5.使用临床样本进行测量方法比对和偏倚估计
临床检验方法确认与性能验证
5.已发表专业推荐
6.基于法规和EQA的质量规范
（七）具体操作
内容 常用的方案 具体方案
方法确认
内容： 总是包括可报告范围、精密度、准确度和参 考区间。某些研究还应包括检出限（或灵敏 度）、特异度、干扰和回收以及校准品确认。 CLIA规则规定对不同复杂程度分类的方法 需要确认不同的特征。对不太复杂的方法， 要求很少的研究。对于自建检测系统或实验 室修改的方法需要更多的实验。
1.标准物质
概念：又称参考物质（ reference material ），是一类充分均匀，并具有一 个（或多个）确定的特性值的材料或物质，标准物质的定值结果一般表示为： 标准值 ± 总不确定度。 “ 标准物质证书“是介绍标准物质的技术文件，是 研制单位向用户提出的质量保证书和使用说明。附有证书的标准物质称为有证 标准物质（ certified reference material, CRM ），其特性值由建立了溯 源性的程序确定，可溯源至准确复现该特性值的计量单位，且每个标准值都附 有给定置信水平的不确定度。 作用：校准仪器设备、评价测量方法，或给其它物质赋值 分类：一级标准物质（ primary reference material ）：稳定、均一，采 用高度准确、可靠的若干方法定值，可用于校准决定性方法及为二级标准物质 定值。在我国，一级标准物质是测量准确度达到国内最高水平的有证标准物质， 由国家技术监督局批准、颁布并授权生产。如： 人血清无机成分分析标准物 质（ GBW09135 ）和血清胆固醇标准物质（ GBW 09138 ）。二级标准物 质（ secondary reference material ）：用一级标准物质校准，参考方法 定值。如： 红细胞微粒标准物质 — GBW （ E ） 090001 、胆红素标准物 质 — GBW （ E ） 090002 、氰化高铁血红蛋白溶液标准物质 — GBW （ E ） 090004 和纯化血红蛋白标准物质 — GBW （ E ） 090011 。
EP9A2用患者样本进行方法比对及偏倚估
EP9A2用患者样本进行方法比对及偏倚估方法比对是指通过比较不同方法在同一样本中的结果，来评估各个方法的准确性和一致性。
而偏倚估计则是指估计测量结果与真实值之间的偏差程度。
本文将用1200字以上来介绍如何应用EP9A2标准对患者样本进行方法比对及偏倚估计。
首先，我们需要选择一种或多种与我们正在评估的方法相似的方法。
这些方法应该具有相似的测量原理、适用范围和结果单位。
我们可以选择已经在临床实践中广泛应用的方法来进行比对，确保比较结果具有代表性。
然后，我们需要收集足够数量的患者样本。
样本的数量应符合统计学要求，以确保我们所得到的比对结果是有意义的。
一般来说，样本的数量应该大于30，并且尽可能多一些，以减小随机误差带来的影响。
接下来，我们需要按照EP9A2标准中的要求，将所有样本进行随机排序分组。
每个样本只能被分配到一个组中，以确保每种方法都有相同数量的样本进行比对。
这样做可以有效地减小由于人为因素引起的偏差。
完成测试后，我们需要进行数据分析。
首先，我们可以计算每种方法的平均值、标准差和95％置信区间。
这些指标可以反映方法的准确性和可靠性。
然后，我们可以使用均方根误差（RMSE）来测量每种方法与参考方法之间的偏差程度，RMSE值越小，表示偏差越小。
此外，我们还可以使用相关系数来评估不同方法之间的相关性，相关系数越接近1，表示相关性越强。
最后，我们需要解释比对结果并提出结论。
我们可以根据平均值、标准差和95％置信区间来评估每种方法的准确性和一致性。
同时，我们还可以根据RMSE和相关系数来估计偏倚程度和方法之间的相关性。
通过比对结果，我们可以得出结论，选择最适合我们需要的方法。
总之，通过EP9A2标准进行方法比对及偏倚估计可以评估不同方法的准确性和一致性，并找到最适合我们需要的方法。
这项工作需要选择相似的方法与我们正在评估的方法进行比对，收集足够数量的患者样本，进行随机分组和测试，并进行数据分析。
最后，根据分析结果提出结论。
EP9(中文版)用患者样本进行方法比较和偏差估计
用患者样本进行方法比较和偏差估计1序言1.1目的本文件给临床实验室设备的用户和制造商提供了在测试同一分析物时, 设计实验来评价两种方法间的偏差的指导原则。
理想情况下，测试（或候选）方法应当与参考方法比较。
但是对用户来说，比较方法通常是目前的日常方法，并且评价的目的是确定这两种方法在实验统计的功效是否产生相等的结果。
在这种情况下，主要关注的是确定测试方法是否是当前方法合适的替代品。
本指导原则允许两种方法间的偏差评估（期望差异）在不同的浓度进行评价。
如果比较方法与制造商在声明述中所用的相同，可以将统计的实验结果与制造商的声明比较来确认可接受性能。
1.2一般比较实验的概述评价一种分析方法需要下面的容：●操作者有足够的时间熟悉设备操作和维护步骤。
●操作者有足够的时间熟悉评价方案。
●确保在整个实验期测试和比较方法在合适的质量控制中。
●有足够的数据来确保测试和比较方法有代表性的数据。
（多少数据构成足够的数据取决于两种方法的精密度和干扰影响，和两种方法间偏差的量，和可用的样本分析物值的围，以及测试的医学要求。
）。
在设备熟悉期，测试和比较方法的操作者必须全面的熟悉两种方法的设定，操作，维护，故障排除和质量控制。
本期可以先于评价实验的其他部分或与制造商的培训期一致。
对两种方法运行日常实验室质量控制程序。
在熟悉期之后，可以开始方法比较实验。
