亚硝酸盐的测定 共20页PPT资料
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式呼吸器。 眼睛防护：戴化学安全防护眼镜。 身体防护：穿胶布防毒衣。 手防护：戴橡胶手套。 其他防护பைடு நூலகம்工作毕，淋浴更衣。保持良好的卫生习惯。
3.1原子吸收光谱法
原子吸收光谱法又称原子吸收分光光度分析，是基于物质所产生的原子蒸气对特定谱 线（通常是特测元素的特征曲线）的吸收作用来进行定量分析的一种方法。
3.3.3高效液相色谱法（HPLC）
A. 试剂
亚硝酸钠、硝酸钠、磷酸、磷酸二氢钾、三乙胺、亚铁氰化钾、乙酸锌、硼 酸钠、盐酸、对氨基苯 磺酸、盐酸萘乙二胺、实验用水为18.25 MΏ·cm的高 纯 水。
B. 仪器
U3000 高效液相色谱仪：美国DIONEX 公司； UV-1700（E）230CE 分光 光度计：日本岛津；BSW224S-CW 电子天平：赛多利斯科学仪器（北 京）有限 公司；超纯水仪：重庆艾科浦；Centrifuge 5810R 冷冻型台式高速离心机：德 国eppendorf公司.
方法2：超声提取法（已通过正交试验确定最佳 提取参数）：称取剪块样（精 确至0.01 g），加入80 mL提取液（72 mL去离子水，8 mL乙腈），50 ℃超声 4 min，过滤，离心，分光光度法测定含量。
方法3：微波提取法（已通过正交试验确定最佳提取参数）：称取剪块样品1 g （精确至0.01 g），加入50 mL蒸馏水（45 mL去离子水，5 mL乙腈），600 W提取4 min，过滤，离心，分光光度法测定含量。
E.火腿肠样品前处理的改进
比较采用3种不同方法对样品进行提取处理。
方法1：参考GB 5009.33-2019 分光光度法：称取1 g（精确至0.01 g）样品制 成匀浆，加入2.5 mL饱和 硼砂溶液，搅匀，以70 ℃左右的水约60 mL将试样 洗 入100 mL容量瓶中，沸水浴15 min后，冷却至室温。 加入1 mL亚铁氰化 钾溶液，摇匀，再加入1 mL乙酸锌 溶液，加水至刻度，摇匀，放置30 min， 过滤，分光 光度法测定含量。
化工01班 20196278 陈雁琳
``````
1.1物理性质
白色至浅黄色粒状、棒状或粉末。有吸湿性。加热至320℃以上分解。在空气中慢慢 氧化为硝酸钠。遇弱酸分解放出棕色三氧化二氮气体。溶于1.5份冷水、0.6份沸水，微溶于 乙醇。水溶液呈碱性，pH约9。与有机物接触能燃烧和爆炸，并放出有毒和刺激性的过氧 化氮和氧化氮的气体。中等毒，半数致死量(大鼠，经口)180mg/kg。
1.2化学性质
属强氧化剂又有还原性。
在空气中会逐渐氧化，表面则变为硝酸钠，也能被氧化剂所氧化；遇弱酸分解放出棕 色二氧化氮气体；与有机物、还原剂接触能引起爆炸或燃烧，并放出有毒的刺激性的氧化 氮气体；遇强氧化剂也能被氧化，特别是铵盐，如与硝酸铵、过硫酸铵等在常温下，即能 互相作用产生高热，引起可燃物燃烧。
① 预处理：在PH=3的酸性条件下，用高锰酸钾将食物中的亚硝酸盐转化为二氧化锰沉淀，用硫酸溶 解沉淀；
② 实验条件：波长279.5nm； 狭缝宽度0.2nm； 灯电流10mA； 火焰高度7nm； 燃气流速33.3mL/s。
① 实验处理：用AA6800原子吸收风光光度计测定锰的吸光度，通过锰的标准工作曲线方程，从而计 算出亚硝酸盐的含量。
1.3危害
