食用菌多糖的提取工艺_PPT课件

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灵芝多糖的提取纯论文制作PPT

灵芝多糖的提取纯论文制作PPT

请各位老师批评指正, 谢谢!
2、实验内容
紫外分光光度计
1)多糖含量的测定
根据《中国药典》(2010版)一部灵芝项下规定, 制定标准曲线,得出线性回归方程: y=17.751x+0.0326,R2=0.9991,n=6,线性关系 良好,如下图:
1.2
1 0.8 吸光度A 0.6 0.4 0.2 0 0 0.01 0.02 0.03 多糖浓度mg/ml 0.04 0.05 0.06 0.07 y = 17.75x + 0.032 R² = 0.999
灵芝多糖的提取纯化工艺研究
研究背景
灵芝味甘,性平,归心、肺、肝、肾经。 《中国药典》(2010版)记载灵芝为多孔菌科 真菌赤芝或紫芝的干燥子实体,有补气安神, 止咳平喘的功效,用于心神不宁,失眠心悸, 肺虚咳喘,虚劳短气,不思饮食等。药理试验 证明,灵芝多糖具有抗病毒、抗肿瘤、提高免 疫力、抗氧自由基、抗衰老等生物活性。 随着生活节奏的加快、生活压力的不断攀 升,人们的健康越来越受到威胁,心脑血管、 癌症等疾病的病发率逐年上升,使得具有提高 免疫力、抗肿瘤等功效的灵芝多糖深受重视。
整体框架
1、前言 灵芝多糖的来源与分类 灵芝多糖的主要成分 灵芝多糖的结构分析 灵芝多糖的提取方法 灵芝多糖的纯化方法 灵芝多糖的测定方法
2、实验内容
1)多糖含量的测定
单因素试验 2)提取工艺研究
正交试验设计 3)纯化工艺研究:正交试验设计 3、讨论 4、结论
提取时间 提取温度 提取次数
1、前言
我国已发现灵芝的品种有90多种,包括赤芝、黄芝、 紫芝、黑芝等,多分布于云、贵、冀、吉、苏等省。 灵芝的化学成分复杂,现已发现灵芝含有灵芝多糖、 三萜类化合物、核苷、甾醇、生物碱、氨基酸、微量 元素等多种化学成分。

香菇多糖的提取工艺

香菇多糖的提取工艺
5、复合酶解,酸与热水相结合浸提法 向香菇处理物中加 适量纤维素 酶和果胶酶,目的是为了酶解细胞表面结构及细胞间连接物, 使其部分糖类 物质的溶出。加 20倍体积的水在 40 ℃水浴恒温下浸泡 80min。后再迅速 升温煮沸 60min,用 4层纱布过滤后收集滤液, 再调节 pH分别为 4. 5、5.0、 5.5 ,进行酸浸提, 然后再用 4层纱布过滤后收集滤液。合并两次滤液。浓 缩。
复合酶解、 酸处理结合热水浸提法提取香菇多糖的改进工艺 原料 → 复合酶解→酶解液→ 水浸提→ 酸浸提→ 浸提物→ 真空浓缩→ 浓缩 液→ 酒精沉淀→ 沉淀物→ sevage法脱蛋白→ 水相→ 丙酮洗涤→ 多 糖粗制品
操作要点
1、原料预处理 选取质量合格的干香菇若干,经植物高速磨碎机 磨成粉末, 称取相应香菇粉末 , 加入适量酒精使香菇粉末成糊状。
香菇多糖(1entinan,LNT) 香菇多糖是从优质香菇子 实体中提取的有效活性成分,是香菇的主要有效成分, 是一种宿主免疫增强剂(host defense potentiator, HDP),临床与药理研究表明,香菇多糖具有抗病毒、抗 肿瘤、调节免疫功能和刺激干扰素形成等作用。
香菇多糖是从优质香菇子实体中提取的有效活性成 分,香菇多糖中的活性成分是具有分支的β— (1—3)— D—葡聚糖,主链由β—(1—3)连接的葡萄糖基组成,沿 ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ链随机分布着由β—(1—6)连接的葡萄糖基,呈梳状 结构。
8 、 sevage法脱蛋白 将上述沉淀溶于适量的蒸馏水中,分别加 入 20 %体积的氯仿和 7 %体积的异戊醇生成絮状凝聚物, 用高速离 心机在 5000r pm离心 15min得沉淀。重复上述操作, 直至无凝聚物 生成。
9、丙酮洗涤脱水 将酒精沉淀物用丙酮洗涤脱水两次, 倒入放 有干燥滤纸的培养皿中 (滤纸重0.98g) ,然后将培养皿放在 50℃ 的 烘干箱中进行干燥 3h ,得到香菇多糖粗制品。

