黄曲霉毒素快速检测卡使用方法
黄曲霉毒素M1检测卡说明书(完整版)
黄曲霉毒素M1检测卡【简介】黄曲霉毒素是一类真菌（如黄曲霉和寄生曲霉）的有毒的代谢产物，它们具有很强的致癌性，主要存在于谷物、坚果、棉籽以及一些和人类血液，动物饲料相关的产品中。
黄曲霉毒素M1是黄曲霉毒素B1的羟基化代谢产物，也是一种强致癌物质。
牛乳及其制品是易受到黄曲霉毒素M1污染的食品之一。
GB 2761-2001中规定：乳及乳制品中黄曲霉毒素M1的最大允许限量为1μg/kg，即1ppb。
本检测卡适用于液态奶和奶粉的检测，检测限为1μg/kg【精密度】同时使用本产品和黄曲霉毒素 M1 ELISA 检测试剂盒对 300 份样品包括 161 份阴性样本和 139 份阳性样本进行检测，检测结果表明，本产品与黄曲霉毒素 M1 ELISA 检测试剂盒的结果符合率为 98％。
【样品处理】奶粉1、取2g奶粉到锥形瓶中，再加入50℃左右去离子水到10ml（还原牛奶）。
2、震荡3min，使充分溶解。
3、2ml样品，用冷冻离心机（4000RPM ，10℃）离心10min去除脂肪（如没有冷冻离心机，可将样品先冷却到10℃，再离心）。
4、后用移液器彻底去除上层奶油。
5、下层脱脂牛奶与纯净水1:6稀释用于检测。
奶样（1）取1 mL新鲜的牛奶（含脂牛奶）样本置于2ml离心管中，降温至10℃以下4000 r/min离心10分钟后，弃去上层脂肪（约四分之三），剩余四分之一奶样与纯净水1:6（1份奶样+5份纯净水）互溶，互溶后刻度刚好为总体积1ml。
用力震荡1min，使充分溶解后为备用待检液；（2）脱脂牛奶待检液配法，脱脂牛奶与纯净水1:6（1份脱脂牛奶+5份纯净水）互溶，用力震荡1min，使充分溶解后为脱脂牛奶备用待检液；【检测步骤及结果判断】检测前请仔细阅读使用说明书，检测应在室温下进行。
检测步骤为：（1）将铝箔袋沿切口部位撕开，取出检测卡放于平整的台面上，并做好标记；（2）用吸管吸取待检样品溶液，垂直加入2~3滴于加样孔中（注：样本中不要带入气泡），反应3~5min 判断结果。
饲料中霉菌毒素快速检测技术
Veratox 组胺检测试剂盒
检测线2.5-50ppm
检测结果
NEOGEN公司ELISA试剂盒特点
1-操作简单,速度快-所有的霉菌毒素检测只需移液器和酶标 仪就可以获得准确结果,并且所有试剂盒操作步骤几乎一 样;大部分试剂盒的前期样品处理时间不超过3分钟,检测时 间不超过20分钟,同传统方法相比有明显的优势; 2-使用广泛-世界各地普遍使用,适合于目前中国大多数饲料 企业实验室检测; 3-质量可靠-试剂盒灵敏度和重复性非常高,其它公司产品无 法达到;黄曲霉毒素试剂盒是美国农业部指定使用产品,呕 吐毒素试剂盒是世界同类产品金标准,玉米烯酮试剂盒为 AOAC官方方法;
Veratox 伏马毒素试剂盒
检测线1-6ppm和 50-600ppb
检测结果
Veratox T-2毒素试剂盒
第一步 样品处理 1-取代表性的样品,粉碎,使75%的样品过20目筛; 2-取5g到25ml 50%甲醇溶液中,震荡3分钟; 3-静止2-3分钟,过滤，收集滤液;。 第二步 检测 1-向每个红色微孔中加入100ul酶结合物溶液； 2-再分别加入100ul标准品和样品处理液，混匀； 3-从红色微孔中取100ul到抗体孔中，室温下温育5分钟； 4-洗涤3-5次； 5-每孔加入100ul底物，室温下温育5分钟； 6-每孔加入100ul终止液，混匀； 7-在酶标仪上读数。
Veratox黄曲霉毒素试剂盒 (美国农业部指定使用产品 USDA认证号#2005-102)
Veratox黄曲霉毒素试剂盒 (美国农业部指定使用产品,USDA认证号 #2005-102)
第一步 样品处理 1-取代表性的样品,粉碎,使75%的样品过20目筛; 2-取5g到25ml 70%甲醇溶液中,震荡3分钟; 3-静止2-3分钟,过滤，收集滤液; 第二步 检测 1-向每个红色微孔中加入100ul酶结合物溶液； 2-再分别加入100ul标准品和样品处理液，混匀； 3-从红色微孔中取100ul到抗体孔中，室温下温育2分钟； 4-洗涤3-5次； 5-每孔加入100ul底物，室温下温育3分钟； 6-每孔加入100ul终止液，混匀； 7-在酶标仪上读数