工作组推荐至少40个患者样本在至少5个工作日进行分析。
在更长时间分析更多的样本，同时按照制造商的建议进行定标，可增加实验的可靠性和有效性。
对每一个患者样本用测试和对比方法进行双份测试。
对每种方法的双份测定，在相应方法的同一批分析。
只要可能，至少50％的测试样本应当在实验室参考区间之外。
1.3本文所用的符号（略）1.4定义（略）2设备熟悉期测试和比较方法的操作者必须熟悉下面的容：●操作●维护步骤●样本准备方法●定标和监控功能。
如果制造商提供培训，可作为熟悉期的一部分。
在实验室建立和运行设备足够长的时间，以确保操作者理解所有的步骤，并能恰当的操作设备。
EP9-A2 LOD和LOQ
CLSI文件EP9-A2用患者样本进行方法对比及偏差评估EP9-A2Method comparison and bias estimation using patient samples ; approved guideline (1995）。
摘要文件EP9-A2（用患者标本进行方法比对及偏倚评估；批准指南-第二版）是为实验室人员和生产厂商制定的。
它叙述了测定两种方法之间相对偏倚的程序，也叙述了采用一分为二的患者样本设计方法比对试验时所需要考虑的因素。
本文包括实验概述、样品数据记录及计算表、总流程图及为初步数据分布的详细流程图，以进行方法比对。
此文件为临床实验室用户和制造商提供了设计一个评价实验的指南，用于评价测定同一被测物的两种方法之间的偏倚。
理想情况下，方法（或候选方法）应该与参考方法相比较。
但对于用户，参比方法通常是目前使用的常规方法，这样，评价的目的在于确定两种方法得到的相应结果是否在实验统计学的范围内。
此时，我们首先关注的是新方法是否是现行方法的合适替代者。
一、实验步骤评价一个分析方法需要以下条件：（1）操作者有足够的时间熟悉仪器操作及保养程序；（2）操作者有足够的时间熟悉评价方案；（3）在评价实验过程中，待评方法及参比方法必须保证有适当的质量控制； 待评方法及参比方法必须有足够的数据以保证结果具有代表性（需要多少数据取决于两种方法的精密度和干扰作用，两方法间的偏倚大小，样本分析物数据的范围及检测的医学要求）。
1、仪器熟悉阶段应有足够的时间熟悉所用的仪器、试验方法、比较方法及比较方案。
待评方法和参比方法的操作者必须熟悉以下工作： ①操作②保养程序③样本准备方法④校准和监控功能实验室中需有足够的时间开启和运行仪器以确保操作者理解仪器的全部步骤并能正确操作。
操作者应该用实际样本进行分析，以注意到常规工作中发生的所有可能的偶然事故（如错误信号、错误纠正、校准等），在此过程中不应该收集数据。
当操作者能够自信的操作仪器，熟悉仪器的阶段才可结束。
EP9-A2 中文版
EP9-A2第22卷第19册替代EP9-A第15卷第17册用患者样本进行方法比对及偏倚估：批准指南——第二版这个文件介绍的程序供两个临床方法间的偏倚评估及采用一分为二的患者标本和资料数据的方法学比较实验设计。
通过NCCLS认同过程制定全球应用的指南NCCLS……通过自愿认同的方式服务于全世界医学科学团体NCCLS是一个国际性、多学科、非盈利、制定标准、教育型组织，在临床检验界促进标准和指南的使用和发展。
为患者检验和相关临床检验组织制定标准和指南在全球围得到一致认同过程。
NCCLS制定标准的原则是从质量效益和成本效益两方面考虑，为患者检验和临床检验组织服务。
除了制定和促进标准、指南的推广外，NCCLS还提供了一个开放、无偏见的论坛，供发表影响患者检验和临床检验质量的批评性言论。
出版物NCCLS文件以标准、指南和委员会报告出版。
标准：通过认同过程形成文件，对材料、方法或不能修改的实践方式明确规定其特定的基本要求。
另外，标准也可以包含明确规定的选定要素。
指南：通过认同过程形成文件，制定常规实验操作程序、方法或材料的规。
使用者可以使用或修改指南以满足特定的需要。
报告：没有经过认同过程，由理事会颁布。
认同过程NCCLS认同过程，建立正式规的程序如下：1.项目的授权；2.文件的制定和公开评审；3.根据使用者的反馈评论修订文件；4.文件被接受为标准或指南。
大多数NCCLS文件只有“建议”和“批准”两个层次的认同过程，根据领域评价或资料收集的需要，文件也可以有中间（如“试行”）认同层次。
建议：作为NCCLS的建议标准或指南处在被临床检验界评审的第一阶段，此文件需接受广泛、全面的技术审核，包括对围、方法、用途及技术和编写容的逐行逐字的审核。
试行：当一种推荐方法对某一领域的评审有明确的需要或者当某议性方案需要收集特定的数据时，才制定试行标准或指南。
同样，试行标准或指南也应接受审核，以保证其有效性。
批准：批准的标准或指南已在临床检验界得到认同。
定量检测体外诊断试剂临床试验统计方法常见问题分析