香菇多糖提取工艺 ppt课件

香菇多糖提取工艺 ppt课件
超声波提取法 向香菇处理物中加入蒸馏水,进行超声波处理浸提。
8000r/min离心五分钟,取上清液,用旋转蒸发仪浓缩至10~20ml,加入两倍 体积的无水乙醇,进行醇沉。放置过夜后再次离心,留取沉淀物,干燥至恒重。
复合酶浸提法 向香菇处理物的中加 0.1g纤维素酶和0.5g果胶酶,目的是为了酶解细
胞表面结构及细胞间连接物,使其部分糖类物质的溶出。往酶解后的香菇处理物中加入 20 倍体积的蒸馏水,并在40水浴恒温下浸泡80min 。迅速升温沸腾90min ,后过滤得滤液。离 心沉淀,上清液浓缩,乙醇沉淀。
香菇多糖提取工艺
精品资料
• 你怎么称呼老师?
• 如果老师最后没有总结一节课的重点的难点,你 是否会认为老师的教学方法需要改进?
• 你所经历的课堂,是讲座式还是讨论式? • 教师的教鞭
• “不怕太阳晒,也不怕那风雨狂,只怕先生骂我 笨,没有学问无颜见爹娘 ……”
• “太阳当空照,花儿对我笑,小鸟说早早早……”
香菇多糖提取工艺
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香菇多糖提取工艺
复合酶解,酸与热水相结合浸提法 向香菇处理物中加 0.1g纤维素酶和 0.5g果
胶酶,目的是为了酶解细胞表面结构及细胞间连接物, 使其部分糖类物质的溶出。加 20倍体 积的水在 40 水浴恒温下浸泡 80min。后再迅速升温煮沸 60min,用 4层纱布过滤后收集滤 液, 再调节 pH分别为 4.5、5.0、5.5 ,进行酸浸提, 然后再用 4层纱布过滤后收集滤液。合 并两次滤液。浓缩。
热水浸提法 向香菇处理物中加入 20倍体积的蒸馏水,并在 40℃ 水浴恒温下浸泡 4h。
放置冰箱冷冻柜中冷冻过夜。将香菇浸泡液从冰箱中取出, 解冻后在恒温水浴箱内分别抽 提 30min、 60min、90min ,用4层纱布过滤后收集滤液。向滤渣中加入20倍体积的蒸馏 水再抽提一次, 沸煮时间同上用 4层纱布过滤后收集滤液,合并两次滤液。

实验一 银耳多糖的制备ppt课件

实验一  银耳多糖的制备ppt课件
• 形态:子实体纯白色,胶质,半透明,宽5-10 cm,由多 数宽而薄的瓣片组成,新鲜时软,干后收缩。
• 生态环境:生于栎及其他阔叶树腐本上。
• 资源分布:分布于西南及陕西、江苏、安徽、浙江、江西、 福建、台湾、湖北、湖南、广东、海南、广西等地。
8
• 性状鉴别:子实体由数片至10余片薄而多皱褶的瓣片
1. 银耳能提高肝脏解毒能力,起保肝作用;银耳对老年慢性 支气管炎、肺原性心脏病有一定疗效;
2. 银耳富含维生素D,能防止钙的流失,对生长发育十分有 益;因富含硒等微量元素,它可以增强机体抗肿瘤的免疫 力;
3. 银耳富有天然植物性胶质,加上它的滋阴作用,长期服用 可以润肤,并有祛除脸部黄褐斑、雀斑的功效;
• 2、提取液中加(提取液的)1/5~1/3V氯仿、(提取液的) 1/25 V正丁醇振摇5min,分层,离心(8500 rpm, 7 min), 吸取上清,重复2-3次左右,得到去蛋白的多糖液(约10-20 ml)。
• 3、去蛋白的多糖液加2V乙醇,离心得沉淀,真空干燥,获 得银耳多糖粗品,下次实验备用。
组成,呈菊花形、牡丹花形或绣球形,直径3-15cm,白色 或类黄色,表面光滑,有光泽,基蒂黄褐色。角质,硬而 脆。浸泡水中膨胀,有胶质。气微,味淡。
• 功效 :具有润肺止咳、补肾健脑、健身嫩肤的功效,
擅长补益肺气,可以提高肺组织的防御功能,提高机体的 免疫能力,从而增强体质,达到抗衰老的作用。
9
银耳的作用5Fra bibliotek糖的分类
• 单糖、双糖、多糖
葡萄糖
6
多糖的共同特性
1.分子量一般很大,在几万以上。在水中不能形成 真溶液,有的根本不溶于水,如纤维素。 2.物理性质:有旋光性,但无变旋现象。无甜味。 3.化学性质:无还原性,不能成脎。

