动物细胞工程PPT课件(1)
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2-2 动物细胞工程(第一课时)-2023-2024学年高二生物精品课件(人教版2019选择性必修
p H ： 多数细胞生存的适宜pH在7.2-7.4
渗透压：需要考虑的一个重要环境参数
气体环境 O2: 细胞代谢所必需的 （95%空气和 CO2：维持培养液的pH 5% CO2 ）
微生物培养中的作用不同（为自养型 微生物提供碳源）
CO2 培养箱
2 动物细胞培养的过程
动物组织块 用机械法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理
（将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配置而成的培养基）
液体培养基 （培养液）
1 动物细胞培养的条件
无菌、无毒的环境 ①对培养液和所有培养用具进行灭菌处理
无菌 ②在无菌环境下进行操作 无毒 定期更换培养液，以便清除代谢物
超净工作台
1 动物细胞培养的条件
适宜的温度、pH和渗透压
温度：哺乳动物多以（36.5±0.5）℃
①使细胞与培养液充分接触，一方面保证细胞所需的 O2和营养物质的供应，另一方面保证细胞内代谢废物 的及时排出；
②使得在细胞水平操作的其它技术得以实现。
2 动物细胞培养的过程
【思考3】用胰蛋白酶分散细胞，由此可说明细胞间的物 质主要是什么成分？ 主要是蛋白质(胶原蛋白等)。
【思考4】胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？那将动物组织 分散成单个细胞时要注意什么问题呢？
能，应注意时间的控制。因为胰蛋白酶不仅能分解细胞 间的蛋白质，长时间还会分解膜蛋白，对细胞造成损伤。
【思考5】能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？ 不能，因为动物细胞培养适宜的PH为7.2—7.4，此环 境下胃蛋白酶（2.0）没有活性，而胰蛋白酶(7.2-8.4) 的活性较高。
2 动物细胞培养的过程
动物细胞工程
（第一课时）
➢ 动物细胞培养 ➢ 动物细胞融合 ➢ 动物细胞核移植
渗透压：需要考虑的一个重要环境参数
气体环境 O2: 细胞代谢所必需的 （95%空气和 CO2：维持培养液的pH 5% CO2 ）
微生物培养中的作用不同（为自养型 微生物提供碳源）
CO2 培养箱
2 动物细胞培养的过程
动物组织块 用机械法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理
（将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配置而成的培养基）
液体培养基 （培养液）
1 动物细胞培养的条件
无菌、无毒的环境 ①对培养液和所有培养用具进行灭菌处理
无菌 ②在无菌环境下进行操作 无毒 定期更换培养液，以便清除代谢物
超净工作台
1 动物细胞培养的条件
适宜的温度、pH和渗透压
温度：哺乳动物多以（36.5±0.5）℃
①使细胞与培养液充分接触，一方面保证细胞所需的 O2和营养物质的供应，另一方面保证细胞内代谢废物 的及时排出；
②使得在细胞水平操作的其它技术得以实现。
2 动物细胞培养的过程
【思考3】用胰蛋白酶分散细胞，由此可说明细胞间的物 质主要是什么成分？ 主要是蛋白质(胶原蛋白等)。
【思考4】胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？那将动物组织 分散成单个细胞时要注意什么问题呢？
能，应注意时间的控制。因为胰蛋白酶不仅能分解细胞 间的蛋白质，长时间还会分解膜蛋白，对细胞造成损伤。
【思考5】能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？ 不能，因为动物细胞培养适宜的PH为7.2—7.4，此环 境下胃蛋白酶（2.0）没有活性，而胰蛋白酶(7.2-8.4) 的活性较高。
2 动物细胞培养的过程
动物细胞工程
（第一课时）
➢ 动物细胞培养 ➢ 动物细胞融合 ➢ 动物细胞核移植
动物细胞工程中小学PPT教学课件
再说说“我”的“驯良”：
活动范围：树林 （不侵犯人类） 活动时间：晚上 （不骚扰人类） 常吃食物：杏仁、榛子、榉实
和橡栗等 （不伤害人畜）
最后说说我的“乖巧”：
从动作、行为上： 过水方法、 警觉性强、 跑跳敏捷、 叫声特点
从搭窝特点上：
选择窝址、 搭窝过程、 窝口设计
品味语言
