临床微生物学检验：弯曲菌与螺杆菌

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分布：
• 广泛分布于温血动物肠道内
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临床意义
• 空肠弯曲菌（C. jejuni )主要引起肠道感染 与吉兰-巴雷综合征和反应性关节炎有关
急性外周神经脱髓鞘神经根神经炎 • 胎儿弯曲菌（C. fetus)等其他弯曲菌主要
引起肠外感染
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微需氧环境 37℃、42℃ 72h 可疑菌落
涂片染色镜检
纯培养（布氏或弯曲菌血琼脂）
鉴定
关键：培养基的选择和最佳孵
育条件的给予
微生物检验
标本采集
• 采取新鲜粪便与肛拭子、血液、分泌物等立即送检。 • 如不能及时送检应种入Cary-Blair运送培养基，放
4℃冰箱保存。
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标本直接检查
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螺杆菌属
（Helicobacter）
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弯曲菌属
（Campylobacter ）
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分类
• 弯曲菌原归属于弧菌属，1973年正式命名 为弯曲菌属，属弯曲菌科。
• 2005年在伯杰系统细菌学手册 （ Bergry’s Manual of Systematic Bacteri ology）中将其分为30个种（亚种）。
• 最适生长温度因菌种而异 ---空肠/大肠弯曲菌最适生长温度42℃ ---胎儿弯曲菌 最适生长温度37℃。
• 营养要求高：常用布氏肉汤增菌，弯曲菌 选择培养基（skirrow、Campy-BAP）培
养。
• 培养时间：较一般细菌稍久（一般72h左右）
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菌落特征：有两种（血平板均不溶血） • 灰白色扁平湿润边缘不整齐蔓延生长的
抵抗力：
• 对外环境抵抗力不强 • 不耐干燥,对热和巴氏消毒敏感. • 对酸性环境和消毒剂敏感,对氧也非常
敏感（空气环境不生长）.
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微生物检验程序
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血液等
粪便、肛拭子
直接检测
增菌 （布氏肉汤）
7天不生长 生长
弃去
动力检查 直接镜检 分离培养（弯曲菌血平板、Skirrow’s平板等） （多块选择平板）
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灰 白 色 圆 形 凸 起 有 光 泽 的 小 菌 落
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生物学特性
生化反应： • 生化反应不活泼，不利用糖类，以氨
基酸为能量来源。 • 不能在3.5%NaCl环境中生长 • 氧化酶和触酶阳性，硝酸盐还原（+） • 尿素（-）、硫化氢（-）。
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生物学特性
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致病物质：
• 不详（可能与细胞毒素、内毒素和肠毒素有 关）
致病部位及表现：
• 感染部位通常在空肠、回肠，也可蔓延到结 肠。
• 腹泻大多为水样便，小部分为脓血粘液便
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来自百度文库物学特性
形态染色
• 革兰阴性，菌体弯曲呈逗点、弧形、S形、 螺旋形或典型的海鸥展翅形，陈旧培养物 可呈球形或长丝状
85%N2，空气中不能生长。 • 最适生长温度因菌种而异 • 营养要求高，常用Skirrow’s和Campy-BAP培养基 • 氧化酶、触酶阳性，不能利用各种糖类，硝酸盐还
原（+），脲酶（-） • 主要通过食物和水经口传播。
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CAMPYLOBACTER
• Campylobacter are Gram-negative,
• 无芽胞、无荚膜、一端或两端有单鞭毛， 运动非常活泼（“投镖样”运动）。
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大肠弯曲菌革兰染色
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空肠弯曲菌鞭毛（扫描电镜）
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生物学特性
培养特性：
• 微需氧菌，最佳气体环境为5%O2,10%CO2 和85%N2，不能在空气中生长。
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鉴定要点：
– 形态培养特征 革兰阴性，菌体弯曲或呈S形，动力（+）氧化 酶（+） 生长温度 (37℃、42℃)试验；
– 奈啶酸、头孢噻吩（唑啉）敏感试验
空肠弯曲菌对奈啶酸敏感、对头孢噻吩耐药； 胎儿弯曲菌对奈啶酸耐药、对头孢噻吩敏感。
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– 马尿酸盐水解试验 • 凡马尿酸盐水解试验阳性、42℃生长、氧化 酶阳性、与镜检形态相符者，即可报告空肠 弯曲菌空肠亚种
• 直接显微镜检查
– 粪便与肛拭子可直接镜检：特殊形态和运动。
• 核酸检测
– PCR方法直接检测粪便标本中的弯曲菌
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分离培养与鉴定
分离培养
– 粪便或肛拭标本：直接接种改良Campy-BAP 选择平板或Skirrow’s平板
– 血、脑脊液标本：布氏肉汤增菌后转种分离培 养基
– 微氧环境培养 – 不同细菌培养温度不同
弯曲菌与螺杆菌
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淋 病 奈 瑟 菌
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肺 炎 链 球 菌
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弯曲菌属与螺杆菌属
弯曲菌目（Campylobacterale）
弯曲菌科
（Campylobacteraceae）
螺杆菌科
（Helicobacteraceae）
弯曲菌属
（Campylobacter）
菌落（沿穿刺线拖尾样外观）
• 灰白色、粉红灰色、黄灰色圆形凸起有 光泽的小菌落
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拖 尾 样 外 观
空肠弯曲菌ATCC33291在Camp-BAP上菌落
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灰 黄 色 圆 形 凸 起 有 光 泽 的 小 菌 落
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大肠弯曲菌在Camp-BAP菌落
• 四肢对称性 迟缓性瘫痪 • 咽-颈-臂无力 • 吞咽困难 • 呼吸困难 • 感觉异常 • 面瘫
等等
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面瘫
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弯曲菌感染后的自身免疫 性疾病
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空肠弯曲菌与大肠弯曲菌感染常见： 感染来源：污染的食物、水和牛乳等。 传播途径：粪-口途径。
弯曲菌感染性质：多为自限性疾病
microaerophiles, which means that they can survive in a low oxygen environment.
– 醋酸吲哚水解试验
• 空肠弯曲菌阳性，胎儿弯曲菌阴性
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免疫学方法
– 胶乳凝集 – 酶免疫方法测定粪便中弯曲菌抗原 – 血清中抗体测定用于流行病学调查
DNA探针和PCR扩增
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Key Points
• 革兰阴性逗点状或S形、海鸥展翅形菌,运动活泼 • 微需氧：最佳生长环境为含5%O2, 10% CO2 和