黄曲霉毒素b1检测卡原理
黄曲霉毒素B1检测卡原理一、介绍黄曲霉毒素B1是一种由黄曲霉菌（Aspergillus flavus）和黄曲霉菌（Aspergillus parasiticus）产生的毒素。
这种毒素在潮湿的环境中很常见，例如地里的土壤、谷物、坚果等。
黄曲霉毒素B1对人体健康具有严重的危害，被国际癌症研究机构（IARC）列为一类致癌物质。
为了保障食品安全，对于食品中黄曲霉毒素B1的检测至关重要。
黄曲霉毒素B1检测卡（Rapid Test Kit）是一种常用的快速、便捷的检测方法。
本文将详细介绍黄曲霉毒素B1检测卡的原理。
二、黄曲霉毒素B1检测卡原理黄曲霉毒素B1检测卡基于免疫学原理进行检测。
它是一种便携式的试纸，可以在实验室、生产现场、农田等地方进行使用。
下面将详细介绍黄曲霉毒素B1检测卡的原理和操作流程。
2.1. 原理黄曲霉毒素B1检测卡的原理是通过免疫反应来检测食品中的黄曲霉毒素B1。
该检测卡上包含了特异性抗体。
当食品中含有黄曲霉毒素B1时，它会与检测卡上的抗体结合，形成特定的抗原-抗体复合物。
这个复合物会继续在试纸上扩散，最终会与试纸上预先涂有黄曲霉毒素B1结合物的线上发生反应。
当食品样品中含有黄曲霉毒素B1时，试纸上的线条会呈现出一定的颜色。
根据线条颜色的强弱，可以判断食品中黄曲霉毒素B1的浓度。
2.2. 操作流程下面是黄曲霉毒素B1检测卡的操作流程：1.取一定量的食品样品，并将其加入试管中。
2.加入适量的提取液，将食品样品与提取液混合均匀。
3.将混合溶液倒入提取管中，封上盖子。
4.轻轻颠倒提取管，将混合溶液与抗体充分接触。
5.将提取管中的混合溶液滴在检测卡上的样品孔中。
6.等待一定时间，观察样品孔和结果窗口。
7.根据结果窗口中线条的颜色强弱，判断样品中黄曲霉毒素B1的浓度。
三、黄曲霉毒素B1检测卡的优点黄曲霉毒素B1检测卡具有以下几个优点：1.快速：该检测卡只需要几分钟就可以得到结果，比传统的检测方法快速许多。
黄曲霉毒素B1快速检测卡(胶体金法)说明书
黄曲霉毒素B1快速检测卡(胶体金法)说明书【产品名称】产品名称：黄曲霉毒素B1快速检测卡(胶体金法)英文名称：Aflatoxin B1 Rapid Test Card (Colloidal Gold)【产品简介】黄曲霉毒素是一类丝状真菌（如黄曲霉和寄生曲霉）产生的有毒代谢产物，黄曲霉毒素B1是已知的化学物质中致癌性最强的一种，其毒性作用主要是对肝脏的损害。
黄曲霉毒素B1污染的食物主要是玉米、稻谷、小麦、花生、花生油等粮油食品，且以南方高温、高湿地区污染最为严重。
本产品用于快速检测玉米油、花生油、葵花籽油等食用油中黄曲霉毒素B1残留，检测过程只需要20分钟，适用于家庭、超市、食堂、食品企业及检测机构的快速筛查。
【包装规格】5次/盒。
【产品组成】黄曲霉毒素B1快速检测卡（5条）；1mL刻度吸管（10支）；提取瓶（内含黄曲霉毒素B1提取液2mL，5瓶）。
【检测原理】本产品采用了竞争抑制免疫层析的原理。
【检出限】本产品检测方法对玉米油、花生油黄曲霉毒素B1检出限量为20μg/kg，对其他食用油黄曲霉毒素B1检出限量为10μg/kg。
根据《食品真菌毒素限量GB2761-2011》规定，玉米油、花生油黄曲霉毒素B1检出限量为20μg/kg，其他食用油黄曲霉毒素B1检出限量为10μg/kg。
【使用方法】1、玉米油或花生油检测：用1mL刻度吸管向提取瓶中加入油样2mL（用吸管移加2次）；其他食用油检测：用1mL刻度吸管向提取瓶中加入油样4mL（用吸管移加4次）。
2、盖紧提取瓶盖，用手上下振荡30-60秒，静置10分钟，待样品分成上下两层。
3、从包装袋中取出检测卡，平放在桌面，用另一只新吸管从提取瓶中吸取少量下层液体，垂直滴加3滴（约100μL）于检测卡加样孔（S孔）中。
4、室温环境计时约10分钟，根据示意图判定结果。
【结果判定】阴性（-）：T线显色比C线深或一样深，均表示样品中黄曲霉毒素B1浓度低于检出限。
阳性（+）：T线显色比C线明显变浅或T线不显色，表示样品中黄曲霉毒素B1浓度等于或高于检出限。
黄曲霉毒素B1试剂盒操作流程图
该操作是根据江苏省苏微微生物产品应用编制的，具体使用请参照产品附带说明书！黄曲霉毒素B1操作流程示意图
1.
