猪蓝耳病抗体检测卡
河南某规模猪场一例蓝耳病的临床剖检及实验室诊断
河南某规模猪场一例蓝耳病的临床剖检及实验室诊断展开全文一、猪蓝耳病的概述猪蓝耳病又称猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)，是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种免疫抑制性病，以成年猪生殖障碍、早产、流产和死胎，以及仔猪呼吸异常为特征的传染病。
高致病性蓝耳病是由猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株引起的一种急性高致病性传染病。
仔猪发病率可达100%，死亡率可达50%，母猪流产率可达30%，育肥猪也可发病死亡。
二、规模猪场猪蓝耳病的流行特点本病呈地方性流行，传播迅速。
不同年龄、性别、品种猪均感染。
易感性有一定差异，母猪、仔猪症状较严重，仔猪致死率可达80%～100%。
病猪和带毒猪是本病主要传染源，感染猪能大量排毒，如鼻分泌物、粪便、尿液中均含有病毒;耐过猪可长期带毒且长期向体外排毒。
传播途径主要是呼吸道与消化道传播——水平传播。
垂直传播发现的病例较少。
当健康猪与病猪接触时，如果饲养密度过大、圈舍潮湿、空气不流通、寒冷、阳光不足、频繁调运、天气突变等都容易导致本病的发生与流行;特别是大型养猪场该病发生较多，传播快，舍外散养传播速度慢。
母猪产前一周发生早产、流产或生产成绩下降，环境越差，感染越快，1～3个月后重复发生，呈持续感染，流行期一般70～100天，最长4～6个月。
病初呈大流行性传播，有明显“跳跃式”传播，无明显季节性，春季多发，仔猪冬季严重，母猪常年发病。
继发细菌及支原体等感染使症状加剧，死亡率增高。
三、规模猪场猪蓝耳病的临床症状母猪发病首先表现为精神倦怠、厌食和发热。
妊娠后期易发生早产、流产、死胎、木乃伊胎及弱仔，持续一段时间后出现重新发情现象，往往引起母猪不育和产奶量下降;少数猪耳部发紫，皮下出现一过性血斑。
有些发病母猪后期出现后躯无力、不能站立或共济失调等神经症状，母猪流产率可达30%以上。
2～28 日龄仔猪最易感，症状明显，发病率可达l0%。
死亡率高达80%，早产仔猪在出生时或几天内死亡。
猪蓝耳病的诊断及防治措施
猪蓝耳病的诊断及防治措施
猪蓝耳病是一种由病毒引起的高传染性的疾病，主要影响猪类的呼吸系统和免疫系统，导致猪的生产性能下降、死亡率增加等严重后果。
因此，猪蓝耳病的诊断和防治非常重要。
一、病因诊断
1.症状诊断：猪蓝耳病的初期症状表现为发热、咳嗽、流涕、呼吸困难等，接着猪出
现精神萎靡、食欲不振、运动能力减弱等症状，最后可能出现腹泻、四肢抽搐、病死等情况。
如果发现猪出现这些症状，应立即进行猪蓝耳病的病因诊断。
2.实验室诊断：为了确诊猪蓝耳病病原体，可以进行血清学检测、病毒分离、基因检
测等多种实验室诊断方法。
其中，血清学检测可以检测血清中的特异性抗体水平，病毒分
离可以通过将病原体分离出来进行进一步观察，基因检测可以对病原体的DNA或RNA进行
检测，以确定其存在和类型。
二、防治措施
1.疫苗接种：目前市面上已经有多种猪蓝耳病疫苗可以使用，可以有效地减轻病情。
疫苗接种可以刺激猪体内的免疫系统产生特异性抗体，增强猪体抵御病原体侵袭的能力。
2.环境清洁消毒：猪蓝耳病病毒的传播途径包括直接接触、空气传播、污染水源等多
种方式。
因此，对猪圈、饮水设施、饲料等环境要及时清洁、消毒，减少病毒污染的可能性。
3.饲养管理：科学合理的饲养管理可以增强猪体抵御病毒侵袭的能力，降低感染率。
包括做好猪圈的保温、通气、环境湿度等工作，提供干净饮用水和饲料，避免应激等。
总之，猪蓝耳病的诊断和防治需要多种手段的配合，包括病因诊断、疫苗接种、环境
清洁消毒、饲养管理等方面的工作。
只有通过全面的预防工作，才能有效地减少猪圈中猪
蓝耳病的发生率，保障猪的健康生长。
高致病性猪蓝耳病抗体免疫效果检测分析
高致病性猪蓝耳病抗体免疫效果检测分析作者：赖彩有来源：《农家科技下旬刊》2014年第04期摘要：为切实了解某地区生猪养殖场的猪蓝耳病免疫效果，本试验分别从规模场及散养地随机抽取了700份生猪血清，用酶联免疫吸附试验检测PRRS免疫抗体。
结果显示：规模场蓝耳病免疫抗体平均合格率达87%，而散养地蓝耳病免疫抗体平均合格率仅为78%，说明部分散养户家的猪蓝耳病免疫效果不够理想，需要进一步采取切实有效的措施，提高猪只的有效免疫率，保证生猪的养殖质量。
关键词：高致病性；猪蓝耳病；免疫抗体；检测；效果高致病性猪蓝耳病是由猪繁殖与呼吸障碍综合症（俗称蓝耳病）病毒变异株引起的一种急性高致死性疫病。
仔猪发病率可达十成、死亡率可达五成以上，母猪流产率可达三成以上，育肥猪也可发病死亡。
该病的发生给养猪生产场户带来巨大的经济损失，也给食品安全造成危害，因此，做好高致病性猪蓝耳病的防控工作是保证畜牧业稳定健康发展的关键。
随着该病不断流行和传播，免疫预防是目前解决该问题的最有效途径。
现结合试验实践与研究，采用ELISA检测试剂检测猪免疫后抗体，以保证猪只体内抗体的免疫效果。
一、材料与方法1.1试验材料1.1.1血清样品来自2个种场、8个规模猪场、50个散养户随机抽取的700份猪血清。
1.1.2试验疫苗猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗（NVDC-JXA1。
1.1.3诊断试剂LSI猪繁殖和呼吸综合征抗体检测试剂盒。
1.1.4实验设备单道和多道微量移液器、37℃恒温箱、酶标仪、纯水仪、量杯、量筒、冰箱等。
