实验七、果蝇的三点测交汇报总结

23.1%
14.1%
2.2%
重组值的计算和基因作图
的重组值=23.1%+2.2%=25.3% 的重组值=14.1%+2.2%=16.3% 的重组值=23.1%+2.2%*2+14.1%=41.6%
根据所得重组值，得出果蝇X染色体上三个基因的 顺序和图距如下：
25.3 41.6 16.3
干涉程度计算
11号观察发现F1代5对果蝇均死亡，仍是麻醉过度的致 死；12号于旧的培养瓶中重新挑选果蝇3对，因为棉花塞 太小，果蝇逃走，又果蝇分给其他组3对，导致最后就一 对F1代果蝇作为F2代的母本。
4、9天后，释放F2代亲本，培养瓶中出现成虫；期间发现 培养瓶中出现一些幼虫和蛹，如下图；
5. 3天后，开始观察记录，观察F2代果蝇眼色、翅形和刚毛 形态，连续统计7天，11.24--11.31； 由于培养基后期被微生物感染，以及培养箱出现问题， 果蝇于室温中培养，许多幼虫、卵和蛹干死，如下图。
符合系数＝ 观察到的双交换频率／ 两个单交换频率的乘积
以三隐雌蝇与野生型雄蝇杂交为例:
五、实验步骤
1、选处女蝇:将母瓶中的果蝇全部麻醉处死或释放，8-12小 时内收集处女蝇3只，和3只雄蝇一起转移到新的培养瓶 中，做好标记，恒温（大约27摄氏度）培养，10.29-30； 实验于10.28开始，第一次麻醉果蝇不知道乙醚使用量 和处理时间，导致挑选雄蝇全部死亡，重新挑选雄蝇;然 后，挑选好的处女蝇，没做好标记工作，导致其他小组拿 错，于是，10.29重新实验，30号才选好亲本。
反交所选果蝇 母本：三隐性雌蝇 父本：野生型雄蝇
三、实验仪器、药品

实验仪器： 体视显微镜、恒温培养箱、培养瓶、麻醉瓶、 毛笔、滤纸、培养皿等。

实验药品：乙醚、
玉米粉、琼脂、红塘、 酵母粉、丙酸等。
四、实验原理

连锁交换定律：
处在同一染色体上的两个或两个以上基因遗传时，联 合在一起的频率大于重新组合的频率。重组类型的产生是 由于配子形成过程中，同源染色体的非姊妹染色单体间发 生了局部交换的结果。
基因型
数量 102
92
38 36 29 16
白眼 小翅 直刚毛
红眼 长翅 卷刚毛
3
4
合计
320
实验结果分析：
由上表可推断出果蝇X染色体上三个基因的顺序如下：
基因交换值计算公式
交换值=相应表型果蝇数量/果蝇总数量
将以上的杂交结果进行整理并计算交换值
102 92 38 60.6%
36
29 16 3 4
Hale Waihona Puke Baidu
六、实验结果和分析
实验结果：
一、F1代果蝇表型以及其性别统计表 三隐性果蝇 雄 雌
15 0
野生型果蝇
0 20
由上表可知，F1代果蝇，雄蝇均为野生型，雌果蝇 均为三隐型。
二、F2代果蝇表型统计表
表型
白眼 小翅 卷刚毛 红眼 长翅 直刚毛 白眼 长翅 直刚毛 红眼 小翅 卷刚毛 红眼 小翅 直刚毛 白眼 长翅 卷刚毛
母本：三隐性雌蝇
父本:野生型雄蝇
2、5天后，释放亲本，发现培养基已有一些幼虫和蛹（如下 图），如下图，11.4；11.2观察，发现一只雌蝇死亡，最 后亲本只剩2只雌蝇和3只雄蝇；
3、6天后，F1代成蝇出现，集中观察记录F1代果蝇表型和 性别；然后，从中挑选1对F1代果蝇，转至新的培养瓶中 恒温培养，如下图，11.10-11.12；