你认为本文的语言有什么特点? 结合具体的句子说说你的体会。
没发生改变。 • 细胞系：超过50代的细胞，遗传物质发生
改变，可无限增殖。
动物细胞培养过程
胚胎成幼龄动物的组织器官（细胞来源） 剪碎胰蛋白酶 分离细胞 单个细胞
洗涤、稀释、分离 原代培养 原代细胞 传代培养 细胞株（遗传物质没有发生改变）
细胞系（遗传物质发生改变）
动物细胞培养应用
1. 生产有价值的蛋白质制品，（如病毒疫 苗、干扰素、单克隆抗体、动物激素）
生动的语言：
运用拟人手法对松鼠作了人格化的描写。
例：
“面容清秀”“玲珑的小面孔”“美丽的尾巴” 中用“清秀”“玲珑”“美丽”对松鼠作了人 格化的描写，突出它的“漂亮”。
----用拟人手法形象生动地说明事物：
1.描写松鼠的漂亮---“面容清秀” “玲 珑的小面孔” “美丽的尾巴”
2.描写松鼠的活动---“歇凉”“练 跑”“玩耍”
学习目标：
• 通过阅读，概括松鼠的特征 • 通过比较，体会文章形象、生动
地说明事物的方法 • 自觉养成爱护动物、保护环境的
良好习惯
教学重点：
学习用拟人手法形象生动地说明事物。
驯良 （xùn）乖巧（guāi） 矫健 （jiǎo）缨形（yīng) 蛰伏（zhé） 橡栗 （lì） 圆锥 （zhuī） 树杈（chà）苔藓（tái xiǎn） 榉树 (Jǔ) 榛 （zhēn）
动物细胞工程复习课件
体内的
细胞，从小鼠体内提取分离该细胞之前，应
给小鼠注射效应__B___________类物质。 常用（__2__）__d_过___程__是_或一_个____抗____原_______________的__诱过导程。，该过程的进行
(3)假设仅考虑某两个细细胞胞融合的融合，则可形成 种类 型培养的C，细D胞细聚，胞乙因二的醇此名需称用是___灭__活__的__病，_培毒其养特基点筛是选出D细胞3用于 _____________________________选_择__性_________。
单克隆抗体最主要的优点：特异 性强，灵敏度高，并能大量制备。
抗体的传统生产方法 抗原 反复注射动物 从动物的血清中分离抗体
该法制备抗体的缺点：
产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度 低。 如何解决这个问题呢？ 单克隆抗体！
⑵用于治疗疾病和运载药物 ①特异性强、灵敏度高 生物导弹——单克隆抗体＋抗癌药物 ②疗效高、毒副作用小
杂交瘤细胞特点： 既能产生特异性抗 体，又能大量增殖。
（二选）：选 能产生所需专 一抗体的杂交 瘤细胞
体外培养 小鼠腹腔内培养
获得产生相应 抗体的B细胞
√ B-B 、B-瘤 、瘤-瘤
（未融合的B、瘤）
（一选）选择 性培养基：只 有杂交瘤细胞 才能存活
2.3单克隆抗体的应用
诊断试剂——最广泛应用 准确、高效、简易、快速
杂交瘤细胞
既能无限增殖又能产生特异性抗体
(4)在培养时通过___有__丝___分裂方式大量繁殖。D细胞体 外培养需要注意的条件是（要求答5项） __________________________________。 无菌、无毒的环境；充足的营养；适宜的温度和pH；适宜 的气（体5）环单境克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面，与 常规抗体相比，其特点是_________________。
第二章细胞工程第2节动物细胞工程 教学课件人教版高中生物选择性必修3
旁栏边角想一想 动物细胞培养时,除了添加糖类、氨基酸等必要的营养成分外,往往还需添 加血清等一些天然成分,原因是什么? 提示 人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚,血清等一些天然成分 的营养成分比较齐全,可以弥补人工培养基的不足。
结论语句辨一辨
1.在25 ℃的实验条件下可顺利完成人神经细胞的培养。( × )
结论语句辨一辨 1.胚胎干细胞可以来源于早期胚胎,也可以来源于成熟个体。( × ) 2.成体干细胞没有组织特异性,可以分化成特定的细胞或组织,不具有发育 成完整个体的能力。( × ) 3.由iPS细胞产生的特定细胞,可以在新药的测试中发挥重要作用。( √ ) 4.体外培养胚胎干细胞可以不断增殖而不发生分化。( √ )
第2章细胞工程
第2节 动物细胞工程
第1课时 动物细胞培养 第2课时 动物细胞融合技术与单克隆抗体 P34 第3课时 动物体细胞核移植技术和克隆动物 P63
课程标准
1.认同动物细胞培养是模拟体内生理条件在体外进行的培养, 分析动物细胞培养需要的基本条件。 2.尝试构建动物细胞培养的基本流程,比较动物细胞培养和植 物组织培养的异同。 3.概述干细胞的分类,探讨干细胞在临床上的应用及面临的风 险,理性看待生物技术。
