弯曲菌属和幽门螺杆菌及检验

第二十一章弯曲菌属和幽门螺杆菌及检验

一、弯曲菌属

（一）概述：

弯曲菌属细菌是一类微需氧，不分解糖类，氧化酶阳性，菌体弯曲呈逗点状、S形或螺旋状，有动力的革兰阴性菌。包括5个种和5个亚种。对人类致病的主要是空肠弯曲菌和胎儿弯曲菌胎儿亚种。前者是人类腹泻最常见的病原菌之一，后者在免疫功能低下时可引起败血症、脑膜炎等。

（二）生物学性状

1.形态染色：革兰阴性、细长、螺旋形或海鸥展翅状、Ｓ形的弯曲杆菌。一端或两端具有单鞭毛，运动活泼，有时呈螺旋状运动。一端单鞭毛多见于胎儿亚种，两端单鞭毛多见于空肠弯曲菌，无芽胞，无荚膜。

2.培养特性：微需氧菌，初次分离时需在含5%O2、85%N2、10%CO2气体环境中生长，传代培养时能在10%CO2环境中生长。

本属菌最适生长温度随菌种而异（生长温度差异可作为菌种鉴别要点）。

营养要求高，在普通培养基上不生长。需加入血液、血清才能生长。常用的选择培养基有Skirrow琼脂和Campy-BAP培养基。这些培养基以血琼脂为基础，加人多种抗生素，能抑制肠道正常菌群，而有利于本菌的分离。空肠弯曲菌初次分离时，经48h培养可形成两种菌落；一种为扁平、湿润、灰白色、半透明、边缘不整齐、常沿接种线扩散生长的菌落；另一种为圆形、凸起、半透明、针尖状、有光泽、单个细小菌落。两种菌落均不溶血。在布氏肉汤内呈均匀混浊生长。

3.生化反应：本属细菌生化反应不活泼。不分解糖类、不液化明胶、不分解尿素，V-P和甲基红试验均阴性。氧化酶均为阳性，大多数弯曲菌能还原硝酸盐、触酶试验为阳性，空肠弯曲菌马尿酸水解试验阳性。

4.抗原结构：有菌体（O）抗原、热不稳定抗原和鞭毛（H）抗原。根据O抗原可将空肠弯曲菌分为42个血清型。

5.抵抗力：抵抗力较弱，56℃5分钟即被杀死。干燥环境中仅能存活3小时。

（二）微生物学检验

1.标本采集：立即送检，及时接种。

2.检验方法及鉴定

（1）直接涂片

1）悬滴标本检查：显微镜下观察有无投镖式或螺旋状运动的细菌。

2）革兰染色检查：为革兰阴性逗点状、S形或螺旋状小杆菌。

（2）分离培养：粪便和肛拭子标本直接接种于改良弯曲菌琼脂平板如改良的Skir-row血琼脂平板和Campy-BAP平板；血液或脑脊液标本接种布氏肉汤增菌后，转种弯曲菌分离培养基，置42℃、37℃，在微需氧环境下培养24～72h，观察菌落特征。

（3）鉴定

革兰阴性细小弯曲杆菌，单鞭毛具有投镖样或螺旋样动力，需氧环境不生长，微需氧条件下，在弯曲菌选择培养基上形成两种类型菌落。不分解葡萄糖。弯曲菌属的鉴定要点为氧化酶阳性，革兰阴性，菌体弯曲或呈S形。最常用的鉴定试验有生长温度（25℃、37℃、42℃）试验、过氧化氢酶试验、马尿酸盐水解试验、硝酸盐和亚硝酸盐还原试验、硫化氢试验等。

（三）临床意义

致病因素主要与肠毒素、细胞毒素、内毒素和黏附、定植能力有关。主要引起人类肠道感染和各种肠道外感染。其中空肠弯曲菌是引起散发性细菌性肠炎最常见的菌种之一。胎儿弯曲菌主要引起肠道外感染，其中胎儿亚种为主要的人类致病菌，致菌血症、胆囊炎、腹膜炎、肺部感染等。

