溶血性贫血的实验室检查PPT课件
合集下载
溶血性贫血的实验室检查ppt课件
– 1. 红细胞破坏增加 – 2.红细胞代偿性增生
第二步 哪一类溶贫（病因检测）
一、溶血性贫血的筛查检测
（一）、红细胞破坏增加
1. RBC寿命测定 51Cr同位素标记 • 参考值：25~32天 • 半衰期<15天，说明有溶血存在
2.血浆游离血红蛋白测定 （plasma free hemoglobin）
有核红细胞 有核红细胞即幼稚红 细胞，均存在于骨髓中， 正常人外周血中不能见 到，在出生一周之内的 新生儿外周血中可见到 少量。 见于：①各种溶血性贫 血②红白血病③髓外造 血④骨髓转移肿瘤
二、哪一类溶血性贫血？
(一)红细胞膜缺陷的检验
红细胞渗透脆性试验
红细胞孵育渗透脆性试 验 酸溶血试验 蔗糖溶血试验 蛇毒溶血试验 CD55,CD59检测
染色质小体 又称豪－乔小体， 为紫红色圆形小 体，是核染色质 的残留部分。 常见于骨髓增生旺 盛的贫血如溶贫， 巨幼贫等
卡波环（Cabot) 一种紫红色成圆形或 8字形细线状环。可 能是纺锤体的残余 物或是胞质中脂蛋 白变性所致。 常与染色质小体同时 出现，见于溶血性 贫血、巨幼细胞贫 血、铅中毒及白血 病等。
8.血清胆红素（TBIL）增高，已非结合胆红素 （间接胆红素，IBIL）增高为主 【参考值】 TBIL 0~1.2mg/dl ( 0~20.5 ummol/L) IBIL 0~0.8mg/dl ( 0~13.7 ummol/L) 【临床意义】提示溶血
8.血清乳酸脱氢酶
【参考值】 80～220 U/L 【临床意义】提示溶血
RBC膜缺陷：遗传球、PNH RBC酶缺陷：G-6PD缺乏症 珠蛋白异常（肽链不平衡）：海洋性贫血、异常血红蛋 白病 免疫性溶贫: AIHA 、新生儿溶血症、药物诱发红细胞相 关抗体 机械损伤性：DIC 、 TTP、人造瓣膜 感染：疟疾 物理因素：灼伤 毒素：蛇毒 脾亢: 单核巨噬细胞功能亢进
第二步 哪一类溶贫（病因检测）
一、溶血性贫血的筛查检测
（一）、红细胞破坏增加
1. RBC寿命测定 51Cr同位素标记 • 参考值：25~32天 • 半衰期<15天，说明有溶血存在
2.血浆游离血红蛋白测定 （plasma free hemoglobin）
有核红细胞 有核红细胞即幼稚红 细胞，均存在于骨髓中， 正常人外周血中不能见 到，在出生一周之内的 新生儿外周血中可见到 少量。 见于：①各种溶血性贫 血②红白血病③髓外造 血④骨髓转移肿瘤
二、哪一类溶血性贫血？
(一)红细胞膜缺陷的检验
红细胞渗透脆性试验
红细胞孵育渗透脆性试 验 酸溶血试验 蔗糖溶血试验 蛇毒溶血试验 CD55,CD59检测
染色质小体 又称豪－乔小体， 为紫红色圆形小 体，是核染色质 的残留部分。 常见于骨髓增生旺 盛的贫血如溶贫， 巨幼贫等
卡波环（Cabot) 一种紫红色成圆形或 8字形细线状环。可 能是纺锤体的残余 物或是胞质中脂蛋 白变性所致。 常与染色质小体同时 出现，见于溶血性 贫血、巨幼细胞贫 血、铅中毒及白血 病等。
8.血清胆红素（TBIL）增高，已非结合胆红素 （间接胆红素，IBIL）增高为主 【参考值】 TBIL 0~1.2mg/dl ( 0~20.5 ummol/L) IBIL 0~0.8mg/dl ( 0~13.7 ummol/L) 【临床意义】提示溶血
8.血清乳酸脱氢酶
【参考值】 80～220 U/L 【临床意义】提示溶血