1.2检测原理及标准1.2.1检测原理LSI猪繁殖和呼吸综合征抗体检测试剂盒是利用间接ELISA方法建立的。
特异的PRRSV 包被在96孔ELISA板上，在反应板上加入按比例稀释好的待检测猪血清样品，样品中的特异性抗体与反应孔中包被的特异性抗原反应，形成“包被抗原+PRRSV-IgG”，在洗版的过程中不会被洗掉。
当添加酶标复合物时，这些酶标复合物就会与“包被抗原+PRRSV-IgG”发生反应，形成“包被抗原+PRRSV-IgG+酶标抗猪IgG二抗”复合物，没有结合的酶标复合物在洗板的过程中被清洗。
猪蓝耳病病毒抗体检测
（ ２ ）一次性移液器 吸头 ， ２ ｍ Ｌ离心管 。
（ ３ ）配制洗涤液用 的 ５ ０ ０ ｍ Ｌ量筒 。
（ ４ ）９ ６ 孔酶标仪 ， 带有 ４ ５ ０ ｎ ｍ单 波长的滤光 片。
（ ５ ）３ ７ ℃的恒温箱 。
（ １ ）试剂盒 ｃ ｕ ｔ ｏ ｆ值 ＝０ ． １ ＋阴性 对照平 均值 （ 若 阴性 对照 Ｏ Ｄ平均值 ＜ ０ ． ０ ５ ，则按 实际值计 算 ，若 阴性 对照 Ｏ Ｄ平均 值 ３０ ． ０ ５ ， 则按 ０ ． ０ ５计算 ） （ ２ ）若 待检样 品 Ｏ Ｄ＜ ０ ． ９倍 ｃ ｕ ｔ ｏ ｆ 值， 判为阴性。 （ ３ ）若 待检样 品 Ｏ Ｄ＞１ ． １ 倍ｃ ｕ ｔ ｏ ｆ 值， 判为 阳性。 （ ４ ）若 待检样 品 Ｏ Ｄ处于 ０ ． ９ 倍ｃ ｕ ｔ ｏ ｆ值 与 １ ． １ 倍ｃ ｕ ｔ ｏ ｆ值之
（ １ ）精确地单道微 量移 液器和多道微量移液器 ， 适用于吸取 １ ０ １ ０ ０ ０ Ｌ的液体 。操作步骤 中所要 求的试剂移取 体积要
求移液器 的误差不超过 ±５ ％。
５ ． １ 在酶标 仪上 ， 以空 白孔调零 ， ４ ５ ０ ｎ ｍ波长测定 吸光值 。 实 验成立 条件 ： 阴性对 照值孑 Ｌ Ｏ Ｄ ４０ ． ２ ５ ， 阳性对 照值孔 Ｏ Ｄ≥ Ｏ ． ７ ， 空白对照值孔 Ｏ Ｄ４０ ． １ ５ ， 否则 实验不成立 ， 重做 。
养 猪
⑧
猪蓝耳病病毒抗体检测
盛 晓辉
（ 辽宁省 建 昌县 动物 疫病 预 防控 制 中心 ，建 昌 １ ２ ５ ３ ０ ０ ）
ＤＯ ｌ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ Ｊ ． Ｉ ＳＳＮ． １ ６ ７１ － ６ ０ ２ ７ ． ２ ０ １ ３． １ ２ ． ０ ５１
猪蓝耳病的诊断与检测
未来研究方向
13
新型疫苗研究
针对PRRS病毒的疫苗已经 存在，但疫苗的效果和安 全性需要进一步研究和改 进。同时，也需要研究如 何提高疫苗的免疫效果和
此外，还可能观察 到血管扩张、出血
和血栓形成
03
PART.4
PCR检测
ห้องสมุดไป่ตู้
PCR检测
PCR(聚合酶链式反应) 是一种用于检测DNA或 RNA的快速、敏感和特
异的分子生物学技术
PCR检测已经被广泛应 用于猪蓝耳病的诊断
样本采集
对于PCR检测，需要 采集猪的血液、组织 样品(如肺、淋巴结) 或鼻拭子等。这些样 本可以通过兽医或动 物检疫人员采集，或 在屠宰场进行采集
保护期等问题
14
综合防控措施研究
为了有效控制PRRS病毒的 传播，需要采取综合防控 措施。未来可以研究如何 更好地结合生物安全、饲 养管理和药物治疗等措施， 以达到更好的防控效果
15
国际合作与信息共享
猪蓝耳病是一种全球性的 疾病，国际合作和信息共 享对于疾病的防控和治疗 非常重要。未来可以加强 国际合作，共享研究成果 和防控经验，共同应对猪
02
出现，具体时间取决于病毒的毒力
和猪的免疫力
03
在感染严重的情况下，猪可能会出 现流产、死胎和新生仔猪死亡
PART.3
病理变化
病理变化
猪蓝耳病的病理变 化主要包括间质性 肺炎、淋巴结肿大
和心肌变性
01
在显微镜下，可以观 察到肺泡间隔增厚、 肺泡腔内渗出物增多、 淋巴细胞浸润和心肌
如何正确认识猪蓝耳病，首先从看懂抗原抗体报告开始
如何正确认识猪蓝耳病，首先从看懂抗原抗体报告开始猪繁殖与呼吸综合征(PRRS,俗称猪蓝耳病)，是由猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSv)引起的一种高度接触性传染病,以繁殖障碍、呼吸困难、耳朵蓝紫、并发或继发其他传染病为主要特征。
猪蓝耳病是当前危害养猪生产的重大传染病，已遍及全球，造成的经济损失占猪各类传染病总损失的30%以上，严重影响着规模化猪场的猪群健康、生产成绩和经济效益。
猪场检测猪蓝耳抗原抗体的意义对于规模化养殖场来说,抗原和抗体水平检测是掌握猪群健康程度的一种有效方法。
主要包括以下几个方面的意义：1、确定猪群是否存在猪蓝耳病(经典蓝耳病和高致病性蓝耳病);2、掌握猪蓝耳病感染的状态;3、了解猪蓝耳病的免疫状况;4、评价猪蓝耳疫苗的免疫效果;5、制定合理的免疫程序和防控措施。
猪场检测猪蓝耳抗原抗体的准备针对猪蓝耳病抗原抗体的检测需要我们提前做好相关的准备工作。
1、根据猪场的规模确定采血的数量，一般达到猪群5%左右的比例即可。
按猪群所在区域划分为产房阶段、保育阶段、生长阶段和育肥阶段;母猪划分为后备母猪和经产母猪(怀孕母猪和哺乳母猪)，并对上述阶段的猪群分别按比例进行采血。
值得注意的是一般建议疫苗免疫后30天以上才抽血检测，以避开疫苗毒的干扰;2、采血后的样品要妥善保存，待血清析出后尽快分离并做好标记冷冻保存，确保样品不能有污染;3、清楚了解疫苗免疫状况，这有助于我们分析抗体检测的结果;4、与临床相结合，哪个阶段的猪群容易出现问题，主要有什么临床表现，有针对性的采集病料(如淋巴结、肺和扁桃体)做抗原(病原)检测，确定是否存在猪蓝耳病病毒的感染。