香菇多糖的分离与鉴定课件

香菇多糖的分离与鉴定课件

10
15
吸光度
y = Ax + C,R2 =
0.8
0.6
0.4
0.2
0 0
10 15 20 25 30 35 40 45 Glucose Concentration (μg/mL)
20
25
30
35
香菇多糖
样品 1
吸光度
测得浓度 (μg/mL)
含糖量 %
样品 2
样品 3
含糖量 % = 测得浓度 / 配制浓度 × 100 %
香菇多糖的分离与鉴定
生物物质分离工程
Name Affiliation
Start
Registered
多糖
抗肿瘤
免疫 调节
抗氧化 降血脂
香菇多糖的分离与鉴定
学习目标
(1)掌握对香菇多糖的提取和分离方法 (2)掌握香菇多糖的总糖含量、单糖组成
和相对分子质量的测定方法
学习内容
(1)多糖的提取 (2)多糖的总糖含量测定 (3)多糖的单糖组成测定 (4)多糖的相对分子质量的测定 (5)多糖的酶解
=
%
3
分子量的测定
实验步骤
高效尺寸排阻色谱法分析香菇多糖相对分子质量 ➢ 配制50mmol/L乙酸铵溶液作为流动相,0.45μm膜过滤,超声30min脱气 ➢ 称取5mg香菇多糖,加1mL水,于60℃ 30min充分溶解,0.45μm膜过滤 ➢ 采用尺寸排阻色谱柱TSKgelG5000 与TSKgelG3000串联,连接蒸发光散射仪,
开速率快、混合物易分离、可平行分析多个样品,酶解后的样
品不需要处理即可点样。
致谢
汕头大学教学改革项目(38030210) 广东省教育创新计划项目(18219114)

[教材]酶解法提取食用菌多糖

[教材]酶解法提取食用菌多糖

酶解法提取食用菌多糖食用菌多糖是由l0个以上的单糖以糖苷键连接而成的高分子多聚物,存在于食用菌的菌丝体、子实体和发酵液中。

食用菌多糖有抗病毒、抗肿瘤、调节免疫功能和抗感染活性【1,同时还有增强免疫、抗氧化、降低血糖、抗溃疡、抗衰老、抗辐射等方面的生物活性和生理功能食用菌组成复杂,除多糖外还含有蛋向质、纤维素、半纤维素和果胶等物质,这些物质的存在会影响多糖的浸L叶J.因此在多糖提取过程巾适当加人酶制剂如水解纤维素的纤维素酶、水解果胶质的果胶酶等有利于多糖的浸,在提高溶出效率的同时,为后续捉取液的精制创造有利条件{l0】。

酶解法的一般方法为按一定料液比加入样品干粉和生物酶、蒸馏水,在合适温度和pH值下酶解一定时间,然后升温灭酶,在合适的温度下提取一定时间,离心取上清液,即可测定多糖含量I⋯。

以下分别介绍单一酶法和复合酶法在食用菌多糖提取巾的应用。

1.1 单一酶法提取食用菌多糖单一酶法是指一种酶来辅助提取食用菌多糖,从而提高多糖提取率。

常用的酶有蛋白酶、纤维素酶和果胶酶等。

蛋白酶可破坏蛋白质的肽键,水解细胞中的游离蛋白质.破坏其空问结构,使其变得松散。

同时蛋白酶还可水解蛋白聚糖和糖蛋白中的蛋向质,降低其对多糖的结合率,使多糖更易浸}H。

刘青娥I⋯彳F推荐的最佳提取条件下分别考察了果胶酶、纤维素酶和木瓜蛋白酶对袖珍菇多糖提取效率的影响,以直接水提法为对照,结果显示木瓜蛋白酶酶解法有最佳提取效果,多糖提取率提高了95%,试验考察了酶解温度、酶用量、pH和酶解时问对木瓜蛋白酶法多糖得率的影响.得的结果是酶解温度为50℃左右时多糖提取率最高,随着温度的升高,多糖提取率下降;木瓜蛋白酶朋量为2.O%。

冈浓度增加到2.0%以后,再增加酶用量多糖提取率基本不再增加;最佳酶解pH 值为5.2,因酶对pH值较为敏感,适当的pH值可维持酶活性中心的最佳空问构象,促进酶与底物的结合,提高反应速率:多糖得率随着酶解时间的延长而增加,超过100 rain时有所下降,是由于酶解时间太长会引起糖结构变化甚至碳环裂解,致使多糖得率降低。

