肿瘤干细胞与胚胎干细胞ppt
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最新3.3胚胎干细胞ppt课件
.优点
干细胞应用前景非常广阔，比如可用于细胞治疗、基 因治疗、药物筛检和毒性的检测、生物体发育机制研究 等。其中最吸引人的应用，是将干细胞分化成某一特定 的细胞、组织，甚至器官，通过移植，使之再建起受损 的组织，甚至器官。比如，将干细胞在体外分化为胰岛 素细胞，注入病人胰脏中，通过增殖，构成病人新的胰 岛组织，它就可以替代病人受损的胰岛组织，使依赖注 射胰岛素维持生命的病人得到根治。人们预言，干细胞 有可能用于治疗人类几乎所有的组织坏死性或退化性疾 病，它将是人类医疗史上的一次革命。
的发生. (二)临床表现 1,有1—6个月的服药史 2,部位全口牙龈,以上下前牙区较重 3,增生呈实质性,分叶状,可覆盖大部分或全部牙冠
(三)别诊断 1,遗传性牙龈纤维瘤病: 2,增生性龈炎 (四)治疗 1,停止服用引起牙龈增生的药物是对药物性
牙龈增生的最根本的治疗. 2,去除局部刺激因素 3,局部药物治疗 4,手术治疗 5,口腔卫生宣教
随着组织工程技术的发 展，通过ES细胞体外诱导分化，还 可以培育出人造组织器官，解决目 前临床上存在的供体器官不足和器 官移植后免疫排斥的问题。
（3）ES细胞也是研究体外细胞分化 的理想材料。
ES细胞在饲养层细胞上， 或在添加抑制因子的培养液中，能 够维持不分化的状态。
在培养液中加入分化诱导因 子,就可以诱导ES细胞向不同类型的 组织细胞分化.
分 – 能发育成完整个体 类 • 多能干细胞(成体干细胞)
– 能分化出动物体内的多种组织（造血干细胞）
• 专能干细胞
– 如成肌细胞、皮肤生发层细胞等 – 能分化出特定的（一种或两种）组织
.分别指什么, 分化程度, 潜能；核全能性；目前初始化
.应用
.
.分类
干细胞可以通过以下四个途径获得： (1)从体外培养的胚胎获得； (2)从早期流产的胎儿中获得； (3)从克隆的胚胎中获得； (4)从成体中获得。
干细胞应用前景非常广阔，比如可用于细胞治疗、基 因治疗、药物筛检和毒性的检测、生物体发育机制研究 等。其中最吸引人的应用，是将干细胞分化成某一特定 的细胞、组织，甚至器官，通过移植，使之再建起受损 的组织，甚至器官。比如，将干细胞在体外分化为胰岛 素细胞，注入病人胰脏中，通过增殖，构成病人新的胰 岛组织，它就可以替代病人受损的胰岛组织，使依赖注 射胰岛素维持生命的病人得到根治。人们预言，干细胞 有可能用于治疗人类几乎所有的组织坏死性或退化性疾 病，它将是人类医疗史上的一次革命。
的发生. (二)临床表现 1,有1—6个月的服药史 2,部位全口牙龈,以上下前牙区较重 3,增生呈实质性,分叶状,可覆盖大部分或全部牙冠
(三)别诊断 1,遗传性牙龈纤维瘤病: 2,增生性龈炎 (四)治疗 1,停止服用引起牙龈增生的药物是对药物性
牙龈增生的最根本的治疗. 2,去除局部刺激因素 3,局部药物治疗 4,手术治疗 5,口腔卫生宣教
随着组织工程技术的发 展，通过ES细胞体外诱导分化，还 可以培育出人造组织器官，解决目 前临床上存在的供体器官不足和器 官移植后免疫排斥的问题。
（3）ES细胞也是研究体外细胞分化 的理想材料。
ES细胞在饲养层细胞上， 或在添加抑制因子的培养液中，能 够维持不分化的状态。
在培养液中加入分化诱导因 子,就可以诱导ES细胞向不同类型的 组织细胞分化.
分 – 能发育成完整个体 类 • 多能干细胞(成体干细胞)
– 能分化出动物体内的多种组织（造血干细胞）
• 专能干细胞
– 如成肌细胞、皮肤生发层细胞等 – 能分化出特定的（一种或两种）组织
.分别指什么, 分化程度, 潜能；核全能性；目前初始化
.应用
.
