液相色谱柱的使用与维护
液相色谱柱的维护与保养
液相色谱柱的维护与保养
液相色谱柱的维护与保养非常重要，可以延长柱的使用寿命并保证分离效果的稳定性。
以下是液相色谱柱的维护与保养的一些建议：
1. 保持柱的洁净：在使用结束后，及时用纯水和有机溶剂洗净色谱柱。
可以采用逆向流动的方法，即用纯水从柱底往上流动直到洗净。
避免使用酸碱溶液以及有机溶剂中的含有杂质的溶液来清洗，避免杂质残留。
2. 避免干燥：柱在储存或者不使用时要避免干燥。
可以用保湿的方式，例如在储存时使用密封塑料袋或保湿剂。
避免长时间暴露在空气中，避免干燥引起的柱损坏。
3. 正确使用柱：避免使用超过柱最大压力或流速的方法进行色谱分离，这会导致柱壁破裂或分离效果恶化。
遵守柱的使用说明和规格。
4. 定期检查：定期检查柱的使用情况，例如检查是否有柱壁表面损坏或吸附物的形成。
如果发现有问题，应及时更换色谱柱。
5. 柱的再生：某些类型的液相色谱柱可以通过柱的再生来延长使用寿命。
具体的再生方法可以参考柱的使用说明书或与供应商咨询。
6. 注意避免柱受到冲击：在搬运和使用过程中要轻拿轻放，避免柱受到冲击造成损坏。
总之，正确的维护与保养可以延长液相色谱柱的使用寿命并保证其分离效果的稳定性。
根据柱的材质和类型，还可以采取适当的措施进行再生以延长柱的使用寿命。
常用液相色谱柱使用与保养
常用液相色谱柱使用与保养液相色谱（Liquid Chromatography，简称LC）是一种分离和分析物质的方法，广泛应用于化学、生物化学、环境科学、食品科学等各个领域。
在液相色谱系统中，色谱柱是其中最为重要的组成部分之一，对色谱分离的效果和分析结果有着重要影响。
因此，正确的使用和保养色谱柱是保证色谱实验质量和延长色谱柱寿命的关键。
一、色谱柱的选择1.根据分析需要选择合适的色谱柱类型，如反相、离子交换、凝胶、手性等。
选用的色谱柱应能实现样品分离的目标。
2.考虑色谱柱尺寸，如柱径和柱长。
柱径越小，理论板高度越高，分离效果越好，但同时也容易增大柱后压力。
柱长则决定了分离时间，通常根据样品的复杂程度和实验要求进行选择。
3.考虑色谱柱填充物，如C18、C8、C4等反相填料。
填充物的理化性质不同，会对分离效果产生影响。
根据样品性质和分离目标选择填料。
二、使用色谱柱的注意事项1.在使用前检查色谱柱外观，确保柱壁完好无损，无裂缝或损坏。
同时检查柱头端口是否干净，无污物残留。
2.进行柱前的处理，如样品预处理和溶剂预处理，保证样品的稳定性和纯度，避免对色谱柱产生不利影响。
3.操作时避免剧烈振荡、震动或摇晃色谱柱，以免对柱填料产生机械损伤。
4.在柱温控制装置的帮助下，保持色谱柱运行温度的稳定，以确保分离结果的重复性和再现性。
三、色谱柱的保养1.使用前、使用后和中间暂停使用时需正确保管色谱柱。
使用前，色谱柱应存放在干燥、阴凉的地方，避免阳光直射。
使用后，将色谱柱用保护帽覆盖，防止灰尘、气体和湿气进入柱内。
中间暂停使用时，用适当的主流溶液保养柱床，避免干燥。
保养柱床时需将色谱柱倒放，使柱床保持湿润状态。
2.避免在色谱柱上溢液，以免引起柱床断裂或填料活化。
使用前，尽量将样品溶液过滤或超声处理，避免样品中存在大颗粒杂质。
3.保证洗涤液和贮存液的纯度和质量，避免因杂质和离子引起色谱柱填料的损坏。
对于需要多次使用的色谱柱，洗涤液需要选择与柱填料相容的溶剂进行洗脱。
维护高效液相色谱柱的方法
维护高效液相色谱柱的方法如何维护高效液相色谱柱高效液相色谱（High Performance Liquid Chromatography，简称HPLC）柱是常用的分析仪器之一，通常用于生物、药物、环境等领域的化学分析。
为了保证HPLC柱的正常运行和保持其分离性能，有必要进行定期的维护和保养。
本文将介绍一系列维护HPLC柱的方法，帮助用户保持柱的高效性和延长其使用寿命。
一、准备工作在对HPLC柱进行维护之前，必须先准备工作。
首先，关闭HPLC 系统并关闭进样器。
然后，从色谱柱系统中拆下柱头，将柱塞或过滤垫插上柱头，以防止溶剂蒸发。
接下来，使用注射器将连接器处的溶剂完全抽入柱中，以避免残留溶剂的挥发造成柱内压力不均。
二、柱的清洗与保养1. 柱的清洗(1) 首次使用前的预处理柱在使用之前，首先需要进行预处理。
可将柱用纯溶剂（如醋酸乙酯/甲醇或乙酸乙酯/乙醇等）冲洗，以除去封装过程中可能残留的杂质和填充剂。
(2) 洗脱剂的选择柱的清洗需要使用合适的洗脱剂。
常见的清洗剂为纯溶剂、水、有机溶剂、酸碱溶液等。
根据柱的具体使用情况和分离物质的性质选择清洗剂。
(3) 清洗步骤清洗步骤可分为：预洗、主洗和后洗三步。
预洗：通常使用纯溶剂预洗，以移除柱表面的胶凝物和杂质。
可使用高压注射器将预洗溶剂不断注入柱内，或使用真空抽滤法注入预洗溶剂。
主洗：根据实际需要选择合适的清洗剂。
如果色谱柱上附着了水溶性的物质，可用水洗涤；如果有机溶剂沾附在柱上，可用纯有机溶剂洗涤。
清洗剂的流速可逐渐增加，以增强冲洗效果。
后洗：用纯溶剂进行后洗，以充分冲洗柱内的清洗剂残留物，恢复柱的初始性能。
2. 柱的保养(1) 使用前的条件调整在每次使用HPLC柱之前，需要根据实验需求调整一些条件。
比如，选择适当的温度、洗脱剂浓度、流速等，以提高分离效果和保护柱的寿命。
(2) 样品预处理样品的预处理也是保护柱的重要环节。
