2009年江南大学803微生物学综合科目考研真题

江南大学803微生物学综合科目2009年硕士研究生入学考试试题及解析
2009年硕士学位研究生入学考试题
考试科目：823微生物学（发酵）A
请将题号和答案写在答题纸上，直接写在试卷上无效！
一、判断题：正确的回答T，不正确的回答F（2分*15）
1. 一般情况下，在土壤中细菌的总数和生物量往往都是高的。

F
2. 青霉素抑制肽聚糖分子中肽桥的生物合成，因此对于生长旺盛的细胞明显的抑制作用，而对于休止细胞无抑制作用。

T
3. 芽孢在适宜条件下可以萌发成为营养细胞，但芽孢不是细菌的繁殖方式。

T
4. 发酵是一种没有外源电子受体的生物氧化方式。

T
5. 有鞭毛细菌去除细胞壁后鞭毛失去了着生位点，从而将失去运动能力。

F
6. 好氧处理能更快的分解废水中的有机物，因此废水中的有机物浓度越高，越适于采用好氧方式处理。

F
7. 啤酒酿造的发酵温度与酿酒酵母的最适生长温度基本上是一致的。

T
8. 通常在耐氧厌氧微生物与兼性厌氧微生物细胞中都含有SOD酶和过氧化氢酶。

T
9. 已经发现的嗜高温微生物都是古生菌，它们的最适生长温度一般要高于80℃.T
10. EMB培养基中，伊红美蓝有促进大肠杆菌生长的作用。

F
11. 两株具有不同营养缺陷型标记的霉菌进行准性生殖时，所形成的异核体和杂合二倍体的分生孢子在基本培养基上都能够生长。

T
12. 无义突变是指不造成任何遗传效应的无意义突变。

F
13. SOS修复系统是诱导产生的一种修复体系，它属于一种倾向差错的修复。

T
14. Ames试验是利用细菌突变来检测环境中存在的致癌物质是一种简便、快速、灵敏的方法。

可以通过某待测物质对微生物的诱变能力间接判断其致癌能力。

T
15. 亚硝酸、羟胺和5-溴尿嘧啶都能诱发碱基置换，因此在大多数情况下，它们诱发的突变都可以被它们自己诱发而得以回复。

F
二、名称解释：（3分*10）
1. 生长因子
微生物生长所必需且需要量很小，而微生物自身不能合成或合成量不足以满足机体生长需要的有机化合物。

2. 拮抗作用
两种微生物生活在一起，其中一种能够产生某种特殊的代谢产物或者改变环境条件，从而抑制或杀死另一种微生物的现象
3. 局限性转导
局限性转导的噬菌体是温和噬菌体，转导噬菌体内的遗传物质是部分噬菌体基因组和细菌染色体DNA的个别基因
4 移码突变
在DNA序列中由于一对或少数几对核苷酸的插入或缺失而使其后全部遗传物质密码的阅读框架发生移动，进而引起转录和翻译错误的突变
5. 增值培养
是增殖培养，又称富集培养
指从微生物混合群开始对特定种的数量比例不断增高而引向纯培养的一种培养方法。

在适于目标微生物而不适于其他微生物生长的条件下继续培养，则目标微生物将成为优势种而得到纯培养。

6. 高压蒸汽灭菌法
可杀灭包括芽胞在内的所有微生物，是灭菌效果最好、应用最广的灭菌方法。

方法是将需灭菌的物品放在高压锅内，加热时蒸汽不外溢，高压锅内温度随着蒸汽压的增加而升高。

在蒸汽压下，温度达到121℃，维持15～30分钟。

适用于普通培养基、生理盐水、手术器械、玻璃容器及注射器、敷料等物品的灭菌。

7.巴斯德效应
酵母菌酒精发酵时通入氧气，发酵减慢，停止产生乙醇，葡萄糖消耗速率下降，氧对发酵的这种抑制现象称为巴斯德效应。

8. biofilm
围绕细胞或细胞器的脂双层膜。

由磷脂双层结合有蛋白质和胆固醇、糖脂构成，起渗透屏障、物质转运和信号转导的作用。

细胞内的膜系统与质膜的统称。

9．Peptideglycan
存在于革兰氏阳性和阴性细菌细胞壁中的一种复合糖类。

主链是β-1,4-糖苷键连接的N-乙酰氨基葡糖和N-乙酰胞壁酸交替的杂多糖。

在N-乙酰胞壁酸上接有肽链，不同糖链上
的肽链交联后形成稳定的水不溶产物。

10.Escherichia coli（Migula）Cvastellani et Chalmers 1919
大肠埃希氏菌，首次定名人为Migula，现名定名人为Cvastellani et Chalmers，定名年份为1919年。

三、问答题（共90分）
1. 试述大肠杆菌、酿酒酵母、红曲霉和T4噬菌体这四种微生物的主要繁殖过程，并从微生物繁殖方式的角度谈谈你对微生物多样性的认识。

（20）
大肠杆菌一般进行无性生殖，成为裂殖，首先是细胞核区伸长并分裂，同时在细胞赤道附件的细胞质膜由外向中心做环状推进，然后闭合形成一个垂直于细胞长轴的细胞质隔膜，并使细胞分开，第二步是形成横膈膜，最后是将细胞等分为两个子细胞。