.分类
干细胞可以通过以下四个途径获得： (1)从体外培养的胚胎获得； (2)从早期流产的胎儿中获得； (3)从克隆的胚胎中获得； (4)从成体中获得。
胚胎干细胞(自己做的ppt)
养，以模拟体内环境。
培养器皿
02
选择适合胚胎干细胞贴壁生长的培养器皿，如培养瓶、培养板
等，并进行预处理以提高细胞贴壁率。
优化策略
03
根据细胞生长情况，调整培养基成分、培养密度、换液时间等，
以优化培养条件，提高细胞质量和数量。
细胞传代与冻存方法
传代时机
当胚胎干细胞生长至一定密度时，需要进行传代以避免细胞过度生长和分化。
02 胚胎干细胞的研究历程
早期研究阶段
起源与发现
胚胎干细胞的研究起源于20世纪 80年代，最初是从早期胚胎中提
取并培养出来的。
初步应用
早期胚胎干细胞研究主要集中在细 胞分化、胚胎发育等基础研究领域， 同时也探索了其在再生医学中的潜 在应用。
伦理争议
由于胚胎干细胞研究涉及人类胚胎 的使用和破坏，因此在其早期阶段 就引发了广泛的伦理争议。
再生医学
胚胎干细胞在再生医学领域具有广阔的应用 前景，可以用于构建人工组织或器官，替代 受损的组织或器官，实现人体损伤的修复和 再生。
药物筛选
利用胚胎干细胞分化得到的特定细胞 类型，可以进行药物筛选和毒性测试， 提高药物研发效率和安全性。
科学研究
胚胎干细胞是研究胚胎发育和细胞分 化的重要模型，有助于揭示生命起源 和细胞分化的奥秘。
特点
具有发育的全能性，能分化出成体动物的所有组织和器官， 包括生殖细胞；具有在体外培养无限增殖、自我更新和多向 分化的特性；无论在体外还是体内环境，ESCs都能被诱导分 化为机体几乎所有的细胞类型。
胚胎干细胞的来源
早期胚胎
核移植技术
通过体外受精或其他辅助生殖技术得 到的早期胚胎是获取胚胎干细胞的主 要来源。
法律法规限制
肿瘤干细胞ppt课件
篮球比赛是根据运动队在规定的比赛 时间里 得分多 少来决 定胜负 的，因 此，篮 球比赛 的计时 计分系 统是一 种得分 类型的 系统
Wnt信号的异常活化可致肿瘤 的发生
转基因小鼠的上皮干细胞内Wnt信号通路 的活化可诱发上皮癌的形成。另外，大 约90%的结肠癌病人早期即发生APC基因 （Wnt信号通路的一部分，参与Catenin 的降解）的突变，从而引发Wnt信号通路 的活化。
乳腺癌
细胞表面标志物呈CD44 + /CD24 - or low , 具有自我更新、能够分化成其他类 型细胞的特征
篮球比赛是根据运动队在规定的比赛 时间里 得分多 少来决 定胜负 的，因 此，篮 球比赛 的计时 计分系 统是一 种得分 类型的 系统
脑肿瘤
不同类型的脑肿瘤可源自一个共同的细 胞。干细胞的不同突变可以导致不同类 型的脑瘤，它们带有正常神经干细胞的 表面标志CD133，但无进一步分化细胞 的细胞表面标志
篮球比赛是根据运动队在规定的比赛 时间里 得分多 少来决 定胜负 的，因 此，篮 球比赛 的计时 计分系 统是一 种得分 类型的 系统
肿瘤干细胞分裂方式
第一种是不对称分裂，即一个肿瘤干细 胞分裂产生的两个子代细胞中，一个总 是进一步分化成肿瘤细胞群，另一个总 是肿瘤干细胞，以维持干细胞的数量不 变
（二）Wnt信号通路 Wnt蛋白是一类胞间信号分子，调控
多种生物体的发育，当其功能失调时有 助于肿瘤的形成，它们与细胞膜表面受 体结合后引发胞内一系列改变，最终活 化控制细胞分裂和分化的基因。
篮球比赛是根据运动队在规定的比赛 时间里 得分多 少来决 定胜负 的，因 此，篮 球比赛 的计时 计分系 统是一 种得分 类型的 系统
干细胞的分裂特性