；
2.1‐6号孔分别按次序由小到大加入浓度为0‐‐2ppb 标准品溶液各50ul ，剩余孔从7号开始分别加入要测定的样品的稀释液；然后从1号开始的所有孔分别加入50ul 稀释后的酶标抗原溶液，加盖后放入37℃培养箱，进行30分钟温育；
3.孵育完成后，倒掉孔内所有试剂，每孔加入约250ul 洗涤液，洗板5次；
4.5次洗板后拍干酶标孔（拍干后残留的气泡可用吸头戳破），按照先后顺序，所有孔先加入50ul 底物a ，然后所有孔再加入50ul 底物b ，加盖后放入37℃培养箱，进行15分钟温育；
显色反应后每个孔基本都会呈现出不同程度的蓝色，肉眼能明显的看到1‐6号孔的蓝色是由深到浅的（毒素含量越低，蓝色越深；反之亦然。
），样品孔则由于毒素含量的不同，呈现出
显色示意图
5.显色反应完成后，在每个孔中加入50ul 的终止液，蓝色变成黄色，混匀后上450nm 波长的酶标仪读取吸光度值。
关于黄曲霉毒素M1定性快速检测试纸条的说明——牛奶
黄曲霉毒素M1快速检测试纸条使用说明书（乳品）【原理】本产品应用胶体金免疫竞争法，通过特异性抗原抗体反应，快速检测乳品中黄曲霉毒素M1残留，适用于各类企业、检测机构、监督部门的现场快速检测。
【检测限】0.3μg/kg （μg/kg=ppb）【适用范围】生鲜乳【产品组成】黄曲霉毒素M1快速检测试纸条（5桶，40份/盒）；黄曲霉毒素M1微孔试剂（5桶，40份/盒）；一次性手套；说明书【需要但未提供仪器】胶体金读数仪【检测步骤】1．仪器准备：打开胶体金读数仪，预热10分钟。
2. 样品检测a．使用前将试纸条、微孔试剂和待检样品恢复至室温（20～25℃）。
b．吸取200µL样品于微孔试剂中，缓慢抽吸至检测样品与微孔试剂充分混匀（大约5-6次）；室温孵育4min。
c．从试剂桶中取出所需数量的试纸条并插入微孔试剂中，室温反应5min，立即取出试纸条1分钟内进行结果判断。
3. 结果判读♦阴性（－）：T线比C线显色深或者一样深，表示样品中待♦检测物质浓度低于检测限，或不含待检测物质；♦阳性（＋）：T线比C线显色浅，或T线无显色，则表示样品中待检测物质浓度高于检测限；♦无效：C线未显色，表明操作过程不正确或检测卡已失效。
4．结果分析ａ．用吸水纸将试纸条下端吸水纸轻轻擦去，（注：勿碰到试纸条白色NC膜表面），打开样品卡壳，将试纸条插入样品卡壳槽内，保证白色NC膜表面的两条色带在卡壳视窗中间；ｂ．将样品卡壳插入胶体金读数仪样品卡槽中，点击“开始检测”键，按照仪器操作程序，读取结果。
【储存及有效期】2～8℃避光干燥保存，有效期12个月（生产日期、有效期及批号见外包装）。
【注意事项】1.检测试纸条及微孔试剂请在保质期内一次性使用；2.打开微孔试剂时，请轻轻揭开密封膜，切勿用力迅速揭开，以免有粉末飞出；3.微孔试剂打开后请在一个小时内使用完，否则失效，影响检测效果；4.在产品未使用完之前，切勿将桶中干燥剂丢弃;5.所检测牛奶样品必须为均匀液体，不能有结块、发酸和沉淀等现象；6.本检测方式为筛选方法，如遇阳性样本，请按照规定的标准进行取样，用确证法进行确证；。
上海快灵生物黄曲霉毒素B1检测卡说明书
快灵生物黄曲霉毒素B1检测卡检测原理：快灵生物黄曲霉毒素B1检测卡基于胶体金免疫层析技术。
检测时，样品中的黄曲霉毒素B1在流动过程中与胶体金标记的特异性抗体结合，抑制了抗体与固相载体膜上的黄曲霉毒素B1-BSA偶联物的结合，如果样品中的黄曲霉毒素B1含量大于灵敏度，检测线在规定时间内不显颜色，结果为阳性，反之，检测线显红色色带，结果为阴性。
无论检测液中黄曲霉毒素B1浓度高低，C线均显红色色带。
适用情况：黄曲霉毒素B1检测卡适用于饲料、粮食、食品企业进行黄曲霉毒素B1的定性或半定量检测；检测样品：谷物、饲料、发酵酒、酱油、醋、食用油等；检测下限：5ppb；试纸特点：黄曲霉毒素B1检测卡可以通过调整稀释倍数准确地检测5ppb、10ppb、20ppb、50ppb或更高阈值；回收率高而稳定（80%左右）；黄曲霉毒素B1检测卡检测背景影响小；通过设置检测梯度实现半定量检测；无毒无害，安全环保；有效期：2~30°C保存18个月。
常见问题：1）用试剂盒定量检测为阳性，但是用试纸卡检测为阴性？答：黄曲霉毒素的生长是呈现不均匀性的，采样不均一可能导致这种结果。
2）说明书后面的残留限量表怎么用？答：残留限量表上面一栏标注有“残留限量”单位是ppb的栏目，是要客户根据自己要测定的标准来选择下面对应稀释液的数量，比如客户是饲料厂，国标规定黄曲霉毒素B1的含量不能超过20ppb，那么在试验中，客户需要加的稀释液的量就是20ppb下面对应的数量。