RBC膜缺陷：遗传球、PNH RBC酶缺陷：G-6PD缺乏症 珠蛋白异常（肽链不平衡）：海洋性贫血、异常血红蛋 白病 免疫性溶贫: AIHA 、新生儿溶血症、药物诱发红细胞相 关抗体 机械损伤性：DIC 、 TTP、人造瓣膜 感染：疟疾 物理因素：灼伤 毒素：蛇毒 脾亢: 单核巨噬细胞功能亢进
血液科溶血性贫血PPT课件
继发性AIHA： 1、造血系统肿瘤 CLL、淋巴瘤，骨髓瘤 2、结缔组织病 SLE、溃疡性结肠炎 3、感染性疾病 Virus 4. 药物 青霉素、氟达拉滨 4、免疫缺陷病 免疫缺陷综合征 5、良性肿瘤 卵巢皮样囊肿
•25
诊断要点
（一）临床表现
1. 起病较缓慢，渐出现贫血，可反复发作； 2. 贫血：主要表现，慢性轻至中度贫血，稳定期可无贫血； 3. 黄疸； 4. 肝脾可呈轻至中度肿大。
3.红细胞寿命缩短：
51Ｃr标记红细胞
•12
多色性红细胞
豪-焦小体
破碎红细胞、盔形红细胞
幼红细胞
•13
2.进一步确定溶血的病因 （1）Coombs试验（AIHA） （2）Ham试验阳性（PNH） （3）血红蛋白电泳和碱变性试验：海洋性贫血 （4）异丙醇试验：不稳定血红蛋白病 （5）高铁血红蛋白还原试验和变性珠蛋白小体（Heinz小
继发性：有原发病的表现，易忽视本病。 急性发病：多见于儿童，偶见成人，呈急性溶血表现。 特殊类型：AIHA伴血小板减少性紫癜，称为Evans综合征 。
•26
（二）实验室检查
1.血红蛋白减少；网织红细胞增多； 血涂片：见球形红细胞增多及大红细胞和有核红细胞；
2.骨髓象以红系增生为主； 3.血清胆红素：42.75～85.50μmol/L，间接胆红素为主； 4.抗人球蛋白试验（Coombs试验）：直接阳性。
体）生成试验：G6PD缺乏症 （6）红细胞特殊形态：靶形红细胞、盔形细胞、破碎细胞 （7）红细胞渗透脆性：增加：球形细胞↑
减低：海洋性贫血。
•14
抗人球蛋白试验（Coombs test）
为检查温抗体（不完全抗体）敏感的试验 主要用于诊断AIHA (autoimmune hemolytic anemi
•25
诊断要点
（一）临床表现
1. 起病较缓慢，渐出现贫血，可反复发作； 2. 贫血：主要表现，慢性轻至中度贫血，稳定期可无贫血； 3. 黄疸； 4. 肝脾可呈轻至中度肿大。
3.红细胞寿命缩短：
51Ｃr标记红细胞
•12
多色性红细胞
豪-焦小体
破碎红细胞、盔形红细胞
幼红细胞
•13
2.进一步确定溶血的病因 （1）Coombs试验（AIHA） （2）Ham试验阳性（PNH） （3）血红蛋白电泳和碱变性试验：海洋性贫血 （4）异丙醇试验：不稳定血红蛋白病 （5）高铁血红蛋白还原试验和变性珠蛋白小体（Heinz小
继发性：有原发病的表现，易忽视本病。 急性发病：多见于儿童，偶见成人，呈急性溶血表现。 特殊类型：AIHA伴血小板减少性紫癜，称为Evans综合征 。
•26
（二）实验室检查
1.血红蛋白减少；网织红细胞增多； 血涂片：见球形红细胞增多及大红细胞和有核红细胞；
2.骨髓象以红系增生为主； 3.血清胆红素：42.75～85.50μmol/L，间接胆红素为主； 4.抗人球蛋白试验（Coombs试验）：直接阳性。
体）生成试验：G6PD缺乏症 （6）红细胞特殊形态：靶形红细胞、盔形细胞、破碎细胞 （7）红细胞渗透脆性：增加：球形细胞↑
减低：海洋性贫血。
•14
