第五次实验发送
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镀银染色法:机体中组织细胞结构经硝酸银染色
曝光后,能将硝酸银还原,形成细小的金属银微粒 附着在组织结构上,使其呈棕黑色,便于在镜下观 察这些结构。
兔脊神经节光镜切片
神经细胞因合成运输大量的蛋白质而含有发达的内质 网和高尔基复合体; 在低倍镜下观察在神经节可见许多浅黄色卵圆形的神 经节细胞。 高倍镜观察,在神经节细胞中央不着色的圆形区为细 胞核。在核的周围有黑褐色颗粒状或呈不规则的条索 状结构即为高尔基复合体。
高碘酸对C-C键的作用和其他氧化剂如KMNO4及 H202不同在于它不能继续氧化新形成的醛基, 而充分给予希夫试剂与新醛基化合成红色物机 会。
实验试剂:高碘酸溶液、Schiff试剂、亚硫酸 水溶液 。
材料:洋葱鳞茎内表皮
实验步骤: 1 撕取洋葱内表皮1cm2大小放入小烧杯,并用蒸 馏水冲洗。 2 加入0.5%的高碘酸水溶液,浸没为宜,处理10~ 15min。 3蒸馏水反复冲洗2min。 4加入Schiff试剂 染色8~15min。(避光染色,放入
3、结构: 在电子显微镜下见到的胞间连丝似乎是一个狭窄 的、直径约30~60nm的圆柱形细胞质通道穿过相 邻的细胞壁。 胞间连丝中有连丝管(desmotubule)通过,它是由 两个细胞的光面内质网衍生而来。胞间连丝不仅 使相邻细胞的细胞质膜、细胞质、内质网交融在 一起, 而且也是植物细胞间物质运输和传递信息 的重要通道。
4、光镜观察:胞间连丝直径0.02-0.2微米,需 要膨胀及染色处理才能看到。 取柿(Diospyroskaki)胚乳横切面永久制片 在低倍物镜下进行观察,可以看到柿胚乳组织 是由许多厚“壁”细胞组成。 高倍镜下,可以看见细胞中具有染成淡黄色的 细胞质。细胞壁很厚,着深黄色,有很多胞间 连丝通过。
二、中心体观察
Ø 中心体是细胞中一种重要的无膜结构的细胞器 ; 细胞间期:它总是位于细胞核附近的细胞质中, 接近于细胞的中心,因此叫中心体。
有丝分裂中、后期:位于细胞分裂级
铁苏木精染色的马蛔虫子宫切片,在低倍镜下 观察可见许多受精卵细胞; 细胞的外面有卵壳,细胞与卵壳之间的腔叫卵 壳腔。在某些卵细胞内,于核附近有圆形的小 粒——中心粒,它与周围致密的细胞质——中 心球,组成中心体;
实验九(一) 多糖类的细胞化学 实验目的: 掌握细胞中多糖鉴定原理及方法
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实验原理:PAS反应又叫高碘酸-希夫试 剂反应,对多糖的存在是一种有效的指示 剂。 原理是利用高碘酸破坏多糖分子中的C-C 键,变为醛基,醛基与希夫试剂结合,生 成一种红色反应物。
颜色的深浅与糖类的多少有关。
+
=
为何用高碘酸做为氧化剂而不用KMnO4或H2O2等?
抽屉里)
5亚硫酸水冲洗2min,再用蒸馏水洗,压片及镜检。
实验九(二) 还原性糖鉴定 实验目的:掌握可溶性还原糖的鉴定操作原理、方法 在糖类中,分子中含有游离醛基或酮基的单糖和含有 游离醛基的二糖都具叫还原性糖。 还原性糖包括葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖、麦芽糖 等。
试剂:斐林试剂 甲液是:质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液 乙液是:质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液 斐林试剂配制:使用时临时配制,将4~5滴乙液 滴入2 mL甲液中,配完后立即使用。
思考题: 1、举例说明PAS反应有哪些应用?至少写出两方面 2、设计还原糖鉴定反应的对照实验? 3、画出兔脊神经节高尔基体图,并指出各部分名 称。 4、画出马蛔虫受精卵中心体图,并指出各部分名 称。 画出柿子胚乳细胞胞间连丝图,并指出各部分名称。
实验原理:还原性糖在碱性溶液中能将cu2+ 还原成cu+,cu+再与OH—结合成CuOH。加 热后,CuOH即变成砖红色的氧化亚铜 (Cu2O)沉淀,反应式如下:
加热
CH2OH—(CHOH)4—CHO+2Cu(OH)2 CH2OH—(CHOH)4—COOH+Cu2O↓+2H2O
还原性糖鉴定步骤:
1、将苹果洗净,去皮,切成小块。 2、取几小块放入研钵中,加5ml水研磨。
3、在漏斗上垫一层纱布,将研磨液过滤到小烧杯 中,取一支试管,向试管中注入2ml苹果液。 4、向试管中注入2ml刚配制的斐林试剂,震荡试 管,使溶液混匀,观察颜色。 5、将这只试管放进盛有开水的大烧杯中,加热煮 沸2min;在对试管加热煮沸的过程中,随时观察 试管溶液的颜色发生了什么变化。
实验十 细胞器的光镜切片观察 实验目的:在光学显微镜下能够识别出高尔基体、 中心体、胞间连丝。
材料:从福州市新建标本厂订购的兔脊神经节光 镜切片、马蛔虫子宫切片(示中心体)、柿子胚 乳切片(示胞间连丝)
一、动物细胞高尔基体(Golgi boby)切片标本的 观察
用镀银法染色的兔脊神经节光镜切片:
转换高倍镜观察,可见中心体的外围还有星状 的放射细丝。
三、柿子胚乳切片(示胞间连丝)
1、概念: 胞间连丝(plasmodesmata):贯穿两个相邻的植 物细胞的细胞壁并连接两个原生质体的胞质丝。 为细胞间物质运输与信息传递的重要通道。
2、发现: 胞间连丝(plasmodesmata)是坦格尔于1879年首先在马 钱子胚乳细胞间发现。1882年由德国植物学家、细胞学 家E.A.施特拉斯布格命名为“胞间连丝”.。