酵母繁殖方式主要分无性繁殖和有性繁殖，无性繁殖包括芽殖、裂殖和裂芽繁殖。

有性繁殖是形成子囊孢子进行繁殖。

红曲霉的有性繁殖是形成卵孢子和接合孢子，无性繁殖有游动孢子，孢囊孢子和厚膜孢子
噬菌体的繁殖主要分为吸附、侵入、增殖、成熟和释放五步，温和性噬菌体可以整合到宿主基因组上繁殖。

微生物繁殖方式多种多样，每类微生物的繁殖方式各不相同，及时同类微生物，不同的种属之间的主要繁殖方式也各有千秋，可见大自然中微生物的多样性。

各个种群由于突变、自然选择或其他原因，往往在遗传上不同。

因此，某些种群具有在另一些种群中没有的基因突变，或者在一个种群中很稀少的等位基因可能在另一个种群中出现很多。

这些遗传差别使得有机体能在局部环境中的特定条件下更加成功地繁殖和适应。

不仅同一个种的不同种群遗传特征有所不同，即存在种群之间的基因多样性；在同一个种群之内也有基因多样性。

在一个种群中某些个体常常具有基因突变。

这种种群之内的基因多样性就是进化材料。

具有较高基因多样性的种群，可能有某些个体能忍受环境的不利改变，并把它们的基因传递给后代。

环境的加速改变，使得基因多样性的保护在生物多样性保护中占据着十分重要的地位
2. 微生物营养物质的跨膜运输有哪几种方式？试从输送动力、输送方向、是否需要载体和代谢能量、输送物质种类（举例）及输送前后存在状态等方面对各自的特点进行比较。

（20）
3. 何谓基因工程？为什么说基因工程的操作离不开微生物？（15）
是指对遗传信息的分子操作和施工，即把分离到的或合成的基因经过改造，插入载体中，导人宿主细胞内，使其扩增和表达，从而获得大量基因产物，或者令生物表现出新的性状。

基因工程的基本过程：目的基因的获得+重组载体的构建斗重组载体导人宿主细胞+阳性重组子的筛选+基因的测序和鉴定斗基因的控制表达。

每一个环节都离不开微生物的参与。

微生物世界的多样性为人类的活动提供了取之不尽、用之不竭的基因来源；基因工程的克隆载体通常由病毒、噬菌体和细菌质粒DNA改建而成；基因工程所用到的绝大多数工具酶都是从不同微生物中分离和纯化而获得的；基因工程中最重要、最广泛应用的克隆载体宿主是原核生物的大肠杆菌及真核生物的酿酒酵母。

植物基因工程和动物基因工程也要先构建穿梭载体，在大肠杆菌中完成外源基因或重组体DNA的拼接和改造，才能再转移到植物和动物细胞中。

大肠杆菌表达系统、酵母菌表达系统和哺乳动物细胞表达系统都是采用重组细胞通过微生物发酵罐的方式大量生产目的蛋白。

基因工程的应用表现在基因工程药物、基因治疗、改造传统工业发酵菌种、动植物特性的基因工程改良及环境保护中各个方面，并已经取得了丰硕的成果。

同时基因工程也推动了微生物学的发展，特别是对于新的微生物资源的开发，认识和了解微生物世界中更多的微生物种类、微生物代谢、微生物遗传等将产生积极的影响。

4. 适述配制斜面培养基的程序和注意事项。

（培养基配方：牛肉膏0.5%、蛋白胨1%、NaCl0.5%、琼脂2%，Ph7.2,灭菌121℃ 20min）（15）
1玻璃器皿的洗涤，清洗干净，用自来水及蒸馏水冲洗，烘干备用
2 按配方准确称量药品，溶于水中，定容后用酸碱调节pH至7.2
3加热煮沸，将称好的琼脂加入，用玻璃棒不断搅拌，继续加热至溶解，加水至所需体积。

4将配好的培养基分装入试管，分装是注意不要使培养基沾污管口，分装至试管高度的四分之一左右
5包装好后放入灭菌锅，在121℃下灭菌20min
6灭好后，趁热将试管摆成适当斜度，斜面长度不超过试管长度的二分之一为宜，凝固
后即成。

5. 以谷氨酸棒杆菌为出发菌株，通过诱变育种，为什么筛选Hser-AECr株，可以获得赖氨酸（Lys）高产菌株？并进一步叙述通过紫外诱变，筛选Hser-突变株的主要步骤及理由。

（20）
Hser-AECr株由于使合成高丝氨酸途径无法进行，是代谢流向赖氨酸途径转移，增大了赖氨酸的产量，同时由于苏氨酸无法合成，解除了其对天冬氨酸激酶的反馈抑制，所以可以获得赖氨酸高产菌株。

出发菌株的选择：选择野生型菌株或者生产中经历生产条件考验的菌株或者诱变过的菌株，以上菌株都有可能获得更高产的突变株
诱变菌株的培养：用LB培养基培养细菌至对数生长期，以使细胞处于同步生长状态的旺盛时期，而且细胞内含有丰富的内源性碱基。

诱变菌悬液的制备：选择缓冲液悬浮细胞，以稳定pH，同时是细胞处于良好的分散状态，利于均匀的诱变剂量下，同时调节适当的细胞密度。

诱变处理：选择紫外诱变处理。

后培养：立即将处理过的细胞转移到丰富的培养基中进行培养，是突变基因稳定、纯合并表达
高产突变株的分离与筛选：可通过复印平板法进行初筛，已筛选到合格的突变株，之后进行鉴定。