抗人球蛋白试验（Coombs test）
为检查温抗体（不完全抗体）敏感的试验 主要用于诊断AIHA (autoimmune hemolytic anemi
溶血性贫血的实验室检查课件
溶血性贫血的实验室检查
反映红细胞寿命缩短、易于破坏的 检查
红细胞畸形、破坏红细胞增多 单核-巨噬细胞吞噬红细胞现象 红细胞寿命缩短 红细胞脆性增加
溶血性贫血的实验室检查
有关红细胞代偿性增生的检查
网织红细胞增多 血中出现大量幼红细胞 血中大红细胞 骨髓中幼红细胞明显增生
溶血性贫血的实验室检查
溶血性贫血的常用实验室检查及意义
临床意义
自身免疫性溶血性贫血，冷凝集素综合征，新生 儿同种免疫性溶血，阵发性冷性血红蛋白尿，药 物性免疫性溶血等直接抗人球蛋白试验阳性。
溶血性贫血的实验室检查
（三）酸溶血（Hams）试验
实验原理 PNH患者体内存在对补体敏感的红细胞。
Hams试验即红细胞在酸性（PH6.4-6.5）的 正常血清中孵育，补体被激活，PNH红细 胞破坏而产生溶血，而正常人RBC不被溶 解，无溶血现象。
溶血性贫血的实验室检查
临床意义
脆性增加 主要见于遗传性球形红细胞增多症，椭
圆形红细胞增多症和部分自身免疫性溶血 性贫血。 脆性降低
主要见于珠蛋白生成障碍性贫血，血红 蛋白C、D、E病，低色素性贫血，肝疾病 等。
溶血性贫血的实验室检查
（二）抗人球蛋白试验
（Coombs试验）
实验原理
抗人球蛋白试验（Coombs试验）
溶血性贫血的实验室检查
操作程序
将一份枸橼酸钠全血加入9份新鲜配制 的糖水中（即0.5g蔗糖+4.5ml蒸馏水+0.5ml 抗凝血，或10%蔗糖水5ml+0.5ml抗凝血）， 混合后，置37℃温箱中孵育30分钟，离心 沉淀。
结果分析
如有溶血蔗糖液为红色，即为阳性。
溶血性贫血的实验室检查
溶血性贫血的临床特点
反映红细胞寿命缩短、易于破坏的 检查
红细胞畸形、破坏红细胞增多 单核-巨噬细胞吞噬红细胞现象 红细胞寿命缩短 红细胞脆性增加
溶血性贫血的实验室检查
有关红细胞代偿性增生的检查
网织红细胞增多 血中出现大量幼红细胞 血中大红细胞 骨髓中幼红细胞明显增生
溶血性贫血的实验室检查
溶血性贫血的常用实验室检查及意义
临床意义
自身免疫性溶血性贫血，冷凝集素综合征，新生 儿同种免疫性溶血，阵发性冷性血红蛋白尿，药 物性免疫性溶血等直接抗人球蛋白试验阳性。
溶血性贫血的实验室检查
（三）酸溶血（Hams）试验
实验原理 PNH患者体内存在对补体敏感的红细胞。
Hams试验即红细胞在酸性（PH6.4-6.5）的 正常血清中孵育，补体被激活，PNH红细 胞破坏而产生溶血，而正常人RBC不被溶 解，无溶血现象。
溶血性贫血的实验室检查
临床意义
脆性增加 主要见于遗传性球形红细胞增多症，椭
圆形红细胞增多症和部分自身免疫性溶血 性贫血。 脆性降低
主要见于珠蛋白生成障碍性贫血，血红 蛋白C、D、E病，低色素性贫血，肝疾病 等。
溶血性贫血的实验室检查
（二）抗人球蛋白试验
（Coombs试验）
实验原理
抗人球蛋白试验（Coombs试验）
溶血性贫血的实验室检查
操作程序
将一份枸橼酸钠全血加入9份新鲜配制 的糖水中（即0.5g蔗糖+4.5ml蒸馏水+0.5ml 抗凝血，或10%蔗糖水5ml+0.5ml抗凝血）， 混合后，置37℃温箱中孵育30分钟，离心 沉淀。
结果分析
如有溶血蔗糖液为红色，即为阳性。
溶血性贫血的实验室检查
溶血性贫血的临床特点