（四）治疗原则

空肠弯曲菌常对红霉素、克林霉素和四环素敏感，多数空肠弯曲菌对氨基糖苷类、氯霉素及氟喹诺酮类敏感，由于可产生β-内酰胺酶，一般对β-内酰胺类耐药。

关于弯曲菌的描述，正确的是

A.微需氧菌

B.革兰阴性，呈细长、螺旋形、海鸥展翅状或S形

C.营养要求高，培养基中需加入血液、血清才能生长

D.生化反应活泼

E.对人致病的主要是空肠弯曲菌和胎儿弯曲菌

[答疑编号500735210101]

『正确答案』ABCE

二、幽门螺杆菌

（一）简述

幽门螺杆菌是一类氧化酶和过氧化氢酶均阳性、微需氧、在37℃能够生长，在25℃不能生长42℃少数生长的革兰阴性弯曲的细菌，有动力。能引起人类疾病的有3个种，即幽门螺杆菌（H.pylori）、H.fennelliae 和H.cinaedi。幽门螺杆菌多见。

（二）生物学性状

革兰阴性，菌体细长弯曲呈螺旋形、S形或海鸥状。

菌体一端或两端可有多根带鞘鞭毛。运动活泼。

微需氧，在5%O2、85%N2、10%C02的环境中生长良好。

对湿度要求较高，相对湿度最好在98%以上。

对营养要求较高，一般需含血或血清才生长。为抑制杂菌培养基中添加多粘菌素B、万古霉素、两性霉素、TMP等。

HP与其他细菌相比有一定的耐酸性，但对酸仍比较敏感，pH降至3.5以下活力明显减弱。

生化反应不活泼。氧化酶、触酶、DNA酶均阳性。快速脲酶试验强阳性（该菌能产生丰富的尿素酶是其显著的特征）。

（三）临床意义

全球一半以上人口被HP感染。传播途径推测经口感染，HP感染与消化性溃疡，十二指肠溃疡有密切关系。HP存在于胃黏膜上皮表面和粘液底层，胃窦为定植的最佳部位，HP数量较多，胃体和胃底较少。

（四）微生物检查

1.标本采集：从多部位采集胃黏膜活检标本，放入20%葡萄糖运送液或无菌生理盐水中立即送检，4℃冰箱保存，不超过5小时。

2.检验方法

（1）快速诊断：有直接染色镜检，快速脲酶分解试验、碳标记（13Ｃ或14Ｃ标记尿素）呼气试验（如果C02超标，提示HP存在）、有商品试剂盒检测粪便HP抗原、血清学检测抗Hp菌体抗体或脲酶抗体、基因芯片法检测脲酶、细胞毒素和空泡毒素抗体。分子生物学技术检测毒素基因。

（2）分离培养鉴定：用选择性培养基（如血巧克力培养基中添加多粘菌素、万古霉素、两性霉素、TMP 等）和非选择性培养基放在微需氧和湿润的环境中，35℃孵育3～4天，挑选出细小、针尖大小、半透明的、不溶血的可疑菌落，做生化鉴定。

（3）药敏试验：测试MIC

（4）治疗：选用一种质子泵抑制剂（PPI）或一种胶体铋剂加上克拉霉素、阿莫西林（或四环素）甲硝唑（或替硝唑），3种抗菌药物中的2种，组成三联疗法。也可用PPI、胶体铋剂联合两种抗生素的四联疗法。

关于幽门螺杆菌的生物学性状，叙述正确的是

A.菌落细小、半透明、不溶血

B.兼性厌氧生长

C.氧化酶阳性

D.革兰阴性螺旋形

E.快速脲酶试验强阳性

[答疑编号500735210102]

『正确答案』ACDE

第二十二章厌氧性细菌及检验

本章考点：

1.概述

概念，分类标准及分类

2.厌氧菌的分布与临床意义

自然界和正常人体中的分布，临床意义

3.厌氧菌标本的采集与送检

标本的采集方法，标本的运送和处理

4.分离与鉴定

检验程序，检验方法概述

一、概述

（一）概念

厌氧性细菌是一大群专性厌氧，必须在无氧环境中才能生长的细菌。

（二）厌氧菌的分类