[课件]报告：干细胞PPT
![[课件]报告：干细胞PPT](https://img.taocdn.com/s3/m/a86906aea0116c175f0e48d3.png)
2、成体干细胞
指存在于组织
中的未分化细 胞，该种细胞 能够自我更新 并能够分化形 成组成该类组 织的细胞。
完成组织的修复和再生功能。 成体干细胞经常位于特定的微环境中。微环境中的间质细胞 能够产生一系列生长因子或配体，与干细胞相互作用，控制 干细胞的更新和分化。 过去认为成体干细胞主要包括上皮干细胞和造血干细胞。 最近研究表明，成体干细胞普遍存在。 2000年年初美国研究人员无意中发现在胰腺中存有干细胞； 加拿大研究人员在人、鼠、牛的视网膜中发现了始终处于 “休眠状态的干细胞” 。 成体干细胞可以横向分化 如：骨髓干细胞可发育成肝细胞，脑干细胞可发育成血细胞。 如何寻找和分离各种组织特异性干细胞？
（6）血管内皮前体细胞－内皮干细胞
内皮干细胞的获得:
骨髓
外周血单核细胞
(7)神经干细胞
关于神经干细胞研究起步较晚，由于分离神经干细
胞所需的胎儿脑组织较难取材，加之胚胎细胞研究的 争议尚未平息，神经干细胞的研究仍处于初级阶段。 理论上讲，任何一种中枢神经系统疾病都可归结为 神经干细胞功能的紊乱。如：给帕金森氏综合症患者
二、干细胞应用的新领域
中晚期恶性实体瘤 心脏病、血管疾病
神经系统损伤
（小细胞肺癌、 乳腺癌、
卵巢癌、睾丸癌、神经母细胞瘤等）
组织器官修复
糖尿病。
（1）造血干细胞
造血干细胞是体内各种血细胞的唯一来源，它主要 存在于骨髓、外周血、脐带血中。 造血干细胞移植是根治恶性血液病（白血病、恶性 淋巴瘤、多发性骨髓瘤）、 再生障碍性贫血、某些
的脑内移植含有多巴胺生成细胞的神经干细胞，可治
愈部分患者症状。
三、再生生物学－热门的领域
研究生讲课肿瘤干细胞-PPT课件
免疫荧光基本原理
流式细胞仪的工作原理
流式细胞仪
流式细胞仪的应用
• 细胞生物学
• 肿瘤些 • 免疫学
• 血液学
• 药物学
流式细胞结果分析（散点图）
流式细胞分析
肺癌干细胞的分离鉴定
原代肺癌细胞培养
TUMOR SAMPLE
DIGESTION: -Collagenase I 37º C - 2 hours -Washing
肿瘤干细胞的起源
• 由正常干细胞经多基因多步骤突变累积而 来
• 由骨髓来源的干细胞与基因发生改变的组 织细胞融合而来 • 由基因发生改变已分化的细胞逆转化而来
Cancer stem cells should be the therapy target
Reya,T.,et al. Nature.2001.414.105-111
原代培养的肺癌细胞在NOD/SCID 小鼠能形成肿瘤
原代培养的肺癌细胞中含有一小群 CD44 强阳性的细胞
Small cell lung cancer(LC004), large cell lung cancer(LC006) have cd44 strong positive population cells.
SINGLE CELL SUSPENSION
CULTURING: Serum free medium
原代培养建立的肺癌细胞系
We have established 5 squamous carcinoma(B), 4 adenocarcinoma(D), 1 large cell lung cancer(C), 1 small cell lung cancer(A), and 1 lung carcinoid cell lines.