2012-3-26溶血性贫血实验室检查2012-3-262-PPT文档
Hb、HbH病等常高于 45%
4、G6PD荧光斑点试验和活性测定
原理: G6PD 使NADP还原成NADPH, 后者在紫外线 照射下发出荧光
6-磷酸葡萄糖
白 G-6PD
NADP
6-磷酸葡萄糖酸
NADPH
参考值： 正常人强荧光； 酶活性 5 U/gHb
GSH GSSG
H202
氧合血红蛋
H20
高铁血红蛋白
1. Coombs试验（抗人球蛋白试验）
目的：检查红细胞表面的或血清中游离的不完全
抗体，用于诊断AIHA。
原理：不完全抗体(IgG)，无法架接两个邻近的红细胞，而只
能和一个红细胞抗原相结合。 抗人球蛋白抗体是完全抗体,可与多个不完全抗体的Fc
段相结合,导致红细胞凝集现象,称为抗人球蛋白试验阳性。
直接Coombs Test(+)说明病人RBC表面上包被有不完全抗体 间接Coombs Test(+)则说明病人血清中存在着不完全抗体
什么叫溶血性贫血？
hemolytic anemia----指各种原因导 致红细胞生存时间缩短、破坏增多或加 速，骨髓代偿造血功能不足时所发生的 一类贫血。
什么叫溶血性疾病？
指骨髓代偿能力尚足以补偿红细胞 的损耗而不出现贫血。
溶血性贫血的分类(病因和发病机制)
1、RBC内在缺陷所致的溶贫 （1） RBC膜缺陷：遗传球 PNH （2） HB结构异常：海洋性贫血 （3）RBC内酶缺陷：G-6PD缺乏症
红细胞寿命测定
方法：51Cr标记红细胞，检测其半衰期 正常红细胞半衰期25—32天 溶血性贫血者半衰期小于15天 确定溶血性贫血的可靠方法
溶血性贫血筛查
血浆游离血红蛋白测定
参考值：＜50mg/L(1-5mg/dl) 临床意义：
4、G6PD荧光斑点试验和活性测定
原理: G6PD 使NADP还原成NADPH, 后者在紫外线 照射下发出荧光
6-磷酸葡萄糖
白 G-6PD
NADP
6-磷酸葡萄糖酸
NADPH
参考值： 正常人强荧光； 酶活性 5 U/gHb
GSH GSSG
H202
氧合血红蛋
H20
高铁血红蛋白
1. Coombs试验（抗人球蛋白试验）
目的：检查红细胞表面的或血清中游离的不完全
抗体，用于诊断AIHA。
原理：不完全抗体(IgG)，无法架接两个邻近的红细胞，而只
能和一个红细胞抗原相结合。 抗人球蛋白抗体是完全抗体,可与多个不完全抗体的Fc
段相结合,导致红细胞凝集现象,称为抗人球蛋白试验阳性。
直接Coombs Test(+)说明病人RBC表面上包被有不完全抗体 间接Coombs Test(+)则说明病人血清中存在着不完全抗体
什么叫溶血性贫血？
hemolytic anemia----指各种原因导 致红细胞生存时间缩短、破坏增多或加 速，骨髓代偿造血功能不足时所发生的 一类贫血。
什么叫溶血性疾病？
指骨髓代偿能力尚足以补偿红细胞 的损耗而不出现贫血。
溶血性贫血的分类(病因和发病机制)
1、RBC内在缺陷所致的溶贫 （1） RBC膜缺陷：遗传球 PNH （2） HB结构异常：海洋性贫血 （3）RBC内酶缺陷：G-6PD缺乏症
红细胞寿命测定
方法：51Cr标记红细胞，检测其半衰期 正常红细胞半衰期25—32天 溶血性贫血者半衰期小于15天 确定溶血性贫血的可靠方法
溶血性贫血筛查
血浆游离血红蛋白测定
参考值：＜50mg/L(1-5mg/dl) 临床意义：
溶血性贫血实验室检测ppt - 安徽省立医院.
