血清药理学方法研究进展
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血清药理学方法研究进展
于 海 荣$，王 济 兴%，陈 建 双$ （$ ’ 承德医学院机能实验教研室，河北 承德 )!A)))；% ’ 解放军第 %!! 医院）
【 关 键 词 】血 清 药 理 学 ；给 药 方 案 ；采 血 时 间 ；血 清 处 理 【中图分类号】/C!B ’ % 【文献标识码】0 【文章编号】$))*N!@AC（%))!）)%N)$@&N)&
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血 清 药 理 学 方 法，首 先 要 给 动 物 用 药，然 后 才 取 血 清 作 为 药物源进行药理实验研究。因此，血 清 药 理 学 很 重 要 的 一 个 问 题是给药剂量的确定。合适的给药剂 量，对 保 证 实 验 的 成 功 很 重要。主要考虑加入反应系统中的血 清 量 不 能 过 大，又 要 被 稀 释许多倍，故应使血 药 浓 度 尽 可 能 的 大，同 时 要 考 虑 如 何 达 到 使 药 物 发 挥 最 大 效 应 的 最 佳 浓 度［!］。 王 力 倩 等［"］在 研 究 苦 参 、 仙鹤草的抗癌作用时 发 现，以 参 考 公 式：给 药 剂 量 # 临 床 常 用 量 $ 动物等效 面 积 系 数 $ 培 养 基 内 血 清 稀 释 度，计 算 给 药 剂 量，得到的含药血清 对 肿 瘤 细 胞 体 外 生 长 有 抑 制 作 用，而 比 上 述参考公式 计 算 的 给 药 量 小 % 倍 量 的 含 药 血 清 无 明 显 作 用。 因为含药血清加入 体 外 反 应 系 后，浓 度 将 被 稀 释，从 而 达 不 到 在体条件下的下的 药 物 浓 度，在 这 种 情 况 下，如 果 反 应 系 出 现 阴性反应，并不能排除药物浓度过 低 而 出 现 的 假 阴 性 反 应。 针 对此种情况，李仪 奎 等［&］提 出 两 种 方 法 参 考，一 是 增 大 给 药 剂 量，即给药剂量 # 在体实验的给药剂量 $ 反 应 系 中 被 稀 释 倍 数 （同上述王力倩所提参考公式）。然 而，其 不 足 之 处 是 给 药 剂 量 与血药浓度并不是呈等比增加，况且受 到 灌 胃 药 物 浓 度 和 体 积 的限制。二是按新药药理研究的技术 要 求 设 计 剂 量 给 药，将 含 药血清制成冷冻干燥粉，以冻干粉形式 加 入 反 应 系 统 使 其 达 到 所需浓度。其优点是：根据需要提高 体 外 反 应 系 统 中 的 含 药 浓 度或形成等容，有 利 于 血 清 的 储 藏 保 存。 王 宁 生 等［’］提 出，上 述计量方法只作了简单的浓度换算，却 忽 视 了 药 物 在 体 内 的 生 物反应及所得含药 血 清 的 受 试 对 象 是 细 胞、组 织 而 不 是 整 体， 因此，以临床用药量（人 ）或 临 床 等 效 量 给 药（ 动 物 ），是 血 清 供 体较为合适的剂 量。 笔 者 认 为，实 验 中 究 竟 采 取 什 么 剂 量，最 好通过预实验解决。整体动物中组织、器 官 或 细 胞 周 围 环 境 不 是血清而是组织液，血 液 中 的 药 物 需 分 布 到 组 织 液 中，才 能 作 用于组织、器官或细 胞 产 生 药 理 效 应，而 药 物 在 体 内 的 分 布 多 数是不均匀的。程珠炉［(］提出，制备 含 药 组 织 液 进 行 体 外 实 验 更 具 科 学 性 ，但 组 织 液 分 离 难 度 大 、体 积 少 ，有 待 今 后 探 讨 。 ! 给药方案
ห้องสมุดไป่ตู้
在中药血清药 理 学 实 验 中，动 物 常 采 用 大 鼠、小 鼠、兔、豚 鼠等。陆慧晶［%］认 为：原 则 上，选 择 动 物 时 应 尽 量 选 与 人 类 生 物特性近似的物种，制备血清的动物 应 与 获 取 离 体 器 官、组 织、 细胞的动物相一致，从而缩小或避免动 物 血 清 之 间 以 及 动 物 血 清和人类血清之间 在 理 化、生 物 等 特 性 上 的 差 异，减 少 因 种 属 差异而造成的免疫反应，提高实 验 结 果 的 可 靠 性。 刘 成 海 等［&］ 提出，在体外培养实 验 中 宜 采 用 同 一 种 单 一 血 清，既 为 细 胞 提 供营养，又为药物载体，还避免了多种 血 清 的 干 扰，但 只 采 用 同 种属的动物血清将极大限制实验范围。一般家兔和大鼠应为 首选。王宁生等［*］认 为，对 于 动 物 的 大 小，应 结 合 具 体 实 验 而 选择；目前多采用大鼠，其幼鼠血清有 利 于 细 胞 生 长，但 由 于 太 小而难以获得足够量的血清，若过大则 可 能 由 于 动 物 老 化 受 到 药物之外因素的影 响；在 实 验 中 曾 采 用 成 年 大 鼠，并 将 数 只 大 鼠的血清混合，这样 既 能 适 应 实 验 需 要，也 减 少 了 动 物 的 个 体 差异。 " 给药剂量