胚胎干细胞的研究及其应用课件
能的细胞。
干细胞的主要特征：
• 1.形态特征 • • 形态特征—圆形或椭圆形，核质比大； 增殖的缓慢性 • 2.增殖特征
•
增殖的自稳性（区别与肿瘤细胞的本质特征）
干细胞的分类
• 全能干细胞
按分化潜能
按发育状态
•胚胎干细胞 •成体干细胞
• 多能干细胞
• 专能干细胞
• 专能干细胞—只能分化成一种类型或功能密切相关的两 种类型的细胞。如上皮组织基底层的干细胞，肌肉中的 成肌细胞。
胚胎干细胞的形态和生化特征
形态特征
• 体积小、核大，有一个或多个核仁； • 胚胎干细胞克隆紧密堆积，无明显的界 限，形似鸟巢
胚胎干细胞的分离
酶消化后培养 免疫方法去除滋养层细胞
流式细胞仪分离法
胚胎干细胞系的建立过程
分离囊胚的内细胞群 与成纤维细胞共培养，ES 细胞非分化增殖 分离胚胎生殖腺脊细胞
基因转染
胚胎干细胞－－－－－－－－－－－－－－－胰岛素分泌细胞
研究意义
人胚胎发育机制及影响因素的研究。 用于药物机理及毒性实验的研究，减少人体 和动物的实验及临床研究。 将胚胎干细胞定向分化的细胞用于制造人体 细胞、组织和器官——治疗性克隆技术。
来源于干细胞的组织可能用于治疗的疾病
细胞类型 治疗的疾病
• 6、胚胎干细胞是从哺乳动物或人的早期胚胎中分离出 来的一类细胞，具有发育的全能性，它可进一步分化 发育成各种不同的组织细胞，。下图所示为干细胞的 培养过程，请问图中哪一段的细胞是全能干细胞： （ ） 人体 体细胞 细胞核 去核卵细胞
各种血细胞 血液组织干细胞 内细胞群 神经细胞等 神经组织干细胞等 A、囊胚 B、内细胞群 C、血液组织干细胞 D、各种血细胞
胚胎干细胞在肝癌中的应用PPT课件
： 肝细胞(或胆管细胞等)发生过度增生,
导致正常结构遭受破坏而形成的一种恶 性肿瘤
肝癌的治疗及不足
方法 局部肝切除 消融治疗 放疗 化疗
不足 肝功能衰竭 延缓肿瘤的进程 毒副反应 毒副反应,目前还没有有效方案
胚胎干细胞 VS 肝癌
一、 肝 癌 二、 干细胞的概念 三、 肝干细胞VS肝癌
四、 伦理之争 五、 展望前景
全能干细胞（totipotent stem cell,TSC）
胚胎干细胞
胚胎干细胞： 是指从桑椹胚 内细胞团分离 的多潜能细胞。
人类 胚胎干细胞
人胚胎干细胞系的培育过程
三 、肝干细胞
一、1956年，Farber将肝内可能具有分化潜力的细 胞描述为卵圆细胞;
二、1958年 ，Wilson和Leduc提出肝干细胞的概念; 三、近年来，人们发现肝干细胞移植对急慢性肝脏
疾病有明确的治疗作用。
肝干细胞的来源与分类
肝源性肝脏干细胞
卵圆细胞 分化的肝细胞 胚胎肝细胞 胆管上皮细胞
非肝源性肝脏干细胞
胚胎干细胞 骨髓造血干细胞 上皮干细胞 造血干细胞 骨髓间充质细胞
ESC源性肝干细胞肝内移植
实验： 筛选ESC源性肝干细胞
荧光示踪剂标记移植细胞
观察 安全性进行评估
人胚是从人胚中收集胚胎干细胞是不道德的，无论目的如何高尚，破坏不 可想象的。
科学家们并没有杀死细胞，而只是改变了其命运，因而是道德的。
五、 应用前景
①人工肝脏 ②评估新药 ③攻克肝癌 ④预防肝病 ⑤治疗急性肝衰竭
预防肝病
一、戒酒 二、慎用药 三、限制脂肪 四、接种疫苗 五、良好生活习惯 六、输血、献血要防备
ESC源性肝干细胞肝内移植
ZT_课件3_肿瘤干细胞
恶性 突变 具备了自我更 新、 多向分化能力 分化 增殖
正常干细胞
克隆发育 获得自我更新能力 /脱分化 恶性肿瘤干细胞 前体 特定祖细胞/成熟细胞
肿瘤干细胞
成熟肿瘤细胞
肿瘤的形成假说
Stochastic
Hierarchy
Ｄick J. E., Proc Natl Acad Sci USA 100 (2003) 3547.