食用菌多糖提取的原理和方法

食用菌多糖提取的原理和方法

食用菌多糖的来源与分布
来源
食用菌多糖主要来源于各种食用菌,如香菇、金针菇、黑木耳等,这些食用菌 在自然界中广泛分布,且具有丰富的多糖含量。
分布
食用菌多糖不仅分布于各种食用菌中,还可通过发酵工程等方法在微生物中获 得。
02
食用菌多糖提取的原理
物理原理
物理原理主要包括机械破碎、 超声波破碎、微波辅助等。这 些方法通过物理手段破坏食用 菌细胞壁,使细胞内的多糖成
特性
食用菌多糖具有较高的分子量、 复杂的分子链结构、良好的水溶 性和生物活性,通常具有抗氧化 、抗炎、抗肿瘤等作用。
食用菌多糖的生物活性与医疗价值
生物活性
食用菌多糖能够调节免疫系统、抗肿 瘤、降血糖、降血脂等多种生物活性 ,对预防和辅助治疗多种疾病具有潜 在的应用价值。
医疗价值
在医疗领域,食用菌多糖可用于开发 新型药物、功能性食品和保健品,为 人类健康提供更多选择。
分释放出来。
机械破碎是通过机械力量将食 用菌组织破碎,常用的设备有
破碎机、磨碎机等。
超声波破碎是利用超声波的振 动效应破碎细胞,具有高效、 低能耗的优点。
微波辅助是利用微波的加热效 应使细胞内的水分迅速升温产 生压力,从而使细胞壁破裂。
化学原理
化学原理主要是通过酸、碱、盐等化 学试剂的作用,使食用菌细胞壁溶解 或改变其结构,从而释放出多糖成分。
沉淀分离
利用多糖在水中的溶解度差异 ,通过加入沉淀剂使多糖沉淀 析出。
凝胶色谱分离
利用凝胶色谱技术根据多糖分 子量大小进行分离纯化。
干燥与保存
干燥方法
采用真空干燥、冷冻干燥等方法去除多糖中的水分,便于保存和运输。
保存条件
干燥后的多糖应存放在阴凉、干燥、避光的地方,避免受潮和污染。同时要关注 温度和湿度对多糖稳定性的影响。

香菇多糖的复合酶法提取.pptx

香菇多糖的复合酶法提取.pptx
➢ 香菇多糖是香菇中分
离出的一种重要的具有生理 活性的物质。
第1页/共19页
➢ 香菇多糖的作用:
香菇多糖具有抗病毒、 抗肿瘤,调节免疫力、 降血糖、抗氧化等功 能。有关香菇多糖的 研究,特别是结构方 面的研究已引起国内 外学者的高度关注, 并有望成为多糖领域 的研究热点。
第2页/共19页
与其他抗肿瘤药物相 比,香菇多糖几乎无 任何副作用,对胃癌、 鼻咽癌、直肠癌、乳 腺癌和慢性粒细胞白 血病等有抑制和防止 术后微转移的作用, 是目前已知最强的免 疫增强剂之一。
酶法提取由于反应特异性 强、条件温和易获得、提取时 间短、提取率高、绿色节能等 已引起广泛的关注,具有较大 的应用潜力,且随着对酶法技 术的不断研究,酶法与其他技 术如超声波、超高压、微波等 技术的联用也将第17页成/共1为9页 另一个热 点研究方向。
Thቤተ መጻሕፍቲ ባይዱnks
第18页/共19页
1.其作用条件温和。 2.通过酶法破壁去除杂质可以明显提高
提取率,缩短提取时间。 3.可减少能源消耗。 4.有效的保存多糖的生物活性。
第6页/共19页
复合酶提取香菇多糖:
复合酶
纤维素酶+木 纤维素酶+中 木瓜蛋白酶+ 中性蛋白酶+ 瓜蛋白酶 性蛋白酶 纤维素酶 纤维素酶
多糖得率(%)12.90
7.02
第3页/共19页
香菇多糖的提取方法:
热水浸提法 稀酸(碱)浸提法 微波法提取香菇多糖 超声波提取法 深层发酵培养提取法 酶解法
第4页/共19页
酶解法:
酶解法就是指在浸提的过程 中加入相应的酶来水解纤维素、 果胶、蛋白质分子等,以使多糖 从细胞中分离出来。
第5页/共19页

香菇多糖提取工艺(课堂PPT)