定量检测体外诊断试剂临床试验统计方法常见问题分析蔡江波【摘要】Objective To use right statistical analysis methods to evaluate quantitative testing in vitro diagnostic reagent(IVD)clinical tri-al data and get scientific and reasonable conclusion. Methods 4 common statistical analysis methods used in clinical trials and their advantages and disadvantages were introduced,and the problems of statistical analysis were pointed out and analyzed. Results Only 1 statistic analysis method or misuse of statistical analysis method might lead to false trial conclusion. Conclusion Multi-methods of statistical analysis should be adopted in agreement evaluation of 2 testing systems and researchers should be trained professionally.%目的：采用正确的统计分析方法对定量体外诊断试剂临床试验数据进行评价，以得出科学、合理的临床试验结论。
方法介绍4种常见临床试验统计分析方法及各自优缺点，列出常见错误并进行分析。
结果单一、不当的统计分析方法可能会得出错误的结论。
结论应采取多种方法从不同角度对2种检测系统的一致性进行综合评价，并加强统计分析人员专业知识培训。
用患者样本进行方法比对及偏倚评估
对同型半胱氨酸试验比对及偏倚评估用患者标本进行方法比对及偏倚评估，参考NCCLS文件EP9-A2（用患者标本进行方法比对及偏倚评估；批准指南-第二版）偏倚的程序，采用一分为二的患者样本设计方法比对试验时所需要考虑的因素。
本文包括实验概述、样品数据记录及计算表、总流程图及为初步数据分布的详细流程图，以进行方法比对。
l 操作l 保养程，样本准—，仪器校准，校准用生产厂商提供的校准品。
实验室中需有足够的时间开启和运行仪器以确保操作者理解仪器的全部步骤并能正确操作。
根据建议花5天时间熟悉仪器。
操作者应该用实际样本进行分析，以注意到常规工作中发生的所有可能的偶然事故（如错误信号、错误纠正、校准等），在此过程中不收集数据。
当操作者能够自信的操作仪器，熟悉仪器的阶段才可开始。
确保有适当控制限的常规质量控制程序。
3 方法比对实验3．1 检测样本按照实验室操作规范和制造商的推荐收集和处理患者标本。
3．1．1 储存储存时间和条件为保证待测成份的稳定性，各运行贮存环节6-10℃储存标本。
3．2 参比方法本实验提供了两方法间在特定浓度的偏倚估计值和偏倚的可信区间，所以两方法间的差值可归因于待评方法的误差，参比方法应该做到如下几点：具有比待评方法更好的精密度；可能的情况下，不受已知干扰物质的干扰；使用与待评方法相同的单位；标准品或参考方法有已知的相对偏倚（可溯源）。
本实验并不能将不同来源的误差归咎于被比较的每一方法。
干扰可能与精密度一样影响两方法间测定结果的差值。
3．3 测定范围应在有临床意义的范围内，即医学决定水平范围内评价待评方法。
通常应从低值参考范围到高值参考范围。
分析物浓度应尽可能分布在测定范围内均匀分布。
分析测定范围是分析物测定浓度区间。
推荐范围考虑了待测物的异常情况。
3．3．1 分析测定范围实验的范围受两种方法分析测量范围的限制。
参比方法的范围应至少与待评方法的范围相同，以便在分析测定范围内可以比较。
3．4 样本数为了满足上述标准要求，至少分析40个样本。
检测系统性能验证
精选ppt
14
参考区间
一般情况下，常选择95%分布范围的大 小表示参考值区间。例如：从2.5%位数 到97.5%位数所在的区间。
很多地方用“参考范围”表示“参考区
间” ，其实“参考区间”只是“参考范
围”的一部分，而不是全体，两者不能
混淆。
精选ppt
15
性能验证方案的介绍
1、为什么要做性能验证 2、什么时候做性能验证 3、该做哪些性能验证 4、如何做性能验证
精选ppt
13
参考区间
对一个参考个体进行某项目测定得到的 的值为该个体的参考值，所有参考抽样 组的各个参考值合起来即为参考值范围。
依据所有参考值的分布特性以及临床使 用要求，选择合适的统计方法进行归纳 分析后，确定参考值范围中的一部分为 参考区间，区间的两端为参考区间的限 值，分为低参考限和高参考限。
验证方案： CLSI C28-A2
精选ppt
50
CLSI C28-A2
CLSI于2000年颁布CLSI C28-A2文件—— 《临床实验室如何确定生物参考区间—— 批准指南》
对厂家提供的或者实验室正在使用的各个项 目的参考范围进行验证
精选ppt
51
CLSI C28-A2
一、样本准备 1、来源 正常体检人群 2、样本数 20例 3、样本要求 最好不同年龄段均匀分布 二、实验方法：
精选ppt
48
简易方案
若相关系数的平方即r2>0.95 (或 r≥0.975)，斜率b在0.97-1.03范围内，a 与0无显著性差异(截距a接近于0)，则可 判断线性范围。
精选ppt
49
参考区间验证方案
随着愈来愈多新的检验项目或方法引入 实验室，要求每个实验室，无论其规模 大小，都去建立自己的参考区间是不现 实的。因此，临床实验室越来越多地依 赖其他实验室或诊断试验生产商建立或 提供的参考值数据。这就需要我们评估 其可接受性。
临床生物化学检验-第4章 方法与试剂盒
1
1
2
1
…
1
1
1 … Sums
1
1
22
2 1
22
(1)
(2)
2
1-
2 2
(3)
18
4. 统计分析 ② 统计计算：首先计算参数A、B和Sr，然后计算批内、批间、天间和总变异系数。
A
I:
Xi1 •
i1
Xi2 •
i2
(Xi1 • − Xi2 • )2 A=
2I
