三萜类化合物的提取与分离
灵芝三萜的提取分离及总三萜的含量测定(精)
— 70 —现代中药研究与实践2010年第24卷第5期Chin Med J Res Prac,2010 Sept.,Vol.24 No.5灵芝是一种名贵的药用真菌，属于担子菌纲多孔菌科灵芝属真菌赤芝和紫芝的总称，始载于«神农本草经»，具有补中益气、滋阴强壮、扶正固本、延年益寿等功效。
灵芝主要成分为多糖类和三萜类。
三萜类成分复杂，曾祥丽等[1]报道灵芝含有122种三萜类成分，其中最主要是灵芝酸37种。
林志彬等研究认为灵芝三萜具有抗HIV-1及HIV-1蛋白酶活性、保肝、抗肿瘤和抗艾滋病毒等药理活性[2-5]。
本文对灵芝三萜的提取分离及总三萜的含量测定作以下报道。
1 仪器、试剂旋转蒸发仪（日本生产，EYELA ROTORYEVAPOPATOR N-1000）；GB204电子天平（瑞典）；751型紫外-可见分光光度计（上海分析仪器灵芝三萜的提取分离及总三萜的含量测定侯敏娜1，刘剑 2（1.陕西国际商贸学院，陕西咸阳 712046；2. 陕西香菊药业集团责任公司，陕西商洛 726000）摘要：目的研究灵芝三萜的最佳提取方法，并测定其总三萜的含量。
方法采用正交实验方法，用硅胶柱进行总三萜分离，通过紫外-可见分光光度法测定总三萜含量。
结果最佳提取方法为用5倍量95%乙醇回流提取3次，每次1.5 h ；用 30倍量硅胶装柱，以石油醚-乙酸乙酯（9：1和7：3）进行洗脱；经分离得到针状晶体Ⅰ和Ⅱ，测定该品种中灵芝总三萜含量为9.07%。
结论本提取方法稳定可行，可作为灵芝三萜工业化生产的参考。
关键词：灵芝三萜; 提取分离 ; 含量测定中图分类号：S567.3+1 文献标识码：A 文章编号：1673-6427(201005-0070-02 Ganoderma Triterpenoids Extraction and Determination of the Total TriterpenoidHOU Min- na1 , LIU Jan2(1.Shan’anxi Institute of International Trade & Commerce, Xianyang 712046, China ;2. Shan’anxi Xiangju Pharmaceutical Group Co., Shangluo 726000,ChinaAbstract: Objective To design the best out of Ganoderma triterpenoids extract programs and separation methods, and measured the total content of triterpenoid. Methods Filter through the orthogonal extraction method, using silica gel column for the total separation of triterpenoids by ultraviolet - visible spectrophotometry triterpenoid content. Results The optimum extraction method is to use fi ve times the amount of 95% ethanol was extracted three times for 1.5 hours each time; loaded with 30 times the amount of silica gel column with petroleum ether - ethyl acetate (9:1 and 7:3 for elution; by ultraviolet - visible spectrophotometry in order to ursolic acid as a reference substance, the total triterpene content of Ganoderma lucidum were determined. Conclusion The extraction method is stable and feasible, and Ganoderma triterpene content was to 9.07%.Key words: Ganoderma lucidum Triterpenes; extraction and separation; content determination厂）；硅胶G （青岛高能达化工有限公司）；薄层层析硅胶板HSGF254（烟台江友硅胶开发有限公司）、氯仿、石油醚、乙酸乙酯、甲醇等试剂均为分析纯，熊果酸对照品（中国药品生物制品检定所）。
萜类化合物的提取和分离
2. 碱提酸沉法
利用内酯化合物在热碱液中，开环成盐而溶于水中，酸化后又 闭环, 析出原内酯化合物的特性来提取倍半萜类内酯化合物。但
是当用酸、碱处理时，可能引起构型的改变, 应加以注意。
萜类化合物的提取分离
TEPENOIDS AND VOLATILE OILS
3. 吸附法
1. 活性炭吸附法： 苷类的水提取液用活性炭吸附，经水洗除去水
（二） 萜类化学成分的分离 1. 结晶法分离 2. 柱层析分离 常用的吸附剂有硅胶、氧化铝（中性氧化铝）。 亦可采用硝酸银柱层析进行分离。 3. 利用结构中特殊功能团进行分离 如倍半萜内酯可在碱性条件下开环，加酸后又环合，借此可 与非内酯类化合分离；
萜类生物碱也可用酸碱法分离。不饱和双键、羰基等可用加 成的方法制备衍生物加以分离。
(6)
(140mg)
(7)
(84mg)
(8)
(89.4mg)