3）除了产品以外，客户还需要购买其他配套设备和试剂吗？答：配套设备只需要准备基础的实验器材，比如烧杯，电子称等，试剂需要配备乙酸乙酯有机溶剂，规格是分析纯，到普通的化学试剂店就可以买到，价格便宜。
4）试验中提到的纯水可以用蒸馏水代替吗？答：可以。
5）检测时间大概多久？答：加上前处理最多需要半个小时。
6）阴性和阳性各代表什么意思？答：阴性代表样品中不含有毒素或者含有的毒素含量没有超过检测的限量；阳性代表样品中的毒素含量超过了检测限量。
农产品快速检测技术W2103-4 胶体金速测卡快速检测玉米中的黄曲霉毒素B1-微教材
《农产品/食品质量安全检测技术》课程-微教材知识讲解1、黄曲霉毒素B1黄曲霉毒素B1是已知的化学物质中致癌性最强的一种。
主要存在于土壤，动植物各种坚果，特别是花生和核桃中。
在大豆、稻谷、玉米、通心粉、调味品、牛奶、奶制品、食用油等制品中也经常发现黄曲霉毒素。
它对包括人和若干动物具有强烈的毒性，其毒性作用主要是对肝脏的损害。
在天然食物中以黄曲霉毒素B1最为多见，危害性也最强，国家质检总局规定黄曲霉毒素B1是大部分食品的必检项目之一。
2、检验原理速测卡法检验的原理，本方法以条状纤维层析材料为固相，通过毛细作用使样品溶液到达指定位置反应、显色来检测样品中黄曲霉毒素B1的含量。
检测时，通过T线颜色的有无来判断黄曲霉毒素B1是否超标。
如果样品中黄曲霉毒素B1的含量等于或高于检测限，在规定的检测时间内，T线不显色，结果为阳性；反之，T线显色，则样品中黄曲霉毒素B1的含量低于检测限，结果为阴性。
无论样品中黄曲霉毒素B1的含量高低，质控线（C线）均显色，以示检测有效,否则检测无效。
边学边练任务：胶体金速测卡快速检测玉米中的黄曲霉毒素B1操作步骤：1、材料与设备玉米粉、80%甲醇-水溶液、黄曲霉毒素B1快速检测卡试剂盒，包括快速检测试纸条、样品稀释液、微孔试剂、记号笔、量筒、烧杯、移液器、天平、50mL离心管、离心机、涡旋振荡器等。
试剂：去离子水、石油醚、甲醇、黄曲霉毒素总量ELISA检测试剂盒等。
2、试剂配制首先向100ml量筒中加入20ml蒸馏水，然后加入80ml甲醇溶液，定容后将甲醇混合液转移到烧杯中，搅拌均匀后待用。
3、样品前处理首先，调好天平后，准确称取处理后的玉米粉5.0g，放置于50ml具塞离心管中，同样方法再称取玉米粉2份备用，并用记号笔做好标记，以免混淆。
分别向3只离心管中加入10ml80%甲醇溶液，在涡旋振荡器上振荡3min，充分混匀后在4000r/min条件下，离心5min，取上清液100μL于ep管中，加入样品稀释液200μL，混匀后待测。
黄曲霉毒素M1快速检测卡(胶体金法)说明书
黄曲霉毒素M1快速检测卡(胶体金法)说明书【产品名称】产品名称：黄曲霉毒素M1快速检测卡(胶体金法)英文名称：Aflatoxin M1 Rapid Test Card (Colloidal Gold)【产品简介】黄曲霉毒素是一类丝状真菌（如黄曲霉和寄生曲霉）产生的具有很强致癌性的有毒代谢产物，黄曲霉毒素M1是黄曲霉毒素B1的羟基化代谢产物, 主要存在于乳及乳制品中。
本产品用于快速检测纯牛奶和婴幼儿配方奶粉中的黄曲霉毒素M1残留，整个检测过程只需要20分钟左右，适用于家庭、超市、食堂、食品企业及检测机构的快速筛查。
【包装规格】5次/盒。
【产品组成】黄曲霉毒素M1快速检测卡（5条）；1mL刻度吸管（5支）；奶粉取样勺（1支）；提取瓶（内含黄曲霉毒素M1提取液4mL，5瓶）。
【检测原理】本产品采用了竞争抑制免疫层析的原理。
【检出限】本产品检测方法对纯牛奶黄曲霉毒素M1的检出限为0.5μg/kg，对婴幼儿配方奶粉（以粉末计）黄曲霉毒素M1的检出限为0.5μg/kg。
根据《食品真菌毒素限量GB2761-2011》规定，液态乳黄曲霉毒素M1检出限量为0.5μg/kg，婴幼儿配方乳粉（以粉末计）黄曲霉毒素M1检出限量为0.5μg/kg。
【使用方法】1、纯牛奶检测：用吸管吸取2mL纯牛奶（吸管刻度线处为1mL，连续吸取两次），加入提取瓶中，盖紧瓶盖后振荡混匀；奶粉检测：用取样勺量取1平勺奶粉（约0.4g），加入提取瓶中，盖紧瓶盖后振荡混匀。
2、将提取瓶放在热水（60-70℃）中水浴5分钟，取出待检。