B
Xi••
i
X•••
(Xi•• − X•••) 2
1
… 40
Xi1/2表示第i号样品第1次/第2次用比较方法测定的结果 Yi1/2表示第i号样品第1次/第2次用候选方法测定的结果
24
2. 统计分析 ② 离群点的检查
1 2
25
2. 统计分析 ③ 候选方法（Y）与比较方法（X）相关回归分析
r = σ σ(Xij − X)(Yij − Y) σ σ ( Xij − X ) 2 σ σ ( Yij − Y ) 2
28
3. 统计分析 (1) 数据整理与离群点的检查： 4次重复测定结果由高到低排序（见表5）。 (2) 多项式线性回归分析： 首先假设数据是非线性的。 (3) 组内变异试验：计算各组内变异均方差 (SS组内)，判断组内变异是否可接受
计算公式： SS组内 = ∑Y2 – ( ∑Y)2/4； P = 最大SS组内/总SS组内 若 P> P0.05 ，则组内变异可接受。
16
2. 评价步骤 用2个样品每天测定2批， 批间测定间隔不得少于2h。每批测定均作2份，至少共测
定20天。每批测定至少做一个质控。
3. 批内精密度计算公式
血细胞分析项目质量要求及性能验证
谢 谢
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≤0.5×109/L
≤0.05×1012/L
≤2.0g/L
≤10×109/L
A
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携带污染
B
血液分析仪的携带污染率应符合表2的要求。
2.1 携带污染检测要求
表2 血液分析仪携带污染检测要求
检测项目
WBC
RBC
HB
PLT
携带污染率
≤3.0%
式中：
CV-变异系数； s——标准差；
日间精密度 1 日间精密度检测要求 日间精密度以室内质控在控结果的变异系数为评价指标，日间精密度应符合表5的要求。
表5 日间精密度检测要求
检测项目
WBC
RBC
HB
HCT
PLT
MVC
MCH
MCHC
相对差异
≤6.0%
≤2.5%
≤2.0%
≤4.0%
≤8.0%
≤2.5%
≤10.0%
2.0～5.0
10%
≤7.5%
5.1～11.0
45%
11.1～50.0
25%
＞50.1
10%
表8 检测项目浓度范围样本数量 所占比例相对偏差
检测项目
浓度范围
样本数量所占比例
相对偏差
准确度 accuracy 单次检测结果与参考值间的一致程度，以 误差表示。
总误差 total error
实验室用某方法在多次独立检测中分析某
样品所得各个结果值与靶值之差在一定置
信区间内的最大允许范围。
可比性 comparability
EP A 中文
EP9-A2第22卷第19册替代EP9-A第15卷第17册用患者样本进行方法比对及偏倚评估批准指南——第二版这个文件介绍的程序供两个临床方法间的偏倚评估及采用一分为二的患者标本和资料数据的方法学比较实验设计。
通过NCCLS认同过程制定全球应用的指南NCCLS……通过自愿认同的方式服务于全世界医学科学团体NCCLS是一个国际性、多学科、非盈利、制定标准、教育型组织，在临床检验界内促进标准和指南的使用和发展。
为患者检验和相关临床检验组织制定标准和指南在全球范围内得到一致认同过程。
NCCLS制定标准的原则是从质量效益和成本效益两方面考虑，为患者检验和临床检验组织服务。
除了制定和促进标准、指南的推广外，NCCLS还提供了一个开放、无偏见的论坛，供发表影响患者检验和临床检验质量的批评性言论。
出版物NCCLS文件以标准、指南和委员会报告出版。
标准：通过认同过程形成文件，对材料、方法或不能修改的实践方式明确规定其特定的基本要求。
另外，标准也可以包含明确规定的选定要素。
指南：通过认同过程形成文件，制定常规实验操作程序、方法或材料的规范。
使用者可以使用或修改指南以满足特定的需要。
报告：没有经过认同过程，由理事会颁布。
认同过程NCCLS认同过程，建立正式规范的程序如下：1.项目的授权；2.文件的制定和公开评审；3.根据使用者的反馈评论修订文件；4.文件被接受为标准或指南。
大多数NCCLS文件只有“建议”和“批准”两个层次的认同过程，根据领域评价或资料收集的需要，文件也可以有中间（如“试行”）认同层次。
建议：作为NCCLS的建议标准或指南处在被临床检验界评审的第一阶段，此文件需接受广泛、全面的技术审核，包括对范围、方法、用途及技术和编写内容的逐行逐字的审核。
试行：当一种推荐方法对某一领域的评审有明确的需要或者当某一建议性方案需要收集特定的数据时，才制定试行标准或指南。
同样，试行标准或指南也应接受审核，以保证其有效性。
胃蛋白酶原I_II检测试剂注册审查指导原则
胃蛋白酶原I/II检测试剂注册审查指导原则本指导原则旨在指导注册申请人对胃蛋白酶原I/II检测试剂注册申报资料的准备及撰写，同时也为技术审评部门对注册申报资料的技术审评提供参考。
本指导原则是对胃蛋白酶原I/II检测试剂的一般要求，申请人应依据产品的具体特性确定其中内容是否适用，若不适用，需具体阐述理由及相应的科学依据，并依据产品的具体特性对注册申报资料的内容进行充实和细化。
本指导原则是供注册申请人和技术审评人员使用的指导性文件，但不包括审评审批所涉及的行政事项，亦不作为法规强制执行，应在遵循相关法规的前提下使用本指导原则。
如有能够满足法规要求的其他方法，也可以采用，但应提供详细的研究资料和验证资料。
本指导原则是在现行法规、标准体系及当前认知水平下制定的，随着法规、标准体系的不断完善和科学技术的不断发展，本指导原则相关内容也将适时进行调整。
