2实验二、花粉生活力测定
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
实验三 作物花粉生活力测定
前 言
花粉生活力测定在育种 上的应用：
1 ．杂交工作中贮藏花粉 的生活力 2．雄性不育系的鉴定
实验目的：
学习并初步掌握作物花粉生 活力测定的常用方法
测定方法:
（一）I-KI染色鉴定
（二）TTC染色鉴定
（三）花粉粒发芽鉴定
实验方法 I-KI染色鉴定：
正常的成熟花粉粒体积较大， 并含有大量的淀粉粒，遇I-KI 呈紫黑色，不正常的Fra Baidu bibliotek粉粒体 系较小、有时畸形、染色浅或 不染色。
在酒精灯上溶化培养基（20%蔗糖+2%琼 脂） — 用玻棒蘸取溶化的培养基在载玻 片上涂成薄层— 几分钟后涂（抖）上花 粉粒—置加有湿滤纸的培养皿中— 置 30℃培养箱保温—每隔15分钟观察一次 发芽情况—至大部分花粉管长度超过花 粉粒直径时调查100粒花粉，统计发芽率。
实验安排
1．每三人一组，一人做小麦、二人做 油菜；
用镊子夹一个花药于载玻片 上滴上一滴1%I-KI溶液 用镊子将花药夹碎并把碎片 去干净盖上盖玻片置显微 镜下观察。
实验步骤
TTC染色鉴定：
取花药5-10个用刀片割破两 头—置于指形管中—加 入几滴0.2%TTC溶液盖住 花药置30℃温度染色3060分钟同上压片镜检。
实验步骤
发芽鉴定：
小麦
油菜
2 ．准备 TTC 染色和发芽试验的材料， 置培养箱保温； 3．调试显微镜，I-KI染色鉴定； 4．TTC染色鉴定、发芽率调查。
作业
实验三、作物花粉生活力测定 1．测定方法和原理： （一）I-KI染色鉴定：正常的成熟花粉粒体积较大，并含有大量的淀粉 粒，遇I-KI呈紫黑色，不正常的花粉粒体系较小、有时畸形、染色浅或 不染色。 （二）TTC染色鉴定：具有生活力的花粉中含有脱氢酶，它能催化底物 使脱下的氢与TTC（氯化三苯基四氮唑）结合，生成红色化合物甲替。 凡有生活力的花粉呈红色，生活力弱的呈浅红色，无生活力的不显色或 成黄色。 （三）花粉粒发芽鉴定：在人工培养基上进行发芽试验，可以比较准确 地判断花粉的生活力。 2．实验结果： 材料 I-IK染色率% TTC染色率% 发芽率%
实验方法 TTC染色鉴定：
具有生活力的花粉中含有 脱氢酶，它能催化引物使脱下 的氢与TTC结合，生成红色化 合物甲替。凡有生活力的花粉 呈红色，生活力弱的呈浅红色， 无生活力的不显色或成黄色。
实验方法
花粉粒发芽鉴定：
在人工培养基上进 行发芽试验，可以比较 准确地判断花粉的生活 力。
实验步骤
I-KI染色鉴定：
前 言
花粉生活力测定在育种 上的应用：
1 ．杂交工作中贮藏花粉 的生活力 2．雄性不育系的鉴定
实验目的：
学习并初步掌握作物花粉生 活力测定的常用方法
测定方法:
（一）I-KI染色鉴定
（二）TTC染色鉴定
（三）花粉粒发芽鉴定
实验方法 I-KI染色鉴定：
正常的成熟花粉粒体积较大， 并含有大量的淀粉粒，遇I-KI 呈紫黑色，不正常的Fra Baidu bibliotek粉粒体 系较小、有时畸形、染色浅或 不染色。
在酒精灯上溶化培养基（20%蔗糖+2%琼 脂） — 用玻棒蘸取溶化的培养基在载玻 片上涂成薄层— 几分钟后涂（抖）上花 粉粒—置加有湿滤纸的培养皿中— 置 30℃培养箱保温—每隔15分钟观察一次 发芽情况—至大部分花粉管长度超过花 粉粒直径时调查100粒花粉，统计发芽率。
实验安排
1．每三人一组，一人做小麦、二人做 油菜；
用镊子夹一个花药于载玻片 上滴上一滴1%I-KI溶液 用镊子将花药夹碎并把碎片 去干净盖上盖玻片置显微 镜下观察。
实验步骤
TTC染色鉴定：
取花药5-10个用刀片割破两 头—置于指形管中—加 入几滴0.2%TTC溶液盖住 花药置30℃温度染色3060分钟同上压片镜检。
实验步骤
发芽鉴定：
小麦
油菜
2 ．准备 TTC 染色和发芽试验的材料， 置培养箱保温； 3．调试显微镜，I-KI染色鉴定； 4．TTC染色鉴定、发芽率调查。
作业
实验三、作物花粉生活力测定 1．测定方法和原理： （一）I-KI染色鉴定：正常的成熟花粉粒体积较大，并含有大量的淀粉 粒，遇I-KI呈紫黑色，不正常的花粉粒体系较小、有时畸形、染色浅或 不染色。 （二）TTC染色鉴定：具有生活力的花粉中含有脱氢酶，它能催化底物 使脱下的氢与TTC（氯化三苯基四氮唑）结合，生成红色化合物甲替。 凡有生活力的花粉呈红色，生活力弱的呈浅红色，无生活力的不显色或 成黄色。 （三）花粉粒发芽鉴定：在人工培养基上进行发芽试验，可以比较准确 地判断花粉的生活力。 2．实验结果： 材料 I-IK染色率% TTC染色率% 发芽率%
实验方法 TTC染色鉴定：
具有生活力的花粉中含有 脱氢酶，它能催化引物使脱下 的氢与TTC结合，生成红色化 合物甲替。凡有生活力的花粉 呈红色，生活力弱的呈浅红色， 无生活力的不显色或成黄色。
实验方法
花粉粒发芽鉴定：
在人工培养基上进 行发芽试验，可以比较 准确地判断花粉的生活 力。
实验步骤
I-KI染色鉴定：