透红小丑鱼的繁殖习性_胚胎发育和胚后发育_单乐州

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亲鱼培育水温为( 26. 5 ± 0. 5) ℃ ,pH 8. 1 ± 0. 1,溶氧量( 9. 23 ± 0. 48) mg / L,氨氮( 0. 078 ± 0. 033) mg / L,盐度 32. 09 ± 0. 66。每隔 2 d 换一 次水,换水量为总水体的 10 % 。每天投喂 2 次, 时间分别在 9: 00 和 15: 30,上午 投 喂 冰 冻 鲜 虾 肉、配合饲料,下午投喂冰冻红虫或卤虫无节幼体 及配合饲料,及时清除残饲、污物。
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伸展的结果,使胚盾不断延长而出现胚体的雏形, 进入原肠晚期( 见图 1 - 13) 。 2. 2. 6 神经胚期
受精后 27 h 15 min,囊胚层细胞下包至卵黄 囊的 5 /6,植物极的卵黄大部分被包围,仅末端一 小部分外露,形成卵黄栓,进入神经胚期( 见图 1 - 14) ,受精卵的外观依旧呈现橘黄色( 见图 1 - 27) 。此时胚盾背部中央出现神经沟,胚盾的前 端稍膨大,将 形 成 脑 泡。 胚 孔 继 续 收 缩,逐 渐 合 拢,受精后约 29 h 15 min,胚层完全包围卵黄,胚 孔封闭。此时,胚体的头部两侧出现 2 个膨大的 椭圆形视囊,肌节 6 ~ 7 对,胚体的头部和尾部已 经可以初步分辨( 见图 1 - 15) 。 2. 2. 7 器官形成期及出膜期
小丑鱼是对雀鲷科海葵鱼亚科鱼类的俗称, 目前全世界共发现 28 种,是当前海水观赏鱼销量 较大的种类。近年来,以小丑鱼为代表的海水观 赏鱼繁育技术有了较大突破,世界上已能成功繁 育 14 种小丑鱼,进行商业化生产的有近 10 种。
透红小丑鱼 ( Premnas biaculeatus) 属 雀 鲷 科 ( Pomacentridae) ,棘颊海葵鱼属( Premnas) ,分布 于西太平洋珊瑚礁海域。雄鱼个体较小,呈浅褐 色; 雌鱼个体较大,呈黄褐色。透红小丑鱼头部有 宽的白色环纹,身体中部和尾部各有一条白色环 纹; 同种间有剧烈的争斗,也攻击其它小丑鱼,体 长最大可达 17 cm,属大型小丑鱼。鲍鹰等[1]研 究报道了透红小丑鱼的人工繁殖和育苗,但未见 有关其人工繁殖习性和胚胎、胚后发育的研究报 道。2008 年,浙江省海洋水产养殖研究所的透红 小丑鱼 人 工 繁 殖 获 得 成 功。笔 者 于 2008 年 至 2014 年在浙江省海洋水产养殖研究所洞头基地 进行了透红小丑鱼的人工繁殖研究,对其人工繁 殖习性及胚胎发育等进行了观察。现将观察结果 总结如下。
受精后 7 h 35 min,分裂球变得更小,中央的 细胞界线不清晰,在原胚盘处形成举起的囊胚,其 高度近似原胚盘的高度,胚胎进入囊胚早期( 见 图 1 - 8) 。受精后 8 h 45 min,细胞继续分裂,胚 层开始向下扩展,举起的细胞变得较为扁平,但仍 呈突起状,此为囊胚中期( 见图 1 - 9) 。受精后 10 h,细胞继续分裂,并开始产生下包作用,胚胎 进入囊胚晚期( 见图 1 - 10) 。 2. 2. 5 原肠胚期
22) ,心率达 190 ~ 198 次 / min。受精后 187 h 15 min,胚体口裂已经形成( 见图 1 - 23) ,上下颌能 进行规律性的启闭,心率为 216 ~ 220 次 / min。受 精后 194 h 45 min,尾部进一步伸长,心率更快,血 液循环明显,胚体不断扭动,开始进入孵化前期, 此时胚体的眼、耳、嗅窝等感觉器官陆续形成( 见 图 1 - 24) ,大部分鱼卵的眼睛会闪烁发亮( 见图 1 - 32) 。受精后 198 h 15 min,卵膜开始软化、变 薄,如果此时用吸管吸取卵粒则很容易造成仔鱼 提前出膜; 出膜前,胚体尾部在卵膜内剧烈摆动, 尾部首先出膜( 见图 1 - 25) 。 2. 3 胚后发育
