梨种质资源对腐烂病抗性的室内评价_张美鑫
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园艺学报 2014,41(7):1297–1306 http: // www. ahs. ac. cn Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@ 梨种质资源对腐烂病抗性的室内评价
张美鑫1,翟立峰1,胡红菊3,张本贤4,洪霓1,2,王国平1,2,*
(1华中农业大学植物科学技术学院,武汉 430070;2华中农业大学,农业微生物学国家重点实验室,武汉 430070;3湖北省农业科学院果树茶叶研究所,武汉 430209;4湖北省钟祥市植物检疫站,湖北钟祥 431900)
摘 要:采用离体枝条分生孢子悬浮液和菌丝块接种测定了11种梨种质资源共211份材料对腐烂病的抗性。结果显示:不同种质资源对病菌的侵入和扩展的抵抗均存在差异,抗侵入的占17.5%,抗扩展的
占35.1%;同一种质资源对病菌侵入与扩展的抵抗之间也有差异,对病菌侵入和扩展抵抗一致的占30.3%,不一致的占69.7%;所有供试材料中对病菌侵入和扩展均为高抗(HR/HR)的占1.4%,抗病(R/R)的占
4.7%,中等(M/M)的占12.3%,感病(S/S)的占10.9%,高感(HS/HS)的占0.9%;通过综合抗性评
价发现,‘大香水’、‘杜梨’、‘江岛’、‘康德’、‘龙泉酥’、‘苹果梨’、‘山梨’、‘云红1号’、‘早玉’和
‘长十郎’为抗病(R/R)材料,‘新高’、‘武豆9号’和‘荆杜3号’为高抗(HR/HR)材料,‘新星’和‘新黄’为高感(HS/HS)材料。
关键词:梨;种质资源;腐烂病;抗性评价
中图分类号:S 661.2 文献标志码:A 文章编号:0513-353X(2014)07-1297-10 Laboratory Evaluation for the Resistance of Pyrus Germplasm Accession to Valsa Canker
ZHANG Mei-xin1,ZHAI Li-feng1,HU Hong-ju3,ZHANG Ben-xian4,HONG Ni1,2,and W ANG Guo-ping1,2,*(1College of Plant Science and Technology,Huazhong Agricultural University,Wuhan 430070,China;2State Key Laboratory of Agricultural Microbiology,Huazhong Agricultural University,Wuhan 430070,China;3Research Institute of Fruit and Tea,Hubei Academy of Agricultural Sciences,Wuhan 430209,China;4Plant Quarantine Station of Zhongxiang City in Hubei Province,Zhongxiang,Hubei 431900,China)
Abstract:The resistance of a total of 211 samples of Pyrus germplasm accessions belonging to eleven species to Valsa canker were evaluated by inoculating detached shoots in the lab with conidial suspension and mycelia plugs of two strains of Valsa mali var. pyri. The results indicated that the difference between the disease auti-invasion(17.5%)and auti-expansion(35.1%)was significant among the examined germplasm accessions. The disease auti-invasion and auti-expansion of the same germplasm accession in response to the pathogen was significantly different,and the consistent resistance accounted for 30.3% while the inconsistent 69.7%. For all of the germplasm accessions,highly resistant(HR/HR),resistant(R/R),moderately(M/M),susceptible(S/S),and highly susceptible(HS/HS)of the disease auti-invasion and auti-extension to the pathogen was 1.4%,4.7%,12.3%,10.9% and 0.9%,respectively. According to comprehensive evaluation for the resistance,it was considered that of Daxiangshui,Duli,
收稿日期:2014–03–01;修回日期:2014–06–05
基金项目:国家现代农业产业技术体系建设专项资金项目(CARS-29-10);国家农业行业公益性项目(201203034-02)
* 通信作者Author for correspondence(E-mail:gpwang@)
1298 园艺学报41卷
Jiangdao,Le Counte,Longquansu,Pingguoli,Shanli,Yunhong-1,Zaoyu and Changshilang were resistant (R/R),that of Niitaka,Wudou-9 and Jingdu-3 were high resistant(HR/HR)and that of Xinxing and Xinhuang were high susceptible(HS/HS).