香菇多糖提取工艺(课堂PPT)
将香菇清洗干净,除去其根部,将剩下的菌伞挤压,切小块放入真 空干燥箱干燥,待香菇恒质量,放入粉碎机中粉碎,将粉碎后的香菇 粉依次通过40,60,80,100目的筛子,得到40目以下、40~60目、 60~80目、80~100目、100目粒度以上的样品,过筛之后把各级 香菇粉分别装到清洁干燥的烧杯中,编号贴上标签,置于真空干燥箱 中待用。
热水浸提法 向香菇处理物中加入 20倍体积的蒸馏水,并在 40℃ 水浴恒温下浸泡 4h。
放置冰箱冷冻柜中冷冻过夜。将香菇浸泡液从冰箱中取出, 解冻后在恒温水浴箱内分别抽 提 30min、 60min、90min ,用4层纱布过滤后收集滤液。向滤渣中加入20倍体积的蒸馏 水再抽提一次, 沸煮时间同上用 4层纱布过滤后收集滤液,合并两次滤液。
4
(2) 各种生产方法比较
主要的多糖提取方法有如下几种: 热水浸提法、 酸(碱)浸提法、 微 波提取法、超声波提取法、复合酶处理→水(或酸)浸提→浸提物→真空浓缩→浓缩液→酒
精沉淀→沉淀物→sevage法脱蛋白→水相→丙酮洗涤→多糖粗制品
5
酸浸提法 向香菇处理物中加盐酸溶液使其最终浓度分别为 0.3mol/L、0.4mol/L、
0.5mol/L , 置于60℃恒温水浴中浸提 8h , 加适量的NaOH中和至中性,过滤,浓缩。
微波提取法 向香菇处理物中按1:25加入去离子水浸泡过夜,粉碎,在一定微波条
件下提取,冷却后离心,从上清液中取样测定其中多糖含量。
香菇多糖提取
张志挺 14生科一班 29号
1
1、香菇多糖
(1) 香菇多糖结构式
分子式:〔 C42H72O36 〕n 分子量:〔1152.9995〕n
(2) 香菇多糖性质
香菇多糖(lentinan;LNT)是从香菇中分离纯化的一种葡聚糖,是以增强 T细胞和巨噬细胞功能为主的免疫增强剂。

猴头菇多糖提取工艺研究进展ppt

猴头菇多糖提取工艺研究进展ppt

03
免疫调节
徐 杭 民 [3]等 使 用 猴 头 菇 多 糖协同刀豆蛋白进行实验, 发现小鼠胸腺细胞显著增 殖,且促进作用随浓度上 升而增强。
Part 3 猴头菇多糖的提取工艺——热 水 浸 提 法
样品 粉碎 真空干燥
李卫旗[4]等以黄木耳为原料,分别以蒸馏水、0.3NHCl、0.5NNaOH为 浸提液提取黄木耳多糖,再用蛋白酶法与Sevage法交替进行脱蛋白, 最终得到最优浸提工艺为,浓缩液为原体积的20%,乙醇加入的体积倍 数为3,在50℃下浸提1.5小时。
Part 2 猴头菇多糖的生物活性
01 预防慢性胃炎
黄 萍 [1] 等 采 用 无 水 乙 醇 灌 刺法,在使用不同剂量灌 给药后发现溃疡面积明显 减少,而灌胃给药后采用 消炎痛皮下注射致小鼠胃 壁感染,同样发现黏膜损 伤显著降低,溃疡抑制率 上升。
02
抗氧化
贾 毓宁[2]等通过羟基自由基、 过氧化氢清除力及还原力测 定等试验,得出猴头菇多糖 具有清除一定活性氧自由基 能力,从而维持细胞内氧化 环境达到抗氧化目的
叶俊[9]等以猴头菇粉为原料,通过超声波辅助提取法提取其中的猴头 菇多糖,在正交试验的优化后,得出最佳提取条件为,料液比1:15, 超声波功率300W,提取时间15min,超声两次,在最优条件下得到的 多糖提取率为16.9%。
参考文献
[1]黄萍,罗珍,郭重仪,操红缨,吴君.猴头菇多糖胃黏膜保护作用研究[J].中药材,2011,34(10):1588-1590. [2]贾毓宁,朱静.猴头菇多糖的提取工艺优化及抗氧化活性研究[J].安徽农业科学,2017,45(31):148-150. [3]徐杭民,谢志慧,张蔚羽,蒋为荤.猴头菇多糖的免疫调节作用[J].中国中西医结合杂志,1994(07):427-428. [4]李卫旗,陈云龙,皇甫宏.金耳多糖的提取及其性能研究[J].菌物系统,1999(03):330-333. [5]魏华,张娣,陆玲,陈福程.几种食用菌多糖的提取与抗氧化性研究[J].南京师大学报(自然科学版),2017,40(02):72-75+88. [6]屈小玄,郑永清,毛姗,吕远平.响应面法优化复合酶法提取猴头菇多糖的工艺研究[J].食品科技,2015,40(07):182-187. [7]屈小玄,郑永清,毛姗,吕远平.响应面法优化复合酶法提取猴头菇多糖的工艺研究[J].食品科技,2015,40(07):182-187. [8]傅奇,肖玉娟,毛玉婷,林慧霞,周小伟.超声波协同复合酶提取猴头菇多糖的研究[J].农产品加工,2020,(10):34-38+43. [9]傅奇,肖玉娟,毛玉婷,林慧霞,周小伟.超声波协同复合酶提取猴头菇多糖的研究[J].农产品加工,2020,(10):34-38+43.