一、适用范围胃蛋白酶原I/II检测试剂用于体外定量测定人血清或血浆样本中胃蛋白酶原I/II（PepsinogenⅠ/Ⅱ，PGⅠ/Ⅱ）的浓度。
本指导原则适用于胃蛋白酶原I/II检测试剂，包括以酶标记、化学发光标记等标记方法免疫分析试剂，不适用于胶体金标记或其他方法标记的半定量胃蛋白酶原I/II检测试剂（如：试纸条等）和用125I等放射性同位素标记的各类放射免疫或免疫放射试剂。
二、注册审查要点（一）监管信息1.产品名称试剂（盒）名称由三部分组成：被测物名称、用途、方法或原理。
例如：例如：胃蛋白酶原Ⅰ检测试剂盒（化学发光法）。
2.分类编码根据《体外诊断试剂分类规则》，胃蛋白酶原I/II检测试剂管理类别为Ⅱ类，分类编码为6840。
3.包装规格注明可测试的样本数或装量，如××测试/盒、××人份/盒、××mL，除国际通用计量单位外，其余内容均应采用中文进行表述。
4.主要组成成分说明产品包含试剂组分的名称、数量、每个组成成分在反应体系中的比例或浓度、其生物学来源、活性及其他特性。
流行病学题库一（供参考）
流行病学题库一（供参考）1. 流行病学就是传染病学。
A. +B. -2. 流行病学研究对象是人群。
A. +B. -3. 流行病学中的群体是指__________。
A．有典型症状的病人B．无症状的健康人C．在一定范围内的人群，可以小到一个家庭，大到全人类D．传染病患者E．病原携带者4. 流行病学的研究对象是_________。
A．疾病B．病人C．人群D．健康人E．亚临床型病人5. 流行病学与临床医学的区别在于_________。
A．在群体水平上研究疾病现象B．研究疾病的病因学C．提供诊断依据D．不涉及药物治疗E．不研究疾病预后6. 关于流行病学，下列哪种说法正确________。
A．从个体的角度研究疾病和健康状况及其影响因素B．只研究传染病的流行和防治C．只研究慢性病的危险因素D．研究人群中疾病和健康状况的分布及其影响因素E．只研究疾病的防制措施7. 流行病学研究的观察法与实验法的根本区别在于_______。
A．设立对照组B．不设立对照组C．是否人为控制研究的条件D．盲法E．统计学检验8. 以下哪一个不是流行病学的特征______。
A．群体特征B．以分布为起点的特征C．预防为主的特征D．对比的特征E．以治疗疾病为主的特征9. 流行病学研究的主要用途是__________。
A．进行统计学检验B．探讨病因与影响流行的因素及确定预防方法C．研究疾病发生概率D．研究疾病的死亡情况E．研究疾病的临床表现10. 流行病学的主要研究方法是_______。
A．实验室方法B．临床诊治方法C．现场调查与现场实验观察研究方法D．临床诊治与统计学方法E．统计学方法11. 流行病学研究主要解决的问题是________。
A．疾病分布及影响分布的因素B．疾病的防制措施C．疾病病因D．增进人群健康的策略E．以上都对12.以下哪项不包括在流行病学用途之中_______。
A．病因的探索B．预防措施的效果评价C．临床观察D．人群患病情况分析E．补充临床观察之不足13. 流行病学的分析性研究不包括________。
方法比对及偏倚评估
质量第一 服务第一
方法比对试验概述
参比方法(comparative method)的选择标准 1、具有比待评方法(test method)更好的精密度； 2、尽可能不受已知干扰物质的干扰； 3、使用与待评方法相同的单位； 4、尽量与标准(standards)或参考方法(reference method)有
的Y与X的均值之差Yi-Xi相对于(Yi+Xi)/2作图。此图的中心线为零。 第四张图是单次测定的Y值与均值之差Yij-Xi(指南中有误）相对于 (Yi+Xi)/2作图。
质量第一 服务第一
方法比对试验结果的定性分析
线性检查：
在测量范围内，检查参比方法和待评方法的数据图是否呈线 性关系。如果线性关系满意，则继续进行数据分析。如果存 在明显的非线性关系，则应把非线性关系的数据点去掉。
已知的相对偏倚（可溯源）。
质量第一 服务第一
方法比对试验结果的定性分析
数据收集
组内离群值检查
目测线性检查 (做散点图、偏倚图)
组间离群值检查
数据分布范围 (r2 ≥0.95)
质量第一 服务第一
方法比对试验结果的定性分析
组内离群值(outlier test within-method)检查：
计算每个样品两次重复检测数值之差的绝对值： DXi=︱xi1-xi2︱ DYi=︱yi1-yi2︱ 其中i=样品号（由1到N，N=样品总数）。 计算上述两种绝对值的均值：
质量第一 服务第一
方法比对试验结果的定性分析
组间离群值检查：
目测图1和图3，检查有无离群值，如果没有，则继续进行数据分析。如果 有离群值，则按下面的公式进行计算： 计算2种方法的绝对差值及其平均值： i=样本号1…40；j=2次重复检测的1和2
两种全自动血液分析仪检测结果的一致性分析
两种全自动血液分析仪检测结果的一致性分析目的对两种全自动血液分析仪检测结果进行比对分析，观察其检测结果的一致性。
方法根据美国化学标准化委员会（NCCLS）标准文件EP9-A2的要求，用本科室的两台全自动血液分析仪对白细胞（WBC）、红细胞（RBC）、血红蛋白（HGB）、血小板（PLT）、红细胞压积（HCT）、红细胞平均体积（MCV）六个项目进行比对实验，验证两台仪器的一致性。
结果两台仪器的精密度与相对偏差均在允许范围内，两台仪器的检测值用配对t检验，差异无统计学意义（P>0.05），线性回归方程符合均要求。
