第七章细菌感染的检测方法与防治原则

第七章 细菌感染的检测方法与防治原则
免疫病原教研室 靖吉芳
Department of Microbiology, Harbin Medical University
教学大纲

掌握内容
标本采集原则 人工免疫的分类及常用生物制剂

熟悉内容
抗细菌感染免疫的特点
了解内容
细菌感染诊断的常用方法 第一、二、三代疫苗的优缺点
免疫动物 抗毒素 脱毒 外毒素 类毒素 （抗毒抗体） （极毒抗原） 0.3-0.4%甲醛 （无毒抗原）
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丙种球蛋白-----人类免疫球蛋白
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（二）类毒素（toxoid）
类毒素是外毒素经0.3-0.4%甲醛 处理后,失去毒性仍保持抗原性的生物 制品.如白喉类毒素、破伤风类毒素等, 还可与死疫苗一起制成联合疫苗,如DPT
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一、人工主动免疫
概念：将疫苗或类毒素接种于人体， 刺激机体免疫系统产生特异性免疫应答， 从而对相应病原体感染产生特异性预防 作用的措施。
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升高4倍以上（含4倍） 升高2倍以上 升高4倍以上 降低4倍以上（含4倍） 降低2倍以上
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• 7.类毒素刺激机体后 产生的特异性免疫应 答物质是（） • A 干扰素 • B 抗毒素 • C 补体 • D 乙型溶素 • E 细胞因子
15．细菌标本的采集与送检 错误做法是（2） A 根据病原菌不同而采集不 同标本 B 标本最好在使用抗生素之 前采集 C 尽量采取病变明显部位的 材料 D 用于分离的标本均需冷藏 快送 E 采局部标本时应先用消毒 剂，避免杂菌污染
二、人工被动免疫
概念:输入含有特异性抗体免疫血 清、纯化免疫球蛋白或细胞因子 等免疫制剂，使机体立即获得免 疫力的过程，称人工被动免疫.可 用于紧急预防和治疗。
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抗毒素-----动物血清中提取的免疫球蛋白
国平均水平30％。
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滥用抗菌药物表现种种－表现
不送检验标本，没有药敏试验，长期“经
验用药”，你有足够的经验吗？
病毒感染者常规使用：预防？“保险”？
无知？其他？ 忽视毒副反应的滥用：肝肾毒性、药物热 首选三代、四代头孢，是对还是错？ 首选碳青霉烯类——所谓“一次搞定”， 是对还是错？
染色特性/特殊结构)
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生化试验(根据酶和代谢产物 鉴别细菌)
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动物实验(检测细菌毒力)
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药敏试验(指导临床用药)
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病原菌抗原的检测
酶免疫技术 协同凝集试验 免疫荧光技术 对流免疫电泳 免疫印记技术
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C7 课堂检测题(20s/题，同桌分奇偶数答题）
• 1．属于人工自动免疫 的生物制品（） • A 白喉抗毒素 • B 破伤风类毒素 • C 细胞因子 • D 胸腺素 • E 白细胞介素 • 2．下列哪种生物制品 用于人工被动免疫( ) • A 卡介苗 • B 麻疹减毒活疫苗 • C 乙肝疫苗 • D 胎盘丙种球蛋白 • E 类毒素
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分离培养
根据营养/生 长条件/菌落 特征初步鉴别 细菌
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涂片镜检(动力/形态/大小/排列方式/
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第一节 细菌感染的实验室诊断
细菌学诊断检测病原菌及其抗原、代谢
产物或其核酸以达到诊断目的。
血清学诊断通过检测患者血清中的特异
性抗体达到诊断目的。
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其他免疫制剂
﹡干扰素-主要为INF-γ,通过产生
炎症反应和活化Mφ增强机体对胞内 寄生菌的抵抗能力 ﹡ IL-2-能刺激T细胞增殖,增强 细胞免疫功能 ﹡集落刺激因子、LAK细胞等 这些免疫制剂在抗菌免疫中应用 不多，主要试用于一些病毒性疾病和 肿瘤
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协同凝集实验
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免疫荧光技术
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病原菌核酸的检测
核酸杂交技术
PCR技术
基因芯片技术
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通过胎盘或初乳 接种抗毒素 接种疫苗 患传染病后 注射丙种球蛋白 12.自然自动免 11.人工被动免疫获 疫获得方式（ ） 得方式（多） 14．人工自动免 13.自然被动免疫获 疫获得方式（ ） 得方式（ ）
• • • • •