肿瘤起源于不同分化阶段的干细胞：如果致癌因子作用于未分化的干细胞，干 细胞就成为肿瘤性干细胞而形成恶性肿瘤；如果致癌因子作用于近于终末期分化而 仍能合成DNA的细胞则形成良性肿瘤；如果致癌因子击中的是中间状态的细胞会出现 中等程度分化而介于这两种极端之间的肿瘤。
Stewart S. Critical Reviews in Oncology/Hematology,2004,51:1
Wnt–E-cadherin connection in stem cell selfrenewal, differentiation and carcinogenesis
肿瘤的传统治疗手段
• 手术、放疗、化疗 • 缺点：不彻底；复发；严重的副作用
肿瘤干细胞研究的临床意义
Therapeutic implications of cancer stem cells
人类皮肤干细胞
（by Yamanaka, Nature）
（如造血干细胞、皮肤干细胞)
人类骨髓成体干细胞
（by Courtesy L.)
干细胞特性：
自我更新、长寿 命，高度增殖 多方向分化潜能
干细胞存在于容纳和调节 它们的特化“生境细 胞”(Niche)间 干细胞内部，以及外部与 其生境细胞间有特定的信 号传导通路，调节自我更 新和分化
正常干细胞
克隆发育 获得自我更新能力 /脱分化 恶性肿瘤干细胞 前体 特定祖细胞/成熟细胞
肿瘤干细胞
成熟肿瘤细胞
肿瘤的形成假说
Stochastic
Hierarchy
Ｄick J. E., Proc Natl Acad Sci USA 100 (2003) 3547.
肿瘤起源于不同分化阶段的干细胞：如果致癌因子作用于未分化的干细胞，干 细胞就成为肿瘤性干细胞而形成恶性肿瘤；如果致癌因子作用于近于终末期分化而 仍能合成DNA的细胞则形成良性肿瘤；如果致癌因子击中的是中间状态的细胞会出现 中等程度分化而介于这两种极端之间的肿瘤。
Stewart S. Critical Reviews in Oncology/Hematology,2004,51:1
Wnt–E-cadherin connection in stem cell selfrenewal, differentiation and carcinogenesis
肿瘤的传统治疗手段
• 手术、放疗、化疗 • 缺点：不彻底；复发；严重的副作用
肿瘤干细胞研究的临床意义
Therapeutic implications of cancer stem cells
人类皮肤干细胞
（by Yamanaka, Nature）
（如造血干细胞、皮肤干细胞)
人类骨髓成体干细胞
（by Courtesy L.)
干细胞特性：
自我更新、长寿 命，高度增殖 多方向分化潜能
干细胞存在于容纳和调节 它们的特化“生境细 胞”(Niche)间 干细胞内部，以及外部与 其生境细胞间有特定的信 号传导通路，调节自我更 新和分化
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iPS研究的重要意义及其面临挑战
重要意义： 1、避开了卵细胞以及胚胎操作等相关伦理障碍。 2、技术相对简单，可解决的移植免疫排斥的问题。 3 、提供了一种新的思路和方法，也是研究发育生物学、
疾病发生发展机制、药物等的十分重要的实用模型
面临挑战：
1 、与 ES 细胞一样，其定向诱导分化以及其致
瘤性的问题还有待解决。
2、Human
3、Rat
4、Monkey 5、Pig
iPS相关技术的革新
一、诱导方法不断创新 1、整合型病毒技术（逆转录病毒） 2、非整合型病毒技术（腺病毒） 3、非病毒技术 – piggyBac转座子 – 质粒 – 重组蛋白技术
整合型病毒技术 首先研发出的 iPS 细胞是使用“逆转录 病毒 (retrovirus) ”将数种基因导入体细 胞，但是，逆转录病毒随机的将外源基因 植入体细胞的染色体，容易使基因引发异 常，导致癌化，从而限制临床应用。而且 基因重排效率不高。
Self-renewal 自我更新的关 键因子
• 胚胎干细胞伦理学争论主要集中在胚胎的道德地 位、创造胚胎与多余胚胎的使用、治疗性克隆、 胚胎干细胞替代等焦点问题上。