(9)
(201mg)
(10)
(79mg)
(11)
(51.6mg)
(12)
(89mg)
(13~18)
萜类化合物的提取分离
TEPENOIDS AND VOLATILE OILS
冬凌草叶干粉（2400g） 乙醚提取 残渣弃去
冬凌草甲素的分离
乙醚液 回收乙醚
萜类化合物的提取和分离
TYPE OF TERPENOIDS
萜类化合物的提取分离
TEPENOIDS AND VOLATILE OILS
（一） 萜类化学成分的提取
1. 有机溶剂法
2. 碱提酸沉法 3. 吸附法
（二）萜类化学成分的分离
1. 结晶法分离 2. 柱层析分离
3. 利用结构中特殊功能团进行分离
白桦茸三萜提取方法
白桦茸三萜提取方法白桦茸是一种珍贵的中药材，它具有多种药用价值。
其中，白桦茸中的三萜类化合物是一类重要的活性成分，具有很高的药用价值。
本文将介绍白桦茸三萜的提取方法。
一、材料准备1. 白桦茸：选择新鲜、无虫蛀、无霉变的白桦茸作为原料。
2. 有机溶剂：可选择乙醇、甲醇等有机溶剂作为提取溶剂。
二、提取方法1. 粉碎：将白桦茸用研磨机或者研钵研磨成细粉。
2. 提取：将粉碎后的白桦茸放入提取器中，加入适量的有机溶剂，浸泡一段时间。
3. 过滤：将提取液过滤，去除固体残渣。
4. 浓缩：将过滤后的提取液放入蒸发器中，进行溶剂的蒸发浓缩，直到得到浓缩物。
5. 结晶：将浓缩物溶解于适量的溶剂中，加热至溶解，然后冷却结晶，得到纯净的白桦茸三萜。
三、注意事项1. 提取过程中要做好通风，避免有机溶剂蒸气对人体造成损害。
2. 选择合适的提取温度和时间，以保证提取效果。
3. 提取液的过滤要彻底，避免固体残渣带入浓缩物中。
4. 浓缩过程中要控制温度，避免溶剂挥发过多。
5. 结晶过程中要控制冷却速度，以获得较大的结晶颗粒。
6. 提取液和浓缩物要密封保存，避免受潮、受热和光照。
四、应用价值白桦茸三萜具有很高的药用价值，可以用于治疗风湿关节炎、骨质增生等疾病。
此外，白桦茸三萜还具有抗菌、抗炎、抗氧化等多种药理活性，对于提高免疫力、抗衰老等方面也有一定的作用。
总结：白桦茸三萜的提取方法主要包括粉碎、提取、过滤、浓缩和结晶等步骤。
在提取过程中需要注意通风、控制温度和时间等因素，以保证提取效果。
白桦茸三萜具有很高的药用价值，广泛应用于中药制剂的研究和开发中。
通过对白桦茸三萜的提取和研究，有助于进一步挖掘和开发白桦茸的药用价值。
三萜类化合物
二、结构与分类
4、环菠萝蜜烷型
β构型
21
22
24 25 26
12 18 20
23
11 19
H
1317 16 14
27
2 1 10 9 8
15
α构型
35
30
4
67
H
Cycloartanes
29 28
二、结构与分类
从中药黄芪（Astragalus membranaceus中分离到的
黄芪苷 I ：
24
二、结构与分类
二）单环三萜 菊科蓍属植物-----蓍醇A
HO
蓍醇A
二、结构与分类
三）双环三萜
从海洋生物Asteropus sp. 中分离得到 pouoside A-E是一类具有双环骨架的三萜乳糖苷类。
OR4
OH
OO
OH
OR3
OAc
R1 O
OR2
二、结构与分类
四）三环三萜 蕨类植物、楝科植物等。
常见的糖有D-葡萄糖、D-半乳糖、D-木糖、L-阿拉伯糖、 L-鼠李糖、D-葡萄糖醛酸、D-半乳糖醛酸，另外还有D夫糖、D-鸡纳糖、D-芹糖、乙酰基和乙酰氨基糖等，多 数苷为吡喃型糖，但也有呋喃型糖。
有些苷元或糖上还有酰基等。这些糖多以低聚糖形式与 苷元成苷，成苷位置多为3位或与28位羧基成酯皂苷 （ester saponins），另外也有与16、21、23、29位等羟 基成苷的。
第七章 三萜类化合物
一、概述 二、结构与分类 三、理化性质 四、提取分离 五、鉴别
一、 概述
一、概述
多数三萜（triterpenoids）是由30个碳原子组成 的萜类化合物，根据“异戊二烯法则”，多数三 萜被认为是由6个异戊二烯（三十个碳）缩合而成 的，该类化合物在自然界广泛存在. 有的以游离形式存在
三萜类化合物
一般C-3位均有-OH，或游离，或成苷，或氧取代
例如：
O
OH
OH
3
HO
H
HO
羊毛脂醇
OH
黄芪醇
二、分类
（一）四环三萜（tetracyclic triterpenoids） 3、 大戟烷型（euphane） 结构特点：
A/B、B/C、C/D环：均为反式 （与达玛烷型一致） 10、14位：β-角甲基 13位：α-角甲基
21 11 1 19 9 2 3 12 18 22 20 17 16 15
1 4 10 14 13
24 23 25 27
26
C 13 D H 14
30 7
A
4 28
10 5
B
6
H 8
17
20
H
29
lanostane
二、分类
（一）四环三萜（tetracyclic triterpenoids）
2、羊毛脂烷型（lanostane）
A
4
B
6
8
30
7
H
29
dammarane
二、分类
（一）四环三萜（tetracyclic triterpenoids）
1、达玛烷型（dammarane） 结构特点：
A/B、B/C、C/D环：均为 反式 8、10位：β-角甲基 14位：α-角甲基 13位： β-H 17位：β-侧链 20位构型：R 或 S
C 13 A
10
R或S 20
H
17
D
B 8
H
dammarane
二、分类
（一）四环三萜（tetracyclic triterpenoids）
三萜类化合物
29 19
COOH
▪ 3、羽扇豆烷型19 H21
18 22
第三节 三萜类化合物的理化性质
一、一般物理性质
1、性状
➢ 苷元多有较好的结晶 ➢ 苷多为无定型粉末 ➢ 具有苦和辛辣味,对人体粘膜有刺激性,还具有吸湿性.