香菇多糖的提取PPT课件

香菇多糖的提取PPT课件

A
热水浸提法
B
酸碱浸提法
C
超声波浸提法
D
微波法
E
复合酶解
提取工艺流程
预处理
浸提(多糖与细胞分离)
过滤 取滤液
醇析 无水乙醇70%
干燥 三种方法 粗多糖
复溶(无离子水)
去除杂蛋白 BECM法 分级沉淀 甲醇
干燥
香菇多糖
热水浸提法提取香菇多糖
工艺流程
香菇粉 加蒸馏水 90摄氏度氺浴提取 滤液浓缩 过滤 静置
谢谢您的观看与聆听
Thank you for watching and listening
香菇多糖的提取
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2
目录
第一部分 香菇多糖的概念 第二部分 提取方法与工艺 第三部分 热水浸提法提取 第四部分 微波法提取流程 第五部分 香菇多糖的检测 第六部分 生活中香菇多糖
香菇多糖的检测
A
紫外可见光谱分析
B
薄层分析
C
红外光谱分析
D
凝胶柱层析检测
薄层分析:娃胶H薄板110℃活化1H后取
水解完全的香菇多糖和木糖甘、露糖、葡萄糖、 半 乳糖、鼠李糖等标样溶液,分别于 薄板点样, 以正丁醇:乙酸:乙脂:乙酸:甲醇:水=2:12:4:4:1 为展开剂展开,苯胺O二苯胺O丙酮显色。
Q&A问答环节
敏而好学,不耻下问。 学问学问,边学边问。
He is quick and eager to learn. Learning is learni ng and asking.

食用菌多糖提取的原理及方法ppt课件

食用菌多糖提取的原理及方法ppt课件
5
香菇多糖提取的方法
方法2:香菇发酵液经离心(3000r/min, 10~15min钟),弃上清夜得菌丝体。 取菌丝体2Kg(湿重),用沸水 (90~100℃)浸提3次,合并3次的热 水提取液,加入3倍体积的96%酒精, 充分混合,置于4℃下静置沉淀,弃 上清夜,沉淀晾干后为棕色无定形粉 末,即KS-2粗品。
2
食用菌速冻工艺
工艺流程 离心得菌丝体
沸水浸提
沸水浸提
醇提
得粗多糖
3
香菇多糖提取的方法
方法1:将香菇发酵液过滤,洗涤滤渣(菌 丝体),再将香菇菌丝体于95~100℃下烘 干,然后粉碎成小块。称取菌丝体(干) 30g,加600mL水,于96~100℃水浴2.5H, 离心(4000r/min,10min钟),收集上清 夜;
4
香菇多糖提取的方法
沉淀物加水600mL,于96~100℃再次 水浴浸提2.5H,离心收集上清夜,合 并2次的离心上清夜,真空浓缩至 4~5mL,加20mL无水酒精混匀,静置 过夜,弃上清夜后,用85%酒精洗涤2 次,再弃上清夜,晾干沉淀物即为香 菇多糖。30g菌丝体经该工艺提取, 可得480mg香菇多糖,收率为1.6%。
四节 食用菌多糖提取的原理和方法
多糖利用深层液体发酵培养香菇菌丝体后,从 发酵液中提取菌丝体,从而得到胞内香菇菌 丝体,再从菌丝体中,利用它在酒精和水, 及酶液的不同溶解度来提取胞内多糖。将菌 丝体抽提、浓缩、离心,取上清液脱色透析, 透析液再浓缩、离心,最后用溶液沉淀、洗 涤干燥而成。
6