(2)培养条件 ①营养条件:将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养 基,称为合__成__培__养__基__,在使用时,通常需要加入___血__清____等一些天然成分。 ②无菌、无毒的环境:在体外培养细胞时,需要对培养液和所有培养用具进 行灭菌处理以及在无菌环境下进行操作。培养液还需要定期更换,以便 清__除__代__谢__物__,防止其积累对细胞自身造成危害。 ③适宜的温度、pH和渗透压:维持细胞生存必须有适宜的温度。哺乳动物 细胞培养的温度多以_3_6_._5_±__0_.5__ ℃为宜。多数动物细胞生存的适宜pH为 __7_._2_~_7_.4___。 ④适宜的气体环境:通常采用培养皿或_松_盖__培__养__瓶__,并将它们置于含有95% 空气和5%CO2的混合气体的_C_O_2_培__养__箱__中进行培养。O2是细胞代谢所必 需的,CO2的主要作用是__维__持__培__养__液__的__p_H___。
《动物细胞工程》课件
动物胚胎
剪碎
胰蛋白酶
或幼龄动
物的组织、 器官，它
细胞悬浮液
用胰蛋白酶分散细 胞，说明细胞间的
们细胞增 殖能力强，
原代培养
物质主要是蛋白质。 动物细胞培养适宜
分裂旺盛， 分化程度
10代细胞
的PH为7.2—7.4， 此环境下胃蛋白酶
低，容易 培养。
洗涤、稀释、
细胞株
（2.0）没有活性， 而胰蛋白酶(7.2-8.4)
（2）单克隆抗体制备过程中应 用哪些细胞 工程技术手段？ （3）制备过程为何要经过两次筛选？
10
单克隆抗体的制备 抗原 小鼠
B淋巴细胞
骨髓瘤细胞
细胞培养
细胞融合，
杂交瘤细胞
筛选
筛选，继续培养
体外培养
体内培养
单克隆抗体
11
单克隆抗体有何应用？
主要用于疾病的诊断、治疗和预防。 与常规抗体相比，具有特异性强、灵敏度 高的优点。如；各种癌症、肝炎病毒、 SARS病毒、细菌及血吸虫等数百种疾病的 诊断；在疾病治疗方面，单克隆抗体犹如 人体卫士，能识别“自己”与“异己”， 一旦发现 致病因素便与之结合将其杀死。 若在单抗上带上抗癌药物制成“生物导 弹”，将药物定向带到癌细胞所在部位， 既消灭了癌细胞又不会伤害健康细胞。
保留融合活性 （诱导细胞融合）
3、动物细胞融合的用途
制备单克隆抗体
5
(三)单克隆抗体
提出问题：长期以来，人们为了获得抗体，采用的是 把某种抗原反复注射到动物体内，然后从动物血清中 分离出所需抗体的方法。用这种方法获得的抗体，不 仅产量低，而且抗体的特异性差，纯度低，反应不够 灵敏。
• 思考：
（1）请概括单克隆抗体的概念 （2）根据阿根廷科学家米尔斯坦和德国科学家柯勒设计的 实验
[人教版]《动物细胞工程》课堂课件1
![[人教版]《动物细胞工程》课堂课件1](https://img.taocdn.com/s3/m/d50fd5c2fc4ffe473268ab47.png)
染色，而活细胞不染色，原因是________。
(4)检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞 分裂到____中____期的细胞用显微镜进行观察。
(5)在细胞培养过程中，通常在___冷__冻___条件下保存细胞。因为 在这种条件下，细胞中___酶___的活性降低，细胞_代__谢_的速率降低
动物细胞工程
图表示四倍体兰花叶片通过植物组织培养形成植
株的过程，相关叙述中正确的是( C ) A．②和③阶段会发生减数分裂 B．①阶段需生长素而③阶段需细胞分裂素 C．①阶段有细胞增殖但无细胞分化 D．此兰花的花药离体培养所得植株为二倍体
在实验室里“种”牛排
一、动物细胞培养
1、概念：
？ 就是从动物机体中
10代 细胞
50代 细胞
无限 传代
原代培养
传代培养
原代培养 传代培养
细胞株
细胞系
4、动物细胞培养需要满足以下条件
①充足的营养供给：微量元素、无机盐、糖类、氨基酸、
促生长因子、血清等。
②适宜的温度：36.5 ℃±0.5 ℃。
③适宜的 pH：7.2～7.4。
O2：有氧呼吸、细胞代谢(95%的空气)
④气体环境
胰蛋白酶 原代 分瓶 培养
动物细胞培养不能 最终培养成动物体
3、几个重要的概念
细胞贴壁
悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上(单层)。 要求：培养瓶（皿）内表面光滑、无毒、易于贴附。
接触抑制