目前，针对猪蓝耳病抗原的检测采用的是PCR方法;而抗体检测采用的是ELISA。
抗体检测结果常规用S/P值来表示。
这个表示值是通过引物数值(对照值)计算出来的。
值得注意的是对于猪蓝耳抗体的检测，同一份样品，不同的设备、不同的实验室、不同的人员检测可能结果会有所差异。
不同饲养方式下猪蓝耳病血清抗体的调查
不同饲养方式下猪蓝耳病血清抗体的调查李培仓X u m u s h o u y i高致病性蓝耳病是由猪繁殖与呼吸道综合症病毒感染引发的一种急性、高度致死性传染性疾病，属于国家一类重大动物疫病，常常呈地方流行。
猪繁殖与呼吸道综合症病毒只会感染猪，不会感染其他动物，不同品种、不同年龄和不同用途的猪均可以受到病毒的侵染，但以妊娠母猪和一月龄的仔猪易感性最强。
患病猪和带毒猪是最最主要的传染源，病毒主要经接触、空气和精液传播，也可以通过胎盘实现垂直传播。
对于该类病毒的传播途径多种多样，造成的死亡率高，发生流行之后，需要执行严格的封锁、隔离、扑杀、无害化处理。
为了更好的控制出蓝耳病的发生流行，就需要我们加强血清抗体检测，掌握蓝耳病的实际发生动态，然后构建针对性的防控措施。
本文主要结合实际工作经验，探讨了不同养殖方式下猪蓝耳病的抗体情况，希望通过本次研究对做好蓝耳病的疫苗免疫接种工作有一定帮助。
一、试验材料与方法1、试验材料选取本次研究选取了青海省民和县巴州镇的两个规模化生猪养殖场和10个中小规模养殖户的964头生猪，其中规模化养殖场564头，中小规模养殖场400头。
按照随机原则采集猪的前腔静脉血液5mL ，静置30分钟之后放置在疫苗保温袋当中，冷藏送到试验室。
共采集了血液964份，放置在2000r/min 的离心机当中离心处理10min ，取上层血清作为待检血清。
2、仪器与试剂猪蓝耳病血清抗体检测主要涉及到酶标洗板机、单道微量可调移液枪、37度恒温培养箱、猪蓝耳病病毒抗体ELISA 检测试剂盒。
3、试验方法本次研究所选择的猪蓝耳病抗体检测试剂盒是将猪蓝耳病毒作为固相抗原，利用抗原和抗体特异性反应和酶高度敏感性催化反应，待检血清当中的抗体能够和猪蓝耳病抗体发生特异性结合。
选择使用酶联免疫吸附试验法，按照试剂盒的使用说明书进行操作，对药品进行妥善的稀释、加样反应、加酶反应和显色反应处理。
以空白对照为基点，酶标仪在450nm 标下下检测各孔的OD 值，OD 值≥0.168，表示猪体内存在蓝耳病抗体，OD 值≥0.400表示猪体内的猪蓝耳病抗体水平较高，免疫效果较好。
猪高致病性蓝耳病的一次性诊断及处理
困难 ， 喜 伏卧 ， 部 分 猪 出现 腹式呼 吸 ， 气喘急 促 ，部 分患 猪流 清鼻 涕 、打 喷
２ ６｜ 投稿信箱ｓ ｙ ｄ ｋ ２ 。 ｏ ７ ＠２ ６ ３ ． ｐ ｉ ｅ ｔ
性７ 头 ，阳性 率 ６ ３ ． ６ ％。 （ ２ ）猪 圆环病 毒抗 体检 测 １ ｌ 头， 其 中阳性 ８ 头 ，阳性率 ７ ２ ． ７ ％。
药 物 的 半 衰期 ，掌握 使 用 注射 剂 量 ，
五 ． 诊 断
根 据 流 行病 学 调 查 、 临床 症 状 、 剖 检 变 化 ，结 合 实 验 室 检 验 结 果 分 析 ，初 诊 为 疑 似 高 致 病 性 猪蓝 耳 病
ＰＨ 值低 于 ６和 高 于 ７ ． ５时 ，其 感 染
（ ３ ） 猪瘟 抗 原 检 测 １ １ 份 ，其 中
疫 苗 的预 防接种 。 ２ ． 严 格 隔 离 消毒 ，杜 绝疫 情 传 播 。 由于 动 物 疫 病 常 常 是 接 触 性 传 播 ，对 发 病 猪 和 健 康 猪 要 做 好 严 格
发 烧 、有 呼 吸 道 症 状 的 可 采 取 对 症 冶 疗 ，尽 量 选 择 中药 制 剂 ，如 双 黄
检 ，发现 大量革 兰 氏阳性 ，呈短链 或 长链 排列 的链球 菌 。同场 猪血 液抹 片
检 出少量 链球 菌和 疑似 弓形体 。
（ ３ ）肝 脏 表 面 有 灰 白色 的 荚 膜 ，有 纤 维 性 渗 出物 和 针 尖 状 的 出 缸 点。 （ ４ ）脾 脏 肿 大 质脆 ，有 的 边 缘 出血 。
结 出血 ，所 有 的 淋 巴 结都 有 出 血 症 检验 。 状 ，腹 股 沟 和 肠 系膜 淋 巴 结 出 血 严
１ ．细 茵学检 验 。
“三分钟”帮您看懂抗体检测报告——蓝耳篇
“三分钟”帮您看懂抗体检测报告——蓝耳篇随着养殖行业，规模化，技术化的不断发展。
猪场对于免疫抗体检测的需求越来越多。
两年前，小编在中牧生物的平台上，发表了一篇解读猪瘟抗体检测报告的文章，传送：/s/LRjJpFZ2rRpL4mZQrcCdeA今天，小编从操旧业，为大家准备了蓝耳抗体检测报告的解读方法，与大家分享。
首先，让我们先重温一下酶联免疫吸附实验（ELISA）抗体检测的原理：酶联免疫吸附试验（ELISA）：酶联免疫吸附试验，简称ELISA，是实验室最常用的检测方法。
ELISA具有准确性高、检测时间短、价格低廉、判断结果有客观标准、结果便于记录和保存等优点，适合于大批标本的检测，广泛应用于食品安全检测、医疗检测以及免疫实验分析等领域。
基本原理：抗原抗体的特异性结合以及抗原或抗体的酶标记。
酶结合物与相应抗原或抗体结合后，可根据加入底物的颜色反应来判定，是否有免疫反应的存在，而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的，可根据已知浓度的抗原或抗体的颜色反应的深浅绘制标准曲线并依此计算出未知样品中抗体或抗原的浓度。
测定对象：可以是抗原也可以是抗体。