柱上堆积的杂质和沉积物会降低色谱分离效果，因此，要尽可能减少样品中的杂质。
液相色谱柱的日常维护保养
液相色谱柱的日常维护保养液相色谱柱是一种常见且重要的分析仪器，在实验室中被广泛应用。
为了保证液相色谱柱的良好工作状态和分析结果的准确性，日常维护保养是必不可少的。
预测维护在实验过程中，对液相色谱柱的使用会产生一定程度的损耗。
因此，在使用液相色谱柱的过程中，需要对其进行预测维护。
预测维护包括以下几个方面：1.液体进样器：每天使用前需要使用5%甲酸或醋酸水溶液进行清洗，冲洗10次；2.处理样品之前，需要使用纯水冲洗固相萃取（SPE）柱，以避免在反相色谱柱中残留的盐和其它非极性化合物损害色谱柱；3.沉淀时，孔径小的使用 0.45 微米滤膜；4.在一次实验操作中，同一规格的 Sample Loop 的使用次数不要超过30 次。
使用前，需要用洗针液清洗洗针头和 Sample Loop；5.使用过程中，如果发现色谱图出现异常，或者分离峰出现交叉、拖挂的情况，则需要对色谱柱进行常规维护。
常规维护常规维护主要涉及以下方面：色谱柱的清洗准备工作：1.将色谱柱固定在色谱仪上；2.关闭色谱仪，并将系统空气排出。
清洗步骤：1.用离子交换水（或去离子水）进行快速洗脱。
每 10 分钟换一次水，连续换 3 次；2.用5%甲酸（或乙酸）水溶液和纯水依次进行梯度洗脱，各洗 10 分钟，共需进行 20 分钟；3.用离子交换水（或去离子水）进行冲洗达 20 分钟，温度一般设置为室温；4.最后用重组缓冲液冲洗至少 30 分钟，直到色谱图正常为止。
清洗完毕后，需要用纯氮对色谱柱进行干燥，再关闭系统气路。
柱的保存柱的保存需要在低温，干燥，阴凉和避光的环境下进行。
存储柱的时间不宜过长，建议每次使用后立即保存，并在下次使用前先进行重新均衡。
色谱柱的更换在使用一段时间后，液相色谱柱的效果会逐渐降低，这时需要进行更换。
在更换时，需要注意以下几点：1.需要按照生产厂家提供的说明书进行更换；2.更换前需要对新柱进行校准；3.更换完成后，需要重新运行QC 样品，验证新柱的分离效果是否正常。
液相色谱柱的使用和维护保养
液相色谱柱的使用和维护保养液相色谱柱是一种广泛使用的分离技术，可用于分离和测定复杂混合物中的组分。
由于液相色谱柱具有精确分离、操作简便、分离效率高等特点，因此，越来越多的实验室都开始使用该技术。
在使用液相色谱柱时，正确的维护保养非常关键。
本文将介绍液相色谱柱的使用方法和维护保养技巧，以便确保您的分离实验能够得到最佳的结果。
一、液相色谱柱的使用1. 准备工作使用液相色谱柱之前，必须先进行预备工作。
这包括：清洗和准备液相色谱柱以免携带有污染物。
准备需要分离和测定的样品。
准备适当的流动相。
流动相必须符合样品的性质。
液相色谱柱的流动相应该是无色的，纯净的水或相应的缓冲液，并具有必要的缓冲能力。
根据柱的尺寸来选择适当的样品注射量。
2. 柱的装配通常情况下，液相色谱的柱是由管状的柱壳、填充柱节、柱端固定件和柱段之间的密封件组成。
在对柱进行装配的时候，对组件应该加强检查以保证每一个元件的质量。
柱被放置在可控压力的色谱装置中，直到达到设定的温度，流动相通过柱床高度。
在样品通过柱床的过程中，要确保流动相的速度恰好足够将所有的组分都分开并在规定的时间内溶出。
3. 分析过程准备工作完成后，可以开始进行样品的分离实验。
在整个过程中，以下措施应予以注意：在样品从样品室进入色谱柱之前，流动相必须在柱中流动。
否则，在注入样品时，将有空气囤积在柱床中，会在透射检测器处产生噪音。
更换液相色谱柱的流动相时需要小心，因为对于一些化学品来说，即使是微量的杂质也会对结果产生影响。
如果发现柱床粘住或困住，不应使用力量来拉动柱子，而应该使用相反方向的流动相，以使样品回到某一个位置，并反向流动一会，这样可以避免样品损坏柱子床。
二、液相色谱柱的维护保养液相色谱分析的成功与否，除了预备工作和分析过程外，还与样品的制备、取样位置以及样品进入液相色谱柱中的流动相的条件等因素有关。
因此，经常做好液相色谱柱的保养工作，可以有效防止柱子损坏，延长其寿命并保证实验结果的准确。
液相色谱柱的使用和维护
前言液相色谱的分离原理是,在色谱柱流动相中样品的不同组分与固定相发生吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和等作用,由于作用力的大小、强弱不同,各种组分在固定相中滞留的时间也不同,因而先后从以固定相中流出而得到分离。
因此液相色谱分离的关键之一是色谱柱中的固定相。
柱效的好坏直接影响目标化合物的分析和检测。
但在液相色谱运行过程中,色谱柱极易发生问题,因此掌握正确使用和维护色谱柱的知识非常必要。
色谱柱使用过程中容易发生柱堵塞引起系统压力过高;柱效低引起峰拖尾、变宽;柱污染、损坏导致鬼峰等问题。
引起这些问题的内在原因有:(1) 硅羟基的死吸附。
色谱柱的基材硅胶粒子表面存在硅胶羟基。
任何物质在色谱柱中都存在双分配效应,即在流动相与固定相之间进行分配,又在流动相与硅羟基之间进行分配。
被分析物质被硅羟基吸附称为非特异性吸附,或称死吸附。
当硅羟基对被分析物质的吸附趋近于饱和状态时,色谱柱柱效下降,峰形出现拖尾、变宽。
(2)重金属。
色谱柱的基材硅胶粒子无论纯度多高，无论怎样处理,都会有不少于5x10- 6的重金属以金属氧化物的形式残存在硅胶粒子的表面,这些金属氧化物很容易与其它化合物形成螯合物,使其被氧化,产生不对称峰或拖尾峰。