2、溶解性
➢ 苷元能溶于石油醚、苯、乙醚、氯仿等。 ➢ 苷极性较大,可溶于水,易溶热水,热甲醇,热乙醇和稀醇,难溶于
3、溶血实验 供试液1毫升，水浴蒸干，0.9%生 理盐水溶解，加入几滴2%红细胞悬浮液，溶液 油浑浊变澄清，则溶血。
二、色谱检识 1、薄层色谱 吸附剂 ：硅胶 展开剂：游离三萜 环己烷-乙酸乙酯
苯-丙酮 氯仿-乙酸乙酯 三萜皂苷 氯仿-甲醇-水 正丁醇-醋酸-水 显色剂：10%硫酸、三氯乙酸等。
▪ 2、纸色谱 ▪ 皂苷：水为固定相 ▪ 苷元：甲酰胺为固定相
第七节 含皂苷的中药实例 一、人参
➢ 五加科人参属植物人参的干燥根。 ➢ 有大补元气、生津止渴、调养营卫。
（一）主成分结构、性质 1、皂苷 含量约4%，根须中的含量高于
主根。
➢ 人参总皂苷（Rx)。 ➢ 根据皂苷元的不同分为A、B、C三类。
▪ （1）分类及主要化合物
▪ A型
➢ 人参皂苷-苷元为20（S)原人参二醇（最
3分布
三萜类化合物在菌类、蕨类、单子叶和双子叶植物、动 物及海洋生物中均有分布，尤以双子叶植物中分布最 多
➢ 游离三萜：豆科、菊科、大戢科、卫矛科 ➢ 三萜苷类：豆科、五加科、桔梗科、远志科、葫芦科、
毛茛科等分布较多
➢ 常用中药人参、黄芪、甘草、三七、桔梗、远志、柴
胡等都含有皂苷（三萜苷）。
第二节 三萜类化合物的结构与分类
齐墩果酸
肖咪 2013110419
一、来源及功效 二、三萜类化合物的提取及分离 三、齐墩果酸的结构鉴定 四、齐墩果酸衍生物的结构鉴定
一、来源及功效
枫杨(PterocaryastenopteraDC1)为胡桃科枫杨属
植物,是我国云南西双版纳地区河岸季雨林的代表群落 类型，作为传统中药,具有杀虫止痒,利尿消肿的功效。
三、齐墩果酸的结构鉴定
CD谱：
化合物1在220nm处呈现正的 Cotton效应,根据扇形规则结合 八区律观察化合物,可以确定齐 墩果酸的结构类型为17S。
三、齐墩果酸的结构鉴定
结论：将化合物1与参考文献对照,碳谱数据基
本一致,与齐墩果酸对照品共薄层, 三种
展开剂系统Rf值均一致,故确定化合物1 为齐墩果酸。
三、齐墩果酸的结构鉴定
三、齐墩果酸的结构鉴定
三、齐墩果酸的结构鉴定
13C-NMR谱：
共有30个碳信号 3位连氧碳信号δ 79.0 12、13位特征烯碳信号δ 122.6、 δ 143.6 28位羧基碳信号δ 183.4 其余信号为三萜骨架信号
（乌苏酸:δ (C12)125.5, δ(C13)138.0,因此对于用质谱不能区别 的齐墩果酸和乌苏酸,可用13C核磁共振谱进行区别。）
13C-NMR谱中检测到2个双键碳δ123.43(d,C12),
四、齐墩果酸衍生物的结构鉴定 通过解析该化合物的1H-1H COSY、HMQC及HMB谱, 确定化合物2具有2,3,23-三羟基齐墩果酸的平面结构。根据 H-2和H-3之间的偶合常数(J2,3=9.5 Hz),H-2和H-3均应处于 a键上,由此确定2-OH为α型,3-OH为β型。 鉴定化合物2为2 α,3 β,23-三羟基齐墩果酸
灵芝中有效成分提取方法
灵芝中有效成分提取方法
灵芝是一种珍贵的中草药，在传统中医药和现代药物领域都有重要的应用价值。
灵芝
中的有效成分主要包括多糖、三萜类化合物和蛋白质等。
提取这些有效成分可以增强灵芝
的药用价值，下面将介绍一些灵芝中有效成分的提取方法。
一、多糖的提取方法：
1. 热水提取法：将灵芝切碎，加入适量的开水，水温保持在80-100℃之间，连续浸
泡2-3小时。
之后，过滤得到提取液，再用醇沉淀得到多糖。
2. 酶解法：将灵芝粉末加入含有酶的溶液中，温度保持在50℃左右，酶解2-3小时。
之后通过离心或过滤，得到多糖的提取液。
二、三萜类化合物的提取方法：
1. 乙醇提取法：将灵芝切碎，加入适量的乙醇中，浸泡12-24小时。
之后，过滤得到提取液，再用乙醇沉淀得到三萜类化合物。
2. 超临界流体萃取法：利用超临界二氧化碳作为溶剂，将灵芝粉末加入超临界流体
萃取设备中，进行高温高压的提取。
之后通过减压，得到三萜类化合物的提取物。
需要注意的是，在提取灵芝中有效成分的过程中，应根据具体成分的性质和目的选择
合适的提取方法。
提取过程中也需要控制温度、时间、浓度等条件，以保证提取效果和成
分的纯度。
为了确保提取物的质量和安全性，提取过程中还要注意卫生和消毒，以防止细
菌和其他有害物质的污染。
灵芝中有效成分的提取方法多种多样，选择合适的提取方法可以充分发挥灵芝药用价值。
在提取过程中要严格控制条件，确保提取物的纯度和质量。