• 简单复习一下红细胞的 结构：
• 1.成熟红细胞为双凹圆 盘状、无核细胞
• 2.主要成分：血红蛋白 =血红素+珠蛋白；血红 蛋白成分：HbA（α 2β 2 ）97%，其他为HbA2（ α 2δ 2）HbF（α 2γ 2）
• 3.红细胞内重要的酶： G-6-PD,PK
一、溶血性贫血的过筛实验 目的：证明有红细胞破坏现象 （一）血浆游离血红蛋白的检 测 （二）血清结合珠蛋白检测 （三）血浆高铁血红素清蛋白 检测 （四）尿含铁血黄素试验 （五）红细胞寿命测定
பைடு நூலகம்
• 4.红细胞膜蛋白的十二炕 基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶 电泳(SDS-PAGE)
• HbS 、HbE 病都有区带1 、2 的缺失或结构异常， HbS 常见4. I 蛋白有缺陷 。
（二） 红细胞酶缺陷的检测 红细胞酶缺陷所致溶血性贫血 又称红细胞酶病，指参与红细 胞代谢（主要是糖代谢）的酶 由于基因缺乏，导致活性改变 而发生溶血的一组疾病。
• 溶血性贫血的临床表现：贫血、黄 疸（主要以间胆高为主）、脾大、 血网织红细胞比例明显增高、血涂 片观察可见破碎、球形、椭圆形、 口形、靶形等异常形态红细胞，甚 至可见幼红细胞，血清结合珠蛋白 降低或消失，LDH(主要LDH2)增高 ，尿胆原增高，甚至可见血红蛋白 尿或含铁血黄素尿，红细胞寿命缩 短等
正常血红蛋 白电泳区带
2.胎儿血红蛋白酸洗脱试验 3.胎儿血红蛋白测定或HbF碱 变性试验
4.HbA2定量测定 5.不稳定血红蛋白测定：异丙 醇试验、热变性试验、血红 蛋白H 包涵体检查
6.红细胞镰变(HbS) 试验 7.HbS 溶解度试验 8.血红蛋白C 试验 9.限制性内切酶谱分析
二、后天获得的溶血性贫血的相 关实验 （一）自身免疫性溶血性贫血检 测
溶血性贫血的实验室检查ppt课件
致溶ห้องสมุดไป่ตู้。
溶血性贫血——阵发性睡眠性血红蛋白尿症检测
血细胞膜CD55、CD59分析(流式细胞术） 参考范围：外周血CD55-、CD59-红细胞和中性粒细胞均<5% 临床意义：PNH患者外周血CD55-、CD59-红细胞和中性粒细胞均>10%
溶血性贫血——红细胞酶缺陷检测
溶血性贫血——筛查检测
肾脏
溶血性贫血——筛查检测
• • • • 血浆游离血红蛋白测定 血清结合珠蛋白测定 血浆高铁血红素白蛋白试验 含铁血黄素尿试验
• 红细胞寿命测定
溶血性贫血——筛查检测
• 血浆游离血红蛋白测定
参考值：<50mg/L 临床意义： 1.血管内溶血时明显增高。 2.血管外溶血时正常。 3.自身免疫性溶血、珠蛋白异常时轻度增高。
溶血性贫血——红细胞膜缺陷检测
红细胞渗透脆性 试验：测定红细胞 对不同浓度低渗氯 化钠溶液的抵抗力。 渗透脆性，它与红 细胞膜面积与细胞 容积的比值有关。 参考值：开始溶 血 0.42 ％ ～ 0.46 ％ (4.2 ～ 4.6g/L) NaCl 溶液， 完全溶血 0.28 ％ ～ 0.34 ％ (2.8 ～ 3.4g ／ L)NaCl 溶液。 临床意义 1． 脆性增高 开始溶血及完全溶血时氯化钠溶 液的浓度均较正常对照提前两管 (0.04％或 更高)，即开始溶血＞0.50％、完全溶血＞ 0.38％NaCl溶液时为脆性增高。主要见于遗 传性球形细胞增多症，温抗体型自身免疫性 溶血性贫血病人的红细胞有继发球形化，渗 透脆性也可增高。脆性增高也可见于遗传性 椭圆形细胞增多症。轻症病人或急性溶血才 发作后，外周血中球形细胞较少，检测结果 可能在正常范围，此时应考虑做温 孵育后渗 透脆性试验。 2． 脆性减低 常见于海洋性贫血。也可见于缺 铁性贫血、某些肝硬化及阻塞性黄疸等。
溶血性贫血——阵发性睡眠性血红蛋白尿症检测