例如儿茶素和大多数中药,因含有多酚结构,极易被金属氧化物氧化,影响其分离效果。
(3) 碳流失。
固定相经长期使用,会有部分碳链被流动相洗脱下来,随流动相一起流出色谱柱外, 造成碳流失。
(4)缓冲液中盐的析出。
在做色谱分析时,有时流动相中会含有缓冲盐溶液。
分析结束后,如果没有先用含一定配比的水相流动相冲洗,而直接用纯有机相冲洗,瞬间柱子中的微环境是高有机相、低水相。
这时流动相中的缓冲盐溶液极易析出盐,将柱子堵塞,使柱压升高,柱效下降。
(5)色谱柱变干。
如果对色谱柱保存不当,使色谱柱中的保存液全部挥发,柱子内部变干,造成色谱柱的损伤,影响分离效果。
2色谱柱的使用新柱使用前应先检查产品包装、外观是否完好。
常用液相色谱柱原理及使用与维护保养PPT
优化方法
2
流动相浓可最大化柱的分离效率。
3
其他因素
流动相配比、pH、缓冲剂的选择和添加 等因素对柱的影响合理控制以保证柱的 寿命和效能。
液相色谱柱的使用注意事项
避光
溶剂、样品和固定相种类不同、pH值不同时，柱的影响因素也不同。
柱后系统
在固定相的保护下避免混杂污染，需要定期清洗、维护流动相使其稳定。
常见的液相色谱柱材料
C1 8固定相
极佳的耐水性和极性选择性， 强了解对齐作用，能保留并分 离大部分非极性化合物。
C8固定相
与C18固定相类似，但对一些极 性化合物有更强的亲和力。
C4固定相
针对较为极性的化合物进行的 分离，一般用于富集和预分离。
液相色谱柱的选择与优化
1
选柱原则
分析物性质、柱材选用、固定相浓度、
样品处理
避免样品中有颗粒物、化合物堵塞缓冲期、流量计、检测器等器件。
液相色谱柱的维护保养方法
1
固定相的重新平衡
柱使用一段时间之后，固定相会逐渐老
流动相的定期更换
2
化，出现问题时，需要进行反相和正相 清洗。
某些流动相在特定条件下会出现化学变
化，影响柱的使用寿命。
3
柱的收纳和储存注意事项
需要在避光、低湿度、适温、无异味的 环境下进行柱的存储。
常见的色谱柱问题和解决方案
柱子变脏
提示柱子可能有混杂物污染，可 以考虑使用反相柱或者…
柱子漏液
可能是管接口关系不太紧密或者 管道盲板故障，可以检查密封情 况。
柱子分离效率低
建议从固定相性质、流动相配比、 检测器选择等多方面考虑优化。
离子交换柱
离子柱是选择性分离离子混合 物的有用工具。
液相色谱柱保护柱安全操作及保养规程
液相色谱柱保护柱安全操作及保养规程液相色谱柱保护柱是在液相色谱分析中不可或缺的部分，它不仅可以延长色谱柱使用寿命，还能保证结果的准确性和可靠性。
但是，在使用液相色谱柱保护柱的过程中也存在一些潜在的危险，因此我们需要了解液相色谱柱保护柱的安全操作以及保养规程。
安全操作1. 确认柱保护柱适用于分析物在选择柱保护柱之前应该首先确认柱保护柱是否适用于分析物，也需要明确分析物的性质以及流动相的性质。
如果分析物中含有弱酸、弱碱成分，应该选择正相柱保护柱；如果分析物中含有酸性、碱性成分，则应该选择反相柱保护柱。
2. 正确连接柱保护柱在连接柱保护柱的时候需要确认连接口是否密封，避免柱保护柱造成柱床或者柱头受到破坏。
3. 确认起点和终点在连通柱保护柱之前，必须确定身份的起点和终点，以此来避免将流动相直接注入保护柱内部。
4. 避免高压冲击在液相色谱分析中，高压是常见的现象。
当高压过大或者压力突然降低时，会对柱保护柱造成冲击，导致保护柱损坏。
因此，需要避免压差过大，分段进行柱洗和换柱。
5. 避免液相中的氧化剂一些溶解度较差的氧化剂（如过氧化氢、亚硝酸盐等）会与柱保护柱中的硅酸胶反应，导致保护柱损坏。
因此，在使用液相色谱柱保护柱的时候需要避免使用这些氧化剂。
6. 定期更换柱保护柱柱保护柱是一种消耗品，在使用过程中需要定期更换。
如果不及时更换，柱保护柱中的沉淀物和过期的填料会对柱床造成污染，降低分析结果的准确性和可靠性。
保养规程1. 消毒为了避免保护柱内部发生细菌或者霉菌污染，需要定期消毒保护柱。
常用的消毒方法包括用有机溶剂洗涤、用二氧化硫气体灌注或者用过氧化氢消毒液处理。
2. 清洗柱体柱保护柱内部可能会形成脱落的硅酸胶颗粒，如果不及时清洗会对分析结果产生影响。
因此，需要定期用高纯度溶剂清洗柱体。
避免使用大量有机溶剂或者酸碱溶液，以免损坏保护柱。
3. 定时更换柱保护柱柱保护柱属于消耗品，使用一定时间之后需要及时更换。
在更换柱保护柱之前，应该进行柱床洗涤，避免污染保护柱内部。
高效液相色谱仪色谱柱的维护与保养
高效液相色谱仪色谱柱的维护与保养一、高效液相色谱仪色谱柱的维护与保养1. 注意安全在进行高效液相色谱仪色谱柱的维护和保养时，应注意安全，不要将手放在柱子上或柱子的内部，以免受到电击。
同时，也要注意防止外界的杂质进入柱内，避免影响柱子的性能。
2. 清洁色谱柱首先，使用湿抹布将色谱柱表面清洁干净，然后使用笔刷和溶剂将柱子内壁清洁干净。
清洁完毕后，需要将柱子放置在洁净的空气中，以便完全自然晾干。
3. 保养色谱柱在保养色谱柱时，需要注意柱子的密封，定期检查柱子的密封情况，如果发现柱子有渗漏现象，及时采取措施进行修理。
另外，还需要定期检查柱子的耐压强度，以免因耐压强度不足而造成柱子的破裂。
4. 定期更换色谱柱定期更换色谱柱是高效液相色谱仪色谱柱的保养工作之一。
色谱柱的使用寿命一般为2-3年，随着使用时间的延长，色谱柱的性能会发生变化，从而影响测试结果的准确性。