提取物的应用还需要进一
步研究和开发，以发挥其在医药和保健品领域的作用。
第八章 三萜类化合物(部分)
第一节 概 述
一、定义 多数由30个碳原子组成的萜类化合物，分子中有
6个异戊二烯单位，通式(C5H8)6 。
在自然界分布广泛，有的以游离体形式存在于 植物，即三萜皂苷元形式。有的与糖结合成苷的 形式存在，即三萜皂苷形式。
（二）四环三萜
在中药中分布很广。
1. 结构特征：
21
22
HO
H
O
O
OH
AcO
HO
H
H
O
OH
H
M e l i 楝a c烷a n e s
川楝素
异川楝素
⑦ 环菠萝蜜烷(cycloartane)型 又称环阿屯烷型。此类化 合物分子中虽然有5个碳环，但其基本碳架与羊毛脂甾烷 很相似，差别仅在于10位上的甲基与9位脱氢形成三元 环，且化学转变的关系也较密切，故仍将此类化合物视 为四环三萜。
A ra(p)
H COOR
H
H
地 榆 皂 甙 B R=H 地 榆 皂 甙 E R = 3-A c-glc
④木栓烷型
由齐墩果烯经甲基移位转变而来。与其他类型五环三 萜皂苷相比，最明显的区别在于4位只有一个甲基。
H
H
H 齐墩果烯
27
H
H
H
28
25
26
24 23
木栓烷
⑤何帕烷型和异何帕烷型 何帕烷型的结构特点：与羽扇豆烷型的主要区
含齐墩果酸的植物很多，但含量超过10%的很少，从刺五 加、龙牙葱木中提取齐墩果酸，得率都超过10%，纯度在95%以 上，是很好的植物资源。
甘草中含有甘草次酸和甘草酸 [又称甘草皂苷或甘草甜 素]P258。甘草次酸和甘草酸都有促肾上腺皮质激素(ACTH) 样作用，临床上用于抗炎和治疗胃溃疡。
第七章三萜类化合物
RO
H
甘草次酸 甘草酸 乌拉尔甘草皂苷A 乌拉尔甘草皂苷B 黄甘草皂苷
R H β-D-gluA2-α-D-gluAβ-D-gluA2-β-D-gluAβ-D-gluA3-β-D-gluAβ-D-gluA4-β-D-gluA-
甘草酸 (Glycyrrhizic acid) 分子式及分子量：C42H62O16 ; 822.92 药理作用：甘草酸具有肾上腺皮质激素样作用，能抑制毛细血 管通透性，减轻过敏性休克的症状。可以降低高血压病人的 血清胆甾醇。 甘草次酸 (Glycyrrhetinic acid) 分子式及分子量：C30H46O4 ; 470.64 药理作用：甘草次酸具有抗菌、抗肿瘤及肾上腺皮质激素样 作用，可制成抗炎抗过敏制剂，用于治疗风湿性关节炎、气 喘、过敏性及职业性皮炎、眼耳鼻喉科炎症及溃疡等。
20 22 23 17 16 15 24 8 4 19 10 5 29 9 18 13 14 30
26
H
8 7
H
6
H
羊毛脂甾烷
存在于自然界中的四环三萜主要有以下类型。
1、羊毛脂甾烷型 (Lanostanes)
2、大戟烷型 (euphane)
3、达玛烷型 (Dammaranes)
本章内容
一、概述
二、结构与分类
三、理化性质 四、提取与分离 五、结构测定
第一节
子。
概
述
三萜 (triterpenes)：多数通式为 (C5H8)6，基本母核含30个碳原
三萜皂苷 （Triterpenoid Glycosides)：
由三萜与糖而成的一类苷类化合物。多数可溶于水，且水溶
液振摇后产生似肥皂水溶液样泡沫，结构中多有羧基，故又
2013年中药士考试辅导：三萜类化合物的提取与分离
三萜类化合物的分离1.分段沉淀法：（适合于皂苷的分离）①原理：利用皂苷难溶于乙醚、丙酮等溶剂。
②操作：将粗皂苷先溶于少量甲醇或乙醇中，然后逐滴加入乙醚、丙酮或乙醚-丙酮（1：1）的混合溶剂（加入量以能使皂苷从醇溶液中析出为限），边加边摇匀，皂苷即可析出。
③分段沉淀法，逐渐降低溶剂极性，极性不同的皂苷就可分批沉出，从而达到分离的目的。
分段沉淀法虽然简便，但难以分离完全。
2.胆甾醇沉淀法①原理：皂苷可与胆甾醇生成难溶性的分子复合物（三萜皂苷与胆甾醇形成的复合物不如甾体皂苷与胆甾醇形成的复合物稳定）。
②操作：先将粗皂苷溶于少量乙醇中，再加入胆甾醇的饱和乙醇溶液，至不再析出沉淀为止（混合后需稍加热），滤过，取沉淀用水、醇、乙醚依次洗涤以除去糖类、色素、油脂和游离的胆甾醇，然后将此沉淀干燥后，用乙醚回流提取，胆甾醇被乙醚提出，使皂苷解脱下来，残留物即为较纯的皂苷。
但是，此法已经基本不被应用。
3.色谱分离法色谱法是目前分离三萜类化合物最常用的方法，通常采用多种色谱法相组合的方法。
①吸附柱色谱法；②分配柱色谱法；③高效液相色谱法；④大孔树脂柱色谱；⑤凝胶色谱法。
