鼻咽癌放疗敏感性现状及策略

17
1,2
J ,2010
11
多种蛋白
双向凝胶电泳分 12 析及质谱分析
实粘附分子整合 三维立体(多细 2Z
素V
胞球)培养
& , 2011
中华放射医学与防 王辉 护杂志，2007
临床肿瘤学杂志， 梁后杰 2008
蛋白水平直接检测放疗敏感性指示剂
• 多药耐药相关蛋白() 、2、P53蛋白、血管内皮生长因 子C
• 下调蛋白：3种
• 果糖二磷酸醛缩酶（ A）、型角蛋白（ 1）和
1与2 剂量-生：存曲线参数的比较
1敏感性低于2
鼻咽癌细胞株(1、2)内在的辐射敏感性的差异原因之一可能与其 在经电离辐射后发生的G，期阻滞程度不同有关。
基因表达差异
辐射抵抗相关基因
辐射敏感相关基因
内在敏感性
影响放疗内在敏感性的基因及其功能
细胞增殖周期和放射敏感性的关系
• 细胞时相的敏感性差异 • M期最敏感 • G2期次之 • S期最不敏感 • G1期抗拒
• 照射后增殖周期中的细胞（时相）分布不同
14种鼻咽癌细胞株放疗剂量-生存曲线参数的比较
1与2敏感性差异的蛋白组学分析
HNE1
CNE2
• 上调蛋白：6种
• I 型角蛋白（ 1） 、谷胱苷肽S转移酶、磷酸甘油 酸激酶（ 1）、脂肪酸合成酶、 纤维母细胞生长因 子受体 2前体、 P73样肿瘤蛋白。
策
肿瘤放射治疗的瓶颈
1.放疗敏感性的个体性差异 2.乏氧细胞造成的放疗抗拒 3.正常组织耐受量的限制 4.治疗不能解决潜在的远处转移
影响放疗敏感性的主要因素
肿瘤细胞的固有敏感性 是否乏氧，乏氧克隆细胞所占的比例 肿瘤放射损伤的修复
鼻咽癌的综合治疗
– 放射治疗 – 化疗 – 手术 – 生物靶向治疗 – 基因治疗 – 免疫治疗
复发对鼻咽癌疗效的影响
放疗抗拒
转移
复发
失败
复发对鼻咽癌预后的影响
• 5年局部失败率为2040% • 局部复发原因占死亡率20%
损伤修复
• 在真核生物，损伤修复主要有两种途径，即 同源重组 ( )和非同源末端连接( )。
• 在哺乳类细胞中是最重要的一种。是一个核 心部分，是丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，由催化 亚单位和调节亚单位蛋白组成。
分子表观
蛋白 多态性 2蛋白
P53、蛋白 2 蛋白
放疗结束复发或残存 时间
杂志
作者
放疗敏感 放疗抵抗
6w无残存 且2m内无 复发
6 w不消退
(2010)
大于3y
小于3y
大于36个m 小于12个m
大于5Y 小于5Y
南方医科大学学报 2007
临床耳鼻咽喉头颈外 科杂志2007
. J. . 2006
袁亚维 刘阳云
• 放疗抗拒组比放疗敏感组高，提示与放疗抗拒有关
• 及β • 与鼻咽癌放射敏感性呈负相关
• ， 67 D • 与放疗敏感性正相关 • • 肿瘤坏死因子促进细胞21放疗抵抗亚群的同步化作用，
增强鼻咽癌放射Βιβλιοθήκη 感性蛋白分子水平• () 26内质网应激诱导蛋白 • 蛋白 • 蛋白
转染对鼻咽癌细胞凋亡的影响
大于5Y 3y
小于5Y 12m
无残存
残存
癌症,2006 . . 2004,
闵华庆 .
实用肿瘤学杂志， 2006
张建文
放疗前根据影像学表现预测敏感性
• 断层显像 • 乏氧组织显像剂99—91l 应用于诊断鼻
咽癌组织的乏氧情况，具有较高临床价 值。
• 反映肿瘤的解剖结构和代谢功能的改变
• 彩色多血普供勒丰超富高声于血供中等、血供贫乏者
检测受损的方法. • 测量指标包括头半径，尾长度，积分光密
度，头/尾含量比例，尾矩， 矩等多种参数 • 用尾力矩之比( ) 表示， 即50 • 0： 未照射的鼻咽癌细胞的尾力矩 • 5：照射 5的鼻咽癌细胞的尾力矩：
分子改变
方法
细胞株
杂志
作者
96 15
12
2007
1,2 5-8F,6-10B
，2007 (2010)
G2阻滞对细胞周期分布的影响
关于1与放疗反应的关系
• 放疗抵抗性相关（观点一）
• 放疗敏感性相关（观点二）
1与辐射抗性有关
观点一 体外转染1和基因到人，不但可形成肺癌，而
且增加辐射抗性。 （ A ， ，1998）
1蛋白与辐射抵抗
• 1蛋白在喉癌20B耐药有关（1987）
• 研究证实：的功能是与组成全酶，参与进行 修复是的重要功能。
第一部分 放疗敏感性的判断方法
• 临床实践水平 • 回顾性判断 • 前瞻性预测
• 基础研究水平 • 细胞水平 • 分子水平 • 蛋白水平 • 基因水平（甲基化及乙酰化）
临床回顾分析敏感性
• 短期疗效 • 从单纯放疗开始至放疗结束后较
短的时间内，观察肿瘤残存率及消 退情况。 • • 长期疗效 • 复发时间的长短来判定肿瘤放 疗的敏感性。
临床判断放疗敏感性小结
• 根据放疗结束一定时间后的肿瘤残存率和 复发率来评价临床肿瘤的放疗敏感性，有 一定的指导价值。
• 只能事后起着间接提示作用，它受到临床 分期、放疗剂量、贫血、肿瘤分化程度等 诸多因素的影响。
细胞分子水平预测放射内在敏感性
细胞分子水平研究放射 敏感性的研究，可以较好 地预测肿瘤的内在敏感性， 是目前肿瘤放射敏感性研
• 细胞凋亡 • 促凋亡： p53,
• 抑制凋亡：2
• 细胞周期调节
• 肿瘤坏死因子
• 细胞增殖调节剂
• 细胞分化
基因的多态性与放疗敏感性
• 辐射抵抗型基因 • 基因
• 基因
• 辐射敏感型基因 • P53
的细胞核形态与放疗敏感性
核含量与鼻咽癌放疗敏感性
“ 彗星” 分析法
• “ 彗 星” 分析法检测敏感性 • 单细胞凝胶电泳 是一种快捷、高灵敏度的
集落数/细胞总数×100% 计数所得克隆数/(接种细胞数×)
方法二：流式细胞技术检测肿瘤 细胞增殖动力学
G0期
G1期 S期
M期 G2期
处于不同增殖周期的细胞放射敏感性的 差异
Survival fraction
1.0 0.1 0.01 0.001
0
400
800
Dose(cGy)
Late S Early S G1 G2/M 1200
基础试验检测放疗敏感性
• 细胞水平研究 • • •
• 组织细胞的蛋白组学研究 • 蛋白组学 • • 免疫组化（）
基础水平研究放疗敏感性
细胞水平检测鼻咽癌放疗敏感性 的 研究
方法一克隆形成试验
原理一个单细胞，形成了50个或更多细胞的 克隆细胞 线性二次模型拟合求出2、D0、、N等放射生 物学参数 单个细胞集落形成效率