因此，需要定期更换色谱柱，以保证测试结果的可靠性。
二、色谱柱的存储1. 色谱柱应存放在干燥、无污染的环境中，避免阳光直射，以免受到湿气和污染物的侵害。
2. 色谱柱应放置在室温下，避免高温环境，以免影响色谱柱的性能。
3. 色谱柱应存放在通风良好的环境中，避免过多的湿气，以免影响色谱柱的密封性能。
4. 色谱柱应存放在有足够空间的地方，以免柱子撞击，造成损坏。
5. 色谱柱应存放在牢固的架子上，以免柱子受到重力的影响，造成损坏。
6. 色谱柱应存放在有足够防护措施的地方，以免受到杂质的污染，影响柱子的性能。
三、总结高效液相色谱仪色谱柱的维护与保养是高效液相色谱仪色谱柱使用的必要措施，既要注意安全，又要注意清洁和保养，定期更换柱子，并且要认真维护存储环境，以确保高效液相色谱仪色谱柱的正常使用。
液相色谱柱空柱管安全操作及保养规程
液相色谱柱空柱管安全操作及保养规程液相色谱柱是分析化学中经常使用的重要设备，其常用的配件之一是空柱管（Guard Column）。
空柱管可以保护主色谱柱，延长柱的寿命，同时也能提高柱的效率和稳定性。
本文将介绍液相色谱柱空柱管的安全操作及保养规程。
安全操作1. 安装空柱管液相色谱柱空柱管安装时，应先检查空柱管是否与主柱相匹配。
安装时，必须将空柱管正确地插入到接头处，并根据需要使用节流器或其他辅助装置。
2. 清洗空柱管清洗空柱管前，应注意不要将空柱管曝露在环境中，以免产生污染或其他影响。
清洗前必须确保气泡全部排出，并注意规定好的洗涤程序和清洗方法。
在空柱管使用前，一定要彻底清洗干净以避免污染主柱。
3. 更换空柱管在某些情况下，空柱管需要更换。
更换空柱管时，必须按照规定程序操作，并注意不要弄掉其他柱的接头，否则会影响色谱的稳定性和准确性。
在更换空柱管后，要重新安排柱的顺序，并按照规定的程序对色谱仪进行校准。
保养规程1. 常规检查为了保证色谱柱的稳定性和可靠性，需要对色谱柱进行常规检查。
检查时，应注意柱是否完好无损，是否存在破损或者漏气现象。
如发现异常情况，则需要进行下一步的清洗或维护。
2. 空柱管更换周期空柱管的更换周期需要根据具体情况而定。
一般情况下，建议每60-80次分析进行一次空柱管的更换，以保证样品的准确性和色谱分离的稳定性。
3. 定期清洗为了保证色谱柱的性能稳定，还需要对色谱柱进行定期清洗。
在正常使用情况下，建议每30天对色谱柱进行一次清洗，以确保色谱柱的稳定性和可靠性。
4. 保护柱柱罐为了避免磕碰或者其他损伤情况的发生，建议在移动柱柱罐时，在外部加上一层保护罩或者泡沫垫，使柱罐更加稳定、更加可靠。
5. 清洗柱柱罐在某些情况下，柱柱罐需要进行清洗。
清洗柱柱罐时，一定要使用专业工具和清洗液，不要随意选择清洗方法，以免对柱柱罐产生影响。
总结液相色谱柱空柱管是液相色谱技术中的重要设备之一，其保养和操作都非常重要。
液相色谱的维护保养
液相色谱的维护保养
液相色谱是一种常见的分离和分析技术，广泛应用于化学、生物、医药等领域。
要保证液相色谱的精度和稳定性，需要进行维护保养。
一、常规维护
1. 每天使用前应检查仪器的电源插头是否牢固，仪器内部是否有异物。
2. 每次开机前应清洗进样器、柱和检测器，避免样品残留和杂质附着。
3. 每天结束工作后应清洗所有部件，包括进样器、柱、检测器和泵，避免化学物质残留引起的腐蚀和堵塞。
二、柱的维护
1. 液相色谱柱在使用过程中会出现色谱效率下降、分离效果变差等情况。
此时可以进行反向冲洗或正向冲洗，以清除柱中的杂质和残留物质。
2. 液相色谱柱的使用寿命有限，一般为几个月到一年不等，需要及时更换。
同时，存储柱时应避免极端温度和湿度。
三、检测器的维护
1. 液相色谱检测器的光源和检测器需要定期清洗，避免灰尘和污垢影响检测精度。
2. 液相色谱检测器需要进行定期校准和标定，以确保检测结果的准确性和可靠性。
四、泵的维护
1. 液相色谱泵需要定期更换密封圈和活塞，以确保泵的密封性和稳定性。
2. 液相色谱泵需要定期进行排气操作，以排除气泡和空气，避免影响流量稳定。
总之，液相色谱的维护保养是保证仪器正常运行和分析结果准确可靠的重要措施。
需要科学合理地制定维护计划和操作规程，定期检查仪器性能和部件状况，及时发现和解决问题。
【液相色谱】液相色谱柱的正确使用和维护 液相色谱维护和修理保养
【液相色谱】液相色谱柱的正确使用和维护液相色谱维护和修理保养色谱柱的正确使用和维护特别紧要，稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。
在色谱操作过程中，需要注意下列问题，以维护色谱柱。
①避开压力和温度的急剧变化及任何机械震动。
温度的蓦地变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充情形；柱压的蓦地上升或降低也会冲动柱内填料，因此在调整流速时应当缓慢进行，在阀进样时阀的转动不能过缓（如前所述）。
②应渐渐更改溶剂的构成，特别是反相色谱中，不应直接从有机溶剂更改为全部是水，反之亦然。
③一般说来色谱柱不能反冲，只有生产者指明该柱可以反冲时，才可以反冲除去留在柱头的杂质。
否则反冲会快速降低柱效。
④选择使用适合的流动相（尤其是pH），以避开固定相被破坏。