蓝耳疫苗抗体的免疫评估：1.OD值：如果OD值＜0.6，样品应判定为PRRSV2（蓝耳抗体）阴性；如果OD值≥0.8，样品应判定为PRRSV2（蓝耳抗体）阳性。
但由于假阳性抗体的存在（主要是野毒感染与隐性带毒干扰）。
目前的ELISA检测手段并不能100%准确的反映猪群蓝耳抗体情况（蓝耳天津株由于配备了专用试剂盒，可以做到区分疫苗抗体和野毒抗体）2.变异系数：Coefficient of Variation(CV)变异系数计算的是平均个体的变化，以平均滴度背离的百分数来表示公式如下：CV≤40%,显示猪群有一个均衡的、相似反应。
（表示猪群内不同个体之间抗体水平稳定，免疫效果良好）CV≥60%,显示了猪群抗体滴度反应变化高于正常估计值。
（表示猪群内不同个体之间抗体水平差异较大；生产管理水平，疫苗质量、免疫程序制定有提升与商榷的余地）实例报告解读此报告样本采自北京某猪场，存栏900头母猪。
猪蓝耳病检测标准-概述说明以及解释
猪蓝耳病检测标准-概述说明以及解释1.引言1.1 概述概述猪蓝耳病，又称猪繁殖与呼吸综合征，是一种由猪蓝耳病毒引起的高度传染性疾病，主要危害猪只的繁殖和生长发育，严重影响猪群的生产效益。
目前，猪蓝耳病已成为全球范围内流行的严重疾病，造成了严重的经济损失和社会影响。
为了及时发现和控制猪蓝耳病的传播，对猪只进行有效的疫病检测显得尤为重要。
本文将重点讨论猪蓝耳病检测的标准及方法，旨在强调猪蓝耳病检测的重要性，提出检测标准的必要性，并展望未来猪蓝耳病检测的发展方向。
通过本文的研究和讨论，希望能为猪蓝耳病的防控工作提供参考，促进畜牧业的可持续发展。
1.2 文章结构文章结构部分主要包括以下内容：1. 引言部分：介绍文章的背景和目的，引导读者进入主题。
2. 正文部分：详细介绍猪蓝耳病的概念、危害、传播途径、症状以及检测的重要性和方法。
3. 结论部分：总结猪蓝耳病检测标准的必要性，展望未来猪蓝耳病检测的发展方向，总结全文内容并提出对未来工作的建议或展望。
文章结构的合理安排有助于文章的逻辑性和条理性，使读者更容易理解和吸收文章内容。
文章1.3 目的部分的内容：本文的目的是探讨猪蓝耳病检测标准的重要性和必要性。
通过深入了解猪蓝耳病的概念、危害、传播途径和症状，以及猪蓝耳病检测的方法和技术，可以帮助养猪行业及相关机构建立健全的检测标准，有效地控制和预防猪蓝耳病的传播。
同时，本文也旨在为未来猪蓝耳病检测技术的发展提供参考和借鉴，促进养猪行业的可持续发展和猪群健康管理。
通过本文的研究和探讨，希望能够提高人们对猪蓝耳病的认识和重视，促进相关政策的制定和实施，有效地保障养猪业的发展和产出质量。
2.正文2.1 猪蓝耳病的概念和危害猪蓝耳病，又称猪传染性蓝耳病，是一种由病毒引起的猪类传染病，主要危害生猪生产业。
该病最早于20世纪80年代被发现，其主要特征是耳廓、颈部和腹部皮肤出现青紫色或青紫色斑块，因此得名“蓝耳病”。
病毒主要通过直接接触受感染的猪或污染的环境传播，也可通过空气传播。
大理某猪场猪瘟、蓝耳病抗体检测报告分析
猪瘟（classical swine fever ，CSF ）和蓝耳病（porcine repro-ductive and respiratory syndrome ，PRRS ）属于烈性传染病，不仅在我国乃至在全世界范围内广泛传播，严重影响养猪业的发展。
蓝耳病已被世界卫生组织列为需要通报的传染病之一；猪瘟已被国际兽医局列为成员国必须报告的动物疫病之一；两种疾病也是国家中长期动物疫病防治规划（2012—2020年）优先防治的国内16种动物疫病中的一类动物疫病[1,2]。
目前，疫苗免疫仍是有效预防和控制这2种疾病的主要方法。
为了解大理猪瘟、蓝耳病的群体免疫状况，于2020年6月对大理某规模化猪场进行抽血采样，血清检测抗体，并对其免疫情况进行分析。
1材料与方法1.1猪场概况本次调查点选自大理某规模化养殖场，该场属于自繁自养二元母猪场，现母猪存栏212头，公猪6头，产房仔猪存栏386头，保育舍仔猪存栏702头，育成舍仔猪存栏916头。
1.2免疫程序本猪场猪瘟和蓝耳免疫都采用普免方式进行免疫。
猪瘟疫苗选用的是青岛易邦猪瘟脾苗，种公猪接种4次/年，剂量2头份肌注；经产母猪4次/年，剂量2头份肌注；仔猪21日龄接种一次，剂量1头份，55日龄加强免疫一次，剂量1头份。
蓝耳疫苗选用的是青岛易邦易蓝净（F92株），种公猪2次/年普免，剂量1头份肌注；经产母猪免疫2次/年，于秋冬两季进行免疫，剂量1头份肌注；仔猪28日龄免疫蓝耳疫苗一次，剂量1头份肌注，55日龄加强免疫一次，与猪瘟疫苗分点注射。
1.3血样采集随机抽取公猪6头、1～2胎次母猪9头、3～5胎次母猪7头、6胎以上的母猪6头、3周龄仔猪5头、7周龄仔猪6头，进行猪前腔静脉采血3～5mL ，按3,000rpm/min 离心10min ，分离血清。
1.4检测方法采用酶联免疫吸附测定试剂盒方法检测抗体，操作方法和结果判定标准均参照试剂盒说明书（猪瘟病毒抗体检测试剂盒厂家：美国IDEXX ；蓝耳病病毒抗体检测试剂盒厂家：美国IDEXX ）。
蓝耳病检测判断标准
蓝耳病检测判断标准是指根据猪的临床症状、病理变化、病原学检测和血清学检测等方法来确定猪是否感染了蓝耳病病毒的标准。
蓝耳病是一种由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起的急性或慢性传染病，主要表现为猪的生殖障碍和呼吸系统症状，严重影响猪的生长和繁殖。
蓝耳病检测判断标准主要有以下几种：
临床症状：蓝耳病的临床症状主要包括发热、食欲减退、呼吸困难、咳嗽、气喘、粘液性鼻涕、皮肤出现紫红色斑点或坏死、耳朵、眼睑、口唇、蹄部等部位出现青紫色或蓝色、乳房肿胀、乳汁减少或停止、流产、死胎、弱仔、死亡等。