过量的亚硝酸钠会致癌。传统食品中也存在亚硝胺，例如腌肉和咸鱼干。亚硝酸盐被 吃到胃里后，在胃酸作用下与蛋白质分解产物二级胺反应生成亚硝胺。胃内还有一类细菌 叫硝酸还原菌，也能使亚硝酸盐与胺类结合成亚硝胺。胃酸缺乏时，此类细菌生长旺盛。 故不论胃酸多少均有利于亚硝胺的产生。亚硝胺具有强烈的致癌作用，主要引起食管癌、 胃癌、肝癌和大肠癌等。
C.样品前处理 （1）参考国标5009.33-2019 分光光度法中样品 前处理方法[12]。 （2）样品直接剪块，加入10%乙腈去离子水溶 液超声提取，过滤，离心。 （3）样品直接剪块，加入10%乙腈去离子水溶 液微波提取，过滤，离心。 D.高效液相色谱测定条件 色谱柱：Acclaim120 硅胶基质反相色谱柱（5 μm，4.6×150 mm） 柱温：30 ℃， 流动相：pH 3.0 的0.03 mol/L的KH2PO4-H3PO4缓冲液+乙腈（体积比 90∶10）， 检测波长210 nm； 流速：1 mL/min； 进样 体积：10 μL。
皮肤接触：脱去被污染的衣着，用肥皂水和清水彻底冲洗皮肤。 眼睛接触：提起眼睑，用流动清水或生理盐水冲洗。就医。 吸入：迅速脱离现场至空气新鲜处。保持呼吸道通畅。如呼吸困难，给输氧。如呼吸停
止，立即进行人工呼吸。就医。 食入：饮足量温水，催吐。就医。 亚硝酸钠 亚硝酸钠 呼吸系统防护：空气中浓度较高时，应该佩戴自吸过滤式防尘口罩。必要时，佩戴自给
具体操作
例如格里斯试剂比色法（盐酸萘乙二胺法）
α-苯酚分光光度法
柱式浓缩分光光度法
褪色光度法
······
3.3色谱法
3.3.1离子色谱法
原理：
离子色谱法的原理是利用纯水萃取食品中的硝酸盐、亚硝酸盐，经 过煮沸、冷冻、过滤后对其进样测定。本方法适用于菠菜原料、冷冻菠 菜、菠菜罐头、胡萝卜、罐头青豆等样品分析。
3.2分光光度法
原理：
分光光度法的原理是利用溶液中的物质在光的照射激发下，产生了对光的吸 收效应，且物质对光的吸收是具有选择性的。各种不同的物质都具有各自的吸 收光谱，因此当某单色光通过溶液时，其能量就会被自动而减弱，光能量减弱 的程度和物质的浓度有一定的比例关系，即符合比耳定律。所以，利用分光光 度计可以测定亚硝酸钠的含量。
徐霞等根据离子色谱法建立了一种同时测定蔬菜中的亚硝酸盐和硝 酸盐的方法。
3.3.2气相色谱法
原理： 气相色谱法的原理是在硫酸介质中，亚硝酸盐与环己基氨基磺酸钠
反应生成环己醇亚硝酸酯，环己醇亚硝酸酯在常温下成气态，非常适合 用气相色谱仪进行定量测定，从而得到亚硝酸盐的含量。张添佛等利用 气象色谱法建立了一种测定海水中硝酸盐和亚硝酸盐的方法。
3.1原子吸收光谱法
原子吸收光谱法又称原子吸收分光光度分析，是基于物质所产生的原子蒸气对特定谱 线（通常是特测元素的特征曲线）的吸收作用来进行定量分析的一种方法。
3.3.3高效液相色谱法（HPLC）
A. 试剂
亚硝酸钠、硝酸钠、磷酸、磷酸二氢钾、三乙胺、亚铁氰化钾、乙酸锌、硼 酸钠、盐酸、对氨基苯 磺酸、盐酸萘乙二胺、实验用水为18.25 MΏ·cm的高 纯 水。
B. 仪器
U3000 高效液相色谱仪：美国DIONEX 公司； UV-1700（E）230CE 分光 光度计：日本岛津；BSW224S-CW 电子天平：赛多利斯科学仪器（北 京）有限 公司；超纯水仪：重庆艾科浦；Centrifuge 5810R 冷冻型台式高速离心机：德 国eppendorf公司.