（1）吸附柱色谱法：①常用方法，可用于分离各类三萜化合物。
②依据所用的吸附剂性质的不同，分为正相吸附柱色谱和反相吸附柱色谱。
③正相吸附柱色谱的吸附剂常用硅胶。
④反相柱色谱通常以键合相硅胶Rp-18、Rp-8或Rp-2等为填充剂。
（2）分配柱色谱法：多用于分离皂苷，常用硅胶等作为支持剂，固定相为3%草酸水溶液等，流动相为含水的混合有机溶剂：如氯仿-甲醇-水，正丁醇-水等。
（3）高效液相色谱法：是目前分离皂苷类化合物最常用的方法，分离效能较高。
用于皂苷的分离制备一般采用反相色谱柱，以甲醇-水、乙腈-水等系统为洗脱剂。
1 2 下页。
灵芝中三萜类有效成分的提取技术
灵芝中三萜类有效成分的提取技术任奕（本溪化学工业学校，辽宁本溪１１７００４）摘要：以灵芝三萜类成分的提取工艺研究成果为基础，介绍溶剂提取、超声波提取、酶解提取等传统提取方法，以及高压超临界ＣＯ２提取、高压脉冲电场提取等现代提取方法的研究进展，为进一步开展灵芝相关研究提供参考。
关键词：灵芝；三萜类成分；提取工艺；提取率中图分类号：Ｒ２８４．２文献标识码：Ａ文章编号：1674-1161（20２０）０２-00５２-0２灵芝（ＧａｎｏｄｅｒｍａＬｕｃｉｄｕｍＫａｒｓｔ）是孔菌科真菌灵芝的子实体，为我国传统的药食兼用的大型真菌，其孢子、菌丝和子实体均可利用，具有祛病延年、滋补强壮的作用。
灵芝三萜化合物是从灵芝中分离出来的一类具有生物活性的成分，具有较强的生理活性，能够增强免疫力、延缓衰老、抗肿瘤、抗病毒、降低胆固醇等。
为有效提取灵芝中的三萜类成分，诸多学者对相关提取工艺进行研究和优化，旨在为灵芝三萜类成分的开发利用提供数据支持和试验基础。
１灵芝三萜类成分的提取技术１．１溶剂提取法溶剂提取法包括乙醇热提、乙醇回流提取、冷凝回流提取和索氏提取等。
其中乙醇回流提取法较为常用。
李康等为确定破壁灵芝孢子粉中总三萜的最佳提取工艺，并对其体外抗肿瘤活性进行评价。
最佳提取工艺条件为：９５％乙醇，液料比６０∶１，在８５℃条件下回流提取２ｈ，提取２次，总三萜的含量可达６．４５％。
段晓颖等优选灵芝总三萜最佳提取与精制工艺参数时，以灵芝总三萜、灵芝酸Ａ为考察指标，通过均匀设计确定总三萜提取最佳工艺参数。
灵芝总三萜提取工艺为８倍量，用９００ｍＬ／Ｌ乙醇提取３次，每次１００ｍｉｎ，提取率达８８．３９％。
１．２超声辅助提取法超声波辅助提取是利用超声波的空化作用、机械作用和热效应等加速细胞内有效物质的释放、扩散和溶解，不仅提取率高，而且能够避免高温对有效成分的影响。
王石磊等选取云南文山产的竹灵芝作为研究对象，考察乙醇浓度、温度、料液比、提取时间等不同提取条件对灵芝中三萜类成分提取得率的影响，再利用正交试验法优化提取条件，最终确定最佳提取条件为：乙醇浓度１００％，料液比１∶２０，浸提温度４０℃，提取时间２０ｍｉｎ，提取得率达１．８％。
中药化学三萜
25
21
OH
20
17 13
14 8
O O
H
达玛烷
HO H
酸枣仁皂苷元
4、葫芦素烷型 B/C为顺式稠合； 5，8，9-β；10-α
葫芦烷
罗汉果甜素V
6
,
g
1
l
c
2
,
1
O glc glc
H
OH
HO
H
H
1, 6 glc glc O
H
5、原萜烷型 C20-S构型；10，14-βCH3；8-αCH3
泽泻萜醇A
（3）Rosen-Heimer反应：纸片反应 25%三氯醋酸乙醇液；100℃显红-紫色
（4）Salkowski反应：试管 氯仿-浓硫酸；硫酸层(下层)——绿色荧光 氯仿层（上层）—— 红色或青色
（5）Tschugaer反应：试管
冰醋酸-乙酰氯-ZnCl2 ；稍加热，红色
（6）芳香醛-硫酸或高氯酸反应：香草醛-定量
均有旋光性。
3、溶解性
游离三萜——溶于有机溶剂，不溶于水。 三萜皂苷——可溶于水，易溶于热水、热
甲醇、热乙醇和稀醇，难溶于低极性有 机溶剂。
正丁醇常作为皂苷的提取溶剂。
4、发泡性： 持久、不因加热而消失。
5、溶血性
溶血指数:
在一定条件（等渗、缓冲、恒温）下 能使同一动物来源的血液中红细胞完全溶 解的最低浓度。
2、 13C-NMR
C=O：150-210ppm C=C ：110-180ppm 糖端基C：90-110ppm 苷元与糖连接的C：70-85ppm 糖上其他C：65-85ppm 苷元上的C：10-70ppm 季C：37-43ppm
用于区分五环三萜的类型。
三萜类化合物的提取