细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分裂，数量 不断增加，最后形成一个单层，此时细胞间相互接 触，细胞分裂和生长停止，数量不再增加。
［名师课堂教学］［人教版］《动物 细胞工 程》课 堂课件1 （完整 版PPT)
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(4)检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞 分裂到____中____期的细胞用显微镜进行观察。
(5)在细胞培养过程中，通常在___冷__冻___条件下保存细胞。因为 在这种条件下，细胞中___酶___的活性降低，细胞_代__谢_的速率降低
动物细胞工程
图表示四倍体兰花叶片通过植物组织培养形成植
株的过程，相关叙述中正确的是( C ) A．②和③阶段会发生减数分裂 B．①阶段需生长素而③阶段需细胞分裂素 C．①阶段有细胞增殖但无细胞分化 D．此兰花的花药离体培养所得植株为二倍体
在实验室里“种”牛排
一、动物细胞培养
1、概念：
？ 就是从动物机体中
10代 细胞
50代 细胞
无限 传代
原代培养
传代培养
原代培养 传代培养
细胞株
细胞系
4、动物细胞培养需要满足以下条件
①充足的营养供给：微量元素、无机盐、糖类、氨基酸、
促生长因子、血清等。
②适宜的温度：36.5 ℃±0.5 ℃。
③适宜的 pH：7.2～7.4。
O2：有氧呼吸、细胞代谢(95%的空气)
④气体环境
胰蛋白酶 原代 分瓶 培养
动物细胞培养不能 最终培养成动物体
3、几个重要的概念
细胞贴壁
悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上(单层)。 要求：培养瓶（皿）内表面光滑、无毒、易于贴附。
接触抑制
细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分裂，数量 不断增加，最后形成一个单层，此时细胞间相互接 触，细胞分裂和生长停止，数量不再增加。
［名师课堂教学］［人教版］《动物 细胞工 程》课 堂课件1 （完整 版PPT)
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动物细胞工程(完整ppt课件
.
动物细胞培养过程
动物胚胎或幼龄动
胰蛋白酶
加培养液
单个细胞
细胞
物的组织、器官 剪碎
制成 悬浮
液
细胞部系分细胞“癌变”，细胞株
遗传物质改变，无 限传代
养原 代 培
壁细 胞 贴
细胞
50代细胞 剥离、分瓶
10代 细胞
动物细胞培养不能 最终培养成动物体
传代培养
.
动物细胞生长特性
细胞贴壁：
悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上， 称为细胞贴壁。
3、体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细 胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？
不是，克隆动物绝大部分DNA来自供体细胞 核，但核外还有少部分DNA（如线粒体DNA） 来自受体卵母细胞
4.动物克隆实例很多，为何多莉就举世闻名呢？
在1997年2月英国罗斯林研究所维尔穆特博士科研组 公布体细胞克隆羊“多莉”培育成功之前，胚胎细胞核 移植技术已经有了很大的发展。实际上，“多莉”的克 隆在核移植技术上沿袭了胚胎细胞核移植的全部过程， 但这并不能减低“多莉”的重大意义，因为它是世界上 第一例经体细胞核移植出生的动物，是克隆技术领域研 究的巨大突破。这一巨大进展意味着：在理论上证明了，
程
妊娠、出生
克隆羊多利
.
思考题
１、在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之 前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？
为使核移植动物的遗传物质全部来自有利用 价值的动物提供的细胞。 ２、用于核移植的供体细胞一般都选用传代10 代以内的细胞，为什么？ 10代以内的细胞一般保持正常二倍体的核型， 未发生突变
.
脱组 分织
化
植物细胞B
胞 促进融合 壁
的方法？
动物细胞培养过程
动物胚胎或幼龄动
胰蛋白酶
加培养液
单个细胞
细胞
物的组织、器官 剪碎
制成 悬浮
液
细胞部系分细胞“癌变”，细胞株
遗传物质改变，无 限传代
养原 代 培
壁细 胞 贴
细胞
50代细胞 剥离、分瓶
10代 细胞
动物细胞培养不能 最终培养成动物体
传代培养
.