血细胞膜CD55、CD59分析(流式细胞术） 参考范围：外周血CD55-、CD59-红细胞和中性粒细胞均<5% 临床意义：PNH患者外周血CD55-、CD59-红细胞和中性粒细胞均>10%
溶血性贫血——红细胞酶缺陷检测
溶血性贫血——筛查检测
肾脏
溶血性贫血——筛查检测
• • • • 血浆游离血红蛋白测定 血清结合珠蛋白测定 血浆高铁血红素白蛋白试验 含铁血黄素尿试验
• 红细胞寿命测定
溶血性贫血——筛查检测
• 血浆游离血红蛋白测定
参考值：<50mg/L 临床意义： 1.血管内溶血时明显增高。 2.血管外溶血时正常。 3.自身免疫性溶血、珠蛋白异常时轻度增高。
溶血性贫血——红细胞膜缺陷检测
红细胞渗透脆性 试验：测定红细胞 对不同浓度低渗氯 化钠溶液的抵抗力。 渗透脆性，它与红 细胞膜面积与细胞 容积的比值有关。 参考值：开始溶 血 0.42 ％ ～ 0.46 ％ (4.2 ～ 4.6g/L) NaCl 溶液， 完全溶血 0.28 ％ ～ 0.34 ％ (2.8 ～ 3.4g ／ L)NaCl 溶液。 临床意义 1． 脆性增高 开始溶血及完全溶血时氯化钠溶 液的浓度均较正常对照提前两管 (0.04％或 更高)，即开始溶血＞0.50％、完全溶血＞ 0.38％NaCl溶液时为脆性增高。主要见于遗 传性球形细胞增多症，温抗体型自身免疫性 溶血性贫血病人的红细胞有继发球形化，渗 透脆性也可增高。脆性增高也可见于遗传性 椭圆形细胞增多症。轻症病人或急性溶血才 发作后，外周血中球形细胞较少，检测结果 可能在正常范围，此时应考虑做温 孵育后渗 透脆性试验。 2． 脆性减低 常见于海洋性贫血。也可见于缺 铁性贫血、某些肝硬化及阻塞性黄疸等。
溶贫检验ppt课件
34
方法
➢ 30%红细胞悬液的配置（1）取患者的血液2ml, 枸橼酸钠抗凝， 混匀，2000转/分离心5分钟；（2）吸出血浆，沉淀的红细胞用8 倍体积的生理盐水洗涤三次，每次2000转/分离心5分钟；（3） 最后沉淀红细胞用生理盐水配成30%的红细胞悬液。
14
尿含铁血黄素试验（Rous试验）
➢ 原理：当血浆中血红蛋白超过肾阈值１.3g/L 时,则可通过肾小球滤过,经过肾小管时被肾小 管上皮细胞嗜取,分解为含铁血黄素沉积在上 皮细胞中,并随着上皮细胞脱落从尿中排出。 含铁血黄素是不稳定的铁蛋白聚合体,其中的 高铁离子与亚铁氰化钾作用,在酸性环境下产 生普鲁氏蓝色的亚铁氰化铁沉淀。尿沉渣肾小 管上皮细胞内外可见直径1~3um的兰色颗粒。
• 参考值：0.5~1.5 Hb/L
12
血清Hp检测的原理（火箭电泳法）
• 将稀释后的Hp抗血清与已融化的2%琼脂糖混匀， 制备凝胶板。在凝胶板上加入一定量的受检血 清（抗原），在电场作用下，定量的抗原在含 有定量抗体的琼脂凝胶中泳动，在一定的时间 内抗原抗体反应形成火箭样沉淀峰，此峰的高 度与抗原浓度成正比，测量峰的高度与标准样 品峰值通过直线回归方程式，计算出受检者血 清中Hp的含量。
9
注意事项
• 采血和分离血浆的过程中，应严格防止 发生体外溶血，以免造成假阳性。
• 一切器材，用前用盐酸浸泡24h，流水冲 洗后再用蒸馏水洗三次，以避免Hb污染 造成假阳性。
• 过氧化氢的浓度要准确，应新鲜配制。 • 当测定管的光密度超过0.6时，应将血浆
稀释后重新检测。
10
血清结合珠蛋白测定(measurement of haptoglobin) • 常用的方法有：
15
正常值和临床意义
方法
➢ 30%红细胞悬液的配置（1）取患者的血液2ml, 枸橼酸钠抗凝， 混匀，2000转/分离心5分钟；（2）吸出血浆，沉淀的红细胞用8 倍体积的生理盐水洗涤三次，每次2000转/分离心5分钟；（3） 最后沉淀红细胞用生理盐水配成30%的红细胞悬液。
14