1 三萜类化合物的提取分离1.1 传统的三萜类成分提取分离方法一般根据其溶解性采用不同的有机溶剂进行提取分离，如：将药材用乙醇浸提3次，提取液浓缩得到的浸膏溶于适量水中，然后用氯仿萃取3次，合并氯仿层，减压浓缩到原体积的1/3，用饱和NaHCO3溶液碱化，取氯仿层部分浓缩，得到棕色浸膏将所得浸膏用硅胶柱层析分离等。
该方法需要消耗大量的有机溶剂易造成医药污染，且提取的选择不高，使制得药物剂型单一，多为汤剂或者丸、散等剂型，服用量大且携带不便，不利于中药的现代化。
1.2 超临界流体萃取法(SFE)由于SFE在萃取过程中几乎不用有机溶剂，萃取物中无有机溶剂残留，对环境无污染，且提取效率高，节约能耗等特点，在中药化学成分的萃取分离领域得到了蓬勃发展。
崔星明等［3］采用SFE得到的芦笋提取物，用甲醇溶解，采用液相色谱-质谱联用仪检测得到了56个组分。
发现有保留时间和熊果酸基本一致的峰，其质谱分子离子峰和特征碎片峰都与熊果酸的一致。
雒廷亮等［4］采用SFE对山茱萸中熊果酸提取方法的研究，结果表明，在熊果酸提取率基本相同的前提下，SFE不仅可以实现清洁生产，而且易于实现工业化。
1.3 半仿生提取该法模拟口服给药，为经消化道给药的中药制剂设计了一种新的提取工艺，即将药材先用一定pH值的酸水提取，继以一定pH 值的碱水提取，提取液分别滤过、浓缩、制成制剂，据报道此种方法经济实用，可保证疗效［5］。
龚慕辛等［6］通过比较水、不同浓度的乙醇、半仿生法及碱水提取对齐墩果酸提出量的影响，结果显示，半仿生提取齐墩果酸，提出量远高于一般水提。
以pH=12的碱液提取女贞子可以使齐墩果酸提出量大于75%乙醇的提出量，并且齐墩果酸不是以游离的形式存在，吸收利用率将提高，提取成本也大大降低。
1.4 超声循环技术黄书铭等［7］研究灵芝三萜类化合物的提取工艺时，在常规提取方法的基础上，增加超声循环的处理步骤，通过实验对比，超声循环提取所需各种溶剂用量减少，提取时间缩短，目的产物提取率提高了40%。
萜类化合物提取和分离及生理生态功能
萜类化合物提取和分离及生理生态功能引言：一次代谢（primary metabolism）指在植物、昆虫或微生物体内的生物细胞通过光合作用、碳水化合物代谢和柠檬酸代谢，生成生物体生存繁殖所必须的化合物，如糖类、氨基酸、脂肪酸、核酸及其局和衍生物、乙酰辅酶A的代谢过程，这些化合物称为一次代谢产物。
一次代谢过程对各种生物来说，基本上是相同的，其代谢产物广泛分布于生物体内；而二次代谢是从某些一次代谢产物作为起始原料，通过一系列特殊生物化学反应生成表面上看来似乎对生物本身无用的化合物，如萜类、甾体、生物碱、多酚类等，这些二次代谢产物就是人物所熟知的天然产物[1]二次代谢产物在生成它们的生物体内有何影响或作用及对环境的作用，随着对这些天然产物的研究，开始逐步浮出水面。
例如，栎树中的鞣酸是幼虫生长的抑制剂，可以保护保护栎树生长。
二次代谢产物可以成为非滋养性化学物质，它能控制周围环境中其他生物的生态学。
由于天然产物数量种类繁多，结构迥异，根据研究的需要，人为的依据天然产物骨架和化学性质分成了八类①糖盒糖苷；②生物碱；③黄酮类；④萜类；⑤甾体类；⑥醌类；⑦香豆素和木脂素；⑧其他类。
本文就萜类化合物的提取分离和生物学特性做一综述。
关键词：萜类，提取分离，生理生态功能1. 萜类化合物的概述萜类化合物（terpenoid）是一一类异戊二烯（C10H16）的聚合体及其含氧的饱和程度不等的衍生物（分子式含C数在15~40个）的统称。
从结构上可划分为若干个异戊二烯单位，称为异戊二烯规则。
但是生物体内萜类并非异戊二烯相互聚合二形成的，在植物体内萜类的真正前提是由乙烯生成的甲戊二羟酸，称为生源的异戊二烯规则[2]。
萜类化合物按照异戊二烯单位的多少可分为单萜、二萜、三萜等，见表1表1 萜类化合物的分类类别异戊二烯单位数（n）含碳数存在单萜（mono-terpenoid） 2 10 挥发油（精油）倍半萜（sesqui-terpenoid） 3 15 挥发油、树脂二萜（di-terpenoid） 4 20 树脂三萜（tri-terpenoid） 6 30 皂苷、树脂四萜（tetra-terpenoid）8 40 色素多萜（poly-terpenoid）>8 >40 天然橡胶倍半萜约有7000多种，是萜类化合物中最大的一类[3].二萜类以上也称“高萜化合物”[4]。
中药化学第八章三帖类化合物
第四节 三萜类化合物的提取与分离 一、三萜类化合物的提取 1．醇类溶剂提取法
为提取皂苷首选方法
（1）含油脂高的原料可事先用石油醚脱脂以后再用醇提， （2）过滤时要趁热。
连一去氧己糖 479[(M＋Na)-162-162-146-132]＋准分子离子峰－己糖×2－去氧己糖－戊糖：