血清药理学方法是指动物经口服给药后采集含药血清进 行体外实验的一种方法。$C@* 年由日本学者首次提出，国内 C) 年代初开始探索，近 年 来 越 来 越 多 地 应 用 于 中 药 药 理 的 研 究， 现已成为中药体外药效学研究的一种重要方法。它是在以前 体外实验的基础上加以改进形成的，以 中 药 血 清 代 替 中 药 粗 提 物进行体外实验，避 免 了 中 药 直 接 体 外 用 药 的 一 系 列 干 扰，不 但能反映中药及其代谢产物的药理作 用，而 且 能 反 映 可 能 由 药 物诱导机体内源性成分所产生的作用，更 接 近 药 物 在 体 内 环 境 产生的真实过程［$］，为从细胞分子水平 研 究 中 药 药 理 学 作 用 提 供了新的手段。作为一种新的实验方 法，它 不 仅 具 有 体 外 实 验 条件可控性强、使用 材 料 少 等 优 点，而 以 其 更 适 合 中 药 及 其 复 方制剂研究的独特之处受到了医学界 的 广 泛 关 注，在 实 验 对 象 的选择、给药剂量 的 确 定，给 药 方 案、采 血 时 间、血 清 的 处 理 等 方面正在日趋规范，但 还 存 在 一 些 问 题，现 就 研 究 现 状 作 一 综 述。 ! 实验动物选择
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如降低心脏负荷等削减凋亡的诱发因素。针对心肌细胞坏死： 挽救细胞坏死允许的时间略长，最 佳 时 机 是 !" 内 解 除 缺 血，但 缺血 ! # $%" 重建血运仍有益 处。 及 早 血 管 再 通 和 再 灌 注 心 肌 保护的措施十分必要。针对慢性期：细 胞 凋 亡 是 缺 血 性 心 脏 病 晚期发展为心力衰 竭 的 重 要 病 理 基 础，心 脏 负 荷、心 肌 缺 血 和 一些生物因子等已 被 证 明 是 触 发 凋 亡 的 常 见 因 素，因 此，可 采 取消除诱发因素、阻断凋 亡 的 信 息 通 路 和 基 因 治 疗。（&）基 因 生 物 制 剂 ：开 发 抗 心 肌 凋 亡 的 新 药 物 及 基 因 生 物 制 品 。 【参考文献】 ［$］ 金惠铭 ’ 病 理 生 理 学［(］’ 第 六 版 ’ 北 京：人 民 卫 生 出 版
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在进行血清药 理 学 实 验 之 前，必 须 确 定 合 适 的 给 药 方 案。 考虑是否禁食，给 药 次 数 和 给 药 间 隔 都 将 对 血 药 浓 度 产 生 影 响。
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在中药血清药 理 学 实 验 中，动 物 常 采 用 大 鼠、小 鼠、兔、豚 鼠等。陆慧晶［%］认 为：原 则 上，选 择 动 物 时 应 尽 量 选 与 人 类 生 物特性近似的物种，制备血清的动物 应 与 获 取 离 体 器 官、组 织、 细胞的动物相一致，从而缩小或避免动 物 血 清 之 间 以 及 动 物 血 清和人类血清之间 在 理 化、生 物 等 特 性 上 的 差 异，减 少 因 种 属 差异而造成的免疫反应，提高实 验 结 果 的 可 靠 性。 刘 成 海 等［&］ 提出，在体外培养实 验 中 宜 采 用 同 一 种 单 一 血 清，既 为 细 胞 提 供营养，又为药物载体，还避免了多种 血 清 的 干 扰，但 只 采 用 同 种属的动物血清将极大限制实验范围。一般家兔和大鼠应为 首选。王宁生等［*］认 为，对 于 动 物 的 大 小，应 结 合 具 体 实 验 而 选择；目前多采用大鼠，其幼鼠血清有 利 于 细 胞 生 长，但 由 于 太 小而难以获得足够量的血清，若过大则 可 能 由 于 动 物 老 化 受 到 药物之外因素的影 响；在 实 验 中 曾 采 用 成 年 大 鼠，并 将 数 只 大 鼠的血清混合，这样 既 能 适 应 实 验 需 要，也 减 少 了 动 物 的 个 体 差异。 " 给药剂量
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在进行血清药 理 学 实 验 之 前，必 须 确 定 合 适 的 给 药 方 案。 考虑是否禁食，给 药 次 数 和 给 药 间 隔 都 将 对 血 药 浓 度 产 生 影 响。