有时可以在进样器前面连接一预柱，分析柱是键合硅胶时，预柱为硅胶，可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”，避开分析柱中的硅胶基质被溶解。
⑤避开将基质多而杂的样品尤其是生物样品直接注入柱内，需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一保护柱。
保护柱一般是填有相像固定相的短柱。
保护柱可以而且应当常常更换。
⑥常常用强溶剂冲洗色谱柱，清除保留在柱内的杂质。
在进行清洗时，对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂渐渐过渡，每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右，即常规分析需要50～75ml。
下面列举一些色谱柱的清洗溶剂及次序，作为参考：硅胶柱以正已烷（或庚烷）、二氯甲烷和甲醇依次冲洗，然后再以相反次序依次冲洗，全部溶剂都必需严格脱水。
甲醇能洗去残留的强极性杂质，已烷使硅胶表面重新活化。
反相柱以水、甲醇、乙腈、一氯甲烷（或氯fang）依次冲洗，再以相反次序依次冲洗。
假如下一步分析用的流动相不含缓冲液，那么可以省略最后用水冲洗这一步。
一氯甲烷能洗去残留的非极性杂质，在甲醇（乙腈）冲洗时重复注射100～200？l四氢呋喃数次有助于除去强疏水性杂质。
四氢呋喃与乙腈或甲醇的混合溶液能除去类脂。
高效液相色谱仪色谱柱的正确操作及维护和修理保养
高效液相色谱仪色谱柱的正确操作及维护和修理保养高效液相色谱仪色谱柱的正确操作色谱柱是高效液相色谱仪最紧要的部件，被测物质能否被很好的分别和测定，色谱柱的性能起着决议性的作用。
因此，在日常工作中，应特别注意色谱柱的正确使用和维护和修理保养，以延长色谱柱的使用寿命。
1、使用预柱和保护柱预柱（pre—column）安装于泵和进样器之间，它给色谱柱中的流动相供应了完全的平衡，并防止了对柱填料有破坏作用的组分或污染物进入色谱柱。
保护柱（guardcolumn）可以阻拦能够坚固地吸附于色谱柱上的组分进入色谱柱，保护柱应与色谱柱的填料相同。
预柱和保护柱可以常常更换，而不需要常常更换色谱柱，这就延长了色谱柱的使用寿命。
2、防止气体进入有些色谱柱（如凝胶柱）是不允许气泡进入的，否则将会使柱效降低甚至形成微小的难以驱除的气室。
因此，为了防止气泡进入色谱柱，确定要使用经过脱气的流动相，并且要严格依照下列步骤来安装色谱柱。
a、拆卸下色谱柱入口处的密封螺丝，察看是否有溶剂渗出；b、如有溶剂渗出，即可将色谱柱接到管路上，以避开气泡的进入；c、如无溶剂渗出时，表明色谱柱的此端已经进去空气了，此时，可将色谱柱的出口端接到进样阀上，以流动相来反方向冲洗色谱柱，以便将柱内的空气排出。
建议以0、2ml/min的小流量来冲色谱柱，假如溶剂的流速太快或者是压力蓦地的上升都将会导致柱性能的降低；d、假如流出的溶剂里不含有气泡，说明柱内的气体已经被排出了，再将色谱柱以正确的方向接好，这样气泡就进不到色谱柱里面了。
3、清洗为了不使被测物质和杂质停留在色谱柱中，在每次的样品分析工作完成之后，都应适时地清洗色谱柱。
首先要用对被测样品洗脱本领强的溶剂来洗脱色谱柱，以分析工作中常用的反相色谱分析法为例，因其先流出的物质是极性大的物质，此时应用100%的甲醇或使用异丙纯、四氢呋喃等极性稍弱的溶剂将吸附在柱内的极性小的物质洗脱下来，洗脱液的用量一般为柱体积的20倍即可。
色谱柱的安装,设置,老化和维护
色谱柱的安装,设置,老化和维护液相色谱柱的使用方法：1、色谱柱的使用说明：（1）、色谱柱使用前注意事项：色谱柱的储存液无特殊说明，均为评价报告所示的流动相。
在使用前，一定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。
在反相色谱中，如用高浓度的盐或缓冲液作洗脱剂，应先用10％左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡一下，否则缓冲液中的盐在高浓度的有机相中很容易析出，堵塞色谱柱。
（2）、流动相：流动相中所使用的各种有机溶剂要尽可能使用色谱纯，配流动相的水最好是超纯水或全玻璃器皿的双蒸水。
如果将所配得流动相再经过0.45μm的滤膜过滤一次则更好，尤其是含盐的流动相。
另外，装流动相的容器和色谱系统中的在线过滤器等装置应该定期清洗或更换。
以常规硅胶为基质的键合相填料通常的PH值适用范围是2.0-8.0，BDS C18适合于碱性化合物，PH值适用范围为2.0-10.0。
当必须要在PH值适用范围的边界条件下使用色谱柱时，每次使用结束后立即用适合于色谱柱储存并与所使用的流动相互溶的溶剂清洗，并完全置换掉原来所使用的流动相。
（3）、样品：样品也要尽可能清洁，可选用样品过滤器或样品预处理柱（SPE）对样品进行预处理；若样品不便处理，要使用保护柱。
在用正相色谱法分析样品时，所有的溶剂和样品应严格脱水。
2、色谱柱的保存（1）、反相色谱柱每天实验后的保养：使用缓冲液或含盐的流动相，实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟，洗掉色谱柱中的盐，再用甲醇冲洗30分钟。
注意：不能用纯水冲洗柱子，应该在水中加入10%的甲醇，防止将填料冲塌陷。
（2）、长期保存色谱柱：如色谱柱要长时间保存，必须存于合适的溶剂下。