方法2：超声提取法（已通过正交试验确定最佳 提取参数）：称取剪块样（精 确至0.01 g），加入80 mL提取液（72 mL去离子水，8 mL乙腈），50 ℃超声 4 min，过滤，离心，分光光度法测定含量。
方法3：微波提取法（已通过正交试验确定最佳提取参数）：称取剪块样品1 g （精确至0.01 g），加入50 mL蒸馏水（45 mL去离子水，5 mL乙腈），600 W提取4 min，过滤，离心，分光光度法测定含量。
E.火腿肠样品前处理的改进
比较采用3种不同方法对样品进行提取处理。
方法1：参考GB 5009.33-2019 分光光度法：称取1 g（精确至0.01 g）样品制 成匀浆，加入2.5 mL饱和 硼砂溶液，搅匀，以70 ℃左右的水约60 mL将试样 洗 入100 mL容量瓶中，沸水浴15 min后，冷却至室温。 加入1 mL亚铁氰化 钾溶液，摇匀，再加入1 mL乙酸锌 溶液，加水至刻度，摇匀，放置30 min， 过滤，分光 光度法测定含量。
化工01班 20196278 陈雁琳
``````
1.1物理性质
白色至浅黄色粒状、棒状或粉末。有吸湿性。加热至320℃以上分解。在空气中慢慢 氧化为硝酸钠。遇弱酸分解放出棕色三氧化二氮气体。溶于1.5份冷水、0.6份沸水，微溶于 乙醇。水溶液呈碱性，pH约9。与有机物接触能燃烧和爆炸，并放出有毒和刺激性的过氧 化氮和氧化氮的气体。中等毒，半数致死量(大鼠，经口)180mg/kg。
1.2化学性质
属强氧化剂又有还原性。
在空气中会逐渐氧化，表面则变为硝酸钠，也能被氧化剂所氧化；遇弱酸分解放出棕 色二氧化氮气体；与有机物、还原剂接触能引起爆炸或燃烧，并放出有毒的刺激性的氧化 氮气体；遇强氧化剂也能被氧化，特别是铵盐，如与硝酸铵、过硫酸铵等在常温下，即能 互相作用产生高热，引起可燃物燃烧。
① 预处理：在PH=3的酸性条件下，用高锰酸钾将食物中的亚硝酸盐转化为二氧化锰沉淀，用硫酸溶 解沉淀；
② 实验条件：波长279.5nm； 狭缝宽度0.2nm； 灯电流10mA； 火焰高度7nm； 燃气流速33.3mL/s。
① 实验处理：用AA6800原子吸收风光光度计测定锰的吸光度，通过锰的标准工作曲线方程，从而计 算出亚硝酸盐的含量。
1.3危害
过量的亚硝酸钠会致癌。传统食品中也存在亚硝胺，例如腌肉和咸鱼干。亚硝酸盐被 吃到胃里后，在胃酸作用下与蛋白质分解产物二级胺反应生成亚硝胺。胃内还有一类细菌 叫硝酸还原菌，也能使亚硝酸盐与胺类结合成亚硝胺。胃酸缺乏时，此类细菌生长旺盛。 故不论胃酸多少均有利于亚硝胺的产生。亚硝胺具有强烈的致癌作用，主要引起食管癌、 胃癌、肝癌和大肠癌等。
C.样品前处理 （1）参考国标5009.33-2019 分光光度法中样品 前处理方法[12]。 （2）样品直接剪块，加入10%乙腈去离子水溶 液超声提取，过滤，离心。 （3）样品直接剪块，加入10%乙腈去离子水溶 液微波提取，过滤，离心。 D.高效液相色谱测定条件 色谱柱：Acclaim120 硅胶基质反相色谱柱（5 μm，4.6×150 mm） 柱温：30 ℃， 流动相：pH 3.0 的0.03 mol/L的KH2PO4-H3PO4缓冲液+乙腈（体积比 90∶10）， 检测波长210 nm； 流速：1 mL/min； 进样 体积：10 μL。
皮肤接触：脱去被污染的衣着，用肥皂水和清水彻底冲洗皮肤。 眼睛接触：提起眼睑，用流动清水或生理盐水冲洗。就医。 吸入：迅速脱离现场至空气新鲜处。保持呼吸道通畅。如呼吸困难，给输氧。如呼吸停
止，立即进行人工呼吸。就医。 食入：饮足量温水，催吐。就医。 亚硝酸钠 亚硝酸钠 呼吸系统防护：空气中浓度较高时，应该佩戴自吸过滤式防尘口罩。必要时，佩戴自给
具体操作
例如格里斯试剂比色法（盐酸萘乙二胺法）
α-苯酚分光光度法
柱式浓缩分光光度法
褪色光度法
······
3.3色谱法
3.3.1离子色谱法
原理：
离子色谱法的原理是利用纯水萃取食品中的硝酸盐、亚硝酸盐，经 过煮沸、冷冻、过滤后对其进样测定。本方法适用于菠菜原料、冷冻菠 菜、菠菜罐头、胡萝卜、罐头青豆等样品分析。
3.2分光光度法
原理：
分光光度法的原理是利用溶液中的物质在光的照射激发下，产生了对光的吸 收效应，且物质对光的吸收是具有选择性的。各种不同的物质都具有各自的吸 收光谱，因此当某单色光通过溶液时，其能量就会被自动而减弱，光能量减弱 的程度和物质的浓度有一定的比例关系，即符合比耳定律。所以，利用分光光 度计可以测定亚硝酸钠的含量。
徐霞等根据离子色谱法建立了一种同时测定蔬菜中的亚硝酸盐和硝 酸盐的方法。
3.3.2气相色谱法
原理： 气相色谱法的原理是在硫酸介质中，亚硝酸盐与环己基氨基磺酸钠
反应生成环己醇亚硝酸酯，环己醇亚硝酸酯在常温下成气态，非常适合 用气相色谱仪进行定量测定，从而得到亚硝酸盐的含量。张添佛等利用 气象色谱法建立了一种测定海水中硝酸盐和亚硝酸盐的方法。