A B C D E
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第三节 细菌感染的治疗原则
何时用？ 怎样用？
人工自动免疫和人工被动免疫的比较
区别要点
主动免疫
被动免疫
抗体或CK 1次 快,立即 短,2-3周 治疗或 紧急预防
免疫物质 抗原 接种次数 1-3次 免疫出现时间 慢,2-4周 免疫持续时间 长,数月-数年 主要用途 预防
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滥用抗菌药物表现种种－表现
·无菌手术的滥用:
术前、术中、术后各个环节的滥用：剂
一、临床标本的采集及运送原则
标本的采集与运送：早期、无菌、因
病而异、双份血清、快、标记
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二、细菌的检测
直接涂片镜检(痰/粪便/拭子等)
标本
分离培养→可疑菌落 增菌(血液/脑脊液等) 涂片镜检 生化反应 血清学鉴定 药敏试验 动物试验
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• 5．下列哪项属于人工主 动免疫 ( ) A注射丙种球蛋白预防麻疹 B接种卡介苗预防结核 C注射免疫核糖核酸治疗恶 性肿瘤 D注射CK治疗肿瘤 E骨髓移植治疗白血病
6、细菌感染的血清学诊断中， 通常采取双份血清检测， 要确认现症感染，需要恢 复期或一周后血清抗体效 价比早期
A B C D E
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活疫苗与死疫苗的比较
活疫苗 死疫苗
接种次数
接种量
1次
小
2-3次
较大
接种反应
免疫效果 毒力回升 安全性
轻
较好,维持1-5年 有可能 有潜在危险性
重
差,维持0.5-1年 不可能 安全性好 相对稳定
（一）疫苗 1 死疫苗：已死,多次接种,剂量 大,副反应明显
2 活疫苗（减毒活疫苗）：
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（一）疫苗 2 活疫苗（减毒活疫苗）：活,无毒 或弱毒,接种一次,剂量小,副作用小, 免疫力持久.严防回复毒力
其他检测法
气相色谱法 呼气试验
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三、血源自文库学诊断
用已知的细菌或其特异性抗原去检测
患者体液中有无相应抗体以及效价的 动态变化,作为某些传染病的辅助诊断
主要适用于抗原性较强的病原和病程
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3．一个从未进行过破伤 风免疫接种的人目前有 可能感染这种细菌,医 生决定对他进行被动免 疫,应该注射（） A 破伤风类毒素 B 破伤风抗毒素 C 破伤风外毒素 D 混合的人丙种球蛋白 E 血液
4．下列哪种生物制品对 人既是抗原又是抗体（） A 类毒素 B 卡介苗(BCG) C 动物免疫血清 D 转移因子 E 活疫苗
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滥用抗菌药物表现种种－资料
WHO的统计结果表明，中国有1/2的儿
童一旦出现咳嗽、流鼻涕的症状，就
使用抗生素进行治疗。 对全国83万名0～13岁儿童支气管 哮喘患病情况调查显示，94%以上的 哮喘儿童应用抗菌药物治疗，多数为 盲用或滥用。
（一）疫苗
4 基因工程疫苗:如把HBsAg基因插入 酵母细胞中，成功制备乙型肝炎疫苗。 优点：安全、经济、可批量生产 缺点：技术要求高
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（一）疫苗
5 重组载体疫苗:将编码某一抗原的基 因转入减毒的病毒或细菌而制成的疫 苗。痘苗病毒为常用载体。为活疫苗 的一种特殊形式。
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（一）疫苗
6 核酸疫苗（DNA疫苗） 是将编码保护性抗原的基因重组到 真核表达载体上，然后将重组的质粒 DAN直接注射入宿主体内，外源基因在 体内所表达的抗原能刺激机体产生免 疫应答。 优点：免疫效果好、可同时诱导体 液和细胞免疫、免疫应答持久、制备 简单、成本低廉、可联合免疫。 缺点：安全？
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滥用抗菌药物表现种种－资料
我国有50%的人生病时使用抗生素，但
事实上只有25%的患病者需要使用抗生素。 我国门诊感冒患者约有 75 ％应用抗生
素；外科手术应用抗生素的情况则高达
95 ％；我国住院患者的抗生素应用率为
79 ％，这一数字远高于英国的 22 ％和各
较长的传染病的诊断
因一般采取病人血清进行试验，故称
血清学诊断.
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要求：双份血清 判断：后期比早期效价高4倍以上
方法
直接凝集实验 补体结合实验 中和试验 乳胶凝集实验 ELISA——酶联免疫吸附试验
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酶联免疫吸附试验
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第二节 细菌感染的特异性预防
特异性防治是给机体注射或服用病原
微生物抗原或特异性抗体，以达到预 防和治疗疾病的目的,这种方法称为人 工免疫,包括人工主动免疫和人工被动 免疫.
疫苗稳定性 相对不稳定
保存
不易保存
易保存
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（一）疫苗
3 亚单位疫苗:利用保护性抗原,不含核 酸,无毒性、可避免回复突变。
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