病理变化：蓝耳病的病理变化主要包括肺部出现弥漫性或局灶性的肺间质性肺炎、肺水肿、肺出血、肺气肿、胸腔积液、心包积液、心肌炎、淋巴结肿大、脾脏肿大、肝脏肿大、肾脏肿大、胎盘出血、胎儿发育不良等。
病原学检测：蓝耳病的病原学检测主要是通过分离和鉴定猪繁殖与呼吸综合征病毒来确诊蓝耳病。
常用的方法有病毒分离培养、逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）、免疫荧光法（IFA）、免疫印迹法（WB）、原位杂交法（ISH）等。
血清学检测：蓝耳病的血清学检测主要是通过检测猪血清中的抗猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体来判断猪是否感染了蓝耳病病毒。
常用的方法有酶联免疫吸附试验（ELISA）、间接荧光抗体试验（IFA）、中和试验（NT）等。
不同的方法有不同的判断标准，一般以S/P值或Ct值来表示检测结果的阳性或阴性。
猪场蓝耳监测方法、检测途径、监测后备母猪及预防措施结论
猪场蓝耳监测方法、检测途径、监测后备母猪及结论监测方法必须在产房监测。
理想情况下在出生时喝奶前对仔猪检测，在断奶前进行检测，结果为阴性可以确认在繁殖群中没有病毒传播。
结果呈阳性要进一步在初生时取样，以确定仔猪出生时是否已被感染或在哺乳期间被交叉感染。
利用血清检测是否确定病毒。
正常情况下随机采取血样不低于5%，当有疾病迹象时，将样本量增加到10%。
病毒循环水平较低，在很长一段时间内进行系统和连续采样，生产上会见到连续几个月阴性后发现阳性样品。
检测到阴性结果后监测仔猪后续整个周期。
检测途径1、仔猪采血较难，可以使用组织处理液。
渗出液主要由血浆和血液组成，在仔猪有病毒血症时发现该病毒。
使用来自尾部血样灵敏度要低得多，不足以可靠地确定养殖场状态。
2、脐带血是蓝耳病毒检测选项，该样本更容易获得，需要出生时有意识收集且应注意环境污染。
它是一种可靠替代方法，可以轻松监控仔猪，并且比断尾的处理液效果更好。
3、口腔唾液被确定为有效样品。
仔猪不会被绳索吸引，采样时间长且代表性低，可以从母猪乳房表面取样，采用湿巾形式，这种情况有会受环境污染而检测到病毒RNA。
4、使用死胎猪舌头可以检测病毒，将产房单元内所有死胎猪舌头剪下一小块，收集30个以上置于冰箱内冷冻，解冻后揉捏取渗出液检测。
监测后备母猪关键点是监测后备母猪。
在进入隔离区之前，通过ELISA检测以确认其健康状况、驯化有效性并知感染时间。
后备母猪阳性不代表产房阳性，必须监测进入妊娠时是否感染病毒。
另一方面，监测种母猪比较困难。
血清学价值很小，同样通过RT-PCR监测在任何一定时间段，母猪具有先天免疫力的病毒血症非常短，表现病毒血症的猪数量会非常少，监测母猪仅在蓝耳病阴性场和疾病暴发时有用。
结论准确监测PRRSV活动是决策的关键，多种工具可用，包括对临床和生产力数据的监控，关键指标的急剧变化是早期预测指标。
可以用不同的样本类型诊断监测，包括个体猪样本，如血清、血拭子或舌尖。
猪蓝耳病抗体试剂盒出现假阳性的确诊思路
81202138卷第5猪场兽医VETERINARY1 概况1.1 案例一山东某核心猪场，存栏能力2 500头基础母猪，一点式布局。
该猪场使用正压通风、空气过滤系统。
场内猪群猪蓝耳病双阴、伪狂犬病gE 抗体阴性、PED 阴性。
2019年12月按照月度监测方猪蓝耳病抗体试剂盒出现假阳性的确诊思路王孝彬，赵康宁，刘纪玉，陈焕昌，李月田，周远杰，刘媛媛，李 飞（环山集团养猪事业部，山东 威海 264400）摘 要：猪蓝耳病（PRRS ）是影响养猪行业的一个重要的疾病。
对于一个核心场或者公猪站而言，维持猪蓝耳病双阴性，做好猪蓝耳病的监测工作是及其重要的。
猪蓝耳病抗体检测是猪蓝耳病双阴性场评估猪群是否感染猪蓝耳病野毒常用的方式之一。
但是所有商品化的试剂盒的敏感性和特异性并不是100%准确的。
通过对3个猪蓝耳病双阴性猪场的猪只进行猪蓝耳病抗体检测，检测结果分别出现2.17%、100%、1.6%的阳性样本。
对于异常结果除实验室进行复检和临床诊断外，还通过抗体变化的监测和免疫荧光的检测来验证检测结果的可靠性，经过验证得知这3个猪场出现的2.17%、100%、1.6%的阳性结果均为假阳性。
关键词：猪蓝耳病；抗体检测；假阳性Validation of false positive of PRRS enzyme-linked immunosorbent assayXiaobin Wang; Kangning Zhao; Jiyu Liu; Huanchang Chen; Yuetian Li; Yuanjie Zhou; Yuanyuan Liu; Fei Li (Huanshan Group Pig Business Department, Weihai, Shandong 264400, China)Abstract: Porcine reproductive and respiratory syndrome (PRRS) is an important disease affecting the pig industry . Remain a nucleus farm or boars stud PRRS antibodies negative is very important through monitoring PRRS antibodies. PRRS antibody detection is one of the commonly used