浓度成正比，根据测得吸光度可求得血 红蛋白浓度。
方法学评价
HiCN法的质量控制
1.标本 2.器材
脂血标本、高WBC、高PLT 定期校准
3.采血部位
4.操作
6.试剂
混匀
延长转化时间
5.反应时间
质量
7.标准曲线
参考范围
男：120~160 g/L；
女：110~150 g/L ； 新生儿：170~200 g/L。
临床意义
一.增高（同红细胞计数） 二.降低：见于各种原因的贫血 贫血的定义：血红蛋白低于参考范围。 贫血程度的判断： 轻度贫血：90~120（110） g/L 中度贫血：60~90 g/L 重度贫血：30~60 g/L 极度贫血：<30 g/L 贫血程度判断时应注意：大量失血未补充液体时 血红蛋白浓度变化不大，不能正确反映失血程度 。 失水时，使血红蛋白浓度升高，贫血亦不明显。
样本（uL ） 0 0 10 工作试剂（mL） 2.50 2.50 2.50 混匀，并在室温中放置5min. 4.用分光光度计在波长540nm处以空白管调零点，读取各管 吸光度。 计算方法 测定管Au 血红蛋白（g/L）=——————— X 标准管血红蛋白浓度 标准管As （g/L）
பைடு நூலகம்
实验步骤
1.测定参数 测定方法：终点法 比色杯直径 1cm 测定波长：540nm 试剂样本比 250:1 反应温度：室温 反应时间 5min 2.在测定前去适量的工作试剂，在室温下平衡 10min后使用.
实验步骤
3.具体操作见下表： 管号 空白管 生理盐水（uL ） 标准液（uL ） 10 0 标准管 0 10 测定管 0 0