对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中，正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中，离子交换柱可以储存于水（含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞）中，并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。
储存的温度最好是室温。
3、色谱柱的再生因为色谱柱是消耗品，随着使用时间或进样次数的增加，会出现色谱峰高降低，峰宽加大或出现肩峰的现象，一般来说可能是柱效下降。
常用液相色谱柱原理及使用与维护保养
新型液相色谱柱的开发
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环境监测领域
液相色谱柱在环境监测领域的应用不断拓展，用于检测水、土壤、空气等样品中的有机污染物和农药残留。通过高效分离和灵敏检测，能够提供准确的污染源定位和污染程度评估。
食品药品安全领域
液相色谱柱在食品药品安全领域的应用也日益广泛，用于检测食品中的添加剂、农药残留，以及药品中的杂质和降解产物。通过严格的分离和检测，能够保障食品药品的安全性和有效性。
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液相色谱柱的维护保养
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高效液相色谱NH2柱安全操作及保养规程
高效液相色谱NH2柱安全操作及保养规程一、NH2柱的使用原理NH2柱是一种液相色谱柱，使用时会采用氨基化的硅胶作为固定相。
由于硅胶表面的官能团是氨基基团，能够与样品中的极性分子发生相互作用，进而对分离进行调节。
二、NH2柱的使用方法1.连接装置安装NH2柱时应连接检测设备，如进样器，检测器等。
连接时，应先连接进样器，再连接检测器。
2.洗涤在第一次使用NH2柱时，需进行洗涤。
使用洗涤液流通2-3个小时后，清空出柱中的洗涤液，然后用纯水进行洗涤，以去除任何残留物。
3.平衡在柱洗干净后，应用该检测方法的溶液和需要分析的溶液对NH2柱进行平衡。
溶液中需要下降等温升级，升温速度不要过快，以避免硅胶固定相表面积损失过大。
4.样品处理样品应先进行过滤或系列化。
如果需要，还可进行脱盐处理。
接下来，可以直接使用这个样品进行连续检测，得到相对准确的定量分析结果。
5.清洗当分析结束后，应立即用纯水进行冲洗，避免任何污渍残留在NH2柱上。
三、NH2柱的保养方法1.不会使用的人员不得安装或拆卸NH2柱；2.应使用安全稳固的操作平台；3.注意检查NH2柱连接的阀门、管道及垫片是否严密；4.避免机械冲击，特别是避免NH2柱连接处遭到打击；5.存放NH2柱时应避免阳光直射，不能暴露在高温、潮湿、有酸性气体或腐蚀性气体的环境中；6.避免NH2柱柱筒陷入液相内，以避免液相侵犯NH2柱内部，导致NH2柱出现问题；7.保持NH2柱表面清洁，避免表面污垢的附着。
四、NH2柱的故障与解决方法NH2柱在使用过程中，可能会出现以下故障情况：1. 柱运行异常问题原因可能是样品处理不当：样品会形成附着在NH2柱表面上的沉淀，导致柱进行正常分离的障碍或减缓。
此时需要对样品进行再次过滤或降温等处理。
2. 样品无法通过柱可能是进样器或检测器出现故障。
需要关闭进样器或检测器，检查柱筒是否存在压力问题，如果发现气泡等问题，需要及时清洗气泡。
3. 封补过强的流量或特別严重的样品陈成很容易出现封补。
常用液相色谱柱使用与维护保养
常用液相色谱柱使用与维护保养液相色谱柱是一种重要的分析仪器，在化学、药物研发、环境科学等领域广泛应用。
正确的使用和维护保养可以延长色谱柱的寿命，提高色谱分离的效果。
一、使用液相色谱柱的注意事项1.选择合适的柱使用液相色谱柱前，需要根据分析目标和样品性质选择适合的柱型和填料。
常用的柱型有反相柱、离子交换柱、正相柱等。
不同的柱具有不同的分离机理和性能，选择合适的柱可以提高分离效果。
2.准备好适当的溶剂系统液相色谱的溶剂系统通常由溶剂A和溶剂B构成。
在使用液相色谱柱之前，需要准备好适当的溶剂系统，并将溶剂通过泵送到色谱柱中。
溶剂的选择应根据柱和样品性质来确定，通常要尽量避免对柱产生腐蚀或损害的溶剂。
3.校准柱的流速在使用液相色谱柱之前，需要对柱进行流速校准。
根据柱的规格和品牌，确定适当的流速范围。
过高或过低的流速都会影响分离效果和柱的寿命。
通常，可以通过控制泵的流速和封堵时间来调整柱的流速。
4.准备样品在使用液相色谱柱进行分析之前，需要准备好样品。
样品可以是纯净物质，也可以是复杂的混合物。
样品的准备和预处理会影响分离效果和柱的寿命。
合适的样品准备方法包括稀释、过滤、目标成分的预处理等。
5.正确设置色谱仪的条件在使用液相色谱柱之前，需要根据柱的特性和样品的性质，正确设置色谱仪的条件。
包括流速、柱温、检测器、梯度和等时并行等。
设置合适的条件可以提高柱的寿命和分离效果。
二、液相色谱柱维护保养1.定期保养色谱柱为了保证液相色谱柱的寿命和分离效果，需要定期进行柱的保养。
在每次使用完柱后，需要冲洗柱，将样品和残留物彻底清除。
冲洗柱时可以使用适当的溶剂或清洗液，根据需要选择正向或反向洗涤。