结论两台仪器检测结果具有较好的准确性和可比性，能够满足临床需要。
Abstract：Objective Comparative analysis of the examined results for both automatic hematology analyzers. Methods According to the requirement of NCCLS，with undergraduate course room two fully automatic blood analyzer of WBC，RBC，HGB，PLT，HCT，MCV six project compare experiment，verify the tow instruments of comparability and consistency. Results Test results with paired t test，there was no statistically significant difference （P>0.05），the linear regression equation ，conform to the requirements of the linear，bias of the two instrument test result are within the scope of the permit. Conclusion Two instrument testing result has good accuracy and comparability，which can satisfy the clinical needs.Key words：Hematology analyzer；Consistency；Contrast很多医院拥有多台不同型号、不同分析原理的血液分析仪，这就使得在同一实验室内同一标本在不同仪器上检测，可能出现测定结果的偏差，给临床诊疗工作带来混乱[1]。
(完整版)EP9-A2：方法比对及偏倚估
这个文件介绍的程序供两个临床方法间的偏倚评估及采用一分为二的患者标本和资料数据的方法学比较实验设计。
通过NCCLS认同过程制定全球应用的指南
NCCLS……
通过自愿认同的方式服务于全世界医学科学团体
NCCLS是一个国际性、多学科、非盈利、制定标准、教育型组织，在临床检验界内促进标准和指南的使用和发展。为患者检验和相关临床检验组织制定标准和指南在全球范围内得到一致认同过程。NCCLS制定标准的原则是从质量效益和成本效益两方面考虑，为患者检验和临床检验组织服务。
4 初步数据检查
4.1 方法内双份数据的离群值检验
4.2数据作图
4.3 线性相关的目测检查
4.4 方法间离群值的目测检查
4.5 X值合适范围的检验
5 线性回归
5.1 计算
5.2 分散均匀性的目测检查
6 计算预期偏倚及其可信区间
6.1 线性回归法（当数据通过合适范围及均匀离散度检查时）
6.2当数据未通过合适范围及均匀离散度检查时，使用分布个别差异计算平均偏倚（分部偏倚法）
批准：批准的标准或指南已在临床检验界得到认同。应审核并评价最终文件的有效性，确保达到认同（即对以前的版本的意见已圆满解决），并确定对新加的认同文件的需要。
NCCLS标准和指南为实验室实践提供了一个认同意见。NCCLS标准和指南的条款较应用规定或多或少要严格些，因此使用NCCLS文件不能减轻使用者对遵守应用规定的责任。
除了制定和促进标准、指南的推广外，NCCLS还提供了一个开放、无偏见的论坛，供发表影响患者检验和临床检验质量的批评性言论。
出版物
NCCLS文件以标准、指南和委员会报告出版。
标准：通过认同过程形成文件，对材料、方法或不能修改的实践方式明确规定其特定的基本要求。另外，标准也可以包含明确规定的选定要素。
5.使用临床样本进行测量方法比对和偏倚估计
影响比对的因素
运行、重复性，可通过增加次数降低估计值的不确定度，CI将变窄
造成偏差（非随机）：
操作者、校准、仪器、批次、场所，应尽可能消除影响，如存在也可以增加因素数量来弱化其影响 注：评估试验中应尽可能的考虑来自随机和系统的影响如
制造商实验室
确定程序间的关系
影响比对的因素
目的是为了估计候选程序相对于比对程序的偏差
特殊要求
样本数量：≥40，更多的样本可增加估计值的可信度，也可能引入非预期的干扰
测量次数：优选单次测量，但按照最佳估计（低不确定度）可重复测量（基于平衡设计） 校准和质控：试验开始时，校准两个程序
数据检查
数据检查
散点图（SD恒定、CV恒定、混合型）
数据检查
差异图
以比对结果或均值为x以偏差为y轴 x 代表比较结果的绘图（4种组合） （如B-A图，x轴为平均值） SD恒定 CV恒定 y
有时，低浓度处SD恒定，高浓度处偏差呈比例的变化（CV不恒定） 差异图分析显示，如偏差在低浓度处不显著（与零偏差），应使用CV恒定Deming回归
此时高浓度点的偏差可能会被高估
，
定量分析（散点图-回归分析）
混合型
定量分析（散点图-回归分析）
混合型
在混合型的偏差分析中，CV恒定Deming回归较其它回归有很大优势（尤 其是弱化高浓度点偏差的影响） 此类分析中，P-B回归是更好的选择
OLR：Y轴方向最小变异，只有y轴存在随机误差（假设）
SD恒定
Deming：考虑xy双方向，都存在不精密度，该回归评价一致性更为合理
定量分析（散点图-回归分析）
CV恒定
对于CV恒定分析，使用WLS（1/x2）：
越分散，对回归贡献越小，但缺陷同OLS，xy交换