methods to assess whether sows are infected in PRRS Ab negative herd. Currently , there are many PRRS ELISA kits on the market for detecting PRRS antibodies. However, the sensitivity and specifi city of all commercialized kits are not 100% accurate. The PRRS antibodies were detected in three PRRS negative farms. The positive samples were 2.17%, 100% and 1.6%, respectively. In addition to laboratory retest and clinical diagnosis for abnormal results, we still used the ways of monitoring antibody changes and immunofl uorescence(IF) detection to verify the reliability of the test results. After verifi cation, it was found that 2.17%, 100% and 1.6% of the positive results in these three pig farms were all false positive.Keywords: Porcine reproductive and respiratory syndrome; Antibody detection; False positive案，对场内猪只采样监测猪蓝耳病抗体。
猪场蓝耳病检测结果与案例分析
等综 合分析 才有意 义 。
３ ． ２保育阶段或育肥前期发病场
由于 猪 舍 全 进 全 出 和 空舍 消 毒 执 行 不 到 位 、蓝 耳 病 活疫 苗 使用 不 当 、母猪 群 蓝耳 病 不
２ ． １病原 Ｒ Ｔ － Ｐ Ｃ Ｒ ｌ ｌ Ｈ 性
检 测 到 的可 能 是野 毒 或者 疫 苗毒 ，但 猪 群 不 一 定发 病 。对于 大 多 数猪场 ，仔 猪在 ５ ０ ～９ ０ 日龄 阶段 容 易检 到ＰＣＲ阳性猪 。在成 年猪 或 者
疫情 多是 从外部传人 ，由于 引种不谨慎 ，滥 用蓝 耳病疫 苗 ，后备猪 隔离驯化不 到位 ，运 猪车
辆消 毒不严格 等 因素 ，导致全场 暴发蓝耳病 。繁 殖 区一般需要 １ ～２ 个月恢 复稳定 。血清学检 测显 示 ，各阶段发 病猪群蓝耳 病抗体处 于较高水 平 ，
４ ３ ３ ２ ２ ｔ １
稳 定和 转 群应 激 等 因素 均可 弓１ 起该 阶 段蓝 耳 病 活跃 、发病 。多 与伪 狂 犬 、支原 体 、 圆环 病毒
等混 合 感染 ，容易 继 发 猪副 嗜血 杆 菌 、链 球菌 等 细菌 病 。血 清学 检 测显 示 ，发 病 猪群 蓝耳 病 抗体 水 平 呈 急剧 上 升趋 势 ，一 般 抗 体Ｓ ／ Ｐ 值 高
场 蓝耳 病 阳性 。蓝 耳病 标 准株ＲＴ —Ｐ ＣＲ阳性率 １ ２． ９ ％，变异 株 阳性 率３ ５ ． ３ ％。
２ ． ２病 原 Ｒ Ｔ － Ｐ Ｃ Ｒ 阴性
未 检 测到 说 明没 有感 染 或者 曾经感 染过 但
已不 排毒 ，也可 能 是样 品 中病 原 含量 低 、检 测 方 法不敏 感等 。
群 ，如 果抗 体 水平 适 中、 离散 度小 ，一般 蓝 耳
吕梁地区规模化猪场蓝耳病抗体水平监测
液洗 ３ 次， 拍干 ； 加人 ５ ０ Ｌ的底 物 ， 轻摇板 ２ ｓ ； 将 酶标板放在黑暗中 ３ ｍ ｉ ｎ ～ ５ ｍ ｉ ｎ ； 加入 １ ０ ０ Ｌ的终止 液， 轻轻振荡酶标板 １ ０ ｓ ， 充分混匀 ； 用酶标仪在波长 ４ ５ ０ ｎ ｍ下检测吸光度 ， 在５ ｍ ｉ ｎ内读数 。 １ ． ６判 定标准 阳性 对照 的平均 Ｏ Ｄ大 于 ０ ． ６ ， 而且 阳性对照平均值 ／ 阴性对照平均值 大于 ４ ． ０ ， 该 检测结果才有效。结果用 Ｉ Ｒ Ｐ Ｃ （ 免疫反应阳性细胞） 表示 ， Ｉ Ｒ Ｐ Ｃ＝ １ ０ ０（ Ｏ Ｄ 一阴性平均值） ／ （ 阳性平均值 一
蓝耳病又称猪繁殖与呼 吸综合征（ Ｐ Ｒ Ｒ Ｓ ） ， 是由
猪繁殖与呼吸综合征病毒（ Ｐ Ｒ Ｒ Ｓ Ｖ ） ￣ Ｉ 起 的猪 的一种
被 清洗 掉 ， 当添加酶 标复合物时 ， 这些 酶标复合 物 就会与猪血清抗体发生反应 ， 没有结合 的酶标复合 物在洗板的过程中被清洗。再加入对氧化物敏感的
可 以显 色底 物 ，显色 的深 浅 与样 品所 含 Ｐ Ｒ Ｒ Ｓ Ｖ的
繁殖和呼吸障碍的传染病 。其特征是发热、 厌食 ， 妊
娠母猪后期流产 、 产死胎 、 木乃伊胎 ， 仔猪发生呼吸 道症状 ， 因为一些病猪耳朵发紫 ， 所 以称“ 蓝耳病 ” 。
抗体浓度成正 比。 １ ． ５试验方法 将试剂放在试验 台上， 恢复至室 温， 并轻摇或者倒置均匀 。在包被的酶标板上分别
阴性平 均值 ） ， Ｉ Ｒ Ｐ Ｃ大 于 ２ ０ ． ０ ， Ｐ Ｒ Ｒ Ｓ抗体 为 阳性 ； Ｉ Ｒ Ｐ Ｃ小于或者等于 ２ ０ ． ０ ， Ｐ Ｒ Ｒ Ｓ 抗体为阴性。
２结 果