尿含铁血黄素试验（Rous试验）
➢ 原理：当血浆中血红蛋白超过肾阈值１.3g/L 时,则可通过肾小球滤过,经过肾小管时被肾小 管上皮细胞嗜取,分解为含铁血黄素沉积在上 皮细胞中,并随着上皮细胞脱落从尿中排出。 含铁血黄素是不稳定的铁蛋白聚合体,其中的 高铁离子与亚铁氰化钾作用,在酸性环境下产 生普鲁氏蓝色的亚铁氰化铁沉淀。尿沉渣肾小 管上皮细胞内外可见直径1~3um的兰色颗粒。
• 参考值：0.5~1.5 Hb/L
12
血清Hp检测的原理（火箭电泳法）
• 将稀释后的Hp抗血清与已融化的2%琼脂糖混匀， 制备凝胶板。在凝胶板上加入一定量的受检血 清（抗原），在电场作用下，定量的抗原在含 有定量抗体的琼脂凝胶中泳动，在一定的时间 内抗原抗体反应形成火箭样沉淀峰，此峰的高 度与抗原浓度成正比，测量峰的高度与标准样 品峰值通过直线回归方程式，计算出受检者血 清中Hp的含量。
9
注意事项
• 采血和分离血浆的过程中，应严格防止 发生体外溶血，以免造成假阳性。
• 一切器材，用前用盐酸浸泡24h，流水冲 洗后再用蒸馏水洗三次，以避免Hb污染 造成假阳性。
• 过氧化氢的浓度要准确，应新鲜配制。 • 当测定管的光密度超过0.6时，应将血浆
稀释后重新检测。
10
血清结合珠蛋白测定(measurement of haptoglobin) • 常用的方法有：
15
正常值和临床意义
溶血性贫血实验室诊断与病例分享护理课件
溶血性贫血实验室诊断与病 例分享护理课件
目录
• 溶血性贫血概述 • 实验室诊断方法 • 病例分享与护理经验 • 治疗与护理建议
01
溶血性贫血概述
定义与分类
定义
溶血性贫血是由于红细胞破坏速 率增加，超过骨髓造血的代偿能 力而发生的贫血。
分类
根据病因，溶血性贫血可分为遗 传性和获得性两大类。
病因与发病机制
诊断标准
根据临床表现、实验室检查（如血常规、血清胆红素、尿常规等）和特殊检查 （如骨髓穿刺、红细胞寿命测定等）进行综合诊断。
02
实验室诊断方法
血常规检查
01
02
03
红细胞计数
溶血性贫血患者红细胞计 数通常低于正常值，表明 贫血存在。
血红蛋白测定
血红蛋白水平降低，反映 贫血程度。
红细胞形态观察
红细胞形态异常，如大小 不等、碎片增多等，提示 溶血性贫血可能。
总结词
自身免疫性疾病，导致红细胞破坏加速，引发贫血。
详细描述
自身免疫性溶血性贫血是由于免疫系统异常攻击自身红细胞，导致红细胞破坏加 速，引发贫血。患者可能出现黄疸、脾肿大等症状。治疗以免疫抑制药物为主， 严重时需输血。
病例二：遗传性球形细胞增多症
总结词
遗传性疾病，红细胞变形能力差，易 破碎。
详细描述
遗传性球形细胞增多症是一种遗传性 疾病，患者的红细胞形状异常，变形 能力差，易破碎。患者可能出现黄疸 、脾肿大等症状。治疗以输血和脾切 除为主。
病例三：阵发性睡眠性血红蛋白尿
总结词
后天获得性造血干细胞基因突变，红细胞对酸和激活的补体敏感。
详细描述
阵发性睡眠性血红蛋白尿是一种后天获得性造血干细胞基因突变导致的疾病，患者的红细胞对酸和激活的补体敏 感，易破碎。患者可能出现贫血、黄疸、脾肿大等症状。治疗以雄激素、免疫抑制药物和定期输血为主。
目录
• 溶血性贫血概述 • 实验室诊断方法 • 病例分享与护理经验 • 治疗与护理建议
01
溶血性贫血概述
定义与分类
定义
溶血性贫血是由于红细胞破坏速 率增加，超过骨髓造血的代偿能 力而发生的贫血。
分类
根据病因，溶血性贫血可分为遗 传性和获得性两大类。
病因与发病机制
诊断标准
根据临床表现、实验室检查（如血常规、血清胆红素、尿常规等）和特殊检查 （如骨髓穿刺、红细胞寿命测定等）进行综合诊断。
02
实验室诊断方法
血常规检查
01
02
03
红细胞计数
溶血性贫血患者红细胞计 数通常低于正常值，表明 贫血存在。