一般推荐用高纯度的有机溶剂冲洗柱。
2.避免柱的过载和超压过载和超压是液相色谱柱常见的问题。
过高的样品浓度或过高的流速都可能导致浓度过载，产生色谱峰畸变或柱堵塞。
超压则会导致柱的损坏或泄漏。
需要根据柱的规格和样品的性质，控制样品浓度和流速，避免过载和超压。
液相色谱柱维护与使用指南
液相色谱柱维护与使用指南色谱柱是整个液相分离系统的核心，而色谱柱的安装，活化/平衡，使用，维护/清洗以及保存是发挥色谱柱性能的重要过程。
笔者收集了Waters,Phenomenex,纳谱分析（国产）以及安捷伦的液相色谱柱使用指南。
笔者综合几家的使用指南，总结如下：1 .安装现代色谱柱上一般都会标明流向，我们应该按照流向进行正确安装,后期也许可以进行反冲,但前期还是尽量不要反冲。
当安装新色谱柱时，必须确保连接管路与新色谱柱匹配。
如果色谱柱末端与系统接头匹配不佳，新色谱柱的性能会受到不良影响（诸如：柱效下降、峰形拖尾等）或者发生渗漏。
同时色谱柱的接头应照最大压力进行选择，如下图为安捷伦推荐的接头。
最大系统压力 推荐的接头部件号最高400barInfmity1abQuickTurn 接头（手紧式）接头：5067-5966最高800barInfmity1abQuickTurn 接头（带有安装工具）接头：5067-5966安装工具：5043-0915 最高1300barInfinity1abQuickConnect 快速连接接头接头：5067-5965如需了解更多信息和部件号，请参见《Agi1entInfinity1ab 接头产品样本》（5991-5164CHCN ）。
2 .活化/平衡通常，色谱柱出厂时保存于100%乙精中。
将色谱柱更换至其它流动相体系之前，务必要确保流动相的兼容性。
为避免流动相缓冲液在色谱柱或色谱系统中析出，使用五倍柱体积的水/有机溶剂混合溶液冲洗色谱柱，其中有机溶剂含量与所需缓冲盐流动相的有机溶剂含量相同或更低（例如，使用60%的甲醇水溶液冲洗色谱柱和系统，然后再更换为60%甲醇/40%缓冲液的流动相）。
对于反相分离来说，完成平衡至少用10倍柱体积的流动相（参见下表中的色谱柱体积）。
当反压达到恒定且色谱柱基线稳定时，可认为该柱达到完全平衡。
对于具有较短的化学链（例如C8、苯基、CN ）固定相的色谱柱，应小心确保在使用色谱柱之前对其进行了彻底的平衡。
常用液相色谱柱使用与维护保养
常用液相色谱柱使用与维护保养液相色谱柱是分离和分析中常用的仪器配件之一，它的使用和维护保养对于实验结果的准确性和可靠性有着至关重要的作用。
本文将介绍常用液相色谱柱的使用和维护保养方法。
一、液相色谱柱的使用方法1.准备工作：在使用前，需要对液相色谱柱进行准备工作。
首先，检查柱的外观是否完好无损，如果发现任何损坏或污染，应立即更换。
其次，检查柱装置是否牢固，连接是否紧密。
最后，将固定相和移动相装入柱中，确保固定相充分均匀地填充在柱内。
2.柱的条件调节：根据实验需要，调节液相色谱柱的柱温、流速和柱压等参数。
在调节柱温时，应注意避免温度过高或过低对柱的损害。
调节流速时，应根据样品性质和分离效果选择合适的流速。
控制柱压时，要确保柱内压力稳定在可接受范围内，避免超过柱的承压能力。
3.样品进样：将待测样品注入进样口或进样器中，注意避免空气进入柱，避免对柱的污染。
可以选择外部进样或直接进样的方法，具体方法根据实验要求和样品性质进行选择。
4.运行柱：在启动液相色谱仪前，先将柱进行预冲洗。
预洗液可以选择与移动相相同的溶剂。
启动液相色谱仪后，根据实验要求设定好运行条件，开始进行实验。
在实验过程中，要及时观察色谱图的变化，根据实验需要调节柱温、流速等参数。
5.柱的保存：在柱使用完毕后，将固定相充分冲洗干净，保证柱内固定相的干燥和保存。
然后，将柱装入保护柱架中，避免碰撞和损坏。
柱的保管环境要保持清洁、干燥、避光和稳定的温度。
二、液相色谱柱的维护保养方法1.柱的清洗：在使用液相色谱柱之前，需要先清洗柱以去除可能存在的污染物。
清洗方法包括预洗和后洗。
预洗可以选择与移动相相同的溶剂，将溶剂通过柱时，将固定相表面的杂质冲洗掉。
后洗可以选择与前一个样品不同的溶剂，将固定相和样品残留物进行清洗。
2.避免柱的干燥：柱在使用过程中，应尽量避免柱的干燥，因为柱的干燥会对固定相造成损害。
在柱停用时，应及时用溶剂进行冲洗并封存起来，以保持柱内的湿润状态。
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使用保护柱的结果
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色谱柱的保存
使用厂商推荐的溶剂保存色谱柱（COA） 除去杂质、缓冲盐，缓冲液残留在色谱柱内，将促使细菌生长，使色谱柱或 筛板堵塞，或导致鬼峰的出现 为防止金属腐蚀，应避免用含卤素溶剂保存色谱柱 色谱柱不能保存在容易发生降解的溶剂中如THF（四氢呋喃），TFA（三氟 乙酸），TEA（三乙胺）等 避免色谱柱床变干
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色谱柱的安装
HPLC柱，粒径5um，内径4.6mm时：
UPLC柱，1.7或1.8um，内径2.1mm时： （UPLC柱体积小，更容易发生溶剂挥发柱床 干涸的问题）??