动物细胞生长特性
细胞贴壁：
悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上， 称为细胞贴壁。
3、体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细 胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？
不是，克隆动物绝大部分DNA来自供体细胞 核，但核外还有少部分DNA（如线粒体DNA） 来自受体卵母细胞
4.动物克隆实例很多，为何多莉就举世闻名呢？
在1997年2月英国罗斯林研究所维尔穆特博士科研组 公布体细胞克隆羊“多莉”培育成功之前，胚胎细胞核 移植技术已经有了很大的发展。实际上，“多莉”的克 隆在核移植技术上沿袭了胚胎细胞核移植的全部过程， 但这并不能减低“多莉”的重大意义，因为它是世界上 第一例经体细胞核移植出生的动物，是克隆技术领域研 究的巨大突破。这一巨大进展意味着：在理论上证明了，
程
妊娠、出生
克隆羊多利
.
思考题
１、在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之 前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？
为使核移植动物的遗传物质全部来自有利用 价值的动物提供的细胞。 ２、用于核移植的供体细胞一般都选用传代10 代以内的细胞，为什么？ 10代以内的细胞一般保持正常二倍体的核型， 未发生突变
.
脱组 分织
化
植物细胞B
胞 促进融合 壁
的方法？
动物细胞工程教学PPT
传代培养
将原代细胞进行传代培养， 使其在体外持续增殖的过 程。
细胞冻存与复苏
通过冷冻保存细胞，以便 在需要时进行复苏和培养。
动物细胞培养的常见问题与解决方案
01 02
污染问题
动物细胞培养过程中常见的污染源包括细菌、霉菌和支原体等。解决方 案包括定期检查培养环境、严格控制培养基和器具的灭菌过程以及及时 处理污染细胞。
动物细胞工程实验技术
动物细胞融合技术
动物细胞融合技术是指将两个或多个 动物细胞融合成一个细胞的过程，是 动物细胞工程中的重要技术之一。
动物细胞融合技术需要使用特定的融 合剂或电刺激等方法，使细胞膜融合， 形成异核或多核细胞。
该技术可用于制备单克隆抗体、诱导 多功能干细胞、研究细胞分化机制等 方面。
动物染色体工程需要严格遵守 伦理和法律规定，确保实验动 物的福利和安全。
动物基因编辑技术
动物基因编辑技术是指通过特定的基 因编辑工具对动物基因进行精确的修 饰和改造的技术。
动物基因编辑技术可以采用CRISPRCas9等基因编辑系统，对目标基因进 行敲除、敲入或定点突变等操作。
该技术可用于研究基因功能、治疗遗 传性疾病、制备转基因动物等方面。
经济和社会发展
动物细胞工程的发展将带动相关产业的发展，创 造就业机会，促进经济发展和社会进步。
THANKS
感谢观看
动物细胞工程教学
• 动物细胞工程概述 • 动物细胞培养技术 • 动物细胞工程实验技术 • 动物细胞工程的应用案例 • 动物细胞工程的未来展望
01
动物细胞工程概述
定义与特点
定义
动物细胞工程是以动物细胞为研究对象，通过细胞培养、细胞融合、基因转移 等技术手段，实现动物细胞在数量和质量上的改变，以应用于医学、农业、生 物工程等领域的技术。
动物细胞工程ppt
二、单克隆抗体
（一）获得抗体的传统方法
2、缺点：
产量低，纯度低，特异性差。
把某种抗原反复注射到动物体内，然后从动物血清中分离出所需的抗体。
人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B淋巴细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每一个B细胞只分泌一种特异性抗体。要想获得大量的单一抗体，必须克隆单一的B淋巴细胞，形成细胞群。
2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体
单击添加副标题
专题2 细胞工程
植物体细胞杂交的意义：
打破生殖隔离，克服远缘杂交不亲和的障碍，培育作物新品种。
一、动物细胞融合
细胞融合是正常的生命活动。 两个细胞正在融合 受精作用
(一)动物细胞融合的概念
02
03
01
04
添加标题
细胞A
添加标题
物理法 化学法
我们以制备单克隆抗体为例来说明这一问题。我们知道，体内产生的特异性抗体种类可多达百万种以上，但是每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体，如果仅取一个脾细胞（含B淋巴细胞）和一个瘤细胞杂交，我们不能确定该脾细胞分泌的抗体是否正是我们所需要的；若用大量的脾细胞和瘤细胞进行融合，就可以从融合细胞中筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。
添加标题
细胞B
添加标题
杂种细胞 灭活的病毒
ห้องสมุดไป่ตู้
用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程
细胞核
病毒颗粒
细胞核
灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面
细胞膜被病毒颗粒穿通 细胞膜连接 细胞融合，形成杂种细胞 （细胞膜具有一定的流动性）
两个核的融合是在杂种细胞第一次有丝分裂时进行的