三点测交：
三点测交就是通过一次杂交和一次测交，同时确定 三对等位基因（即三个基因位点）的排列顺序和它们之间 的遗传距离，是基因定位的常用方法。

主要过程： 用三显性纯合体和三隐性纯合个体杂交，获得三基因 杂合体（F1），再使F1与三隐性基因纯合体测交，通过 对测交后代表现型及其数目的分析，分别计算三个连锁基 因之间的交换值，从而确定这三个基因在同一染色体上的 顺序和距离。 位于同一条染色体上的基因是连锁的，同源染色体的 基因之间会发生一定频率的交换，使子代中出现一定数量 的重组型。重组型出现的多少，即重组值反映基因间发生 交换的频率的高低。根据基因在染色体上直线排列的原理， 基因交换频率的高低与基因间的距离有一定的对应关系。
七、实验讨论与思考
在果蝇三点测交实验中为什么正交（母本为野生型雌 果蝇，父本为三隐性雄果蝇）只需统计雄性个体的表型？ 在果蝇三点测交实验中，三个基因均位与X染色体上， 而Y染色体上没有相应的等位基因，在纯合体亲本杂交得 到的F1代中雄果蝇均为野生型，雄果蝇在减数第一次分裂 前期不发生基因重组，携带X染色体的雄配子（野生型） ， 与任何一种基因型的雌配子结合，均表现为野生型性状， 雌配子的重组基因型性状被雄配子显性基因掩盖；而携带 Y染色体的雄配子，与任何一种基因型的雌配子结合，均 表现雌配子的基因性状，因此在正交实验中只需统计雄性 个体的表现型。
八、实验反思
1、麻醉果蝇：麻醉果蝇的乙醚用量和处理时间要恰当，要 根据具体的培养瓶大小、棉花塞的厚度和果蝇的老幼等决 定，以免将果蝇麻醉致死； 2、无菌操作：培养果蝇的培养基要经过高温灭菌才能使用， 转移果蝇至新的培养瓶时，注意点燃酒精灯等，尽量使操 作过程保持在无菌状态下完成，以免培养基被微生物感染， 使酵母菌不能大量繁殖， 从而导致果蝇食物不足，果蝇 不能正常繁殖，或致使果蝇被感染疾病致死等：
实验七、果蝇的三点测交汇报总结
--上午第五组反交
汇报人： 汇总人： 组员：
一、实验目的
1、掌握三点测交的原理及方法； 2、学习三点测交的数据统计处理及分析方法；
3、了解绘制遗传学图的原理和方法
二、实验材料仪器
黑腹果蝇(Drosophila

melanogaster)品系：
野生型果蝇（+++）： 红眼、长翅、直刚毛 三隐性果蝇（wmsn3）：白眼、小翅、焦刚毛
基因图距就是通过基因间重组值的测定而得到的。如 果基因座位相距很近，重组率与交换率的值相等，直接将 重组值作为基因图距；如果基因间相距较远，两个基因间 往往发生两次以上的交换，必须进行校正。两个基因间的 单交换往往影响邻近两个基因的单交换，使实际观察到的 双交换值低于预期值（两个单交换频率的乘积），因为每 发生单交换，邻近发生交换的机会减少，这叫干涉。一般 用符合系数表示干涉的程度。
3、观察表型：观察果蝇性状过程中，要小心用毛笔将果蝇 取出，不损坏其表型影响观察；要细心辨别果蝇的翅形和刚 毛形态，果蝇翅形和刚毛不易判断； 4、挑选女蝇：处女蝇挑选要保证母瓶亲本已处理完全干净， 在8-12小时内挑选完毕，避免挑选果蝇不是出女蝇；区别 果蝇雌雄一定要以找到性梳为准则，避免错找处男蝇，影 响最终实验结果； 5、实验过程中还需要做好标记工作，避免各组拿错；还需 时时观察并做好相关记录，防止实验出现问题及时补救。
符合系数＝ 观察到的双交换频率／ 两个单交换频率的乘积 =2.2%/23.1%*14.1% =0.675=67.5% 查阅相关资料可知果蝇X染色体上三个基因的实际 顺序和图距如下：
15.2
35
19.2
所得实验结果与实际数据相比较可得：
1、本次实验所得果蝇X染色体上的三个基因的顺序与实际的 基因顺序一致； 2、本次实验所得果蝇X染色体上的三个基因的距离，即基因 图距，与实际的基因图距相差较大，但大体符合，数值上 相差不是很大；数值不够准确可能一方面，与果蝇的实验 数量不足；另一方面，因为果蝇个体较小，一些表型不易 观察清楚，导致统计数据存在误差； 3、计算得干涉率即符合系数为67.5%，可初步推断两个基因 间的单交换对临近两个基因的单交换影响较大，使邻近发 生交换的机会减少，实际观察到的双交换值低于预期值单 交换。