EP9A2用患者样本进行方法比对及偏倚评估27页word
EP9-A2第22卷第19册替代EP9-A第15卷第17册用患者样本进行方法比对及偏倚评估：批准指南——第二版这个文件介绍的程序供两个临床方法间的偏倚评估及采用一分为二的患者标本和资料数据的方法学比较实验设计。
通过NCCLS认同过程制定全球应用的指南NCCLS……通过自愿认同的方式服务于全世界医学科学团体NCCLS是一个国际性、多学科、非盈利、制定标准、教育型组织，在临床检验界内促进标准和指南的使用和发展。
为患者检验和相关临床检验组织制定标准和指南在全球范围内得到一致认同过程。
NCCLS制定标准的原则是从质量效益和成本效益两方面考虑，为患者检验和临床检验组织服务。
除了制定和促进标准、指南的推广外，NCCLS还提供了一个开放、无偏见的论坛，供发表影响患者检验和临床检验质量的批评性言论。
出版物NCCLS文件以标准、指南和委员会报告出版。
标准：通过认同过程形成文件，对材料、方法或不能修改的实践方式明确规定其特定的基本要求。
另外，标准也可以包含明确规定的选定要素。
指南：通过认同过程形成文件，制定常规实验操作程序、方法或材料的规范。
使用者可以使用或修改指南以满足特定的需要。
报告：没有经过认同过程，由理事会颁布。
认同过程NCCLS认同过程，建立正式规范的程序如下：1.项目的授权；2.文件的制定和公开评审；3.根据使用者的反馈评论修订文件；4.文件被接受为标准或指南。
大多数NCCLS文件只有“建议”和“批准”两个层次的认同过程，根据领域评价或资料收集的需要，文件也可以有中间（如“试行”）认同层次。
建议：作为NCCLS的建议标准或指南处在被临床检验界评审的第一阶段，此文件需接受广泛、全面的技术审核，包括对范围、方法、用途及技术和编写内容的逐行逐字的审核。
试行：当一种推荐方法对某一领域的评审有明确的需要或者当某一建议性方案需要收集特定的数据时，才制定试行标准或指南。
同样，试行标准或指南也应接受审核，以保证其有效性。
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比对程序
相对差异图 平均值 绝对差异图
数据检查
绘图检查（SD恒定，选择绝对差异图）
数据检查
绘图检查（CV恒定，选择相对差异图）
数据检查
绘图检查(低端SD恒定，高端CV恒定差异图)
数据检查
绘图检查(排序的差异图，恒定比例差异显
著)
数据检查
绘图检查(排序的混合型差异图)
数据检查
绘图检查(当差异随浓度变化和非线性关系)
偏差图和回归分析都不适合，可能的方法是拟合一条线（非线性） 如是要评价某一特定浓度处的偏差，可以在其左右分别选择10个以上样本，
使用差异图估计偏差
定量分析（差异图估计偏差）
偏态分布
对于差异图上偏差不呈正态分布，存在较大偏度时：
一个样本或少数几个样本在y轴上的分布有偏斜时，应进行离群值分析，并
查明原因，原因未知时分布仍然呈不偏态分布，应使用中位值估计偏差
方法比对
简介
x-轴特征 y-轴特征
自变量
比较测量程序 参考测量程序
因变量
候选测量程序
方法比对
比对方法类型 决定性方法（ definitive method）
经详尽研究尚未发现不准确度或不确定性原因的方法
比对方法的关系
常规方法
参考方法（reference method）
经详尽研究证实其不准确度与不精密度可以忽略的方法
通过差异图，确定使用的回归方法
但是是否使用回归分析，取决于评价目的，如制造商在建立或确认时应进
行回归分析，而临床实验室可按照要求，自由选择
定量分析（散点图-回归分析）
SD恒定
定量分析（散点图-回归分析）
SD恒定情况下，用OLR的确定系数作为回归拟合强度的指标，并可作为 OLR是否被接受的指标，不应作为接受或拒绝测量程序的指标 不应只使用相关系数评价线性（非线性指标）
3.样本的制备方法
4.校准和测量程序的质量监测
制造商实验室设计
制造商实验室
理想情况
理想情况是比对程序为公认的或参考测量程序，其具有较高的准确度（较
低的不精密度和偏差）；
但是，在实际中比对程序通常是另一制造商的商业化程序，这将导致在被 测量的不精密度、测量区间、线性和特异性等方面有一定的局限性
制造商实验室
数据检查
异常值检查
数据分析-偏差图
定量分析（差异图估计偏差）
检查差异图时，如果绝对差异图显示偏差在 分析区间内基本保持一致时，两个测量程序 测量结果之间的偏差可以通过个体偏差的平
SD恒定（正态分布）
均值（或中位值 ）来估计
此时代表测量区间内任何浓度的偏差估计值
定量分析（差异图估计偏差）
检查差异图时，如果绝对差异图显示偏差在 分析区间内基本保持一致时，两个测量程序 测量结果之间的偏差可以通过个体偏差的平
定量分析（差异图估计偏差）
偏差估计值的CI
偏差分布形态对称时： 平均值估计偏差 使用标准差估计标准误，t检验临界值作为 因数计算95%的CI 偏差分布形态不对称时： 中位值估计偏差 使用非参数估计方法，因其取决于试验点数， 所以可能不正好是95%
数据分析-散点图
定量分析（散点图-回归分析）
回归分析的必要性
定量分析（差异图估计偏差）
检查差异图时，如果相对差异图显示相对偏
差在分析区间内基本保持一致时，两个测量
CV恒定（明显偏离正态）
程序测量结果之间的相对偏差可以通过个体
相对偏差的平均值（或中位值 ）来估计
中位值7.5%，平均值36.5%， 存在离群值
使用相对偏差中位值估计
定量分析（差异图估计偏差）
检查差异图时，如果相对差异图显示相对偏
有时，低浓度处SD恒定，高浓度处偏差呈比例的变化（CV不恒定） 差异图分析显示，如偏差在低浓度处不显著（与零偏差），应使用CV恒定Deming回归
