奎屯垦区棉花黄萎病发生规律及防控技术研究

奎屯垦区棉花黄萎病发生规律及防控技术研究
摘要：测定了奎屯垦区棉花黄萎病致病类型，明确了该区棉花黄萎病发生与温、湿度等气象因子的关系；通过黄萎病抗性鉴定，表现耐病的品种（系）有１３个；利用选择性培养基以新陆早３５号为供试材料分析了棉花黄萎病发病与土壤中黄萎病菌微菌核数量之间的关系。

获得了新陆早３５号菌核含量致病的临界点。

调查了生物药剂萎菌净防治棉花黄萎病的效果。

关键词：棉花黄萎病；发生规律；防控技术；致病临界点；奎屯垦区
ａｂｓｔｒａｃｔ：ｔｈｅｐａｔｈｏｇｅｎｉｃｔｙｐｅｏｆｃｏｔｔｏｎ vｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍｗｉｌｔｉｎ
ｋｕｉｔｕｎｒｅｃｌａｍａｔｉｏｎａｒｅａ was determined；ａｎｄｔｈｅｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅｏｆｃｏｔｔｏｎ v ｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍｗｉｌｔａｎｄｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ，ｒｅｌａｔｉｖｅｍｏｉｓｔｕｒｅ，ｒａｉｎｆａｌｌ was defined． it was ｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｄ that 13 ｃｕｌｔｉｖａｒｓｗｅｒｅｒｅｓｉｓｔａｎｔ against vｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ．ａｎｄｔｈｅｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎｄｉｓｅａｓｅｉｎｃｉｄｅｎｃｅｏｆｃｏｔｔｏｎａｎｄｔｈｅｎｕｍｂｅｒｏｆｖｅｒｔｉｃ
ｉｌｌｉｕｍｄａｈｌｉａｅ was analyzed ｂｙｓｅｌｅｃｔｉｖｅｍｅｄｉｕｍｗｉｔｈｘｉｎｌｕｚａｏ３５．ｔｈｅｎｔｈｅｃｒｉｔｉｃａｌｐｏｉｎｔｏｆｐａｔｈｏｇｅｎｉｃｉｔｙｏｆｓｃｌｅｒｏｔｉａｏｎｘｉｎｌｕｚａｏ３５ was obtained；ａｎｄｔｈｅ control ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｂｉｏｔｉｃ fｕｎｇｉｃｉｄｅ dａｈｌｉａｅｎｅｔ were investigated．
ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｃｏｔｔｏｎ vｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍｗｉｌｔ；ｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ；ｃｏｎｔｒｏｌｍｅｔｈｏｄｓ；ｃｒｉｔｉｃａｌｐｏｉｎｔｏｆｐａｔｈｏｇｅｎｉｃｉｔｙ；ｋｕｉｔｕｎｒｅｃｌａｍａｔｉｏｎａｒｅａ
由大丽轮枝菌（ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍｄａｈｌｉａｅｋｌｅｂ．）引发的棉花黄萎病是土传植物维管束萎蔫病害，是危害棉花的最重要病害之一。

该病在奎屯垦区致病力明显增强，发病时期不断提前，极大地影响了棉花的生产和棉农的植棉积极性［１，２］。

土壤中棉花黄萎病菌的大量积累是该病发生流行的重要原因［３，４］。

目前，防治棉花黄萎病的主要方法是选育与应用抗病品种。

药剂防治中使用化学药剂对环境造成了危害。

拮抗微生物和农业措施防病效果都不是很理想［５］。

国外已有报道，拮抗微生物的种群密度大小与其寄主病原菌种群密度的相关性是保持防治
效果稳定的重要条件，其相关性越大防治的效果越显著［６，７］。

希腊、澳大利亚等国已将生物防治黄萎病的重点转向黄萎菌的初侵染源——微菌核［８，９］，目前尚未见对土壤中黄萎病菌核数量与品种抗病性之间的相互关系和致病临界点进行研究。

因此，明确奎屯垦区棉花黄萎病的致病类型和发生发展规律，客观评价主栽品种的抗黄萎病能力，深入分析土壤中黄萎病菌核含量与品种抗病性之间的相互关系和致病的临界点，对今后品种布局以及棉花黄萎病的综合控制有很重要的意义。

１材料和方法
１．１材料和试剂
以新陆早３５号和农七师主栽棉花品种、新育品种等３８份材料为供试材料。

采集不同类型棉田的土壤，用直径10 ｃｍ的网孔直径为３８μｍ和１５０μｍ的网筛过筛。

选择性培养基：改良ｍｓｍ培养基［３］（玻璃纸浸出液、蔗糖２ｇ、ｅｄｔａ－ｎａ２０．１５ｇ、２ｍｏl／ｌ的ｍｇｓo ４·７ｈ２ｏ０．５ｍｌ、２ｍｏl／ｌ的ｋｎｏ３５ｍｌ、1 ｍｏｌ／ｌ的ｋ２ｈｐｏ４２ｍｌ，ｔｅｒｇｉｔｏｌ－ｎｐ１０１ｍｌ、ｂｉｏｔｉｎ 1 ｍｇ、1 ｍｏｌ／ｌ的ｔｒｉｓ３５ｍｌ、ｌｍｏｌ／ｌ的ｔｒｉｓ－ｈｃｌ１５ｍｌ、琼脂１５ｇ、蒸馏水１ 000 ｍｌ、土霉素５０ｍｇ／ｌ、青霉素２００ｍｇ／ｌ）。