Ｐ Ｒ Ｒ Ｓ Ｖ被包被在 ９ ６ 孔微量反应板上。在反应过程 中， 检测样品被加入反应孔 中， 样 品中的特异 性抗 体会与孔 中特异性抗原反应 ， 在洗板的过程 中不会 在所检测的 ８ １ ３ 份样品中， 阳性数共有 ６ １ １ 份， 阳性率 ７ ５ ． １ ％。其中文水 ２ ３ ２ 份， 阳性数 １ ７ １ 份， 阳
正确认识蓝耳病第一步：看懂蓝耳抗体报告
正确认识蓝耳病第一步：看懂蓝耳抗体报告猪繁殖与呼吸综合征（猪蓝耳病）是一种由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起的猪传染病，由于患猪在感染蓝耳病之后会引发很多继发感染，和其他疾病一样，表现的临床症状是发热，体温达40.0～41.5度，耳朵或体表皮肤出现发绀等，同时在母猪方面，表现症状是繁殖障碍、在仔猪方便则表现为呼吸困难。
该病在国内猪场普遍存在，给养猪业造成了重大的经济损失，根据流行病学调查发现，猪蓝耳病随着毒株不断变异，已成为严重危害我国养猪业的“杀手”之一。
由于蓝耳病爆发不分季节性，一年四季都可发生，冬季尤甚，同时传播速度极快，仔猪呼吸道症状表现最为明显。
猪场检测猪蓝耳抗体的意义：1.确定猪群是否存在猪蓝耳病；2.掌握猪蓝耳病感染的状态；3.了解猪蓝耳病的免疫情况；4.评价猪蓝耳疫苗的免疫效果；5.制定合理的免疫程序和防控措施。
根据蓝耳相关研究发现，感染猪蓝耳病的猪在7-14天逐渐出现抗体，少于5%的猪只可能会延迟到21天才会出现抗体。
蓝耳病毒中的N蛋白是蓝耳病毒抗原性最强的蛋白，而猪只体内最先产生的对抗蓝耳病毒的抗体指向目标就是N蛋白，N蛋白并不会中和蓝耳病毒，市面上商业ELISA试剂盒使用N蛋白可以进行早期诊断，但是当前ELISA试剂盒无法分辨野毒和疫苗毒。
有些商业试剂盒增加了其他抗原比如GP5，用来增加检测谱。
大部分商业蓝耳病ELISA使用的是间接ELISA检测法。
ELISA具有准确性高、检测时间短、价格低、判断结果客观、便于记录和保存等优点，适合于大批样本的检测。
做法是指将蓝耳病毒抗原滴在微孔板上，加入怀疑患有蓝耳病的猪只血清进行检测，检测结果的展示是通过加入血清检测。
加入合适的反应基础液后，如果抗原、抗体发生反应，颜色反应的深浅和血清中的抗体含量成正比，根据已知浓度的抗体颜色反应深浅绘制标准曲线并依次计算出未知样品中蓝耳抗体的浓度，这里用到就是所谓的S/P 值。
抗体阳性率：不同试剂盒判定标准不同，比如IDEXX 蓝耳检测试剂盒中，S/P 值＜0.3，即判定为阴性，说明样品没有蓝耳抗体或蓝耳抗体没有达到保护水平；0.4≤S/P 值＜2.5，即判定为阳性，说明样品内含有蓝耳抗体且在保护水平；S/P 值≥2.5怀疑为野毒感染，需要结合临床症状进行进一步确诊。
输入猪三种主要疾病的免疫抗体检测
阴性 ： 在观察孔内， 对照线 区（ ） Ｃ 出现一条紫红色 线。 无效 ： 在观察孔 内， 检测线 区（ ） Ｔ 及对照线区（ ） Ｃ 都不出现紫红色线 。阳性说 明抗体滴度较高 ， 不必进 行疫苗接种。弱阳性说明抗体滴度只达到抵抗水平 ， 应及时进行疫苗接种 。阴性结果说明机体 内无抗体 ， 或抗体水平低于抵抗改种疫病强度攻击的最低保护水 平， 健康动物群体要及时进行疫病接种。
Ａｂ ｔ ａ ｔ Ｕｓ ｇ Ｉ ｓｒ ｃ ： ｉ ｍｍｕ ｅ Ａｎ ｉ ｏ ｙ ｇ ｌ ｍｎ ａ ｄ ｔｓ ｔ ｐ ｏ ｗ ｎ ｅ ｅ ， ＲＲＳ－ ｗ ｎ ｓ ｕ ｏ ａ ｉｓ ｄ ｔ ｄｎ ｎ ｎ ｔ ｄ ｏ ｄ ｓ ｄ ｒ ｅ ｔ ｓ ｆ ｓ ｉ ｅ ｆｖ ｒ Ｐ ｂ ｉ ｒ Ｓ ｉ ｅ ｐ ｅ ｄ ｒ ｂ ｅ － ｅｅ ｉ ｇ ｉ ｍｍｕ ｅ ａ ｔ ｏ ｙ ｏ ｈ ｅ ｉ ｄ ｆｄ ｓ ａ ｅ ｆ ｒ ｐ ｇ Ｔ ｅ ｒ ｓ ｌ ｈ ｗ ｄ ｔ ａ ｏ ｉ ｖ ａｅ ｏ ｗ ｎ ｅ ｅ ｒ ｓ ｉ ｅ ｗａ ｎ ｉ ｄ ｆｔ ｒ ｅ ｋｎ ｓ ｏ ｉ ｓ ｏ ｉ ， ｈ ｅ ｕ ｔ ｓ ｏ ｅ ｔ ｐ ｓ ｅ ｒ ｔ ｆ ｓ ｉ ｅ ｆｖ ｒ ｆ ｗ ｎ ｓ ｎ ｂ ｅ ｓ ｈ ｉ ｔ ｏ ５ ％ － ０ ８ ｆ ｒｐ ｇｅ ｓ ｐ ｓｔ ｅ ｒ ｔ ｆＰ Ｓ ｆ ｒｓ ｉ ｅ ｗ ｓ １ ２ － ｒｐ ｇ ｅｓ ｐ ｓｔ ｅ ｒ ｔ ｆｓ ｎ ｓ ｕ ｏ ａ ｉ ｓｆｒ ９ ２ ． ％ ｏ ｉｌ ｔ ； ｏ ｉ ｖ ａ ｅ ｏ ＲＲ ｗ ｎ ． ％ ０ ｆ ｉ ｌｔ ； ｏ ｉ ｖ ａ ｅ ｏ ｉ ｏ ｉ ｏ ｉ ｗｉ ｅ ｐ ｅ ｄ ｒ ｂ ｅ ｏ ｓ ｎ ａ ５ ９ 。 ％ ｆｒ ｐ ｇ ｅｓ ｉ ｄ ｃ ｔ ｇ ａ ｔ ｏ ｙ ｔ ｅ ｓ ｏ ｒ ｉ ａ ｗ ｎ ｓ ｉ ｎ ｔｈ ｇ ， ｔｉ ｎ ｃ ｓ ａ ｙ ｔ ｔ ｎ ｔ ｅ ｗｉ ｅ ｗ ｓ １ ． ％ ２ ｏ ｉ ｌｔ 。 ｉａ ｎ ｎ ｂ ｄ ｉ ｒ ｆｏ ｉ ｎ ｓ ｅ ｓ ｏ ｉ ｈ ｉ ｓ ｅ ｅ ｓ ｒ ｏ ｓｒ ｇｈ ｎ ｎ ｉ ｉ ｔ ｇ ｌ ｉ ｅ
吉林某规模化猪场的猪蓝耳病抗原抗体分析及防控建议
772022年39卷第11期 SWINE INDUSTRY SCIENCE 猪业科学猪场兽医VETERINARY猪蓝耳病，又被称为猪繁殖与呼吸综合征，因其具有极高的传染性，我国将其列为一类传染病。
2021年中国猪病流行数据统计显示：我国猪场有87.81%处于亚健康状态，商品猪场猪蓝耳病阳性率高达90%以上，发病率高达30%～40%。
猪场一旦感染猪蓝耳病，母猪流产率可高达30%以上，仔猪死亡率高达50%以上。
猪蓝耳病以其高传播性和高死亡率的特点致使其难以防控，从而给猪场带来了不可估量的损失。
日常防控措施包括完善的生物安全管理措施、疫苗接种预防、定期的实验室抗体水平检测和药物防治等。
