血库标准操作规程

卡式ABO、抗D血型鉴定标准操作程序1.目的：

检测受检者红细胞表面有无A或B、D抗原。

2.适用围：

适用于本科日常工作中ABO正定型、抗D血型鉴定试验。

3.职责：

输血科全体工作人员。

4.溯源：见操作说明书。

5.操作程序：

本实验用“博迅生物技术有限责任公司”提供的coombs卡。适用抗原抗体反应与凝胶分子筛技术相结合检测红细胞A﹑B﹑D抗原，适用于抗凝血。

5.1实验原理：

这是抗原抗体反应与凝胶分子筛技术相结合的产物。通过调节葡聚糖凝胶的浓度来控制分子筛孔径大小，使分子筛只允许游离分子通过，从而达到分离凝集红细胞和游离红细胞的目的。即将红细胞和血清加在凝集的上部反应离心以后，凝集红细胞将受到凝胶的阻碍而停止在凝集的上部或凝胶中，则证明发生凝集反应为阳性，反之判断凝集反应为阴性。

5.2 实验试剂：

5.2.1 Coombs卡每份标本用4孔。

6. 测定步骤：

6.1 在A﹑B﹑D孔分别加入已配制的3%病人红细胞悬液25ul（或1滴）。

6.2离心，定时9分钟。

6.3 结果判断见原理。

6.4 注意事项：

6.4.1结果不明显时，或有拖尾现象，应用试管法核查，并核查何种疾病的病人

标本，找出原因

6.4.2 实验前应将卡离心。

Rh血型鉴定标准操作程序

1.目的：

检测待检红细胞上有无D抗原。

2.适用围：

适用于本科急诊Rh血型鉴定试验。

3.职责：

输血科全体工作人员。

4.溯源：全国临床检验操作规程（第三版）。

5.操作程序：

本实验用“博迅生物技术有限责任公司”提供的RhD（IgM）血型定型试剂盒（单抗隆抗体）检测红细胞上有无D抗原。

6.实验原理：

用已知的标准血清（抗D）检测待检红细胞上有或无D抗原。临床上凡带有D 抗原者，称为Rh阳性。不带D抗原者，称为Rh阴性。

7. 试剂：抗D标准血清。

8. 操作：

8.1.1 取小试管1支，加2d抗D血清，再加2d 3~5%红细胞悬液。

8.1.2 900G离心15秒。

9.结果观察：

若有凝集，则表明受检者红细胞上有D抗原，Rh阳性。

若无凝集，则表明受检者红细胞上无D抗原，Rh阴性。

9.1 注意事项：抗D标准血清应保存于2~8℃冰箱。

ABO血型反定型鉴定标准操作程序

1、目的：

检测受检者血清中有无抗A,抗B抗体

2、适用围：

适用于本科日常工作中ABO血型反定型

3、职责：

输血科全体工作人员。

4、溯源：全国临床检验操作规程(第三版).

5、操作程序：(试管法)

本实验用博迅生物技术有限责任公司提供的人ABO反定型红细胞试剂盒。5.1 实验原理：用已知的红细胞检测受检者血清中有无抗A,抗B抗体,根据血清中有无抗A,抗B抗体将血型分为A型.B型. 博迅生物技术有限责任公司AB型及O型4种.

5.2试剂组成： A.B.O红细胞

5.3 测定步骤:

5.3.1 将抗凝血离心

5.3.2 取小试管3支.分别标上A.B.O

5.3.3 在上述小试管中分别加入A.B.O红细胞悬液2d.和已离心好的受检者血清2d.

5.3.4 900G离心15秒,观察结果.

5.3.5 结果观察

受检者血清+试验红细胞

受检者血型

A细胞B细胞O细胞A型–+ –

B型+ ––

O型+ + –

AB型–––

注：+：凝集；–：不凝集

5.3.6 注意事项：如果凝集很微弱或结果不明显,应重复做

凝聚胺配血标准操作程序

1.目的：

为规凝聚胺试验的技术操作，保证试验结果准确，依据《输血实验室管理程序》4.1.8（1）条款的要求制定本规程。

2.适用围：

适用于医疗机构输血科采用凝聚胺法进行血型血清学试验。

3.职责：

医疗机构输血科技术人员负责凝聚胺法血型血清学试验。

4.溯源：见试剂操作说明书。

5.操作程序:

本实验用“天一生物技术研究所”提供的聚凝胶胺试剂盒。

6.1原理: 凝聚胺法是利用低离子介质(LIM)来降低介质的离子强度,进而减少

红细胞之间距,以促进红细胞和血清(血浆)中的抗体及生物特异性结合,接着加入凝聚胺(Polybrene),使红细胞间发生非特异性凝集,最后加入重悬液(resupending)使之中和凝聚胺(Polybrene)所引发的非特异性凝集,倘若没有凝集发生,则判定为阴性;若有凝集,则得知存在特异性之抗原抗体反应,则判为阳性。

6.2.试剂盒组成:

8.1 LIM (low lonic trength medium)低离子介质溶液8.2. POLYBRENCE凝聚胺

8.3 RESUSPENDING 重悬液8.4 POSITIVE CONTROL阳性对照

6.3交叉配血实验:

6.3.1 取小试管2支,标主次侧,主侧管加病人血清(血浆)2d,加供血者3~5%红

细胞悬液(洗涤或不洗涤均可)2d,次侧管反之

6.3.2各加LIM0.7ml,混合均匀后,再各加polybrene溶液2d，并混合均匀。

6.3.4 1000G离心15秒,然后把上清液倒掉不要沥干，让管底残留约0.1ml液体。

6.3.5 轻轻摇动试管，目侧红细胞有无凝集。如无凝集，则必要重做。

6.3.6 最后加入resuspending2d，轻轻转动试管混合并同时观察结果。如果在

109 30秒凝集散开，代表是由polybrene引起的非特异性凝集配血结果相对;

如凝集不散开,则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应,配血结果不相对。如反应可疑,可进一步倒在玻片上用显微镜观察。

7. 注意事项:

7.1若病人血清含肝素高则应加入双倍量的POLYBRENE液中和肝素。

7.2 试剂使用前,应恢复室温再做。

7.3由于某些病人血清中可能含有冷凝集素等因素,而导致假阳性的结果出现。

若有怀疑,建议在最后滴入RESVSPENDING液时,将试管立即置入37℃水浴中,轻轻转动试管混合,并在30秒观察结果。