血红蛋白测定
血红蛋白水平降低，反映 贫血程度。
红细胞形态观察
红细胞形态异常，如大小 不等、碎片增多等，提示 溶血性贫血可能。
总结词
自身免疫性疾病，导致红细胞破坏加速，引发贫血。
详细描述
自身免疫性溶血性贫血是由于免疫系统异常攻击自身红细胞，导致红细胞破坏加 速，引发贫血。患者可能出现黄疸、脾肿大等症状。治疗以免疫抑制药物为主， 严重时需输血。
病例二：遗传性球形细胞增多症
总结词
遗传性疾病，红细胞变形能力差，易 破碎。
详细描述
遗传性球形细胞增多症是一种遗传性 疾病，患者的红细胞形状异常，变形 能力差，易破碎。患者可能出现黄疸 、脾肿大等症状。治疗以输血和脾切 除为主。
病例三：阵发性睡眠性血红蛋白尿
总结词
后天获得性造血干细胞基因突变，红细胞对酸和激活的补体敏感。
详细描述
阵发性睡眠性血红蛋白尿是一种后天获得性造血干细胞基因突变导致的疾病，患者的红细胞对酸和激活的补体敏 感，易破碎。患者可能出现贫血、黄疸、脾肿大等症状。治疗以雄激素、免疫抑制药物和定期输血为主。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
• 血红蛋白电泳
• 碱变性试验
• HbF酸洗脱法检测
• 血红蛋白H包涵体生成试验
• RBC镰变试验
• 异丙醇沉淀试验
• 热变性试验
• 变性珠蛋白小体生成试验
12
免疫性溶血的检验
• Coombs试验 • 冷热溶血试验 • 冷凝集试验 • 血型检测
13
溶贫常用的实验室检查(1)
• RBC渗透脆性试验 • 温孵育后渗透脆性试验 • 自身溶血试验及纠正试验 • 酸溶血试验 • 蔗糖水溶血试验
• RBC寿命缩短、破坏增加 • 血浆游离Hb增高 • 胆红素代谢异常
4RBC寿ຫໍສະໝຸດ 缩短的检验• RBC寿命测定 • RBC形态改变 • 血浆LDH测定
5
血浆游离Hb增高的检验
• 血浆游离Hb检测 • 血清结合珠蛋白检测 • 血浆高铁血红素清蛋白检测 • 血红蛋白尿检测 • Rous试验
6
胆红素代谢异常
• 血清非结合胆红素增高 • 尿中尿胆原排泄量增高，
尿胆红素阴性
7
RBC代偿增生的依据
• 外周血Ret-RBC增多 • 血涂片中有RBC形态改变，
提示红系增生旺盛 • 骨髓象提示增生性贫血
8
溶血原因分析的有关检验
• 红细胞膜缺陷的检验 • 红细胞内酶缺陷的检验 • 珠蛋白合成异常的检验 • 免疫性溶血的检验
9
RBC膜缺陷的检验
• RBC渗透脆性试验
• 温孵育后渗透脆性试验
• 自身溶血及纠正试验
• 酸溶血试验
• 热溶血试验
• 蔗糖溶血试验
10
RBC内酶缺陷的检验
• 自身溶血及纠正试验 • 变性珠蛋白小体生成试验 • 高铁血红蛋白还原试验 • 氰化物-抗坏血酸盐试验 • 酶活性测定
11
珠蛋白合成异常的检验
溶血性贫血的 实验室检查
复旦大学附属华山医院血液科
谢彦晖
1
溶血性贫血的分类
• 按病因和发 • 按溶血发生
病机制
的部位
– 红细胞内在 缺陷所致
– 红细胞外来 因素所致
– 血管内溶血 – 血管外溶血
2
溶血性贫血确诊的 实验室检验
• 显示红细胞破坏增加的依据 • 显示红细胞代偿增生的依据
3
RBC破坏增加的依据
16
PNH昼夜尿标本
17
更多精品资源请访问 docin/sanshengshiyuan doc88/sanshenglu
18
14
溶贫常用的实验室检查(2)
• 抗人球蛋白试验 • 冷热溶血试验 • 变性珠蛋白小体生成试验 • 高铁血红蛋白还原试验 • 氰化物-抗坏血酸盐试验
15
溶贫常用的实验室检查(3)
• 珠蛋白合成异常的检验
–RBC形态学检查 –Hb电泳 –HbA2定量检测 –HbF定量检测 –异丙醇沉淀试验 –Hb的一级结构分析