3、从包装袋中取出检测卡，平放在桌面，用吸管从提取瓶中吸取样品，垂直滴加3滴（约100μL）于检测卡加样孔（S孔）中。
4、室温环境计时10分钟，根据示意图判定结果。
【结果判定】阴性（-）：T线显色比C线深或一样深，均表示样品中黄曲霉毒素M1浓度低于检出限。
阳性（+）：T线显色比C线明显变浅或T线不显色，表示样品中黄曲霉毒素M1浓度等于或高于检出限。
黄曲霉毒素的危害限量标准及快速定量检测方法
黄曲霉毒素的危害、限量标准及快速定量检测方法黄曲霉毒素（Aflatoxins，简写 AF）主要为黄曲霉和寄生曲霉的次生代谢产物。
在温暖与潮湿的气候地区粮食和饲料凡是被黄曲霉和寄生曲霉污染的都可能存在黄曲霉毒素。
黄曲霉毒素最易污染的有花生、玉米、棉籽、禽蛋、肉、奶及奶制品，其次是小麦、高粱和甘薯，大豆粕被黄曲霉毒素污染的程度轻些。
在我国，粮食和饲料被黄曲毒素污染的概率很高， 给饲料企业以及养殖业主带来了很大的损失，人们食用含有黄曲霉毒素的食物危害到人体健康。
一、黄曲霉毒素的理化特性目前已经确定的黄曲霉毒素的结构有AFB1、AFB2、AFM1等 18 种， 它们的基本结构中都含有二呋喃环和氧杂萘邻酮（又名香豆素）， 前者为其具有毒性的结构，后者可能与其的致癌性有关。
黄曲霉毒素很难溶解于水、己烷、乙醚和石油醚，易溶于甲醇、乙醇、氯仿以及二甲基甲酰胺（DMF）等有机溶剂中。
分子量为 312-346，熔点为 200-300℃，黄曲霉毒素耐高温，通常加热处理方式对其的破坏很小， 只有在熔点的温度下才能发生分解。
黄曲霉毒素遇碱情况下能迅速分解， 但此应可逆， 即在酸性的条件下又能复原。
一般来说，温度30℃、相对湿度80%、谷物水份在14%以上（花生的水份在9%以上）最适合黄曲霉繁殖和生长。
在 24-34℃之间， 黄曲霉菌产毒量最高。
几乎所有谷物、饲草和各种食品（包括畜产品）都可作为黄曲霉基质。
二、黄曲霉毒素对动物和人的危害2.1 黄曲霉毒素对动物的危害黄曲霉毒素的毒性非常高，是目前已发现霉菌中毒性最大的一种。
目前发现的18种黄曲霉菌毒素家族中， AFB1的毒性最为最为强烈，AFM1、AFG1 次之，AFB2、AFG2、AFM2 毒性较弱。
AFB1的毒性是砒霜的68倍，其诱发肝癌的能力甚至比二甲基亚硝胺大75倍之多。
其毒性的大小因动物的种类、年龄、性别、体况及营养状况的不同而有所差异，年幼动物、雄性动物较敏感。
黄曲霉毒素B 检测卡说明书
黄曲霉毒素B 检测卡说明书1. 产品介绍该检测卡是一种用于检测食品中黄曲霉毒素B（简称“黄曲霉素B”）含量的便捷、快速的测试工具。
黄曲霉素B是一种常见的食品毒素，长期摄入可能对人体健康造成危害。
使用该检测卡能够准确、迅速地检测食品中的黄曲霉素B含量，从而保障消费者的食品安全。
2. 产品特点（1）便捷快速：该检测卡采用便携式设计，操作简单，不需要专业设备，30分钟内即可得到检测结果。
（2）高灵敏度：该检测卡具有高灵敏度，能够准确检测低至10ppb（微克/升）的黄曲霉素B含量。
（3）适用广泛：该检测卡适用于各类食品，如谷物、坚果、肉制品等。
（4）可靠准确：该检测卡经过严格的质量控制，具有较高的准确性和可靠性。
3. 使用说明（1）样品处理：将待测试的样品按照说明书的要求进行处理，提取出样品中的黄曲霉素B。
（2）装置准备：在平整的工作台上，将黄曲霉素B检测卡取出，待温度适应后，打开包装袋。
（3）取样：使用专用吸样管吸取待测试样品提取物，滴入检测卡指定位置。
（4）加液：使用专用注射器，向指示位置加入3滴洗涤缓冲液。
（5）等待反应：将检测卡平放，避免震动，等待约5分钟，让反应发生。
（6）解读结果：观察测试线上是否出现红色或粉色条纹。
如果出现了测试线，表示样品中含有黄曲霉素B，颜色深浅与含量成正比。
若没有出现测试线，表示样品中黄曲霉素B含量低于检测限。
4. 注意事项（1）请勿使用已经过期的检测卡，以免影响测试结果。
（2）使用前请仔细阅读产品说明书，并严格按照要求进行操作。
（3）使用过程中注意个人卫生，避免污染样品。
（4）请将检测卡妥善保管，避免受潮、受热等情况。
（5）本检测卡仅用于食品中黄曲霉素B的初步筛查，如需精确测量，请使用专业仪器。
5. 注意事项（1）本产品仅适用于黄曲霉素B的检测，不适用于其他毒素的检测。
（2）本产品仅供科研和食品安全监测使用，不得用于其他非法用途。
（3）本产品的开发商、制造商对于由于使用不当、操作失误等原因造成的检测结果不准确或任何直接或间接损失概不负责。