01
03
02
04
05
(三)动物细胞融合的应用
（一）获得抗体的传统方法
2、缺点：
产量低，纯度低，特异性差。
把某种抗原反复注射到动物体内，然后从动物血清中分离出所需的抗体。
人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B淋巴细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每一个B细胞只分泌一种特异性抗体。要想获得大量的单一抗体，必须克隆单一的B淋巴细胞，形成细胞群。
2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体
单击添加副标题
专题2 细胞工程
植物体细胞杂交的意义：
打破生殖隔离，克服远缘杂交不亲和的障碍，培育作物新品种。
一、动物细胞融合
细胞融合是正常的生命活动。 两个细胞正在融合 受精作用
(一)动物细胞融合的概念
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添加标题
细胞A
添加标题
物理法 化学法
我们以制备单克隆抗体为例来说明这一问题。我们知道，体内产生的特异性抗体种类可多达百万种以上，但是每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体，如果仅取一个脾细胞（含B淋巴细胞）和一个瘤细胞杂交，我们不能确定该脾细胞分泌的抗体是否正是我们所需要的；若用大量的脾细胞和瘤细胞进行融合，就可以从融合细胞中筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。
添加标题
细胞B
添加标题
杂种细胞 灭活的病毒
ห้องสมุดไป่ตู้
用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程
细胞核
病毒颗粒
细胞核
灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面
细胞膜被病毒颗粒穿通 细胞膜连接 细胞融合，形成杂种细胞 （细胞膜具有一定的流动性）
两个核的融合是在杂种细胞第一次有丝分裂时进行的
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(三)动物细胞融合的应用
动物细胞工程PPT医学课件
.细胞培养图
思考一下！
1、小林在皮肤烧伤之后，很容易得病，为什么？ 缺少皮肤的保护作用 2、皮肤在我们人体当中是第几道防线，其他几道防线是什么？ 第一道防线，第二道防线是溶菌酶、吞噬细胞等，第三 道防线是细胞、体液免疫系统 3、选取植皮时，理论上选择谁的皮肤最好？为什么？ 自己的，不发生免疫排斥反应 4、自身的健康皮肤是有限的，能不能通过其他途径获得自身 的皮肤？
③制成细胞悬液： 用培养液化后的初次培养；
一、动物细胞培养
⑤传代细胞培养：
贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶处理 后分瓶继续培养，让细胞继续增殖；
动物胚胎或幼龄动物的组织、器官
胰蛋白酶
单个细胞
加培养液
遗传物质 未改变
细胞悬浮液 原代培养 10代细胞 细胞株
40-50代细胞
传代培养
遗传物质 已改变
细胞系 无限传代
一、动物细胞培养
3、动物细胞培养过程的基本概念
①细胞贴壁：细胞在培养过程中，分散的 细胞贴附在瓶壁上。 ②接触抑制：贴壁细胞分裂生长到表面相 互接触时，细胞会停止分裂增殖；
贴壁生长、接触抑制
细胞在贴壁 生长过程中，随 着细胞分裂，数 量不断增加，最 后形成一个单细 胞层，此时细胞 间相互接触，细 胞分裂和生长停 止，数量不再增 加。
(1)为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官 或组织做动物细胞培养材料？
答： 因为这些组织或器官，分裂能 力旺盛，易于培养。
(2)为什么培养前要将组织细胞分散成单 个细胞？
答：成块组织中细胞与细胞靠在一起，
限制了细胞的生长和增殖，且细胞不能与培 养液充分接触，不利于培养。
(3)胰蛋白酶的作用是什么？由此可说明 细胞间的物质是什么成份？ 能够用胃蛋白酶 代替胰蛋白酶吗？为什么？
思考一下！
1、小林在皮肤烧伤之后，很容易得病，为什么？ 缺少皮肤的保护作用 2、皮肤在我们人体当中是第几道防线，其他几道防线是什么？ 第一道防线，第二道防线是溶菌酶、吞噬细胞等，第三 道防线是细胞、体液免疫系统 3、选取植皮时，理论上选择谁的皮肤最好？为什么？ 自己的，不发生免疫排斥反应 4、自身的健康皮肤是有限的，能不能通过其他途径获得自身 的皮肤？
③制成细胞悬液： 用培养液化后的初次培养；
一、动物细胞培养
⑤传代细胞培养：
贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶处理 后分瓶继续培养，让细胞继续增殖；
动物胚胎或幼龄动物的组织、器官
胰蛋白酶
单个细胞
加培养液
遗传物质 未改变
细胞悬浮液 原代培养 10代细胞 细胞株
40-50代细胞
传代培养
遗传物质 已改变
细胞系 无限传代
一、动物细胞培养
3、动物细胞培养过程的基本概念
①细胞贴壁：细胞在培养过程中，分散的 细胞贴附在瓶壁上。 ②接触抑制：贴壁细胞分裂生长到表面相 互接触时，细胞会停止分裂增殖；
贴壁生长、接触抑制