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测试色谱柱的柱效
不测试柱效的“后果”：
_保留时间改变
_峰型问题
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目录
正确使用
_柱效测试 _色谱柱的平衡 _色谱柱的清洗 _色谱柱的保护 _色谱柱的保存
色谱柱常见故障
_柱效下降 _基线问题
_保留时间改变
_峰型问题
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了解你的色谱柱：
色谱柱维护使用指南书(网站下载)
缓冲液（盐）的浓度
用色谱纯溶剂，并与填料相匹配
溶剂中的杂质含量
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色谱柱平衡/反相色谱柱
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离子对试剂的使用
使用离子对流动相的色谱柱
– 明显需要较长的平衡时间 – 因为，一般在一根色谱柱中： 1µ mol/m2 表面覆盖率 300 m2/g 硅胶表面积 2g 色谱柱中的填料量
柱外死体积大 色谱峰 区域展宽 色谱柱受震荡，填料出现间隙 填料被流动相溶蚀而流失，入 口柱床层塌陷 色谱峰 区域展宽 (伴随色谱 峰拖尾) 色谱峰 区域展宽 (伴随色谱 峰前延)
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关，确保死体积
较小；为使色谱 柱在尽量长的时 间内保持较高柱 性能，流动相的 纯度和过滤一定
填装良好的色谱柱在系统、连接状况皆良好的状况下，色谱 峰形很好
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色谱柱的安装
色谱柱可能已经发生：
– 溶剂部分挥发，柱床部分干涸 – 常用C18柱发生干涸时：如果操作正确，可将柱恢复至应有柱效
好的操作习惯：
– 仅连接柱入口端、纯有机溶剂、低流速：检查是否存在柱干涸情况 – 如存在柱干涸：充分排除柱内气泡，避免进入检测器 – 如存在柱干涸：继续用纯有机溶剂、低流速浸润柱，避免柱压骤升
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色谱柱的保护
使用保护柱和在线过滤器 经常清洗色谱柱 对脏样品进行预处理，最大限度减少强保留组分和颗粒 按照色谱柱生产商的温度上限指标之下操作色谱柱 在压力范围内使用色谱柱 按标注方向操作色谱柱 询问色谱柱生产商确定色谱柱是否可以反冲 使用新鲜溶剂，防止细菌生长 色谱柱使用完毕后，应将盐和缓冲液冲洗干净，并用乙腈保存色谱柱
测试柱效
一、了解色谱柱之前的情况并判断色谱柱是否正常 二、将检测结果小心保存，当实验过程中发现异常时，再检测柱效进行对比，来 进一步排查原因 三、按照色谱柱检测报告方法测试色谱柱，由于色谱系统有差异，您的测试结果 可能与色谱柱厂家实验室得到的结果有所差异， 可归因于仪器的不同 四、理论塔板数可使用下面的公式估算： N=3500L/dp L 代表柱长，单位是 cm；dp 代表填料粒径，单位是 µ m。 一般来说，变化小于20%
覆盖此色谱柱需要相当于600µ moles的离子对试剂，如果流动相中PIC试剂的浓度 是每升1mM，就需要600ml溶剂 在1ml/min流速下，需要600分钟（10小时）
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色谱柱清洗和再生
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– Silica, amino, diol
流动相含有高比例的有机溶剂 (> 80%) 和少量的水相
– 水（或其它极性溶剂）是强的洗脱溶剂
*Alpert, A. J. J.Chromatogr. 499 (1990) 177-196.
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溶剂选择性与洗脱强度
缓冲盐
– 配制一份储存用溶液 [通常可为 200 mM] 然后在使用时用运行的流动相将其 稀释20倍即可 [10 mM 柱上浓度]
– 例如: 配制好一份 200 mM 甲酸铵, pH 3. 要配制含有 90% 乙腈和 10% 水 和 10 mM 甲酸铵 pH 3的流动相时，加入50 mL储存缓冲盐高浓度溶液，50mL水 和 900 mL乙腈即得。
- 如柱效不佳，将浪费对实际样 品的分析测试时间、问题排查 时间，甚至宝贵样品；
- 对于新柱，如柱效不佳，难以 判断是否是样品或流动相污染 所造成；
- 建议新柱在到货后，即进行柱 效测试，如有疑问，及时与供应 商联系排查。
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影响色谱柱柱效表达的系统因素
在您开始之前: 样品溶剂的影响
样品溶剂会强烈影响溶解性与峰形（就像反相一样） 样品溶剂最少含75%乙腈，或尽可能的与初始流动相条件相近 但极性分析物通常在有机溶剂中存在溶解性不佳的问题，常可使用的 HILIC样品溶剂溶解策略是：
– 75:25 乙腈:甲醇对大多数极性分析物奏效 – 在溶解性问题和色谱峰形问题之间寻找折中方案 – 根据您的样品性质来调节pH值促使样品溶解（如：添加0.2%甲酸提高碱性分 析物的溶解性，或添加氨水提高酸性分析物的溶解性）
Weakest
Acetone
Primary [Weak] Solvents
Acetonitrile
Isopropanol Ethanol
Elution [Strong] Solvents
Methanol Water
Strongest
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Use a less polar solvent to Increase retention of polar analytes
0.009"
注：过长的管线亦会造成较大的谱带展宽
0.040" 0.020"
样品谱带在管线内发生了扩散
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色谱柱安装及连接的机械因素-连接
连接适当
连接不妥，造成漏液
连接不妥
谱带展宽
由于色谱柱连接不当引起的谱带展宽，机械问题
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梯度洗脱时，为了梯度性能最佳以及重现性最好，我们建议添加剂或 缓冲盐应同时加入水相溶剂瓶和有机相溶剂瓶内，保持梯度过程中添加 剂或缓冲盐浓度不变。
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在您开始之前:
关于柱平衡与洗针溶剂
仪器洗针溶剂
– 强洗针溶剂： 9:1 water: acetonitrile – 弱洗针溶剂/purge溶剂：初始梯度的流动相条件 [但不包含盐、添加剂或缓冲盐]
色谱柱的保存
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HILIC介绍
HILIC – 亲水作用色谱(Hydrophilic Interaction Chromatography)
– 1990 提出，以区别于正相色谱*
HILIC 是正相色谱的一个“变种”，它避免了使用与水不相容的有机溶剂， 流动相中含有水 – “反反相色谱”，又称“水相正相色谱” 固定相是极性填料
在色谱柱与进样器之间使用不同内径的管线
上图是用0.009″内径的管路连接时测 柱效的色谱图：
柱效：1,1000
下图是用0.04″内径的管路连接时测 柱效的色谱图： 柱效：4000
注：使用相同色谱柱
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实例：管线内径对柱效的影响
连接管线的内径对系统谱带展宽的影响
防止水中细菌生长
注意存放的温度 避免机械震动
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目录
正确使用
_柱效测试 _色谱柱的平衡 _色谱柱的清洗 _色谱柱的保护 _色谱柱的保存
色谱柱常见故障 _柱效下降
_基线问题 _保留时间改变 _峰型问题
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Waters HILIC 模式色谱柱
Hybrid HILIC Column (pH range extended)
ACQUITY UPLC® BEH Amide XBridgeTM Amide (HPLC) (pH 2-11)
ACQUITY UPLC® BEH HILIC XBridgeTM HILIC (HPLC) (pH 1-9)
新拿到一根色谱柱开始实验前，要先测试柱效
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正确使用色谱柱-总述
样品方面 了解样品在流动相中的溶解度，用流动相试样品的溶解度，防止其在流动相 中析出 了解样品与色谱柱的基质/填料是否相互作用 流动相方面 过滤
脱气
纯度的要求 超纯水，梯度实验时水中有机杂质含量要低 缓冲液的pH值必须在填料的允许范围内