Key words:Pyrus;germplasm accessions;Valsa canker;evaluation for the resistance
由苹果腐烂病菌梨变种(Valsa mali var. pyri)引起的梨腐烂病在中国各梨产区均有发生,尤其在西北、东北和华北地区发病十分严重,常导致树体病疤累累,枝干残缺,甚至造成大量死树或毁园(王国平,2012)。田间调查发现,不同地区因栽植的梨品种不同,其腐烂病病株率存在明显差异,新疆库尔勒香梨为50% ~ 80%,西北地区酥梨为30% ~ 50%,华北地区鸭梨、雪花梨为30%左右(王国平,2012)。长期以来,生产上对梨树腐烂病的防控主要依赖于休眠期刮除病斑后涂抹有机砷杀菌剂,尤以福美胂的效果最好(杨迎春和苗春会,2010),但长期使用福美胂会造成梨果实砷含量超标,且目前无公害梨生产上已禁止使用这类药剂。因而为保证梨的高效安全生产,通过评价筛选抗性资源和培育推广抗病品种的途径控制梨树腐烂病具有重要意义。
中国栽培梨的范围非常广泛(各省市区除海南省均有种植),且各地的主栽品种和砧木类型繁多(蒲富慎,1988),因而在田间进行抗性鉴定会受到环境条件和资源的限制。已有研究表明,采用离体枝条接种法可正确评价桉树、苹果树等对腐烂病的抗性程度(Chang et al.,1989;Abe et al.,2007),且不同梨品种离体接种腐烂病菌后,病斑大小存在显著差异(张美鑫等,2013),因此,从梨种质资源中离体选择优异抗病材料具有可行性。本研究中采用梨腐烂病菌分生孢子和菌丝块接种离体枝条的方法,测定目前中国各梨产区主要种质资源对梨腐烂病菌的抗侵入能力和抗扩展能力,并进行综合评价,旨在为梨的资源利用和抗病育种提供参考依据。
1 材料与方法
1.1梨种质资源材料及供试菌株
2012—2013年依托于国家现代农业梨产业技术体系,在中国19个省市区的21个综合试验站共采集到分属于11个种的211份梨种质资源,选取粗细均匀、含水量相近的1年生健康枝条用于室内抗性测定。从实验室已测定致病力的91份梨腐烂病菌株中选取致病力强且分布广泛的菌株F-HN-6和F-SHX-1b用于接种鉴定。
1.2离体枝条分生孢子接种法测定抗病性
在两个灭菌EP管中各加入1 mL PD培养液,分别挑取F-HN-6和F-SHX-1b两个供试菌株的少量新鲜分生孢子,配制成1.5 × 106 ~ 2 × 106个 · mL-1的分生孢子悬浮液备用。将枝条用无菌水洗净晾干,经75%酒精消毒后将其剪成15 cm长的小段,两端用石蜡封口,然后用直径为5 mm的打孔器在枝条的中央打1个孔,每个孔中用移液枪加入20 μL分生孢子悬浮液,另选取枝条用相同的方法打孔后加入不含分生孢子的PD培养液作为对照,待其晾干后用保鲜膜缠绕接种部位保湿。每个菌株每次接种处理重复16次。接种后的枝条置于白盘中(盘底铺有无菌水浸湿的灭菌纱布,盘口覆保鲜膜),在25 ℃,光暗交替的环境下培养6 d,然后分别调查两个菌株在枝条上的病斑数并计算其平均发病率(Incidence rate,IR)。
1.3离体枝条菌丝块接种法测定抗病性
供试菌株在PDA平板上生长2 d时,用5 mm打孔器从菌落边缘取大小一致的菌丝块用于接种,