灵芝多糖提取PPT课件

灵芝多糖提取PPT课件

2019/11/1
5
除蛋白
• 采用醇沉或其它溶剂沉淀得到的粗多糖中 常含有较多的蛋白质, 需要除蛋白。
• 除蛋白的方法传统上有Sevage 法、三氯乙 酸法、三氟三氯乙烷法等。
2019/11/1
6
Sevage 法
• 根据蛋白质在氯仿等有机溶剂中变性的特 点 , 用 V( 氯 仿 )∶V( 戊 醇 或 正 丁 醇 ) 为 5∶1 或4∶1,混合物剧烈振摇20~30 min,蛋 白质变性生成凝胶,离心分离,分去水层 和溶剂层交界处的变性蛋白质。
• 一般按多糖水溶液的1/5~1/4体积加入。
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Sevage 法优缺点
• 此种方法只能除去少量蛋白质,须反复多次,多糖有损失, 得率不高, 且氯仿对人体也有一定毒性, 操作时应注意。
• 该法优点是条件温和, 可避免多糖的降解。利用蛋白酶可 水解蛋白质的特性, 在多糖样品溶液中加入一些蛋白质水 解酶如中性蛋白酶和糜蛋白酶, 再用Sevage 法效果更佳。
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纤维素柱层析优缺点
• 这种方法实质上与分步沉淀法相反, 可称其 为分步溶解法。其理论塔板数较高, 所以流 出液的纯度高。
• 但该法的缺点是流速慢, 纯化周期长, 特别 是对于粘度较大的酸性多糖, 更显得流速过 慢。
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多糖纯度鉴定
• • 此法不能除去脂蛋白,因为脂蛋白溶于氯仿。
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多糖纯化
• 超滤法 • 季胺盐沉淀法 • 柱层析法 • 色谱法 • 其他方法
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纤维素柱层析
柱中的载体是纤维素。先用乙醇液将柱内 纤维素平衡好, 然后将多糖混合物全部沉淀 于惰性的纤维素上面。用不同浓度乙醇水 溶液(如80%, 60%, 40%, 20% ) 梯度洗脱, 则不同多糖就依次洗脱出来。先洗脱的是 分子量最小的多糖, 最终洗脱的是分子量最 大的多糖。在洗脱过程中, 由于各种多糖在 柱上进行无数次的溶解和沉淀过程, 最终将 各种多糖分离开来。