去氧糖前连戊糖，且此四个单糖组成一条糖链 479＝齐墩果酸分子量＋Na （苷元）：糖链全部打掉。
以上FD-MS测定数据与该三萜皂苷的分子量及糖链连接顺序完全吻合。
三、NMR谱 1．1H－NMR: 可提供甲基质子、连氧碳上质子、烯氢质子及糖端基质子结构信息。
环的碎片峰.
由于分子中存在C12双键，具环己烯结构，故C环易发生RDA裂 解，出现含A、B环和D、E环的碎片离子峰。
(2) 羽扇豆醇型三萜皂苷元 其特征碎片离子峰为失异丙基碎片离子峰[M-43] + 。
2．三萜皂苷 主要以FD-MS和FAB-MS测定。
例 :齐墩果酸-3-0-β-D-葡萄糖基-(1→4)-0 -β -D-葡萄糖基-(1→3)0-α-L-鼠李糖基-(1→2)-0- α -L-阿拉伯糖苷.
2．大戟烷(euphane)型
17 13
H 14
H H
如
结构特点 是羊毛脂烷的立体异构体， C13、C14和C17 上的取代基构型与羊毛脂烷相反，分别是 13α、14β、17α-构型。
COOH
9 8 7
O H
乳香二烯酮酸 △7（8） 异乳香二烯酮酸 △8(9)
3．达玛烷(dammarane)型
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第四节 三萜类化合物的提取与分离
二、三萜皂苷的分离
1.分段沉淀法
利用皂苷难溶于乙醚、丙酮等溶剂来分离。
皂苷/醇液+ 滴加乙醚等→
优点—简便
沉淀
5 缺点—分离不完全，不易获得纯品
5
第四节 三萜类化合物的提取与分离
二、三萜皂苷的分离 2.胆甾醇沉淀法
皂苷（醇提液）
胆甾醇
沉淀
水，醇，乙醚洗涤除杂
天然药物化学
第九章 三萜及其苷类
第四节 三萜类化合物的提取与分离
一、三萜皂苷的提取与分离
1. 三萜苷元类化合物的提取 多采用极性较小的溶剂进行回流提取 2. 三萜皂苷类化合物的提取 多采用极性较大的溶媒提取，如甲醇、乙醇、含水醇 等
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第四节 三萜类化合物的提取与分离
一、三萜皂苷的提取
1.醇类溶剂提取法：醇提取物依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯，正丁醇 等溶剂进行分部提取，然后进一步分离，三萜成分主要从氯仿部位中 获得。 2.酸水解－有机溶剂萃取法：以获得苷元为目的。由于水解反应比较强 烈，发生结构变异而生成次生结构，得不到原始皂苷元。欲获得原始 皂苷元，则应采用温和酸水解，两相酸水解、酶水解或Smith降解等 方法。 3.碱水提取法：酸性皂苷。
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第四节 三萜类化合物的提取与分离
二、三萜皂苷的提取分离实例
（一）人 参
1．结构分类
人参的根、茎、叶、花及果实中均含有多种人参皂苷 (ginsenosides)。人参根中总皂苷的含量约5％，根须中人参皂苷的含量
比主根高。目前已经确定化学结构的人参皂苷有人参皂苷Ro、Ral、Ra2
、Rbl、Rb2、Rb3、Rc、Rd、Re、Rf、Rgl、Rg2、Rg3、Rhl及Rh2、Rh3等30 多种，根据皂苷元的结构可分为A、B、C三种类型：
（四）柴 胡 1.结构与分类
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第四节 三萜类化合物的提取与分离
二、提取分离实例
（四）柴 胡 2.提取分离
柴胡皂苷a、d、c 的提取分离
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第四节 三萜类化合物的提取与分离
二、三萜皂苷的提取分离实例
（二）甘 草
1．结构
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甘草皂苷
13
甘草次酸
第四节 三萜类化合物的提取与分离
二、三萜皂苷的提取分离实例
（二）甘 草
2．提取分离
（1）甘草酸铵盐的制备
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第四节 三萜类化合物的提取与分离
二、提取分离 实例
（二）甘 草
2．提取分离
（2）甘草酸单钾 盐的制备
沉淀
乙醚回流
6
乙醚液 （胆甾醇）
6
残渣 （皂苷）
第四节 三萜类化合物的提取与分离