艾维德G030102黄曲霉毒素B1检测卡
产品缩写：AFB1 货号：G030102 版本：2015.21黄曲霉毒素B1检测卡使用说明书（胶体金法）1 原理及用途本产品应用竞争抑制胶体金免疫层析的原理制成，用于检测谷物、饲料等样本中的黄曲霉毒素B1（Aflatoxin B1，AFB1）。
样本溶液滴入检测卡的加样孔后，样本溶液中的黄曲霉毒素B1与金标抗体相结合，从而阻止金标抗体与纤维素膜上黄曲霉毒素B1偶联物结合。
当样本溶液中的黄曲霉毒素B1含量大于检测限时检测线不显色，结果为阳性；当样本溶液中黄曲霉毒素B1含量小于检测限时检测线显紫红色，结果为阴性。
2 技术指标2.1 试剂卡灵敏度：2ppb （ng/ml ）对样本的最终检测限须以试剂卡灵敏度乘以样本处理的稀释比例。
2.2 样本检测下限：谷物、饲料、粮油……………10ppb 3 试剂盒组成检测卡…………………………50个/盒 说明书…………………………1份 4 需要的器材和试剂4.1 仪器：均质器 、振荡器、离心机、刻度移液管、天平（感量0.01g ）4.2 微量移液器：单道20µl -200µl，100µl -1000µl 4.3 试剂：甲醇，正己烷 5 样本前处理5.1 样本处理前须知：实验器具必须洁净并使用一次性吸头，以避免污染干扰实验结果。
5.2 配液：配液1：样本提取液70%甲醇，即V 甲醇:V 去离子水=7:3。
5.3 样本前处理步骤： 5.3.1 谷物、饲料1）称取2g 粉碎样本于离心管中，再根据不同的检出限要求按下表加入样本提取液检测下限 10ppb 20ppb 50ppb 100ppb 样本提取液2ml4ml10ml20ml振荡5分钟，室温4000转/分离心10分钟。
2）取0.1ml 上清，加入0.4ml 去离子水，混匀； 3）取80ul 进行分析。
5.3.2 粮油（菜油、麻油、色拉油、花生油等）1）称取2g 样本于离心管中，再根据不同的检出限要求按下表加入样本提取液检测下限 10ppb 20ppb 40ppb 100ppb 样本提取液2ml4ml8ml20ml然后加入8ml 正己烷，振荡5分钟，室温4000转/分离心10分钟。
黄 曲 霉 毒 素 检 验 方法
一、目的规范实验室检验方法。
二、内容（一）试验准备1、标定荧光计。
（1）、将仪器后的电源开关打开。
（2）、按SELECTTEST键，直至显示出AflaTest，按ENTER。
（3）、荧光计显示：START CALBRATION…OPEN THE LIDINSERT RED VIAL打开仪器盖，将红色的真菌毒素标定管放入。
一定要确认标定管是否已放到了仪器的底部。
（4）、仪器显示：HIGHCAL 22PPB如果这个值正好是所选分析方法规定的设定值，请按ENTER键。
否则，从键盘上所规定的设定值，确认准确无误后，按ENTER键。
（5）、仪器显示：READING HIGH CAL…SA VING HIGH INENSTTYOPEN THE LIDINSERT GREEN VIAL打开仪器盖取出红色的标定管，插入绿色的真菌毒素标定管。
一定要确认标定管是否已充分插入仪器的底部。
（6）、仪器显示：LOW CAL 1.0PPB如果这个值正好是所选分析方法规定的设定值,请按ENTER键.否则,从键盘上所规定的设定值,确认准确无误后,按ENTER键。
（7）、仪器显示：READING LIW CAL…SA VING HIGH INTENSITJY 接着显示：OPEN THE LIDINSERT GREEN VIAL打开仪器盖取出绿色的标定管。
（8）、仪器显示：VICAM V1.3 READY按SELECT TEST键,仪器显示: AFLATEST, 按ENTER键。
（9）、仪器显示：START RUN TEST OPEN THE LID （10）、插入黄色的真菌毒素标定管，其读数应该在分析方法的测定范围内。
（11）、荧光屏计标定工作完毕，可经进行样品分析了。
荧光计每周需要标定一次。
如果需要重新标定，请按STOP键，再按OPIONS 键，直至仪器显示：CALIBRATE TEST然后按ENTER键，仪器显示：AFLATEST如果不是这样，按SELECT TEST键，直至仪器显示：AFLATEST，按ENTER键。
总黄曲霉毒素检测卡说明书(完整版)
总黄曲霉毒素快速检测卡【产品简介】黄曲霉毒素是真菌的次级代谢产物，主要是由黄曲霉、寄生曲霉和特曲霉产生。