受精后 20 h 45 min,胚盘向植物极下包、扩 展,当下包达卵径的 1 /4 ~ 1 /3 时,细胞向胚盘边 沿流动、外包并向内卷而形成胚环,进入原肠早期 ( 见图 1 - 11) 。在受精后 23 h 15 min,囊胚层下 包卵黄达 1 /2 ~ 3 /5 时,胚环明显,在胚环上出现 一盾状突起,称为胚盾,将形成胚体的原基,此为 原肠中期( 见图 1 - 12) 。受精后 24 h 55 min,囊 胚层下包卵黄 3 /5 ~ 3 /4 时,由于细胞内卷、集中、
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doi: 10. 16446 / j. cnki. 1001 - 1994. 2015. 01. 006
透红小丑鱼的繁殖习性、胚胎发育和 胚后发育
单乐州1
邵鑫斌1
闫茂仓1
曹醒戈2
( 1 浙江省海洋水产养殖研究所,温州 325005; 2 温州市珊瑚礁渔业有限公司,温州 325005)
缸转移到培育缸,培育缸内加入 10 L 亲鱼缸水和 20 L 新水。孵化时培育缸的水温保持在 27 ℃ , 遮光。采用静水微充气孵化法,充气量控制在能 使卵粒较有规律地摆动。 1. 2. 3 胚胎发育
对活体胚胎定时取样,利用 NikonYS100 显微 镜观察透红小丑鱼的胚胎发育过程,记录受精卵 所处的发育阶段,进行连续观测和拍摄记录,分析 和总结各发育时期的形态变化。 1. 2. 4 苗种培育
孵化 12 h 后,投喂经扁藻或微绿藻培养的轮 虫,保持轮虫密度在 10 个 / mL 左右。孵化后第 3 天起,每天换水 1 /3,及时吸出死亡的鱼苗。第 15 天起投喂卤虫无节幼体,每天投喂 2 次,早上和中 午各一次。对 40 日龄的鱼苗开始投喂配合饲料, 此时可将其转移到循环水系统中继续饲养至 成鱼。
透红小丑鱼的卵受精后,原生质开始向动物 极集中,卵 黄 与 卵 膜 之 间 出 现 卵 周 隙。在 水 温 26 ℃ 时,受精后 1 h 30 min,在卵黄体上方隆起一 帽状胚盘,为卵裂和胚胎的进一步发育奠定了基 础( 见图 1 - 2) 。 2. 2. 3 卵裂期
受精后 2 h 15 min,出现第 1 次卵裂,细胞经 裂成 2 个大小相似的分裂球( 见图 1 - 3) 。受精 后 2 h 30 min,细胞沿与第 1 次卵裂垂直的方向经 裂成 4 个大小相近的分裂球,即进入 4 细胞期( 见 图 1 - 4) 。受精后 3 h 15 min,发生第 3 次卵裂,2 个分裂沟与第 1 次的分裂沟平行,分裂成大小不 均匀的 8 个细胞,排成两排,胚胎发育进入 8 细胞 期( 见图 1 - 5) 。受精后 3 h 55 min,发生第 4 次 卵裂,两个分裂沟与第 1 次的分裂沟相垂直,胚胎 发育进入 16 细胞期( 见图 1 - 6) 。受精 6 h 后, 由于细胞继续分裂,分裂球越来越小,各分裂球的 分裂速度也不一致,形成明显隆起的实心细胞团, 胚胎发育进入桑葚期( 见图 1 - 7) 。之后,分裂球 越来越小,细胞之间的界限逐渐模糊。 2. 2. 4 囊胚期
成熟卵呈长椭圆形,为粘性卵。受精卵长径 1. 5 ~ 1. 7 mm,短径 0. 63 ~ 0. 67 mm( 见图 1 - 1) , 属于典型的端黄卵,卵裂方式为盘状卵裂。在动 物极的顶端 1 - 26) ,卵质透明, 卵黄内含一个大油球和许多大小不等的小油球, 聚集在植物极一端。 2. 2. 2 胚盘期
2 结果
2. 1 繁殖习性 在良好的培养条件下,一对透红小丑鱼每月
能产卵 2 次,常年连续产卵。产卵前一天,雌鱼的 腹部明显膨大; 产卵前 2 ~ 3 h,亲鱼开始不断地用 嘴啄除瓷板上的藻类和沉积物,越接近产卵时间 啄得越频繁。透红小丑鱼一般在下午 1 点左右开 始产卵,产卵时雌鱼的输卵管明显伸长,雌鱼将伸 长的输卵管靠近产卵瓷板,轻轻抖动胸鳍并摇摆 下半身,一边往前移一边旋转,雄鱼则以相同的动 作排精于橘红色的卵粒上。约 1 h 20 min,产卵 结束,产卵量约为 1 300 ~ 1 400 粒。产卵后,亲鱼 有护卵习性,会用嘴啄除坏卵,并扇动胸鳍产生水 流,使卵摆动。通常雄鱼比雌鱼更加积极主动,越 接近孵化日,胸鳍扇动水流的频率越高,直至鱼卵 孵化。 2. 2 胚胎发育 2. 2. 1 受精卵