二、三萜皂苷的分离 3.色谱分离法 吸附色谱：固定相为中性氧化铝、硅胶，洗脱剂为有机溶 媒（极性较小、或中等极性皂苷） 分配色谱：如反相HPLC、MPLC、ODS、纸色谱（极性 较大皂苷）、DCCC、HSCCC。 大孔吸附树脂色谱：一种新型非离子型高分子聚合物吸附剂。 凝胶色谱：分子筛的作用。
（三）黄 芪 1.结构与性质
从膜荚黄芪中分离鉴定近20个皂苷，绝大多数为环菠萝蜜烷型三萜皂 苷。如黄芪苷Ⅰ(astragalosideⅠ)、黄芪苷V(astragaloside V)、黄芪苷 Ⅶ(astragaloside Ⅶ)等。中国药典主要检测其中的黄芪苷IV(astragaloside IV)
17 ，也叫黄芪甲苷。这些皂苷在酸性条件下水解时，可获得共同的皂苷元环
黄芪醇。
17
第四节 三萜类化合物的提取与分离
二、三萜皂苷的提取分离实例
（三）黄 芪
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二、三萜皂苷的提取分离实例
（三）黄 芪 2.提取分离
黄芪甲苷（黄芪苷IV）的提取分离
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第四节 三萜类化合物的提取与 胡
柴胡，药用部位为伞形科植物柴胡或狭叶柴胡的干燥根。春、秋 二季采挖，除去茎叶及泥沙，干燥。柴胡是常用解表药。
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性味苦、微寒，归肝、胆经。有和解表里，疏肝升阳之功效。用
于感冒发热、寒热往来、疟疾、肝郁气滞、胸肋胀痛、脱肛、子宫脱 垂、月经不调。
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第四节 三萜类化合物的提取与分离
二、三萜皂苷的提取分离实例
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(1)人参二醇型－A型 (2)人参三醇型－B型 (3）齐墩果酸型－C型
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第四节 三萜类化合物的提取与分离
二、三萜皂苷的提取分离实例
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第四节 三萜类化合物的提取与分离
二、三萜皂苷的提取分离实例
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第四节 三萜类化合物的提取与分离
二、三萜皂苷的提取分离实例
（二）甘 草
甘草，为豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch.、胀果甘草 12 Glycyrrhiza inflata Bat.或光果甘草Glycyrrhiza glabra L.的干燥根和根茎 。分布于东北、华北、陕西、甘肃、青海、新疆、山东等地。 具有补脾益气，清热解毒，祛痰止咳，缓急止痛，调和诸药之功效。常 用于脾胃虚弱，倦怠乏力，心悸气短，咳嗽痰多，脘腹、四肢挛急疼痛，痈 肿疮毒，缓解药物毒性、烈性。 12
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第四节 三萜类化合物的提取与分离
二、三萜皂苷的提取分离实例
（三）黄 芪
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黄芪为豆科植物膜荚黄芪(Astragalus membranaceus)或蒙古黄芪的 根，具有补气升阳，固表止汗，利水消肿，生津养血，行滞通痹，
托毒排脓，敛疮生肌之功效。
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第四节 三萜类化合物的提取与分离
二、三萜皂苷的提取分离实例
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第四节 三萜类化合物的提取与分离
三、三萜皂苷的提取分离实例
（一）人 参
人参本品为五加科植物人参的干燥根。主产吉林、辽宁、黑龙江等省。 性味归经：甘、微苦，平。归脾、肺、心经。
8 功效：大补元气，复脉固脱，补脾益肺，生津，安神。
主治：用于体虚欲脱，肢冷脉微，脾虚食少便溏，气短乏力，肺虚喘 咳，津伤口渴，内热消渴，久病虚羸，惊悸失眠，阳痿宫冷；心力衰竭， 心原性休克。