它易天然存在于花生、棉籽、玉米、小麦和稻米等农作物中具，有强烈的毒性和致癌性。
本产品为总黄曲霉毒素胶体金快速检测卡，用于定性检测核桃奶、银杏露等各种饮品以及玉米、花生等坚果和饲料中的黄曲霉毒素B1、B2 和G1、G2 的残留，整个检测过程只需要5 分钟左右。
核桃奶、银杏露等各种饮品灵敏度为1ppb，玉米、花生等坚果和饲料的灵敏度为2ppb 。
乳液中黄曲霉毒素Ｍ１检测灵敏度为0.5ppb.【产品规格】规格：40 份/盒【样品处理】1、饮品可直接用于检测。
2、玉米、花生等坚果和饲料称取适量样品经饲料粉碎机磨细后，过20 目筛。
称取过筛后 1 克粉碎样品，用4ml 样品提取液溶解。
用手或用涡旋仪剧烈震荡 5 分钟左右。
静置10-20 分钟。
静置后轻轻取上清液，按1:2 加入样品稀释液（上清液：样品稀释液=1:2）。
充分混匀后用于检测样品提取液：60%甲醇溶液。
按体积比甲醇：纯水=3:2 配制。
样品稀释液：0.01mol/L 磷酸盐缓冲液PBS【使用步骤】1、在进行测试前先完整阅读使用说明书，使用前将检测卡和待检样本溶液恢复至室温。
2、从原包装袋中取出检测卡，打开后请在一个小时内尽快地使用。
3、将检测卡平放，用滴管吸取待检样品溶液，垂直逐滴加入4、滴无气泡样品于加样孔中，加样后开始计时。
5、5 分钟读取结果，30分钟后结果判读无效。
根据示意图判定结果。
注：如果出现无法层析至顶的情况，可酌情多滴1-2 滴。
【结果判定】阴性（-）：两条紫红色条带出现。
表示样品中不含有总黄曲霉毒素或其浓度低于检测限。
阳性（+）：检测T 线无显色，则表示样品中总黄曲霉毒素浓度高于检测限。
无效：未出现质控 C 线，表明操作过程不正确或检测卡已失效。
【注意事项】1、检测卡请在有效期内一次性使用；2、检测时避免阳光直射和电风扇直吹；3、尽量不要触摸检测卡中央的白色膜面；4、样品滴管不可混用，以免交叉污染；5、如果样品出现沉淀或浑浊物，请离心后再检测；由于样品的差异，有的检测线可能偏淡或颜色偏灰，但只要出现条带，就可判定为阴性结果。
黄曲霉毒素B1检测的操作规程
1 适用范围本方法适用于测定全价饲料及脂肪含量小的固体原料（如玉米、玉米副产物等）。
2 操作方法1 样品处理：称取5.0g粉碎后的样品于具塞三角瓶中，准确加入25.0毫升甲醇水（1+1）溶液，（现配现用）。
振摇15分钟过滤，收集试样滤液，此液为样品提取液。
根据样品的国家标准允许量标准，用A试剂（样品稀释液）将样品提取液进行适当稀释，玉米一般将提取液稀释10倍（取滤液50uL+450uLA试剂），全价料滤液一般稀释4倍（取滤液50uL+150uLA试剂）稀释后放在混匀器上混匀，即为待测样液。
2、试剂的配制：每瓶C试剂准确加入1.5毫升D试剂（用移液枪移两个750uL）。
配成实验用酶标抗原溶液；取一瓶E试剂（浓缩洗涤液）加入300毫升蒸馏水中，配成洗涤液待用，均在2—8℃保存。
3、试剂平衡：将测试盒于室温中放置15分钟以上，平衡至室温。
4、小孔编号：根据实验需要截取相当孔数放置反应板框架上，设定一号孔为仪器调零孔（空白孔），2号孔为阴性对照孔，3号孔为阳性对照孔，其余孔为样品孔。
5、洗板（激活抗原）：每孔加入250uL洗涤液，洗涤液不得溢出，放置1分钟后，甩掉洗涤液，在吸水纸上拍干（注意：不能在同一张纸上重复多次拍打），重复洗板一次，放置、甩掉、拍干。
6、加样：第1步：第一个孔加50uLA稀释剂，第二个加50uLB试剂（0.1AFB1标准溶液），第三个孔加50 uLB试剂（1 AFB1标准溶液），其余孔加入相应待测样液。
第2步：1号孔加入50uLD试剂，从第2个孔开始加50uLC试剂，加完轻轻摇下，在37℃培养箱中培养半个小时，最好用书包着避光。
半个小时后，洗板，甩掉反应液，拍干。
每孔加入250洗涤液后，放置两分钟，甩掉洗涤液，在吸水纸上拍干，再重复洗涤4次。
第3步：显色：每孔分别加入50uL F试剂（显色液）和50uL G试剂（显色液），摇匀，将反应板放入37℃恒温培养箱中显色15分钟（可以F和G混合加100uL，现用现配）。
黄曲霉毒素b1检测卡原理
黄曲霉毒素b1检测卡原理黄曲霉毒素B1（AFB1）是一种有毒的真菌代谢产物，常见于玉米、花生等食品中，会对人体健康造成危害。
因此，对于食品中的黄曲霉毒素B1进行检测是十分必要的。
而黄曲霉毒素B1检测卡就是一种常用的检测方法。
一、黄曲霉毒素B1检测卡的基本原理黄曲霉毒素B1检测卡采用竞争性免疫层析法进行检测。