药物治疗基于两个核心点：提升免疫力和控制继发感染，常用黄芪多糖和杜仲提取物等提升免疫力和抗生素联合应用防治猪蓝耳病。
经临床验证，联合应用已在猪场取得了不错的效果。
本文以吉林某规模化猪场药物防治前后的猪蓝耳病抗原抗体分析报告为例，阐述药物防治猪蓝耳病和定期实验室检测抗体的重要性，旨在帮助规模化猪场能更好地防控猪蓝耳病，在养殖过程中获得更好的收益。
1 材料与方法1.1 猪场背景吉林省辽源市杨木林镇某小规模猪场，母猪存栏30头，保育猪存栏50头，采取自繁自养，场内一直没有进行过猪蓝耳病疫苗免疫。
母猪大群健康，个别食欲差；40日龄保育吉林某规模化猪场的猪蓝耳病抗原抗体分析及防控建议刘英杰，齐六卫，董彦龙，羿 岩（沈阳伟嘉生物技术有限公司，辽宁 沈阳 110027）猪有呼吸道症状，发病率6%～10%。
随机挑选症状明显的保育猪10头，进行样本的采集及药物的治疗。
1.2 血样采集治疗方式采取杜仲提取物连续饲喂21 d ，随机选取整齐度差、精神状态差的保育猪10头进行抗原抗体检测分析。
具体方法如下：分别于给药前、给药后，进行猪前腔静脉采血3～5 mL ，按3 000 r/ min 离心10 min ，分离血清。
1.3 检测方法通过荧光定量聚合酶链式反应检测猪繁殖与呼吸综合征病毒核酸（猪蓝耳病毒抗原），采用酶联免疫吸附测定试剂盒方法检测抗体（猪蓝耳病毒抗体），操作方法和结果判定标准均参照试剂盒说明书。
猪蓝耳检测卡说明书(完整版)
猪繁殖与呼吸综合症抗体快速检测试剂盒——（胶体金法）使用说明书【产品名称】通用名称：猪繁殖与呼吸综合症抗体快速检测试剂盒（胶体金法）英文名称：Rapid Anti-PRRSV Test汉语拼音：Zhu Fanzhi Y u Huxi Zonghezheng Kangti Kuaisu Jiance Shiji He(Jiaoti Jin Fa)【用途】用于检测猪血清/血浆/全血样品中猪繁殖与呼吸综合症(又称蓝耳病，Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)抗体。
【实验原理】猪蓝耳病抗体诊断试剂盒（胶体金法），系采用胶体金免疫层析技术，检测样品（血清、血浆或全血）中蓝耳病抗体的方法。
在玻璃纤维纸上预包被金标记灭活猪蓝耳病抗原（Au-Agl），在硝酸纤维素膜上检测线和对照线处分别包被猪蓝耳病抗原(Ag2)和兔抗猪蓝耳病抗体。
当检测样品为阳性时，样品中猪蓝耳病抗体与胶体金标记猪蓝耳病抗原（Au-Ag1）结合形成复合物，由于层析作用复合物沿纸条向前移动，经过检测线时与预包被的猪蓝耳病抗原(Ag2)形成“Au-Ag1-猪蓝耳病抗体-Ag2-固相材料”免疫复合物而凝聚显色，游离金标记抗原则在对照线处与兔抗猪蓝耳病抗体结合而富集显色。
阴性样品则仅在对照线处显色。
操作简便，快速，结果直观、准确，灵敏度高，容易判定。
【试剂盒组成】1、猪蓝耳病抗体检测卡50头份2、说明书1份3、一次滴管50根【试验方法】1、将检测卡从铝箔袋中取出，水平放置并做好标记。
2.、在检测卡的加样孔内加入2滴（70-100ul）待检血清/血浆/全血标本。
3 、20分钟内观察并记录实验结果。
【结果判定】阳性：对照线区（C）和检测线区(T)各出现一条紫红色线。
检测线(T)的颜色越深，表明猪蓝耳病抗体的滴度越高。
阴性：只有对照线区（C）出现一条紫红色线。
无效：未出现紫红色线或只在检测区(T)出现紫红色线，对照线区(C)未出现紫红色线。
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猪蓝耳病抗体检测卡
原理
猪蓝耳病抗体检测试剂盒（胶体金法），系采用国际最先进的胶体金免疫层析技术检测样本（全血、血清、血浆）中抗猪蓝耳病抗体的方法。
整个试验只需20分钟，操作简便、快速、准确，灵敏度高、结果直观、容易判定。
本试剂盒内还设计一张“金标试纸与ELISA试验实物参照图”，用试纸检测线的颜色与实物参照图对照，便可粗略估计样品中抗体的滴度。
操作方法
∙在检测卡的加样孔内加入2滴（100ul）待检血清或血液样品。
∙将检测卡平放于桌面上，在室温下静置5－20分钟内判定结果。
超过20分钟的结果只能作为参考。
结果判定
∙阳性：在观察孔内，检测线区（T）及对照线区（C）同时出现紫红色线。
猪蓝耳病抗体滴度越高，检测线（T）颜色越深。
∙弱阳性：在观察孔内，检测线区（T）及对照线区（C）同时出现紫红色线，但检测线区（T）出现的颜色很浅。
∙阴性：在观察孔内，只有对照线区（C）出现一条紫红色线。
∙失效：在观察孔内，对照线区（C）和检测线区（T）都不出现色线；或仅检测线区（T）出现色线。
诊断参考
1.如果该猪未接种过猪蓝耳病毒疫苗:
∙当被检样品检测线（T）处无明显色带出现，说明被检测样品中没有猪蓝耳病毒抗体。
如果猪群健康，应当及时进行猪蓝耳病毒疫苗接种。
∙当被检样品检测线（T）处有明显色带出现，则该猪有可能为野毒感染，应进一步观察验证。
2. 如果该猪已接种过猪蓝耳病毒疫苗:
∙当被检样品检测线（T）条带的色泽≥对照卡中1：40效价时，说明猪蓝耳病毒抗体的滴度较高，已达到抵御强毒攻击的保护水平。
∙当被检样品检测线（T）条带的色泽＜对照卡中1：40效价时，说明猪蓝耳病毒抗体效价未达到抵御猪蓝耳病毒强毒攻击的最低保护滴度，建议进行疫苗补种。
注意事项
铝箔袋打开后，检测卡应尽快使用；受潮后检测卡将失效。
常温保存，保质期18个月。
特点
∙方便：肉眼判断、无需仪器、操作简单；
∙快速：5－20分钟即可出结果，有利于疫情的快速鉴别和免疫水平监测；
∙用途：适合于各级防检部门、猪场、兽医站广泛使用。