１．２病菌的筛选
采用土壤水筛法［３］称取上述土样2．０ｇ，共３份，每份分别放入盛有２００ｍｌ水的三角瓶中，加入玻璃珠以刚好铺满三角瓶底部为宜，静置１０ｍｉｎ，在２００ｒ／ｍｉｎ的摇床上摇３０ｍｉｎ。

然后倒入上层孔径１５０μｍ、下层孔径３８μｍ的双层细筛里，在自来水下将泥土冲洗干净。

将留在下层筛网上的土壤残留物全部转移到５0 ｍｌ三角瓶中，用无菌水定容到2０ｍｌ。

将定容好的土样液用移液枪每次均匀吸取２ｍｌ于msm培养基表面均匀涂布，每种培养基接种10皿（接种前将三角瓶中的土样液充分摇匀），放在超净工作台上吹干，在２５℃下黑暗培养，分别在１、２、３、４周后于体视显微镜下进行检查。

每种培养基10个皿的检验结果数目之和就是所测2 ｇ土样中所含微菌核的量。

试验设３次重复。

1.3 生物药剂防治
供试药剂为可湿性粉剂萎菌净（河北省农林科学院植物保护研究所提供）。

棉花播种前用种子重量10%的药剂拌种。

试验在本所黄萎病圃进行，设拌种处理、未拌种处理、新陆早6号未拌种处理3种处理方式。

设3次重复。

每处理种植2膜8行，行长6 m，每小区18 m2。

统一地块、品种，调查棉花黄萎病的发生情况，比较拌种与不拌种对棉花黄萎病发生的影响。

２结果与分析
２．１奎屯垦区棉花黄萎病菌的致病力
采集奎屯垦区棉田棉花黄萎病病株，并对黄萎病菌进行了分离、鉴定。

病菌菌落在ｐｄａ平板上正面为灰色，背部为黑色，在２０～２５℃条件下生长最快，３０℃下大部分菌株停止生长；并利用室内盆栽、定量蘸根接种法对分离菌株的致病力进行了测定，结果表明奎屯垦区的棉花黄萎病菌的致病力为中等。

２．２奎屯垦区棉花黄萎病的发生规律
棉花黄萎病的发生情况调查从５月份持续到９月份，从３年的调查结果（图１）来看，棉花黄萎病的发生均呈上升趋势，随着生育期的进程而加重。

２０１０年棉花黄萎病发病较重，是因为棉花现蕾后持续适温，有利于棉花黄萎病的发生。

２．３棉田土壤中棉花黄萎病微菌核数量
２０１０年比较了同一品种不同类型棉田土壤微菌核的种群数量之间的差异，分析了棉花黄萎病发病与土壤中黄萎病菌微菌核数量之间的关系。

随着土壤中菌核数的增多，棉花黄萎病的发生程度加重。

当土壤中菌核数在０～９个／ｇ时，新陆早３５号表现为耐病，即病情指数在３５以下；当土壤中菌核数大于９个／ｇ时，新陆早３５号表现为感病。

结果表明新陆早３５号菌核含量致病的临界点为９个／ｇ。

２．４主栽和新育棉花品种的抗病性
２０１０年在人工病圃种植了农七师近几年来的主栽品种、近年来审定的新品种、生产上抗性较好的品种以及我所近几年培育的新品系共３７个（份），通过黄萎病抗性鉴定，表现耐病的品种（材料）为：８１－３、ｇ－９５８、早３３、早３８、早４１、早４２、早４５、早４６、早４９、ｋｆ２、６２０、ｌ１、０８－１０６０。

２．５生物药剂防治效果
利用可湿性粉剂萎菌净进行了防治棉花黄萎病效果试验，从棉花的长势来看，棉花的整个生育期拌种处理整齐度好，生长势强。

从棉花黄萎病的发生情况看，蕾期、花期药剂拌种处理效果较好，到了铃期、吐絮期，随着棉花黄萎病发生高峰期的到来，药剂拌种效果有所减弱。

因此，该药剂拌种对于苗期、蕾期的棉花黄萎病有一定的抑制作用。

３讨论
本研究应用改良的棉花黄萎病菌土壤选择性培养基进行抗性监测具有成本低廉、不需要昂贵仪器设备等优点，可在棉花黄萎病土壤带菌量普查、病害危害风险及防治效果的监测评估等方面直接应用。

但是建立土壤棉花黄萎病有效的定量检测方法，受培养基、土壤接种量的影响，同时还可能受大田土壤采集方法、土壤制备方法以及计数方法等因素的影响，这些方面还值得深入探讨。

参考文献：
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