竞争性免疫层析法是指在试剂条上固定有抗原或抗体，样品与试剂条上固定的抗原或抗体发生竞争结合反应，从而实现对样品中特定成分的快速检测。
具体来说，黄曲霉毒素B1检测卡上固定有标记了金纳米粒子的单克隆抗体。
当样品中含有黄曲霉毒素B1时，它会与单克隆抗体竞争结合金纳米粒子标记的单克隆抗体。
当样品中含有大量的黄曲霉毒素B1时，会与金纳米粒子标记的单克隆抗体竞争结合，导致试剂条上的T线变浅或消失。
反之，当样品中含有较少的黄曲霉毒素B1时，金纳米粒子标记的单克隆抗体会优先结合样品中的黄曲霉毒素B1，而不是与试剂条上固定的单克隆抗体结合。
这种情况下，试剂条上的T线会呈现出明显的颜色。
二、黄曲霉毒素B1检测卡的具体操作步骤（一）样品处理首先需要将待检测食品样品进行处理。
一般来说，可将待检测食品样品加入适量水中搅拌均匀，并过滤掉杂质。
（二）取样取出黄曲霉毒素B1检测卡，并用移液器将待检测液滴于卡上。
（三）等待反应在试剂条上滴加待检测液后，需要等待约5-10分钟左右，让试剂条充分反应。
（四）读取结果在等待反应结束后，可以通过目视或者读取仪器来判断检测结果。
当试剂条上的T线变浅或消失时，说明样品中含有黄曲霉毒素B1。
反之，当试剂条上的T线呈现出明显的颜色时，说明样品中含有较少的黄曲霉毒素B1。
三、黄曲霉毒素B1检测卡的优缺点（一）优点1. 操作简单：只需要将待检测液滴于试剂条上即可进行检测。
2. 快速：整个检测过程只需要10分钟左右即可完成。
3. 灵敏度高：可以对样品中非常微小的黄曲霉毒素B1进行检测，灵敏度在0.05-0.1μg/kg之间。
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黄曲霉毒素是由黄曲霉和寄生曲霉中产毒菌株所产生的有毒代谢产物，最主要的4种分别为：B1、B2、G1、G2。
黄曲霉毒素具有很强的急性毒性，也有明显的慢性毒性及强致癌性。
黄曲霉毒素主要污染粮、油及其制品，其中受污染最严重的是花生、棉籽、玉米及其制品；其次是稻米、小麦、大麦、高粱、芝麻、茶叶等。
【检测原理】
该试剂盒采用免疫竞争法分析原理结合胶体金标记技术进行检测。
【检测范围】
酱油检测限为5ppb
花生、玉米、小麦、大米、茶叶、饲料检测限为10ppb
食用油检检测限为10ppb
【产品组成】
名称数量名称数量
黄曲霉毒素B1卡10条样品稀释液11瓶
样品稀释液21瓶乙酸乙酯1瓶
15ml离心管2只2ml离心管10只
一次性手套3只滴管10支
说明书1份
【检测步骤】
1、酱油检测：
取100ul酱油加入配套的2ml离心管中，加400ul稀释液1，摇匀. 取出试纸，开封后平放在桌面，用滴管向试纸孔缓慢而准确地逐滴加入3滴检测液。
5~10分钟判断结果，半小时后的结果判读无效。
2、花生、玉米、小麦、大米、茶叶、饲料等检测
⑴. 取5g以上有代表性的粉碎后的谷物样品（过20目筛），准确称取0.5g均匀粉碎试样，加入到配套的15ml离心管中。
⑵．向离心管中准确加入纯净水和乙酸乙酯各2mL，将瓶塞盖紧密封，用力振荡5分钟，4000rpm离心1分钟（备注：如实验室没有大离心机设备，可以用小离心管取1.5ml上清液，用小离心机离心）。
⑶．用吸管取0.6mL上清液到小玻璃杯中，吹干滤液，然后用0.3ml体积稀释液1复溶杯底固体。
此溶解液即为检测液.
⑷．取出试纸，开封后平放在桌面，用滴管向试纸孔缓慢而准确地逐滴加入3滴检测液。
⑸．5~10分钟判断结果，半小时后的结果判读无效。
取1ml待测食用油样品于2ml离心管中，加入1ml样品稀释液2，振荡5min，取上清液100ul，加100ul 样品稀释液1稀释，加样检测。
5~10分钟判断结果，半小时后的结果判读无效。
【结果判断】
序号检测样品样品中毒素含量(ppb)
1酱油5
2花生、玉米、小麦、大米、茶叶、饲料10
3食用油10
1、阴性:测试线(T)与对照线(C)都出现，表明样品中黄曲霉毒素的浓度不超标。
2、阳性:只有对照线(C),无测试线(T)，表明样品中黄曲霉毒素的浓度超标。
3、无效:对照线(C)和测试线(T)都不出现，或者对照线（C）不出现。
【注意事项】
1、本产品在2～30℃密封干燥保存；忌冷冻；检测卡保存期18个月；
2、在环境温度15～37℃下操作；检测卡极易受潮，打开小包装后应立即使用；
3、乙酸乙酯为易挥发液体，保存为12个月，不用时要盖紧瓶塞；。