细胞在贴壁 生长过程中，随 着细胞分裂，数 量不断增加，最 后形成一个单细 胞层，此时细胞 间相互接触，细 胞分裂和生长停 止，数量不再增 加。
(1)为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官 或组织做动物细胞培养材料？
答： 因为这些组织或器官，分裂能 力旺盛，易于培养。
(2)为什么培养前要将组织细胞分散成单 个细胞？
答：成块组织中细胞与细胞靠在一起，
限制了细胞的生长和增殖，且细胞不能与培 养液充分接触，不利于培养。
(3)胰蛋白酶的作用是什么？由此可说明 细胞间的物质是什么成份？ 能够用胃蛋白酶 代替胰蛋白酶吗？为什么？
新教材高中生物第2章第2节动物细胞工程一动物细胞培养pptx课件新人教版选择性必修3
及应用(生命观念、科学思维、社会责任)
知识导图
课前·新知导学
动物细胞培养的条件
1．动物细胞培养的概念 从动物体中取出相关的组织，将它分散成___单__个__细__胞___，然后在适 宜的培养条件下，让这些细胞___生__长___和___增__殖___的技术。
2．动物细胞培养的条件 (1) 营 养 ： 动 物 细 胞 培 养 所 需 的 营 养 有 ___糖__类____ 、 氨 基 酸 、 无 机 盐、维生素等，将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的 培养基，称为__合__成__培__养__基__。通常需要在培养基中加入__血__清____等一些 天然成分。 (2)无菌、无毒的环境：对_培__养__液___和所有_培__养__用__具___进行无菌处理 以及在_无__菌__环__境___下进行操作。培养液需要__定__期__更__换__，以便清除代谢 物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。
5．应用 (1)将正常的__造__血__干__细__胞____移植到病人体内，恢复病人的_造__血___和 免疫功能，用来治疗白血病等疾病。 (2)__神__经__干__细__胞____在治疗神经组织损伤和神经系统退行性疾病方面 (如帕金森病、阿尔茨海默病等)有重要的应用价值。 (3)用___i_P_S_细__胞____治疗阿尔茨海默病、心血管疾病等领域的研究也 取得了新进展。
(3)温度、pH和渗透压 ①适宜的温度条件：_3_6_._5_℃___±0.5 ℃。 ②适宜的pH条件：__7_.2_～__7_._4__。 ③CO2的主要作用是维持__培__养__液__的__p_H___。
动物细胞培养液中为什么要加动物血清？ _____________________________________。 【答案】血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等物质，而且 还含有多种未知的促生长因子，能促进细胞的生长、增殖
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2、动物细胞培养的应用和概念： 动物细胞培 养就是从动物有 机体中取出相关 的组织,将它分 散成单个细胞, 然后,放在适宜 的培养基中,让 这些细胞生长和 增殖.
动物细胞的培养过程
取动物器官 和组织 幼龄动物 剪碎组织
胰蛋白酶处理 单个细胞 细胞培养
动物细ห้องสมุดไป่ตู้培养技术是其他动物细胞工程技术的基础
动物胚胎或幼龄动 3、动物细胞培养过程： 物的组织、器官
过程有什么影响？
• 3、动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理是否
相同？两者的融合过程是否也一样？
一、动物细胞融合
细胞融合是正常的生命活动
受精作用
两个细胞正在融合
动物 细胞 融合
细胞A
物理法 化学法
细胞B
仙台病毒
灭活的病毒
疱疹病毒
新城鸡瘟病毒
杂种细胞
用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程
病毒颗粒 细胞核
胰蛋白酶处理动物组织，可以使动物组织细胞 间的胶原纤维和细胞外的其他成分酶解，获得单 个细胞。
有关概念:
• 原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为 原代细胞。初次培养称为原代细胞培养。 • 传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配 制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的 培养瓶中继续培养，称为传代培养。
3.动物细胞培养的条件:
1.无菌无毒的环境 2.营养
3.温度和pH
4.气体环境
4.动物细胞培养技术的应用:
• 1.蛋白质生物制品的生产 如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体
• 2.健康细胞培养
培养健康细胞用于烧伤病人皮肤移植
• 3.细胞的生理、药理、病理研究
植物组织培养和动物细胞培养的比较
比较项目 植物组织培养 动物细胞培养
一、动物细胞培养
1.发展历史: 20世纪初，人们不知道神经纤维是由神经细胞的细 胞质向外突出形成的，还是由神经细胞周围的其他细胞 融合而成的。生物学家们就这个问题展开了激烈的争论。 1907年，美国生物学家哈里森(Harrison)从蝌蚪的脊索 中分离出神经组织，把它放在青蛙的凝固的淋巴液中培 养。蝌蚪的神经组织存活了好几周，并且从神经细胞中 长出了神经纤维。哈里森的实验不仅解决了神经纤维的 起源问题，而且开创了动物组织培养的先河。此后，在 许多科学家的不懈努力下，动物组织培养不断改进并逐 渐发展成为动物细胞培养。