胚胎干细胞研究的伦理挑战
胚胎干细胞的来源是否符合法律与道德？
胚胎干细胞的应用是否会引起伦理及法律
问题？
该项研究是否会导致人流泛滥？或导致医
iPS细胞的创新性研究进展
• iPS细胞的种属来源 • iPS相关技术的革新
– 诱导方法不断创新 – 转录因子逐步减少
• 疾病相关的iPS研究进展
iPS细胞的种属来源
1、Mouse
iPS技术首先在小鼠成纤维细胞上获得成功。 2006年，Yamanaka等成功诱 导出小鼠iPS细胞。 2008年，美国怀特黑德生物医学研究所鲁道夫· 詹尼士（ Jaenisch R ）证明 成熟小鼠B细胞可重编程为iPS细胞 2007年， Yamanaka等人和俞君英等人利用人类上皮细胞诱导出iPS细胞。 2008年，Daley GQ 利用人成纤维细胞诱导出iPS细胞 2008年，西班牙科学家用头发代替皮肤成功培育出iPS细胞 2009年， Daley GQ 利用成人血液中CD34+细胞成功诱导出iPS细胞 2008年，上海中科院肖磊等人成功运用病毒表达转录因子把大鼠成体细胞成 功地重编程到多能干细胞状态。 2008年，北大邓宏魁等人利用猴子成纤维细胞成功诱导出iPS细胞 2009年，肖磊博士通过使用转录因子重编程了来自一头猪的耳朵和骨髓的细 胞，从而成功地培育出了诱导多能干细胞。 2009年，裴端卿成功的利用一种小型藏香猪成纤维细胞构建出了iPS细胞系
质粒 Yamanaka 采用质粒载体，两个质粒，一 个携带c-Myc；另一个携带Oct3／4、Klf4 和 Sox2 ，同时转入小鼠胚胎成纤维细胞， 可将之转化成iPS细胞。 （Science 7 November 2008: 949-953.）
重组蛋白技术 丁盛博士用重组的蛋白就能诱导出多能干 细胞
2、其诱导转变的细胞及分子机制尚不清晰。
iPS细胞的未来研究方向
• • • • • • • iPS形成机制 定向分化 避免成瘤性 规范化方法 疾病模型 药物研究平台 临床试验
成体干细胞（adult stem cell )
造血干细胞 神经干细胞 肌肉干细胞 骨髓间充质干细胞 心脏干细胞 胎盘造血干细胞 胎盘亚全能干细胞
主要的作用：维持和修复所在的器官或组织.
定位于特定的组织环境中，干细胞可以保持静 止状态，在疾病或者损伤发生，分裂被激活。
对成体干细胞了解哪些
能够不分化增殖较长时间，能够形成有 形态特征和特定功能的成体细胞类型。 一些成体干细胞能够分化一些不是来自本身
起源地的组织，这是指它们的可塑性。
成体干细胞非常稀少。常常很难被鉴定，起 源也不是很清楚。
• 成体干细胞（adult stem cell )
成年动物的许多组织和器官，比如表皮和造血系统， 具有修复和再生的能力。成体干细胞在其中起着关键的作 用。在特定条件下，成体干细胞或者产生新的干细胞，或 者按一定的程序分化，形成新的功能细胞，从而使组织和 器官保持生长和衰退的动态平衡。
造血干细胞、神经干细胞、肌肉干细胞、骨髓 间充质干细胞、心脏干细胞、胎盘造血干细胞和 胎盘亚全能干细胞等。
不对称分裂的意义:
使机体对干细胞的调控更灵活，以适应机体的
生理变化。
要求机体对干细胞分裂的调控更精确，以保持
干细胞数目恒定。
如：正常肠腺有 250 个细胞组成，如果额外多
一个干细胞，则可能多产生64~128个子代细胞。
小结： 干细胞的特征：
自我更新能力； 数目er stem cell
学习要点
1.干细胞概述 • 胚胎干细胞 • iPS细胞 • 成体干细胞 （①概念②特征③应用④及存在的问题）
2.肿瘤干细胞及其生物学特征
IMPORTANT
Science 1999 现” 2000 2002 “干细胞的研究与发 十大科学进展之首； 年度十大科技进展； 值得关注的六大科技 领域
Stem cell
• 1963 年 第一次证实造血干细胞 (haematopoietic stem cell, HSC)的存 在。
James Till McCulloch
Ernest
Basic concept
• 干细胞（stem cells, SC）： 是机体终生存在的细胞，是
一类具有自我复制能力(selfrenewing)的多潜能细胞，在一定 条件下，它可以分化成多种功能 细胞。
