第07章 放射免疫试验

法，以及剂量-反应曲线的数学处理模型，为酶免疫试验
和发光免疫试验奠定理论和实践基础。
本章目录
第一节 放射免疫分析方法
第二节 免疫放射分析方法
第三节 两种方法比较
第四节 临床应用
第五节 关键因素
重点提示
放射免疫分析方法（原理） 免疫放射分析方法（原理）
第一节
放射免疫分析方法
相关知识
放射免疫分析方法
分离技术
图：聚乙二醇-双抗体法( 特异性和低成本）
四、放射性测量和数据处理
抗原-抗体（温浴） 分离结合标记物 放射性测量
数据处理
放射性测量
放射性核素
125I
γ 射线
测量仪器
采用γ 计数器
实例：

图：标准曲线
第二节
免疫放射分析方法
相关知识
免疫放射分析 immunoradiometric assay， IRMA 非竞争性免疫分析
第五节
关键因素
在放射免疫试验中被测物质浓度是根据标准曲线计算 得来的。标准曲线的精确度直接影响测定结果的精确度。 获得准确测定结果不仅需要高质量的检测试剂，同时也需
要尽可能地从实验过程中把关，需要严格和精确的操作。
关键因素
试剂盒质量 操作过程 测量过程
曲线拟合
关键因素
试剂盒 标准品 抗体
标记物
检测抗体（标记放射性核素）
非竞争性免疫分析模式
体系中抗体保持过量
技术要点
抗原抗体反应 B、F的分离 放射性测量
数据处理
二、分离技术
固相吸附分离法 固相材料 捕获抗体将结合标记物捕获于固相材料表面，而
游离标记物分布于液相中，经洗涤去除液相中的游离标记
物。
固相吸附技术
固相吸附技术
包被 Coating
第四节
临床应用
历史地位
方法建立 20世纪60年代 快速发展
20世纪80年代～90年代
临床应用
体内激素水平 病原体抗原或抗体 肿瘤标志物
药物测定
临床应用
现存检测项目 反三碘甲状腺原氨酸（分子量651Da）、胃泌素（分 子量2098Da）、醛固酮（分子量364Da）、血管紧张素-I
（分子量1200Da）和血管紧张素-Ⅱ（分子量1046Da）
技术（操作）要点
抗原抗体反应
标本与试剂混合并温浴
分离技术
分离结合标记物与游离标记物 发射性测量 数据处理
二、抗原-抗体反应
竞争模式 平衡法 非平衡法
温浴条件
温度
酸碱度
基质
图：非平衡法
三、分离技术
非均相免疫分析 结合标记物（Bind，B） 游离标记物（Free，F）
分离方法
聚乙二百度文库沉淀法
双抗体法
发明人：Miles and Hales 1968
一、分析原理（1）
免疫放射分析 单位点法 适合测定小分子抗原
双位点法
适合测定小分子抗原
一、分析原理（2）
图：免疫放射分析（单位点法）测定原理示意图
一、分析原理（3）
图：免疫放射分析（双位点法）测定原理示意图
一、分析原理（4）
双位点法 一对互相匹配的抗体 捕获抗体（与固相载体连接）
将捕获抗体吸附于固相材料表面的过程
封闭
blocking
用高溶度蛋白溶液封闭空白结合位点
数据处理（实例）
图：标准曲线
第三节
两种方法的比较
RIA & IRMA
RIA & IRMA
放射免疫分析 液相状态的抗原与抗体反应 免疫放射分析
固相表面与液相状态之间的抗原抗体反应
抗体固相化对抗体结构和功能的影响
radioimmunoassay, RIA；
首个用于超微量物质定量的标记免疫分析技术；
发明人： Yalow and Berson 1959
一、分析原理
放射免疫分析方法 竞争性免疫分析模式 标记抗原和待检抗原同质
分析体系中的抗体限量
分析原理
图：放射免疫分析方法原理示意图（1）
图：放射免疫分析方法原理示意图（2）
第七章 放射免疫试验
李会强
引言
放射免疫试验以放射性核素为特征，通过测定放射性 强度评估抗原-抗体反应的强度，从而实现对待测物质的 定量（或定性）分析。放射免疫试验将放射性核素的高灵
敏性与抗原-抗体间的高特异性结合于一体，具有较高的
分析敏感性和分析特异性。
引言
放射免疫试验创立了两种重要标记免疫分析模式即竞 争性免疫分析（放射免疫分析方法）和非竞争性免疫分析 （免疫放射分析方法），同时，也创立了固相吸附分离方