受精后 33 h,进入眼囊期,眼囊如蚕豆状隆起 于头部两侧,肌节增至 10 ~ 12 对( 见图 1 - 16) 。 受精后 43 h 45 min,肌节增至 23 ~ 24 对,尾与卵 黄分离,尾鳍褶出现,体背部出现浅棕色色素( 见 图 1 - 17) ,肉眼能够明显看到卵粒呈现深褐色 ( 见图 1 - 28) 。受精后 48 h 45 min,眼原基内出 现类似圆形无色透明的眼泡晶体,耳囊呈小泡状, 吻端的嗅囊已具雏形( 见图 1 - 18) ; 尾部的肌节 有较明显的收缩作用,形成间歇性的抽动,胚体浅 棕色色素增多,颜色加深; 胚体头部后下方出现微 弱搏动的心脏,心率为 74 ~ 80 次 / min,肌节增至 30 对。受精后 69 h 45 min,胚体头部已移至卵黄 前端,耳囊中出现一前一后两颗微小的耳石; 胚体 心脏及卵黄腹部可见血液流动,胚体扭动加剧,心 率加快到 106 ~ 110 次 / min; 眼晶体外圈开始出现 黑色素,先是呈较细的圆圈,黑色素较稀,随后黑 圈渐渐变粗,黑色素较密,最后使整个眼充满黑色 素( 见图 1 - 19) ; 肉眼可观察到胚体出现黑色眼 点( 见图 1 - 29) 。受精后 93 h 45 min,眼睛有了 进一步的发育,黑色的眼睛尤为突出 ( 见图 1 - 30) 。受精后 116 h 45 min,血黄素出现,可见黄 色血液在全身循环,卵黄囊上许多血管清晰可见 ( 见图 1 - 20) ,卵黄大部分被吸收; 肉眼能够观察 到部分胚体的眼睛开始出现亮闪的光泽( 见图 1 - 31) 。受精后 139 h 45 min,胸鳍原基形成,类 似月牙状( 见图 1 - 21) 。受精后 146 h 45 min,胚 体的末端已达眼部,胸鳍偶尔摆动,胚体眼部积聚 鸟粪素,体腹部出现菊花状亮蓝色色素( 见图 1 -
摘 要: 为了补充确定透红小丑鱼的分类地位,对透红小丑鱼的繁殖习性及胚胎发育等进行了观察。结果 表明: 透红小丑鱼的产卵时间持续近 1 h 20 min,产卵量多达 1 400 粒; 受精卵长径 1. 5 ~ 1. 7 mm,短径 0. 63 ~ 0. 67 mm; 胚胎发育过程包括胚盘期、卵裂期、囊胚期、原肠胚期、神经胚期、器官形成期和孵化期共 7 个 时期; 在水温( 26. 5 ± 0. 5) ℃ 时,受精卵约需 198 h 15 min 孵化出膜; 初孵仔鱼全长 3. 0 ~ 3. 6 mm,18 d 进入 稚鱼期,45 d 进入幼鱼期。 关键词: 透红小丑鱼; 繁殖; 受精卵; 胚胎发育
1 材料和方法
1. 1 试验材料 1. 1. 1 亲鱼
2006 年 7 月从泰国引进 9 月龄的透红小丑 鱼幼鱼,饲养于浙江省海洋水产养殖研究所洞头 基地室内循环水系统中,经选择和人工配对成功, 2008 年开始产卵。 1. 1. 2 试验用海水
试验用水采用经过二级砂滤的自然海水。 1. 2 试验方法 1. 2. 1 亲鱼培育
收稿日期: 2014 - 05 - 18 作者简介: 单乐州( 1968—) ,男,高级工程师,研究方向为海水鱼类增养殖技术。 基金项目: 浙江省科技厅合作研发和成果转化项目 2013F50017。
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1. 2. 2 产卵和孵化 从产卵日算起,于第 8 天下午将鱼卵从亲鱼
初孵仔鱼全长 3. 0 ~ 3. 6 mm,刚出膜的仔鱼 尾部弯曲,只能在水中旋转; 口已张开,能够开口 摄食轮虫; 头部变大,背部微隆起,身体透明,背鳍 鳍膜从背部隆起并延伸至尾部; 卵黄囊和油球明 显缩小; 头部和身体躯干部位有少量点状和射线 状的色素; 耳囊内的耳石清晰可见,一大一小( 见 图 1 - 33) ; 紧贴消化道末端有一椭圆形的膀胱; 能快速躲避外物。
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