香菇多糖PPT课件

香菇多糖PPT课件
响其抗肿瘤活性
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性质
香菇多糖为白色或棕黄色粉末, 对光和热稳定, 具吸湿性, 相对分子质量较大, 无甜味和还原 性, 部分能溶于水,在水中的溶解度随分子质量 增大而降低,水 溶液为中性,不溶于甲醇、已醇、 丙酮等有机溶剂
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作用机理
• 香菇多糖对正常机体并无免疫促进作用,但能使荷瘤式或感染后的机体的免 疫应答得以提高。其制剂在动物体内筛选试验中未见直接抗癌效果,却明显 促进体外淋巴细胞培养物的转化作用。曾经发现胸腺切除的动物注射抗淋巴 细胞血清后,可削弱香菇多糖的抗肿瘤活性,且它的作用还能被巨噬细胞抑 制剂角叉菜胶和硅胶所削弱。所以说,香菇多糖是一种胸腺依赖型T细胞导 向并有巨噬细胞参与的特殊免疫佐剂。它能识别脾脏及肝脏中抗原的巨噬细 胞,促进淋巴细胞活化因子的产生,释放各种辅助性T细胞因子,增强宿主 腹腔巨噬细胞吞噬率,当宿主机体注射香菇多糖数小时后,一些具生理活性 的血清因子如急性期蛋白诱导因子、血管扩张和出血诱导因子、IL-1生成诱 导因子、IL3和集落刺激因子的水平达到峰值。这些因子作用于淋巴细胞、 肝细胞、血管内皮细胞后,产生许多有效免疫应答,同时导致胸腺内的前体 T细胞趋于成熟、分化、增殖并向外周释放。
• 所得 产品紫外吸收光谱显示,产品杂质含量少,红外光谱显示 结构与直接热水浸提法一致。 采用超临界 CO2 辅助提取后, 香菇多糖的提取率和质量显著提高。
脱脂,脱胶 脱色 除臭
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纯化
• 常用的纯化方法有:沉淀法、柱层析法、制备 性高效液相法、制备性 区域电泳法、超滤法等。 目前多采用各种不同的凝胶层析柱色谱和 离子 交换柱色谱。
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单一酶法 只用一种酶来辅助提取食用菌多糖
复合酶法 使用两 种以上的酶对多糖进行提取
常用的酶为蛋白酶、纤维素酶、果胶酶
优点:可提高多糖的得率,且反应温度较低,提 取时间较短。 缺点:酶的价格较高,易失活,实验过程中温度 控制要求严格且多糖的高级结构可能因酶的作用 而改变。
谢谢!
目录
一.食用菌多糖简介 二.食用菌多糖的应用 三.食用菌多糖提取方法
一.简介
食用菌多糖是由10 个以上的单糖以糖苷键连接 而成的高分子多聚物,存在于食用菌的菌丝体、子实 体和发酵液中。
食用菌多糖种类繁多,一般可将其分为4类:杂 多糖、甘露聚糖、葡聚糖、糖蛋白和多糖肽。
二.应用
2.1食用菌多糖在医学中的应用
优点:选择性好,适合分离热敏物质,溶剂回收简 单,二氧化碳具惰性保护作用、无毒,萃取后无有 害物质残留,可最大限度地保证产品的天然品质。 缺点:需在相当高的压力下操作, 压缩设备投资以 及附加费用较大,对配套设备要求很高, 进一步提 高了投资费用,且在连续化上还存在工艺设备方面 的困难。
3.2化学方法
其优点在于提取温度低、效率高、时间短; 但超声时间不宜过长, 否则可能使多糖发生 断裂而降低多糖的得率。
3.1.2微波法
微波提取的机理:微波透过对微波透明的溶剂, 到达物料内部的维管束和细胞内部,微波转化成分 子的动能而发热,连续的高温使细胞内部压力超过 其空间膨胀的能力,从而导致细胞破裂,胞内有效 成分流出,从而容易进入提取溶剂。
3.2.2酸碱浸提法
酸碱浸提法是通过食用菌细胞与酸碱液的充分 作用,使食用菌细胞基质、细胞壁充分吸水胀破, 致使食用菌多糖充分游离,提高产率。
优点:稀碱液浸提后提取的多糖含量高,既能节省 时间,又能减少原材料及试剂的消耗。 缺点:碱提后的溶液浓度增大,造成过滤困难。
3.3酶解法
食用菌组成复杂,含有多种会影响多糖浸出的 物质,因此在多糖提取过程中适当加入酶制剂有利 于多糖的浸出,在提高溶出效率的同时,为后续提 取液的精制创造有利条件。
优点:简单、高效、安全,具有高选择性。 缺点:此法耗电量较大,微波功率稍高,易出现焦 糊状态, 破坏食用菌多糖。
3.1.3超临界流体萃取技术
超临界CO2流体萃取分离过程是通过调节体系 的压力和温度,来控制溶解度和蒸汽压两个参数进 行分离,故超临界流体萃取综合了溶剂萃取和蒸馏 的两 种功能和特点。
3.2.1热水浸提法
多糖溶于水而不溶于醇、醚、丙酮等有机溶 剂。用热水进行提取,主要是借助于热力作用使 食用菌细胞发生质壁分离,水作为溶剂渗入细胞 壁和细胞质中,溶解液泡中的物质,使其穿过细 胞壁, 扩散到外部溶剂中。
优点:试验设备简单,操作容易, 准确度高,成 本低廉,一次性投入较小,适用于大规模的工业 生产。 缺点:需要的劳动强度大,提取效率低且费时, 产品纯化困难且活性损失较大。
三.提取方法
3.1物理方法
3.1.1超声波法
超声波法提取食用菌多糖是利用超声波的高频 振荡、空化效应和机械剪切效应,通过强化固体微 粒向液体的传质,促进提取剂向固·液界面扩散。另 外,空化作用产生的冲击波和射流可破坏植物细胞 壁和细胞膜结构,并除去部分妨碍酶与底物接触的 物质,从而增加细胞内容物通过细胞膜的穿透能力。 固体微粒和缔合水分子也被粉碎,变成微小的质团, 从而提高了有效成分溶出的速度,即可提高多糖的 得率。
药理作用:抗肿瘤作用,免疫调节作用,降血 压、血糖、血脂作用,抗氧化作用,抗衰老作用, 抗病毒作用。
目前食用菌多糖作为抗肿瘤、抗突变、抗艾滋 病(HIV)、降血压新药,主要应用于对人体多种致癌 物的抑制。
2.2食Байду номын сангаас菌多糖在保健食品中的应用
食用菌多糖具有良好的排毒养颜、润肺益气、健 脾和胃、补肾利尿、强精护扶、健脑、增寿等保健 功效,还具有降低胆固醇、防止血管硬化、促进儿 童生长发育的作用,具有很大的开发价值,在保健 品、功能性食品等方面都可以得到广泛应用。
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