有关概念
细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞 生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存 活到40~50代，这种传代细胞为细胞株。 细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞 生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的 改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这 种传代细胞为细胞系。 细胞株和细胞系的区别： 细胞系的遗传 物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制， 容易传代培养。
另一头绵羊的子宫
妊娠、出生
克隆羊多利
胚胎移植技术
胚胎移植的基本程序如下（以牛胚胎移植为例）
2.体细胞核移植技术的应用前景
3.体细胞核移植技术存在的问题
思考下列问题：
• 1、什么叫动物细胞融合？植物体杂交技术与动物细胞 融合有什么不同呢？
• 2、动物细胞在结构上有何区别？这与它们杂交或融合
细胞核
细胞融合与融合诱导细胞融合物质：
诱导剂：仙台病毒、聚乙二醇 诱导细胞融合的仙台病毒必须灭活。 思考讨论：为什么细胞融合过程中使用的 病毒需要灭活？不灭活行吗？
因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂 质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合，不灭 活的话会感染细胞，而不能诱导细胞融合。 细胞融合技术应用于哪些方面？ 细胞学、遗传学、免疫学及制备单克隆抗体。
二、单克隆抗体
什么是抗体？ 抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能 与该抗原发生特异性结合的具有免疫功 能的球蛋白。 浆细胞产生抗体。
B淋巴细胞与抗体的关系：
１．B淋巴细胞受抗原刺激后，可以产 生抗体。 ２．动物体内的B淋巴细胞可以产生百 万种以上的抗体，每种抗体对特定的抗原 具有特异性免疫作用。 ３．每一个淋巴细胞只能产生一种抗 体。 所以传统的抗体的生产方法及缺陷是什么？ 怎样解决这个问题？
原理
培养基性质 培养基特有成分
细胞的全能性
固体培养基 蔗糖
细胞增殖
液体培养基
植物激素 葡萄糖 动物血清
培养结果 培养目的
植物体 快速繁殖、培育 无病毒植株
细胞株、细胞系 获得细胞或细胞 分泌蛋白
思考：
1、动物细胞培养液的主要成分是什么？较植物组培培养基 有何独特之处？ 主要成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。 独特之处有：1、液体培养基 2、成分中有动物血清等 2、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞 培养材料？ 因为这些组织或器官上的细胞生命力旺盛，分裂能力强 3、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？ 成块组织不利培养，分散了做成细胞悬浮液利于培养 4、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个 体？ 不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的 动物个体
二、动物体细胞核移植技术和克隆动物 动物核移植是将动物的一个细胞的细胞 核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中. 使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的 胚胎最终发育为动物个体.
核移植技术
1.克隆羊培育过程
黑面绵羊去 核卵细胞 白面绵羊乳 腺细胞核
细胞核移植
重组细胞 电脉冲刺激 早期胚胎 胚胎移植
动物细胞工程
动物细胞培养 动物 细胞 工程 常用 技术 核移植 动物细胞融合 单克隆抗体技术
• 一、教学目标： • 1、简述动物细胞培养的过程、条件及应用 • 2、简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物 的过程及应用前景 • 3、举例说出动物细胞融合与单克隆抗体的原 理和应用 • 二、教学重点和难点： • 1.动物细胞培养的过程及条件 • 2.用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程 • 3.单克隆抗体的制备和应用
动物组织细胞间隙中 含有一定量的弹性纤 维等蛋白质，将细胞 网络起来形成具有一 定弹性和韧性的组织 和器官。
遗传物质 未改变
单个细胞
胰蛋白酶 （分解弹性纤维） 加培养液
细胞悬浮液 原代培养 10代细胞
细胞株
50代细胞
遗传物质 已改变
传代培养
细胞系 无限传代
• 思考讨论：在动物细胞培养过程中，
• 为什么要用胰蛋白酶对取出的动物 • 组织进行处理？