对成体干细胞需要了解什么？
成体干细胞在体内有哪些来源？他们是不 是留在体内的胚胎干细胞，或者是其他途径 来的？为什么他们能保持未分化状态？是不 是能处理成体干细胞以增加其在体外的增殖 能力，已是成体干细胞可以被用做移植的一 个有效的组织来源？
成体干细胞有多少种，都存在于哪些组织？
对成体干细胞需要了解什么？
非整合型病毒技术
哈佛大学的 Konrad Hochedlinger ， 利用腺病毒载体，使用基因：Oct4, Sox2, Klf4, and c-Myc，可使小鼠纤维原细胞和 肝脏细胞转变为iPS细胞。
(Science 7 November 2008: 945-949. )
非病毒技术
piggyBac转座子 英国（Keisuke Kaji）和加拿大的研究小组利用来自病毒 的 2A 肽序列生成一种结合重新编程因子的“多顺反子载 体”（ multicistronic vector ），该载体被 piggyBac 转 位子载体送入细胞中，从而在人及小鼠成纤维细胞中都生 成了稳定的 iPS 细胞。与 2A 结合在一起的重新编程因子 （在已经生成的iPS细胞系中是不需要的）被除去。 优点：提高了安全性，不易使基因癌化；且能通过转座子 的切除来获得无载体和转基因的iPS细胞。 （Nature）
多向分化潜能；
可无限增殖、分裂； 多数处于静止状态； 对称分裂与不对称分裂。
分类（一） -依据分化能力
• 全能干细胞（Totipotent stem cell）： 能够发 育成为具有各种组织器官的完整个体潜能的细胞。 指受精卵到卵裂期32细胞前的所有细胞（受精卵）
• 多潜能干细胞（pluripotent stem cell）：具有 分化出多种细胞组织的潜能，但失去了发育成完整 个体的能力，发育潜能受到一定的限制（ ES）
• 多能干细胞（multipotential stem cell）：只能分化成特定组织或器官等特 定族群的细胞（例如：HSC）
• 单能干细胞（unipotent stem cell）：只 能产生一种细胞类型；但是，具有自我更 新的属性，将其与非干细胞区分开（例如： 上皮组织基底层的干细胞）
分类（二）-依据组织类型
Outer cells (forms placenta)
Isolate inner cell mass (destroys embryo) Inner cells (forms fetus)
Culture cells
Day 5-6 Blastocyst
“Special sauce” (largely unknown) Liver Heart repaired
成体干细胞在三胚层来源的组织均有发现。 骨髓来的造血干细胞研究是最多的，临床用于移 植修复重建骨髓的血液和免疫部分。从骨髓和血 液至少已鉴定出其他两个成体干细胞群。
对成体干细胞了解哪些
在脑尤其在海马，已鉴定出几个成体干细胞群， 功能还不清楚，脑干细胞的增殖和分化受不同生 长因子的影响。 最近几篇新的研究报道在其他组织（肌肉、血 液和脂肪）也有具有可塑性的干细胞。关于干细 胞可塑性包括克隆形成能力的研究报道很少，也 就是说，有限的证据证实一个单独的干细胞或由 遗传特征的成体干细胞系的可塑性。 很少有研究可塑性的实验证实成体干细胞能产 生成体的、功能完全的细胞或这些细胞在体内能 重建失去的功能
有没有通用的干细胞？在成体哺乳动物，新的观点 认为可能有通用干细胞群体存在。在许多实验系统， 研究者发现成体组织正在分裂的细胞常常出现在血 管附近，像脑中海马处的干细胞。 成体干细胞在体内是否也发挥可塑性？如果是这样， 所有成体干细胞都是这样？具可塑性的干细胞的增 殖和分化的调节信号是什么？
胚胎干细胞（Embryonic Stem Cells,ES cells)
ES细胞的研究趋势
• 改善ES细胞的体外培养条件，建立更有效、简便 的获取ES的方法； • 定向诱导分化成特定类型的细胞，用于临床疾病 的治疗，并解决免疫排斥和潜在的致肿瘤问题； • 成体干细胞的横向分化的能力以及与胚胎干细胞 的比较，成体干细胞能否替代胚胎干细胞。
是未分化（非特化）的 细胞，出现在已分化特 定的组织中，能够自我 更新，并且产生由他来 源的所有特定类型的组 织细胞。