此时高浓度点的偏差可能会被高估
，
定量分析（散点图-回归分析）
混合型
定量分析（散点图-回归分析）
混合型
在混合型的偏差分析中，CV恒定Deming回归较其它回归有很大优势（尤 其是弱化高浓度点偏差的影响） 此类分析中，P-B回归是更好的选择
SD恒定（偏态分布）
均值（或中位值 ）来估计
此时代表测量区间内任何浓度的偏差估计值
定量分析（差异图估计偏差）
CV 恒定（未明显偏离正态） 检查差异图时，如果相对差异图显示相对偏
差在分析区间内基本保持一致时，两个测量 程序测量结果之间的相对偏差可以通过个体 相对偏差的平均值（或中位值 ）来估计 虽不是经典分布，但未出现明显离群，无显 著的偏态分布，使用相对偏差平均值估计
方法比对
比对研究的特性
研究类型
声称值的 建立
声称值的 验证/确认 验证
实施者
制造商 制造商 实验室
样本数
≥100 ≥100 ≥40
候选方法 重复次数
≥1 1 ≥1
候选测量 程序数量
≥1 ≥1 1
推荐分析 方法
回归 回归
差异图或 回归
方法比对
试验前准备
操作候选测量程序和比对测量程序的工作人员应熟悉以下内容： 1.测量系统的操作和测量步骤 2.测量系统的维护程序
测量次序
可以按照收集顺序检测，也可以收集完成后集中检测 集中检测时，在两个程序上应使用随机化顺序 如重复测量需单独进行（手工方法），也应使用随机化顺序 自动化测量中重复测量无需随机化
制造商实验室
持续时间
对于试验样本，应在样本稳定时间段内完成两个程序的检测 优先选择新鲜采集的样本 如不能及时检测，采用能保证其稳定性的方法贮存，应同时符合两个程序要求 注意在此不要引入新的变量，如贮存条件
Jackknife技术:N个N-1的样本抽样（不适用于P-B回归） Bootstrap技术：随机抽取任何数量的样本
，
结果判定
测量程序比较
95%CI包括零值：两程序没有显著偏差 95%CI包括在可接受区间内：两程序偏差在95%置 信水平上满足可接受标准 95%CI不包括在可接受区间内：两程序偏差符合
制造商实验室
比对程序
应有以下特性:
在特定浓度下，应有比候选程度低的不确定度（通常通过重复测量均值实现） 避免已知干扰因素，对比程序测量区间至少和候选程序区间一样宽 和候选程序有相同的单位或可通过转化实现 可能的话溯源至参考物质或参考测量程序，如使用稀释等方式应有相关资料支持
制造商实验室
不造成偏差（非系统）：
比对研究是使用能覆盖全区间的真实临床样本（临床信息，用于查找原因
样本
或统计分析）来确定两程序之间的关系
样本可使用个体样本（用量不足时，建议使用分析物浓度接近，临床状态 相似的样本混合制备，≤20%）
注意：混合样本可能导致个体间的差异平均化
制造商实验室
样本
在有些情况下，特定测量区间的样本很难获得时，可用稀释或降解或添加
OLR：Y轴方向最小变异，只有y轴存在随机误差（假设）
SD恒定
Deming：考虑xy双方向，都存在不精密度，该回归评价一致性更为合理
定量分析（散点图-回归分析）
CV恒定
对于CV恒定分析，使用WLS（1/x2）：
越分散，对回归贡献越小，但缺陷同OLS，xy交换
CV恒定Deming回归（W）更适合
考虑权重，越分散贡献越小 Xy随机误差，数据集不含零值（W）
的方式获得（≥100，≥2次，3次或以上时选择中位值可能更合理）
因处理样本在不同程序上存在互换性限值，这种方法只能作为没有办法的方法 如果采用该方法，应标注，同时和离群值的处理方法一样进行统计分析，样本结果与重复顺序无关时重复测量 一组比对只使用一种类型的样本，其声明中应包括样本类型，应注意不同类型样本的贮存方式（多地点试验）
特殊要求
样本数量：≥40，更多的样本可增加估计值的可信度，也可能引入非预期的干扰
测量次数：优选单次测量，但按照最佳估计（低不确定度）可重复测量（基于平衡设计） 校准和质控：试验开始时，校准两个程序
数据检查
数据检查
散点图（SD恒定、CV恒定、混合型）
数据检查
差异图
以比对结果或均值为x以偏差为y轴 x 代表比较结果的绘图（4种组合） （如B-A图，x轴为平均值） SD恒定 CV恒定 y
声称值的验证（确认）
目的是为了证实在常规实验室条件下，候选程序能够满足允许的偏差规定，当不满足规定时也可能被接受，即确 认工作 试验应至少3-5天，为提高可靠性，应合并多家实验室并进行多次校准 如模拟实际使用条件，不应进行重复测量（如测量不受顺序影响，多次均值估计方法在统计上仍然有效）
制造商实验室
可接受偏差
可接受标准
95%CI在可接受区间外：两程序偏差不符合可接 受标准
，
测量程序比较
偏差声明内容
，
同一方法不同条件
相关举例
离群值
检验方法
α
制定剔除标准 （注意四舍五不入）
计算SD、平均值、ESD、 临界值、与临界值比较 （如同时有两个值相等且 大于临界值时，不应剔除）
，
中位值
制造商实验室
数据收集时应及时进行数据检查，便于及时发现并解决问题，如放置、输入、传输、打印
重复测量是便于查找原因最直接的一种方法 测量系统异常期间的结果不应用于比对研究的最终分析 记录所有数据，包括试验期间出现错误的数据，但不应用于比对研究的最终分析 详细记录已发现原因和问题需要剔除数据的任何情况（如重复数或样本）
每个区间至少存在20个数据
定量分析（差异图估计偏差）
线性（偏差随浓度变化）
对于偏差呈线性分布情况: 回归分析，确定变化在测量区间内是否显著， 如果斜率和零有区别（在95%的置信水平上 统计意义），则存在非恒定差异